基因工程和細胞工程測試題可打印有答案

1、基因工程和細胞工程測試題成績姓名一、選擇題 （每題 5 分，共 50分） 1小鼠雜交瘤細胞表達的單克隆抗體用于人體試驗時易引起過敏反應(yīng)，為了克服這 個缺陷，可選擇性擴增抗體的可變區(qū)基因 （目的基因 ） 后再重組表達。下列相關(guān)敘述正確 的是 （）A 設(shè)計擴增目的基因的引物時不必考慮表達載體的序列B. 用PCR方法擴增目的基因時必須知道基因的全部序列C. PCF體系中一定要添加從受體細胞中提取的DNA聚合酶D. 定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細胞2從某海洋動物中獲得一基因， 其表達產(chǎn)物為一種抗菌性和溶血性均較強的多肽P1。目前在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強但溶血性弱的多肽藥物，首先要做的

2、是（）A. 合成編碼目的肽的 DNA片段 B 構(gòu)建含目的肽 DNA片段的表達載體C. 依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計多條模擬肽D. 篩選出具有優(yōu)良活性的模擬肽作為目的肽3. 某種極具觀賞價值的蘭科珍稀花卉很難獲得成熟種子。為盡快推廣種植，可應(yīng)用多種技術(shù)獲得大量優(yōu)質(zhì)苗，下列技術(shù)中不能選用的是 （）A. 利用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗B 采用花粉粒組織培養(yǎng)獲得單倍體苗C. 采集幼芽嫁接到合適的其他種類植物體上D. 采用幼葉、莖尖等部位的組織進行組織培養(yǎng)4. 如圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述，正確的是（）A. 是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細胞B. 中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細胞

3、的形成C. 同時具有脾臟細胞和鼠骨髓瘤細胞的特性D. 是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞群5某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉，其技術(shù)路線為“取材t消毒t愈傷 組織培養(yǎng)t出芽t生根t移栽”。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A. 消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒齊U對細胞的傷害B. 在愈傷組織培養(yǎng)中加入細胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得染色體加倍的細胞C. 出芽是細胞再分化的結(jié)果，受基因選擇性表達的調(diào)控D. 生根時，培養(yǎng)基通常應(yīng)含 a-萘乙酸等生長素類調(diào)節(jié)劑 6.將胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)成幼苗時，下列條件中不需要的是A. 具有完整細胞核的細胞B 一定的營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素C.離體狀態(tài) D .導(dǎo)

4、入外源基因7芥酸會降低菜籽的品質(zhì)。油菜有兩對獨立遺傳的等位基因（H和h, G和g）控制菜籽的芥酸含量，下圖是獲得低芥酸油菜新品種(HHGG的技術(shù)路線。已知油菜單個花藥由花藥壁 (2n) 及大量花粉 (n) 等組分組成，這些組分的細胞都具有全能性。據(jù)圖分析，下列敘述錯誤的是 ()A. 、兩過程均需要植物激素來誘導(dǎo)細胞脫分化B. 與過程相比，過程可能會產(chǎn)生二倍體再生植株C. 圖中三種途徑中，利用花粉培養(yǎng)篩選低芥酸植株(HHGG)的效率最高D. Fi減數(shù)分裂時，H基因所在染色體會與 G基因所在染色體發(fā)生聯(lián)會&天然的玫瑰沒有藍色花，這是由于缺少控制藍色色素合成的基因B,而開藍色花的矮牽牛中存在序列已知

5、的基因B。現(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍玫瑰。下列操作正確的是( )A. 提取矮牽牛藍色花的 mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補的 DNA再擴增基因BB. 利用限制性核酸內(nèi)切酶從開藍色花矮牽牛的基因文庫中獲取基因BC. 利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細胞D. 將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌，然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細胞9.下圖示植物組織培養(yǎng)過程。據(jù)圖分析下列敘述正確的是 ()A. 植株根尖細胞的全能性比植株根尖細胞的強B. 試管的培養(yǎng)基中含有植物生長調(diào)節(jié)劑，不含有有機物C. 試管中的細胞能進行減數(shù)分裂D. 調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中植物生長調(diào)節(jié)劑的比例可誘導(dǎo)產(chǎn)生不同的植物器官10 下列是應(yīng)用動物細胞工程獲取單克隆抗X抗體的

