柴平膠囊對(duì)慢性淺表性胃炎小鼠胃黏膜氨基己糖的影響

1、柴平膠囊對(duì)慢性淺表性胃炎小鼠胃黏膜氨基己糖的影響         【摘要】  目的觀察柴平膠囊對(duì)慢性淺表性胃炎小鼠胃黏膜氨基己糖（hexosamine,HS）含量的影響。方法將健康雄性昆明系小鼠隨機(jī)分為：空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、中藥氣滯胃痛顆粒對(duì)照組、西藥對(duì)照組、柴平膠囊高、低劑量治療組。造模結(jié)束后，中藥氣滯胃痛顆粒對(duì)照組、西藥對(duì)照組、柴平膠囊高、低劑量治療組分別按體重灌服藥物;空白對(duì)照組、模型對(duì)照組按體重灌服生理鹽水。用改良的Neuhaus法測(cè)胃黏膜中HS的含量。結(jié)果柴平膠囊能夠顯著提高小鼠胃黏膜HS的

2、含量，促進(jìn)損傷胃黏膜修復(fù)。結(jié)論 HS含量升高可提高胃黏膜的保護(hù)功能，這是柴平膠囊對(duì)慢性淺表性胃炎的治療機(jī)制之一。 【關(guān)鍵詞】  慢性淺表性胃炎； 氨基己糖； 胃黏膜； 柴平膠囊   柴平膠囊是在經(jīng)方柴胡疏肝散基礎(chǔ)上加味組成的，經(jīng)導(dǎo)師多年臨床經(jīng)驗(yàn)證實(shí)是治療慢性淺表性胃炎的有效方劑。本實(shí)驗(yàn)以氨基己糖為指標(biāo),旨在探討柴平膠囊在增強(qiáng)胃黏膜防御機(jī)制上的作用，并為柴平膠囊更進(jìn)一步的應(yīng)用于臨床提供理論基礎(chǔ)?，F(xiàn)報(bào)告如下。1  儀器與材料1.1  動(dòng)物雄性昆明系小鼠120只，體重1822 ，購于黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。1.2  藥物氨水、脫氧膽酸

3、鈉、氣滯胃痛顆粒、膠體果膠鉍膠囊、西咪替丁片、柴平膠囊(由柴胡、白芍、川芎、蒼術(shù)、厚樸、木香、郁金、甘草等藥物組成)。1.3  試劑D氨基葡萄糖、酚酞、對(duì)二甲氨基苯甲醛、碳酸氫鈉、乙酰丙酮、牛血清白蛋白、氫氧化鈉、鹽酸、考馬斯亮蘭等。1.4  儀器高速離心機(jī)、勻漿機(jī)、分光光度計(jì)、電子天平、光學(xué)顯微鏡、電熱恒溫水浴箱等。2  方法2.1  造模方法將小鼠隨機(jī)分為6組，除正常組20只外，其余動(dòng)物用0.1%氨水溶液及20 mmol/L脫氧膽酸鈉溶液交替自由飲用，配合饑飽失常法(2 d足食,1 d禁食)喂食，連續(xù)6周。觀察小鼠一般狀態(tài),各組取一只小鼠,處死后取其

4、胃黏膜，經(jīng)病理組織學(xué)觀察符合慢性淺表性胃炎的標(biāo)準(zhǔn)。在造模過程中，模型組小鼠死亡1只，西藥對(duì)照組和空白組各死亡2只，中藥對(duì)照組、柴平膠囊高低劑量組各死亡3只。2.2  給藥方法中藥對(duì)照組:將氣滯胃痛顆粒配成0.195g/ml的混懸液,給予小鼠3.9 g·kg-1·d-1灌胃；柴平膠囊治療組:將柴平膠囊配成0.624，0.312 g/ml懸濁液,分別給予小鼠12.48，6.24g·kg-1·d-1灌胃;西藥對(duì)照組:將膠體果膠鉍溶液配成0.002 g/ml的懸濁液,小鼠空腹2 h后以0.04 g·kg-1·d-1灌胃，進(jìn)食后給予0

