黃瓜香對小鼠免疫功能調(diào)節(jié)的實驗研究

1、黃瓜香對小鼠免疫功能調(diào)節(jié)的實驗研究 作者：李春艷 李先輝 呂江明 高輝【摘要】 目的研究黃瓜香水提物對小鼠免疫功能的影響。方法通過小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能測定、免疫器官重量法等方法，評價黃瓜香對小鼠免疫功能的影響。結(jié)果黃瓜香水提物， 劑量組與生理鹽水組比較有顯著性差異，能增加免疫器官重量，提高正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù)， 劑量組無顯著性差異。結(jié)論 黃瓜香水提物對小鼠非特異性免疫功能有促進(jìn)作用。 【關(guān)鍵詞】 黃瓜香水提物 免疫功能 吞噬百分率Abstract：Objective Viola diffusa Ging（） f Methods Viola diffusa Ging ， e

2、n c Results ， （P ）Conclusion Key words：Viola diffusa ； ； 近年來， 免疫功能低下日益受到國內(nèi)外醫(yī)學(xué)專家的廣泛關(guān)注，其本身及所誘發(fā)的各種并發(fā)癥可對人體健康造成嚴(yán)重的威脅。而我國傳統(tǒng)醫(yī)藥在改善人體免疫功能方面具有獨到的見解， 中藥在調(diào)節(jié)人體免疫功能方面的作用日益受到人們重視。本研究以小鼠為模型， 觀察了湘西民間中草藥黃瓜香對免疫功能的影響。1 材料1.1 動物及分組健康昆明小鼠 只，雌雄各半（ 周齡，體重 ） ，由湘雅醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供。將小鼠隨機(jī)分成空白組、生理鹽水組、黃瓜香水提液大、中、小劑量組（以下簡稱水提大、中、小劑量組） 、香菇

3、多糖組共 組，每組 只。1.2 用藥黃瓜香水提物由吉首大學(xué)藥理實驗室提供，傳統(tǒng)方法水提、濃縮，臨用時用蒸餾水稀釋成所需濃度（實驗所用劑量均以生藥計）；香菇多糖購自金陵藥業(yè)股份有限公司福州梅峰制藥廠， 產(chǎn)品批號：國藥準(zhǔn)字。2 方法2.1 給藥方法按人常用劑量，根據(jù)人小鼠體表面積比，小鼠用藥量。黃瓜香水提物大、中、小劑量分別為， 香菇多糖 。灌胃 次，每次 ，連續(xù)灌胃 。2.2 雞紅細(xì)胞懸液制備無菌條件下，自雞翼下靜脈采血。置 疫苗瓶中，加入相當(dāng)于雞血體積 倍的 溶液混勻， 冰箱貯存。臨用時，用生理鹽水洗滌 次，前 次離心速度為 ，離心 ，棄上清液和界面的細(xì)胞層。最后連續(xù) 次離心（ ， ） 直至細(xì)

4、胞壓積值恒定，用生理鹽水配成體積分?jǐn)?shù)為 的紅細(xì)胞懸液 。2.3 腹腔吞噬細(xì)胞吞噬功能測定第 天給藥后 ，給小鼠腹腔注射雞紅細(xì)胞懸液 ，間隔 ，頸椎脫臼處死，仰位固定于鼠板上。中下剪開腹壁皮膚，經(jīng)腹膜注入生理鹽水 轉(zhuǎn)動鼠板 ，然后吸出腹腔洗液，平均分滴于 片載玻片上。晾干，以丙酮甲醇溶液固定，晾干，用瑞氏染液染色 ，洗去染色液，晾干。在油鏡下觀察巨噬細(xì)胞吞噬的雞紅細(xì)胞的個數(shù)。按下列公式計算吞噬百分率和吞噬指數(shù) 。 吞噬百分率（%）=吞噬雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞總數(shù)觀察到的巨噬細(xì)胞總數(shù)100 % 吞噬指數(shù)（%）=被吞噬的雞紅細(xì)胞總數(shù)觀察到的巨噬細(xì)胞總數(shù)100 %2.4 免疫器官重量實驗動物處死后迅速取出