6、具體操作步驟，其中對單克隆抗體制備的相關(guān)敘述錯誤的是 ()從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取骨髓瘤細胞將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細胞 將雜交瘤細胞注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)篩選出能產(chǎn)生抗 X抗體的雜交瘤細胞 利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞 從小鼠腹水中提取抗體 利用促細胞融合因子促使細胞融合A. 實驗順序應(yīng)該是B. 過程產(chǎn)生多個雜交瘤細胞的過程稱為克隆C. 過程獲得的細胞均可無限增殖D. 利用細胞融合生產(chǎn)單克隆抗體的過程中通常要經(jīng)過兩次篩選二、非選擇題 ( 共 50 分)11 .絞股藍細胞中含有抗煙草花葉病毒(TMV)基因，可以合成一種抗 TMV蛋白，葉片對TMV具有抗感染性。煙草是重要的

7、經(jīng)濟作物，由于TMV的感染會導(dǎo)致大幅度減產(chǎn)。研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗TMV勺煙草，主要流程如下圖所示。(1) 科學(xué)家首先從絞股藍細胞中提取抗TMV基因轉(zhuǎn)錄的RNA然后合成目的基因。圖中過程表示 。(2) 由圖分析， 在過程構(gòu)建的重組 Ti 質(zhì)粒上應(yīng)該含有的標(biāo)記基因是 基因，重組 Ti 質(zhì)粒導(dǎo)入煙草體細胞的方法是 。(3) 在過程培養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營養(yǎng)成分外，還必須添加，以保證受體細胞能培養(yǎng)成再生植株。(4) 過程可采取 的方法，檢測植株是否合成了抗 TMV蛋白。在個體水平的鑒定過程中，可通過 的方法來確定植株是否具有抗性。12 .單純皰疹病毒I型(HSV 1)可引起

8、水泡性口唇炎。 利用雜交瘤技術(shù)制備出抗 HSV 1 的單克隆抗體可快速檢測 HSV1?；卮鹣铝袉栴}：(1) 在制備抗HSX 1的單克隆抗體的過程中，先給小鼠注射一種純化的 HS I蛋白，一段時間后，若小鼠血清中抗 的抗體檢測呈陽性，說明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了 反應(yīng)，再從小鼠的 中獲取B淋巴細胞。將該 B淋巴細胞與小鼠的 細胞融合，再經(jīng)過篩選、檢測，最終可獲得所需的雜交瘤細胞，該細胞具有的特點是 。(2) 若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可在體外對雜交瘤細胞進行培養(yǎng)，也可將該雜交瘤細胞注射到小鼠的 中使其增殖，再從 中提取、純化獲得。(3) 通過上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識別這種HSV 1 蛋白

9、，其原因是該抗體具有 和 等特性。13.花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用 一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此 原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種 植株。流程如下圖。據(jù)圖回答下列問題：(1) 過程所需的酶是 。(2) 過程后，在顯微鏡下觀察融合的活細胞中如有有供體的 (填細 胞器)存在，根據(jù)這一特征可作為初步篩選雜種細胞的標(biāo)志。(3) 原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持細胞具有一定的滲透壓，而維持 。原生質(zhì)體經(jīng)過 再生，進而分裂和脫分化形成 組織。(4) 若分析再生

10、植株的染色體變異類型， 應(yīng)剪取再生植株和 植株的根尖，通過 、 、染色和制片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。(5) 采用特異性引物對花椰菜和黑芥基因組DNA進行PCR擴增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對雙親及再生植株14進行PCR擴增的結(jié)果。據(jù)圖判斷，再生植株14中一定是雜種植株的有 。(6) 對雜種植株進行 接種實驗，可篩選出具有高抗性的雜種植株。14 .圖表示含有目的基因 D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列，圖 表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?，F(xiàn)有MspI、BamH、Mbol、Smal 4種限制性核酸內(nèi)切酶，它們識別

