黃瓜香對(duì)小鼠免疫功能調(diào)節(jié)的實(shí)驗(yàn)研究

1、黃瓜香對(duì)小鼠免疫功能調(diào)節(jié)的實(shí)驗(yàn)研究 作者：李春艷 李先輝 呂江明 高輝【摘要】 目的研究黃瓜香水提物對(duì)小鼠免疫功能的影響。方法通過(guò)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能測(cè)定、免疫器官重量法等方法，評(píng)價(jià)黃瓜香對(duì)小鼠免疫功能的影響。結(jié)果黃瓜香水提物， 劑量組與生理鹽水組比較有顯著性差異，能增加免疫器官重量，提高正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù)， 劑量組無(wú)顯著性差異。結(jié)論 黃瓜香水提物對(duì)小鼠非特異性免疫功能有促進(jìn)作用。 【關(guān)鍵詞】 黃瓜香水提物 免疫功能 吞噬百分率Abstract：Objective Viola diffusa Ging（） f Methods Viola diffusa Ging ， e

2、n c Results ， （P ）Conclusion Key words：Viola diffusa ； ； 近年來(lái)， 免疫功能低下日益受到國(guó)內(nèi)外醫(yī)學(xué)專家的廣泛關(guān)注，其本身及所誘發(fā)的各種并發(fā)癥可對(duì)人體健康造成嚴(yán)重的威脅。而我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)藥在改善人體免疫功能方面具有獨(dú)到的見(jiàn)解， 中藥在調(diào)節(jié)人體免疫功能方面的作用日益受到人們重視。本研究以小鼠為模型， 觀察了湘西民間中草藥黃瓜香對(duì)免疫功能的影響。1 材料1.1 動(dòng)物及分組健康昆明小鼠 只，雌雄各半（ 周齡，體重 ） ，由湘雅醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。將小鼠隨機(jī)分成空白組、生理鹽水組、黃瓜香水提液大、中、小劑量組（以下簡(jiǎn)稱水提大、中、小劑量組） 、香菇

3、多糖組共 組，每組 只。1.2 用藥黃瓜香水提物由吉首大學(xué)藥理實(shí)驗(yàn)室提供，傳統(tǒng)方法水提、濃縮，臨用時(shí)用蒸餾水稀釋成所需濃度（實(shí)驗(yàn)所用劑量均以生藥計(jì)）；香菇多糖購(gòu)自金陵藥業(yè)股份有限公司福州梅峰制藥廠， 產(chǎn)品批號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字。2 方法2.1 給藥方法按人常用劑量，根據(jù)人小鼠體表面積比，小鼠用藥量。黃瓜香水提物大、中、小劑量分別為， 香菇多糖 。灌胃 次，每次 ，連續(xù)灌胃 。2.2 雞紅細(xì)胞懸液制備無(wú)菌條件下，自雞翼下靜脈采血。置 疫苗瓶中，加入相當(dāng)于雞血體積 倍的 溶液混勻， 冰箱貯存。臨用時(shí)，用生理鹽水洗滌 次，前 次離心速度為 ，離心 ，棄上清液和界面的細(xì)胞層。最后連續(xù) 次離心（ ， ） 直至細(xì)

4、胞壓積值恒定，用生理鹽水配成體積分?jǐn)?shù)為 的紅細(xì)胞懸液 。2.3 腹腔吞噬細(xì)胞吞噬功能測(cè)定第 天給藥后 ，給小鼠腹腔注射雞紅細(xì)胞懸液 ，間隔 ，頸椎脫臼處死，仰位固定于鼠板上。中下剪開(kāi)腹壁皮膚，經(jīng)腹膜注入生理鹽水 轉(zhuǎn)動(dòng)鼠板 ，然后吸出腹腔洗液，平均分滴于 片載玻片上。晾干，以丙酮甲醇溶液固定，晾干，用瑞氏染液染色 ，洗去染色液，晾干。在油鏡下觀察巨噬細(xì)胞吞噬的雞紅細(xì)胞的個(gè)數(shù)。按下列公式計(jì)算吞噬百分率和吞噬指數(shù) 。 吞噬百分率（%）=吞噬雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞總數(shù)觀察到的巨噬細(xì)胞總數(shù)100 % 吞噬指數(shù)（%）=被吞噬的雞紅細(xì)胞總數(shù)觀察到的巨噬細(xì)胞總數(shù)100 %2.4 免疫器官重量實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死后迅速取出