5、胸腺、脾臟，吸去血液，修去脂肪、系膜，用天平稱取其濕重，然后根據(jù)體重計算胸腺、脾臟指數(shù)。胸腺指數(shù)胸腺重量（）體重（），脾臟指數(shù)脾臟重量（）體重（） 。2.5 統(tǒng)計學(xué)處理數(shù)據(jù)以s表示，進(jìn)行單因素方差分析，繼以組間數(shù)據(jù)兩兩比較，檢驗水平為 。以上統(tǒng)計分析采用 軟件。1 3 結(jié)果3.1 黃瓜香水提物對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響表結(jié)果顯示，黃瓜香水提物大劑量組和中劑量組與空白對照組和生理鹽水組比較均能提高巨噬細(xì)胞的吞噬百分率和吞噬指數(shù)（P），小劑量與生理鹽水組比較無顯著性差異（P）；與香菇多糖組比較，大劑量組沒有顯著性差異（P）。說明黃瓜香水提物的大劑量和中劑量能夠提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能。3

6、.2 黃瓜香水提物對免疫器官重量的影響結(jié)果見表。4 討論 黃瓜香為堇菜科蔓莖堇菜 （匍伏堇）的全草，屬多年生草本植物。其化學(xué)成分主要為黃酮、糖類、黏液質(zhì)。植株總黃酮含量為，根總黃酮含量為，細(xì)胞懸浮物總黃酮含量為 。其中，作為蔓莖堇菜的主要有效化學(xué)成分的黃酮，具有極大的藥用價值，民間應(yīng)用顯示具有良好的提高免疫力、抗衰老的作用，但與藥理作用聯(lián)系較少。而生物類黃酮，是植物次級代謝產(chǎn)物，廣泛地存在于植物中，具有保護(hù)心腦血管、利膽保肝、抗癌、抗衰老、提高免疫力等多種生物活性。本實驗從免疫器官（胸腺和脾臟）、免疫細(xì)胞（吞噬細(xì)胞）方面探討了黃瓜香水提物對免疫功能影響的機(jī)制。表1 腹腔吞噬細(xì)胞吞噬功能測定（略

7、）與空白對照組比較，P0.01；與生理鹽水組比較，P0.01；與香菇多糖組比較，P0.05表2 免疫器官重量實驗結(jié)果（略）與空白對照組、生理鹽水組比較，P0.01,P0.05,與香菇多糖組比較，P0.05 脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)是反映動物機(jī)體免疫功能的最基本和最常規(guī)的指標(biāo)，已被廣泛用于評價機(jī)體的整體免疫狀態(tài)。藥物對動物胸腺、脾臟重量的影響，可作為免疫藥理機(jī)制的初步指標(biāo)。本實驗結(jié)果顯示， 黃瓜香水提物可明顯增加小鼠胸腺、脾臟的重量，提示具有免疫增強(qiáng)作用。巨噬細(xì)胞在非特異性免疫中發(fā)揮極為重要的作用，是消除致病微生物的重要效應(yīng)細(xì)胞，具有攝取、處理、加工、清除外來異物、呈遞抗原的功效，在調(diào)節(jié)免疫功能和免疫應(yīng)答的各環(huán)節(jié)中起著重要的作用。本實驗結(jié)果表明， 黃瓜香水提物能明顯提高正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù)，證明黃瓜香水提物對非特異性免疫功能有增強(qiáng)作用。 綜上所述，本實驗研究從免疫器官、免疫細(xì)胞水平探討了黃瓜香水提物對機(jī)體非特異性免疫功能的影響，結(jié)果顯示黃瓜香水提物能夠增加小鼠胸腺、脾臟的重量，提高正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù)，具有一定的免疫調(diào)節(jié)的作用。 黃瓜香原植物由吉首大學(xué)民族醫(yī)藥研究室提供鑒定，謹(jǐn)致謝意！【】 1 劉訓(xùn)