11、的堿基序列和酶切位點分別為CJ CGG GJ GATCC J GATC CCQ GGG請回答下列問題：(1) 圖的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個堿基之間依次由 連接。(2) 若用限制酶Smal完全切割圖中 DNA片段，產(chǎn)生的末端是 末端，其產(chǎn)物長度為 。(3) 若圖中虛線方框內(nèi)的堿基對被T- A堿基對替換，那么基因 D就突變?yōu)榛騞o從雜合子分離出圖及其對應(yīng)的DNA片段，用限制酶 Smal完全切割，產(chǎn)物中共有種不同長度的DNA片段。(4) 若將圖中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行連接，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限制酶是 。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加 的

12、培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。經(jīng)檢測，部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中的目的基因D不能正確表達，其最可能的原因是 。答案一、選擇題 （每題 5 分，共 50分）1小鼠雜交瘤細胞表達的單克隆抗體用于人體試驗時易引起過敏反應(yīng)，為了克服這 個缺陷，可選擇性擴增抗體的可變區(qū)基因（目的基因 ） 后再重組表達。下列相關(guān)敘述正確的是 （）A. 設(shè)計擴增目的基因的引物時不必考慮表達載體的序列B. 用PCR方法擴增目的基因時必須知道基因的全部序列C. PCR體系中一定要添加從受體細胞中提取的DNA聚合酶D. 定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細胞D本題主要考查 PCR技術(shù)的有關(guān)知識。利用PCR技術(shù)擴增目的基因的前提

13、是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計引物，但不需知道目的基因 的全部序列，需要考慮載體的序列；因PCR反應(yīng)在高溫條件下進行，故反應(yīng)體系中需加入耐高溫的DNA聚合酶；因某些目的基因編碼的產(chǎn)物需經(jīng)特殊的加工修飾過程，故一定 要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細胞。2. 從某海洋動物中獲得一基因， 其表達產(chǎn)物為一種抗菌性和溶血性均較強的多肽 P1。目前在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強但溶血性弱的多肽藥物，首先要做的是（）A. 合成編碼目的肽的 DNA片段B構(gòu)建含目的肽 DNA片段的表達載體C. 依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計多條模擬肽D. 篩選出具有優(yōu)良活性的模擬肽作為目的肽C 由題中

14、信息“在 Pl 的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強但溶血性弱的多肽藥物”可推知本 題考查蛋白質(zhì)工程的相關(guān)知識。根據(jù)蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā) t設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)t推測應(yīng)有的氨基酸序列t找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因 ） ，可推知答案為 C。3. 某種極具觀賞價值的蘭科珍稀花卉很難獲得成熟種子。為盡快推廣種植，可應(yīng)用多種技術(shù)獲得大量優(yōu)質(zhì)苗，下列技術(shù)中不能選用的是 （）A. 利用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗B. 采用花粉粒組織培養(yǎng)獲得單倍體苗C. 采集幼芽嫁接到合適的其他種類植物體上D. 采用幼葉、莖尖等部位的組織進行組織培養(yǎng)B 本題考查對獲得大量優(yōu)質(zhì)苗的多種技術(shù)手段的分析。為了使優(yōu)質(zhì)苗

15、的生物性 狀不發(fā)生性狀分離，可采用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗，也可采用將幼芽嫁接到合 適的其他種類植物體上的方法或用莖尖或幼葉等部位的組織進行植物組織培養(yǎng)獲得大量 優(yōu)質(zhì)苗；花粉粒是減數(shù)分裂的產(chǎn)物，利用花粉粒離體培養(yǎng)得到的是單倍體苗，其高度不 育，且會發(fā)生性狀分離，因此B項方案不能選用。4. 如圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述，正確的是（）A. 是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細胞B. 中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細胞的形成C. 同時具有脾臟細胞和鼠骨髓瘤細胞的特性D. 是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞群D本題主要考查單克隆抗體制備的相關(guān)知識。是從已免疫的小鼠脾臟中

