不同發(fā)育階段小鼠的雌性生殖器官變化

1、不同發(fā)育階段的昆明小鼠的卵巢的形態(tài)學(xué)觀察ThemorphologicalobservationoftheovaryoftheKunmingmousesatthedifferentdevelopmentstages摘要本實(shí)驗(yàn)選用不同年齡階段的昆明小鼠，并對(duì)它們解剖，取其生殖器官，固定、逐級(jí)脫水、做組織切片，并用 HEHE 染色，顯微鏡觀察。比較不同年齡階段小鼠卵巢內(nèi)卵泡、黃體的變化。實(shí)驗(yàn)觀察表明三個(gè)月齡的小鼠的卵巢中出現(xiàn)生長(zhǎng)卵泡、成熟卵泡及少量黃體，隨發(fā)育階段的不同，初級(jí)卵泡數(shù)量減少，黃體數(shù)量不斷增加，到了產(chǎn)后階段，發(fā)生明顯變化，黃體量很多。本實(shí)驗(yàn)支持小鼠的性成熟是在兩個(gè)月到三個(gè)月之間的看法。關(guān)

2、鍵詞：小鼠卵巢；組織切片；固定1 1 .前言小鼠(Musmusculus)(Musmusculus)是最重要的哺乳動(dòng)物發(fā)育生物學(xué)的研究模型，由于其胚胎發(fā)育過(guò)程與人類(lèi)比較接近，可以作為很多人類(lèi)疾病的動(dòng)物模型而備受關(guān)注。卵巢是雌性哺乳動(dòng)物的生殖器官，具有排卵和分泌類(lèi)固醇激素的功能1,卵巢發(fā)育具有相當(dāng)?shù)膹?fù)雜性與重大意義，迄今為止，其發(fā)育過(guò)程中還有許多機(jī)制和調(diào)控機(jī)理仍不甚明了。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究不同發(fā)育時(shí)期小鼠卵巢的基本結(jié)構(gòu)，為正常小鼠的資源數(shù)據(jù)庫(kù)提供資料，以便后人的繼續(xù)研究。2 2 . .材料和方法本實(shí)驗(yàn)用的雌性昆明小鼠，購(gòu)于山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，20152015 年 4 4 月5 5月期間先后購(gòu)買(mǎi)

3、 4 4 只七日齡的小乳鼠，一個(gè)月、兩個(gè)月、三個(gè)月、四個(gè)月、五個(gè)月、六個(gè)月、八個(gè)月以及產(chǎn)后的小鼠各 2 2 只。我們將小鼠生殖器官取材，固定、經(jīng)逐級(jí)酒精脫水、二甲苯透明、浸蠟、包埋、切片(68um)(68um)2。HEHE 組織學(xué)常規(guī)染色，顯微鏡下觀察，并作了顯微測(cè)量。3 3 . .觀察結(jié)果卵巢是產(chǎn)生卵子的器官，左右各一個(gè)，位于腎臟下方，顏色呈淺粉色或紅色，質(zhì)較韌硬，形似豆?fàn)?，長(zhǎng)度在 4m*4m*右，其表面凸隆，性成熟后，由于卵泡的膨大和排卵后結(jié)瘢，致使其表面凹凸不平。卵巢的大小、形狀和顏色，因月齡不同而異。輸卵管是卵子受精及通過(guò)的管道，呈盤(pán)曲狀，左右各一條，位于卵巢與子宮角之間，前段喇叭口朝

4、向卵巢，后端緊接于子宮。子宮為YY字形，分為子宮角、子宮體和子宮頸。左右子宮會(huì)合于子宮頸末端，突出于陰道，形如小丘。解剖時(shí)我們對(duì)小鼠的體長(zhǎng)、 尾長(zhǎng)以及生殖系統(tǒng)的顏色、 生殖管和生殖腺的長(zhǎng)度做了測(cè)量 （參見(jiàn)表 1 1）: :表1不同時(shí)期小鼠體長(zhǎng)尾長(zhǎng)Table1Mousebodylengthandtaillengthatdifferentdevelopmentstages月齡體長(zhǎng)(mm)(mm)尾長(zhǎng)( (mm)mm)（卵巢）顏色(mm)(mm)生殖腺長(zhǎng)度（mmmm）左右左右四個(gè)月1101109797淺粉色141414145 53.53.5五個(gè)月100100101101淺紅色181818183 34