5、.014 g/ml的西咪替丁懸濁液,0.208 g·kg-1·d-1灌胃。以上各組均根據(jù)體重每7 d調(diào)整用藥容積,連續(xù)4周。模型對(duì)照組和空白對(duì)照組以生理鹽水0.2 ml/10 g灌胃，1次/d，連續(xù)4周。2.3  觀測(cè)方法末次給藥后，禁食不禁水24 h斷頸處死,剖腹取全胃，沿胃大彎剪開，打開胃腔，于4生理鹽水中漂洗，攤開,肉眼觀察黏膜色澤、形態(tài)。于胃竇處取2 mm大小的黏膜，甲醛固定，供病理組織切片觀察。將小鼠剩余胃黏膜組織勻漿、離心，取上清液備用,用考馬斯亮藍(lán)染色法測(cè)定蛋白含量,采用改良后Neuhaus法13測(cè)胃黏膜組織HS含量。  

6、0;      2.4  統(tǒng)計(jì)學(xué)方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用(±s)表示，用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，多個(gè)樣本均數(shù)比較采用方差分析，以P0.05作為有差異的界值，以P0.01作為有顯著差異的界值。3  結(jié)果3.1  采用綜合造模方法后成功復(fù)制慢性淺表性胃炎小鼠模型，符合慢性淺表性胃炎的病理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。3.2  柴平膠囊高、低劑量治療組胃組織勻漿中HS含量明顯高于模型組（P0.01）,表明柴平膠囊可以促進(jìn)HS含量升高，起到保護(hù)胃黏膜的作用。3.3  柴平膠囊高劑量組與中藥對(duì)照組相比，胃黏膜HS

7、含量明顯升高（P0.01），說明療效優(yōu)于中藥組,而與西藥對(duì)照組相比較無顯著性差異（P0.05）。柴平膠囊低劑量組與中藥對(duì)照組相比胃組織勻漿中HS含量比較無顯著性差異（P0.05）表1  各組小鼠氨基己糖含量的檢測(cè)結(jié)果(略)4  討論   慢性淺表性胃炎，指不伴胃黏膜萎縮，胃黏膜層以淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤為主的慢性胃炎。引起慢性淺表性胃炎的病因很多，最初被認(rèn)為是受衰老和終身接觸各種損傷因素的影響，幽門螺旋桿菌（helicobacter pylori ,HP）是慢性淺表性胃炎的主要病因之一。   胃黏膜上有一層厚度不同的黏液凝膠層，緊貼黏膜

8、表面。黏液中95%是水，其它為多聚糖蛋白、電解質(zhì)、肽脂等，它們與H2CO3一起構(gòu)成黏膜的屏障。而糖蛋白中N-乙酰氨基己糖含量約占23.3%。黏膜組織的屏障作用及功能與其HS含量關(guān)系密切。氨基己糖水平被認(rèn)為是衡量胃黏膜防御功能的重要指標(biāo)4。   柴平膠囊是由柴胡疏肝散合平胃散加味而成。方中柴胡、香附疏肝理氣;川芎行氣活血止痛;陳皮、枳殼理氣行滯;芍藥、甘草養(yǎng)血柔肝、緩急止痛;蒼術(shù)、厚樸健脾燥濕。全方共奏疏肝理氣止痛，運(yùn)脾燥濕調(diào)中之功效。   本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明柴平膠囊能夠增加小鼠胃黏膜氨基己糖的含量（P0.01），柴平膠囊高劑量組與中藥對(duì)照組相比有顯著意義（P0.01）,與西藥對(duì)照組比較無顯著差異。證明柴平膠囊為治療慢性淺表性胃炎的有效方劑,其作用機(jī)制可能與其能夠增強(qiáng)胃黏膜的防御機(jī)制有關(guān)?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1張世民.多種中性糖、氨基己糖及酰氨基己糖微量測(cè)定J.第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，1990，11(5)：450.2馮敬池,馮麗英,官心鵬.胃黏膜氨基