16、獲得的漿細胞；中使用聚乙二醇或滅活的病毒等，有利于雜交瘤細胞的形成；同時 具有漿細胞和骨髓瘤細胞的特性；是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞群。 故 D 項正確。5某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉，其技術(shù)路線為“取材t消毒t愈傷組織培養(yǎng)t出芽t生根t移栽”。下列有關(guān)敘述錯誤的是()A. 消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒齊U對細胞的傷害B. 在愈傷組織培養(yǎng)中加入細胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得染色體加倍的細胞C. 出芽是細胞再分化的結(jié)果，受基因選擇性表達的調(diào)控D. 生根時，培養(yǎng)基通常應(yīng)含a-萘乙酸等生長素類調(diào)節(jié)劑B本題主要考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識。在愈傷組織中，因植物細胞含有細

17、胞壁，阻礙了細胞融合，所以此時加入細胞融合的誘導(dǎo)劑，不能獲得染色體加倍的細 胞；消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細胞的傷害；愈傷組織出 芽是細胞分化的結(jié)果，而細胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達；生長素和細胞分裂素是 啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素，生根時，培養(yǎng)基通常含有a-萘乙酸等生長素類調(diào)節(jié)劑。故 B項錯誤。6.將胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)成幼苗時，下列條件中不需要的是A.具有完整細胞核的細胞B 一定的營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素C.離體狀態(tài) D .導(dǎo)入外源基因D7芥酸會降低菜籽的品質(zhì)。油菜有兩對獨立遺傳的等位基因(H和h, G和g)控制菜籽的芥酸含量，下圖是獲得低芥酸油菜新品種(

18、HHGG的技術(shù)路線。已知油菜單個花藥由花藥壁 (2n) 及大量花粉 (n) 等組分組成，這些組分的細胞都具有全能性。據(jù)圖分析，下列敘述錯誤的是 ()A. 、兩過程均需要植物激素來誘導(dǎo)細胞脫分化B. 與過程相比，過程可能會產(chǎn)生二倍體再生植株C. 圖中三種途徑中，利用花粉培養(yǎng)篩選低芥酸植株(HHGG的效率最高D. Fi減數(shù)分裂時，H基因所在染色體會與 G基因所在染色體發(fā)生聯(lián)會D 兩過程是脫分化過程， 培養(yǎng)基中需要加入生長素類和細胞分裂素類激素來誘導(dǎo)細胞脫分化，故 A項正確；過程是利用植物花藥離體培養(yǎng)獲得植株的過程，其 中花藥壁細胞屬于正常的二倍體體細胞，由其獲得的植株為二倍體正常植株，過程是 利用

19、花粉粒離體培養(yǎng)獲得的，花粉細胞只有一個染色體組，由其獲得的植株為單倍體植 株，故B項正確；圖中的三種途徑中，利用花粉培養(yǎng)獲得的只有四種品種，比例為1 : 1 :1: 1,易篩選出所需品種，故 C項正確；H h和G g分別是兩對獨立遺傳的等位基因， 故兩者是位于非同源染色體上的，在減數(shù)分裂時，H和G基因所在的染色體不會發(fā)生聯(lián)會，故D項錯誤。&天然的玫瑰沒有藍色花，這是由于缺少控制藍色色素合成的基因B,而開藍色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B。現(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍玫瑰。下列操作正確的是( )A. 提取矮牽牛藍色花的 mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補的 DNA再擴增基因BB. 利用限制性核酸內(nèi)切酶從開藍色

20、花矮牽牛的基因文庫中獲取基因BC. 利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細胞D. 將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌，然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細胞A 可以利用mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄合成目的基因后再進一步擴增，A項正確；因為開藍色花的矮牽牛基因 B的序列是已知的，所以該目的基因宜采用化學(xué)方法合成或用聚合酶 鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴增，而不是從開藍色花矮牽牛的基因文庫中獲取，B項錯誤；目的基因必須與運載體結(jié)合后才能導(dǎo)入受體細胞，且需要DNA連接酶縫合，C、D項錯誤。9.下圖示植物組織培養(yǎng)過程。據(jù)圖分析下列敘述正確的是 ()A. 植株根尖細胞的全能性比植株根尖細胞的強B. 試管的培養(yǎng)基中含有植物生長調(diào)節(jié)劑，不含有有機