5、 4六個(gè)月102.5102.59696淺粉色151515155 53 3八個(gè)月1081089797淺粉色111113133 35 5產(chǎn)后110110105105181815153 32 2從測(cè)量結(jié)果可以看出，四個(gè)月后的小鼠體型大小基本不變，說(shuō)明小鼠四個(gè)月后達(dá)到體成熟。產(chǎn)后小鼠的生殖器官顏色及長(zhǎng)度與產(chǎn)前小鼠比較發(fā)生了很大變化。3.13.1 不同時(shí)期小鼠卵巢的切片原始卵泡位于皮質(zhì)淺部，體積小，數(shù)量多，卵泡中央有一個(gè)初級(jí)卵母細(xì)胞，周?chē)鸀閱螌颖馄降穆雅菁?xì)胞（又稱(chēng)顆粒細(xì)胞）。生長(zhǎng)卵泡是卵巢的組織結(jié)構(gòu)成分之一，分為：初級(jí)生長(zhǎng)卵泡、次級(jí)生長(zhǎng)卵泡兩種。初級(jí)生長(zhǎng)卵泡有一層或多層立方形卵泡細(xì)胞。次級(jí)生長(zhǎng)卵泡卵泡細(xì)

6、胞之間出現(xiàn)卵泡腔，卵泡細(xì)胞密集排列成數(shù)層，稱(chēng)為顆粒細(xì)胞層。成熟卵泡是卵泡發(fā)育的最后階段。卵泡體積很大，并向卵巢表面突出。成熟卵泡的卵泡腔很大，顆粒層甚薄，顆粒細(xì)胞也不再增殖。卵泡的發(fā)育階段：原始卵泡一生長(zhǎng)卵泡一成熟卵泡。當(dāng)排卵后，卵泡的剩余部分就變?yōu)辄S體，隨后黃體逐漸形成白體。實(shí)驗(yàn)用不同時(shí)期小鼠的卵巢切片在光學(xué)顯微鏡下拍的照片（見(jiàn)圖 1,1,圖 2,2,圖 3 3）: :圖1兩個(gè)月小鼠卵巢10X1010X10Figure1Theovaryofthetwomonthsmouse圖2四個(gè)月小鼠卵巢10X1010X10Figure2Theovaryofthefourmonthsmouse圖圖 3 3

7、 產(chǎn)后小鼠的卵巢 1010X10X10Figure3Theovaryofthepostpartummice3.23.2 不同時(shí)期小鼠卵巢變化將不同切片放在顯微鏡下觀察比較，可以看出不同發(fā)育時(shí)期小鼠卵巢的變化（參見(jiàn)表 2 2）: :表2不同發(fā)育時(shí)期小鼠卵巢的變化Table2Changesofmouseovariesindifferentperiods一個(gè)月觀察不到無(wú)月齡卵泡或黃體所在位置特點(diǎn)兩個(gè)月初級(jí)卵泡在卵巢皮質(zhì)的淺部三個(gè)月卵泡移動(dòng)到卵巢皮質(zhì)較深的部位觀察到基本為原始卵泡，卵泡體積小，數(shù)量多觀察到原始卵泡減少，出現(xiàn)一些生長(zhǎng)卵泡、成熟卵泡及少量黃體，卵泡的總體數(shù)量在減少。觀察到有少量原始卵泡，大