5、胸腺、脾臟，吸去血液，修去脂肪、系膜，用天平稱取其濕重，然后根據(jù)體重計(jì)算胸腺、脾臟指數(shù)。胸腺指數(shù)胸腺重量（）體重（），脾臟指數(shù)脾臟重量（）體重（） 。2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以s表示，進(jìn)行單因素方差分析，繼以組間數(shù)據(jù)兩兩比較，檢驗(yàn)水平為 。以上統(tǒng)計(jì)分析采用 軟件。1 3 結(jié)果3.1 黃瓜香水提物對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響表結(jié)果顯示，黃瓜香水提物大劑量組和中劑量組與空白對(duì)照組和生理鹽水組比較均能提高巨噬細(xì)胞的吞噬百分率和吞噬指數(shù)（P），小劑量與生理鹽水組比較無(wú)顯著性差異（P）；與香菇多糖組比較，大劑量組沒(méi)有顯著性差異（P）。說(shuō)明黃瓜香水提物的大劑量和中劑量能夠提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能。3

6、.2 黃瓜香水提物對(duì)免疫器官重量的影響結(jié)果見(jiàn)表。4 討論 黃瓜香為堇菜科蔓莖堇菜 （匍伏堇）的全草，屬多年生草本植物。其化學(xué)成分主要為黃酮、糖類、黏液質(zhì)。植株總黃酮含量為，根總黃酮含量為，細(xì)胞懸浮物總黃酮含量為 。其中，作為蔓莖堇菜的主要有效化學(xué)成分的黃酮，具有極大的藥用價(jià)值，民間應(yīng)用顯示具有良好的提高免疫力、抗衰老的作用，但與藥理作用聯(lián)系較少。而生物類黃酮，是植物次級(jí)代謝產(chǎn)物，廣泛地存在于植物中，具有保護(hù)心腦血管、利膽保肝、抗癌、抗衰老、提高免疫力等多種生物活性。本實(shí)驗(yàn)從免疫器官（胸腺和脾臟）、免疫細(xì)胞（吞噬細(xì)胞）方面探討了黃瓜香水提物對(duì)免疫功能影響的機(jī)制。表1 腹腔吞噬細(xì)胞吞噬功能測(cè)定（略

7、）與空白對(duì)照組比較，P0.01；與生理鹽水組比較，P0.01；與香菇多糖組比較，P0.05表2 免疫器官重量實(shí)驗(yàn)結(jié)果（略）與空白對(duì)照組、生理鹽水組比較，P0.01,P0.05,與香菇多糖組比較，P0.05 脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)是反映動(dòng)物機(jī)體免疫功能的最基本和最常規(guī)的指標(biāo)，已被廣泛用于評(píng)價(jià)機(jī)體的整體免疫狀態(tài)。藥物對(duì)動(dòng)物胸腺、脾臟重量的影響，可作為免疫藥理機(jī)制的初步指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示， 黃瓜香水提物可明顯增加小鼠胸腺、脾臟的重量，提示具有免疫增強(qiáng)作用。巨噬細(xì)胞在非特異性免疫中發(fā)揮極為重要的作用，是消除致病微生物的重要效應(yīng)細(xì)胞，具有攝取、處理、加工、清除外來(lái)異物、呈遞抗原的功效，在調(diào)節(jié)免疫功能和免疫應(yīng)答的各環(huán)節(jié)中起著重要的作用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明， 黃瓜香水提物能明顯提高正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù)，證明黃瓜香水提物對(duì)非特異性免疫功能有增強(qiáng)作用。 綜上所述，本實(shí)驗(yàn)研究從免疫器官、免疫細(xì)胞水平探討了黃瓜香水提物對(duì)機(jī)體非特異性免疫功能的影響，結(jié)果顯示黃瓜香水提物能夠增加小鼠胸腺、脾臟的重量，提高正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù)，具有一定的免疫調(diào)節(jié)的作用。 黃瓜香原植物由吉首大學(xué)民族醫(yī)藥研究室提供鑒定，謹(jǐn)致謝意！【】 1 劉訓(xùn)