21、物C. 試管中的細胞能進行減數(shù)分裂D. 調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中植物生長調(diào)節(jié)劑的比例可誘導(dǎo)產(chǎn)生不同的植物器官D植株根尖細胞的全能性與植株根尖細胞相同；試管的培養(yǎng)基中含有植物生長調(diào)節(jié)劑和有機物等；試管中的細胞進行的分裂方式為有絲分裂；調(diào)節(jié)培養(yǎng) 基中植物生長調(diào)節(jié)劑的比例，可誘導(dǎo)產(chǎn)生根或芽。10 下列是應(yīng)用動物細胞工程獲取單克隆抗 X 抗體的具體操作步驟，其中對單克隆 抗體制備的相關(guān)敘述錯誤的是 ( )從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取骨髓瘤細胞將 X 抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細胞 將雜交瘤細胞注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)篩選出能產(chǎn)生抗 X抗體的雜交瘤細胞 利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞 從小鼠腹水中提取抗體

22、利用促細胞融合因子促使細胞融合A. 實驗順序應(yīng)該是B. 過程產(chǎn)生多個雜交瘤細胞的過程稱為克隆C. 過程獲得的細胞均可無限增殖D. 利用細胞融合生產(chǎn)單克隆抗體的過程中通常要經(jīng)過兩次篩選C利用促細胞融合因子促使細胞融合，可獲得多種融合細胞。其中B淋巴細胞與 B 淋巴細胞融合的細胞不能無限增殖。二、非選擇題 (共 50 分)11 .絞股藍細胞中含有抗煙草花葉病毒(TMV)基因，可以合成一種抗 TMV蛋白，葉片對TMV具有抗感染性。煙草是重要的經(jīng)濟作物，由于TMV的感染會導(dǎo)致大幅度減產(chǎn)。研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗TMV勺煙草，主要流程如下圖所示。(1) 科學(xué)家首先從絞股藍細胞中提取抗TMV基因轉(zhuǎn)

23、錄的RNA然后合成目的基因。圖中過程表示 。(2) 由圖分析， 在過程構(gòu)建的重組 Ti 質(zhì)粒上應(yīng)該含有的標(biāo)記基因是 基因，重組 Ti 質(zhì)粒導(dǎo)入煙草體細胞的方法是 。(3) 在過程培養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營養(yǎng)成分外，還必須添加 以保證受體細胞能培養(yǎng)成再生植株。(4) 過程可采取 的方法，檢測植株是否合成了抗TMV蛋白。在個體水平的鑒定過程中，可通過 的方法來確定植株是否具有抗性。(1) 逆轉(zhuǎn)錄 (2) 卡那霉素抗性 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(3) 植物激素 (4) 抗原抗體雜交 接種煙草花葉病毒(1) 由圖可知，表示逆轉(zhuǎn)錄(或反轉(zhuǎn)錄)。 由圖示培養(yǎng)基中含有卡那霉素可知， Ti 質(zhì)粒的標(biāo)記基因是

24、卡那霉素抗性基因， 將基因表達載體 (重組 Ti 質(zhì)粒)導(dǎo)入植物細胞中 常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。 (3) 將受體細胞培養(yǎng)成再生植株需要進行植物組織培養(yǎng)，培 養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營養(yǎng)成分外，還必須添加植物激素。(4) 通過抗原一抗體雜交的方法，檢測植株是否合成了抗TMV蛋白，在個體水平上，通過接種煙草花葉病毒的方法可以確定植株是否具有抗性。12 .單純皰疹病毒I型(HSV 1)可引起水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出抗 HSV1 的單克隆抗體可快速檢測 HSV1 。回答下列問題：(1) 在制備抗HSV 1的單克隆抗體的過程中，先給小鼠注射一種純化的 HSV- I蛋白，一段時間后