8、量四個(gè)月卵泡在卵巢皮質(zhì)較深部位生長(zhǎng)卵泡，一些成熟卵泡和黃體，卵泡和黃體的總體數(shù)量在減少。觀察到少量原始卵泡，大量生五個(gè)月卵泡和黃體都在卵巢皮質(zhì)深長(zhǎng)卵泡和成熟卵泡，黃體增部多， 卵泡和黃體的總體數(shù)量在減少。六個(gè)月卵泡和黃體都在卵巢皮質(zhì)深部觀察到少量原始卵泡，生長(zhǎng)卵泡，大量成熟卵泡，黃體增多，卵泡和黃體的總體數(shù)量減少。觀察到少量原始卵泡、生長(zhǎng)卵八個(gè)月卵泡和黃體都在卵巢皮質(zhì)深泡和一些成熟卵泡，黃體出現(xiàn)部很多，卵泡和黃體的總體數(shù)量減少。產(chǎn)后黃體幾乎占據(jù)卵巢絕大部分，卵泡被散洛在卵巢皮質(zhì)較小不同部位觀察到少量原始卵泡、生長(zhǎng)卵泡和成熟卵泡，有大量的黃體，出現(xiàn)白體，卵泡和黃體的總體數(shù)量非常少。我們所觀察到的

9、切片中從第三個(gè)月小鼠的卵巢中出現(xiàn)些生長(zhǎng)卵泡、成熟卵泡及少量黃體，隨發(fā)育階段的進(jìn)展，初級(jí)卵泡不斷減少，黃體不斷增加，到了產(chǎn)后階段，發(fā)生明顯變化，除很少原始卵泡、生長(zhǎng)卵泡和成熟卵泡外，有大量黃體存在，還有一些白體。卵泡和黃體的位置也發(fā)生了一定變化，卵泡從開(kāi)始皮質(zhì)淺部移動(dòng)到皮質(zhì)深部后又被擠到了皮質(zhì)較小部位。而黃體則是從最初在卵巢中占很少位置，后來(lái)移動(dòng)到皮質(zhì)深部，幾乎占據(jù)整個(gè)卵巢。小鼠三個(gè)月時(shí)發(fā)生排卵，形成了黃體。4.4.討論本實(shí)驗(yàn)研究的是不同發(fā)育階段小鼠的雌性生殖系統(tǒng)中卵巢的形態(tài)學(xué)研究，觀察卵巢中卵泡及黃體變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果是小鼠的性成熟是發(fā)生在兩個(gè)月到三個(gè)月月齡之間，與發(fā)育生物學(xué)網(wǎng)中介紹說(shuō)小鼠的性成熟

10、是相符。我們支持“小鼠的性成熟是在兩個(gè)月到三個(gè)月之間”的看法。卵泡的發(fā)育受多種激素的調(diào)控，例如 FSHFSH（促卵泡激素）和 LHLH（促黃體生成素），這兩種激素共同調(diào)控卵泡的生長(zhǎng)發(fā)育4,我們可以檢測(cè)這兩種激素在卵泡不同時(shí)期的含量，也可以探討通過(guò)如何控制 NotchNotch 信號(hào)通路來(lái)調(diào)控激素的含量，刺激卵泡的生長(zhǎng)發(fā)育5,進(jìn)而研究這些激素的作用機(jī)制。今后可以嘗試認(rèn)識(shí)激素替代物對(duì)卵泡生長(zhǎng)發(fā)育的影響，也可以通過(guò)體外注射這些激素替代物來(lái)探索對(duì)小鼠的生殖發(fā)育的調(diào)控機(jī)制，以便通過(guò)導(dǎo)入激素替代物來(lái)調(diào)節(jié)卵泡發(fā)育，運(yùn)用到人類(lèi)不孕癥的治療。參考文獻(xiàn)1羅陽(yáng)小鼠卵巢不同發(fā)育階段的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究.中南大學(xué)D.2012.05.2芮菊生，杜懋琴，陳海明等組織切片技術(shù)M.人民教育出版社.1980.11.3桂建芳，易梅生發(fā)育生物學(xué)M.科學(xué)出版社出版.2002.4高志華牛腔前卵泡體外無(wú)血清培養(yǎng)及超微結(jié)構(gòu)研究D.20035姜曉龍DAPT阻斷Notch信號(hào)通路對(duì)綿羊卵泡顆粒細(xì)胞功能的影響D.20156閆利平Imp2對(duì)大鼠卵泡發(fā)育影響的研究.曲阜師范大學(xué)D.2009.不同發(fā)育階段的昆明小鼠的卵巢的形態(tài)學(xué)觀察Themorphologicalobservationo