25、，若小鼠血清中抗 的抗體檢測呈陽性，說明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了 反應(yīng)，再從小鼠的 中獲取B淋巴細胞。將該 B淋巴細胞與小鼠的 細胞融合，再經(jīng)過篩選、檢測，最終可獲得所需的雜交瘤細胞，該細胞具有的特點是 。(2) 若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可在體外對雜交瘤細胞進行培養(yǎng)，也可將該雜交瘤細胞注射到小鼠的 中使其增殖，再從 中提取、純化獲得。(3) 通過上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識別這種HSV 1 蛋白，其原因是該抗體具有 和 等特性。(1) HSV 1蛋白 體液免疫(其他合理答案也可)脾臟(其他合理答案也可)骨髓 瘤 無限增殖且產(chǎn)生專一抗體 ( 其他合理答案也可 )(2) 腹腔 腹水 (3)

26、純度高 特異性強 ( 其他合理答案也可 )(1) 制備單克隆抗體時， 需要先給小鼠注射特定抗原 (HSV1 蛋白 )，當(dāng)小鼠血清中抗 HSV- 1蛋白的抗體檢測呈陽性時，就可從小鼠脾臟中獲取B淋巴細胞，將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，經(jīng)過篩選和克隆化培養(yǎng)，最終獲得既能無限增殖又能產(chǎn)生專一抗體的 雜交瘤細胞。 (2) 單克隆抗體的獲取有兩條途徑，一是從體外細胞培養(yǎng)液中提純獲得，二 是將雜交瘤細胞注射到小鼠的腹腔中使其增殖，再從腹水中提取、純化獲得。(3) 單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高、純度高等特點。13.花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用 一定劑量的紫外線處理

27、黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此 原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種 植株。流程如下圖。據(jù)圖回答下列問題：(1) 過程所需的酶是 。(2) 過程后，在顯微鏡下觀察融合的活細胞中如有有供體的 (填細胞器)存在，根據(jù)這一特征可作為初步篩選雜種細胞的標(biāo)志。(3) 原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持細胞具有一定的滲透壓，從而維持 。原生質(zhì)體經(jīng)過 再生，進而分裂和脫分化形成 組織。(4) 若分析再生植株的染色體變異類型， 應(yīng)剪取再生植株和 植株的根尖，通過 、染色和制片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。

28、(5) 采用特異性引物對花椰菜和黑芥基因組DNA進行PCR擴增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對雙親及再生植株14進行PCR擴增的結(jié)果。據(jù)圖判斷，再生植株14中一定是雜種植株的有 。(6) 對雜種植株進行 接種實驗，可篩選出具有高抗性的雜種植株。(1) 纖維素酶和果膠酶 (2) 葉綠體 (3) 原生質(zhì)體完整性 細胞壁 愈傷(4) 雙親 ( 或花椰菜和黑芥 ) 解離 漂洗 (5)1、2、4(6) 黑腐病菌本題考查植物細胞工程、染色體變異的實驗鑒定以及高抗性的雜種植株的篩選等相 關(guān)知識。 (1) 去除細胞壁獲得原生質(zhì)體需要用纖維素酶和果膠酶處理。(2) 葉肉細胞含有葉

29、綠體，因此通過 PEG誘導(dǎo)融合的雜種細胞應(yīng)含有葉綠體，以此作為初步篩選雜種細胞 的標(biāo)志。 (3) 原生質(zhì)體失去了細胞壁的保護作用，因此原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃 度的甘露醇，使原生質(zhì)體處于等滲溶液中，以維持原生質(zhì)體正常形態(tài)。原生質(zhì)體經(jīng)過細 胞壁再生，進而分裂和脫分化形成愈傷組織。 (4) 要判斷染色體變異的類型，應(yīng)剪取再生 植株、花椰菜和黑芥植株的根尖，通過解離、漂洗、染色、制片等過程制成裝片，然后 進行顯微觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。 (5) 根據(jù)兩親本的差異性條帶， 可知再生植株 1、 2和 4既有花椰菜的條帶，又有黑芥的條帶，因此再生植株1、2和 4一定為雜種植株。(6) 要篩選出高抗性的雜種植株，應(yīng)進行相應(yīng)的病原體接種實驗，即接種黑腐病菌。14 .圖表示含有目的基因 D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列，圖 表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?，F(xiàn)有MspI、BamH、Mbol、Smal 4種限制性核酸內(nèi)切酶，它們識別的堿基序列和酶切