鴨禽流感疫苗免疫程序研究報(bào)告.docxVIP

1、第53卷第21期2014年11月湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)HubeiAgriculturalSciences鴨禽流感疫苗免疫程序研究報(bào)告Hi楊峻，羅青平，艾地云，羅玲，王紅琳，張蓉蓉，溫國元，張騰飛，汪宏才，邵華斌(湖北省農(nóng)科院畜牧獸醫(yī)研究所/動(dòng)物胚胎工程及分子育種湖北省改點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，武漢430064)播要：為了科學(xué)制定鴨的禽流感疫苗免疫程序，進(jìn)行了以下三方面的試毆：不同品種維格母源抗體消長(zhǎng)帶況測(cè)定。姑果表明，57日齡雛鴨AI-HI抗體可維持較高水平,15-17日齡下降至4.01og2以下。疫苗首免后抗體檢剝。結(jié)果表明，鴨首次免疫后2周可測(cè)出AI-HI擾體，4周時(shí)達(dá)到高峰；抗體水平持續(xù)4周后開始下降。肉鴨免疫

2、一次抗體水平差異大，不能完全預(yù)防禽流感的發(fā)生。肉種鴨及妥種曲免疫程序及抗體消長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)定。結(jié)果表明,7-14日齡初免，60日齡二次免疫和120日齡加強(qiáng)免疫(三次免疫)，種鴨的AI-HI抗體水平最高分別可達(dá)到91og2Jllog2,二次免疫后8個(gè)月其AI-HI平均抗體水平為5.6【og2,三次免疫后10個(gè)月其AI-HI平均抗體水平為7.6log2以上。關(guān)鍵詞：鴨；禽流感；滅活疫苗；免疫程序中圖分類號(hào)：S859.79；S858.32文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文童編號(hào)：0439-8114(2014)21-5213-04DOLlO.l4088/ki.issn0439-8114.2014.21.042ImmuneP

3、rocedureofAvianinFluenzaVaccineforDuckYANGJun,LUOQing-ping,AlDi-yun,LUOLing,WANGHong-Un,ZHANGRoi-rong.WENGuo-yuan,ZHANGTeng-fei,WANGHong-cai,SHAOHua-bin(InstituteofAnima)andVeterinaryScience,HubeiAcademyofAgriculturalSciences/HubciKeyLaboratoryofAnimalEmbryoandMolecularBreeding,Wuhan430064,China)Abs

4、tract；Inordertoscientificallymaketheimmuneprocedureofavianinfluenzavaccineforduck,threetestsincludingthedetectionofthevarietyofmaternalantibodylevelsindifferentbreeds,theantibodydetectionafterfirstimmunization,andtherelationshipofimmuneprocedureandantibodylevelsvarietyweremade.Theresultsshowedthatth

5、eAI-HIantibodylevelsof1weekoldduckswererelativehigher,andthendroppedto4log2orevenlowerat15to17daysold.TTieAI-HIantibodyinduckswasdetectedat2weeksafterfirstimmunization,andantibodylevelreachedpeakatfourweeksafterfirstimmunization(4.81og2).Theantibodylevelwasstable4weeksandthenbegantodrop.Theantibodyl

6、evelsinmeatduckshadgreatdifferenceafterfirstimmunization.AIVwasnotpreventedcompletely.TheAI-HIantibodylevelofbreedingducksreachedto911log2whentheducksgotfirstimmunizationat8daysold,thesecondimmunizationat60daysold,andboosterimmunizationwereat120daysold.Theantibodylevelmaintainedat69log2after10months

7、.Keywords：duck；avianinfluenza；inactivedvaccine:immuneprocedure研究表明，水禽是禽流感病毒的天然宿主，禽流感病毒不僅可長(zhǎng)期在其體內(nèi)寄居，而且可通過其遷徙經(jīng)消化道排毒污染水域而感染其他鳥類和哺乳動(dòng)物。這可能是禽流感病毒長(zhǎng)期適應(yīng)水禽達(dá)到進(jìn)化平衡狀態(tài)的結(jié)果。但自20世紀(jì)90年代中期以后,研究發(fā)現(xiàn)H5N1亞型禽流感病毒對(duì)水禽具有明顯的致病性，并可引起大批水禽發(fā)病死亡，這說明隨著自然生態(tài)的進(jìn)化，禽流感病毒與水禽之間的生態(tài)平衡被打破，水禽也成了禽流感病毒的易感宿主s：。近年來周邊國家暴發(fā)的禽流感，給中國養(yǎng)收稿日期：2014-04-17捻金項(xiàng)目：湖

8、北省科技廳“十一五”重大攻關(guān)項(xiàng)目(2009BBB003)；農(nóng)業(yè)部公益行業(yè)科研專項(xiàng)(201003012)；湖北省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新中心資助項(xiàng)目(2011-620-001-003)作者簡(jiǎn)介：椅峻(1953-),男，湖北武漢人，研究員，主要從事禽病防研究工作，(電話電子信箱)junyang2013；通訊作者，邵華斌，研究員，(電子信箱)Shbl961°禽業(yè)構(gòu)成了極大威脅，因此及時(shí)開展有關(guān)禽流感疫苗的研究成為當(dāng)前預(yù)防和控制禽流感的必然選擇。有關(guān)禽流感疫苗免疫雞效果的研究報(bào)道較多，但對(duì)水禽系統(tǒng)免疫效果的報(bào)道較少。本研究針對(duì)鴨禽流感滅活疫苗免疫程序中最佳免疫時(shí)間及不同品種鴨

9、免疫效果進(jìn)行了試驗(yàn)，對(duì)預(yù)防和控制鴨禽流感的發(fā)生具有重要參考意義。1材料與方法1.1商品疫苗及檢測(cè)用抗原禽流感滅活疫苗（H5亞型）選擇國內(nèi)批準(zhǔn)的生產(chǎn)廠家疫苗；用于檢測(cè)AI-HI抗體的抗原、陽性血清、陰性血清購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所。AI-HI抗體檢測(cè)方法按常規(guī)方法成進(jìn)行。1.2試驗(yàn)鴨雛鴨、青年鴨和成年產(chǎn)蛋鴨來自湖北省內(nèi)蛋鴨場(chǎng)和肉鴨場(chǎng)，試驗(yàn)前均未進(jìn)行禽流感免疫。大部分試驗(yàn)結(jié)合當(dāng)?shù)厣a(chǎn)完成。1.3試驗(yàn)設(shè)計(jì)1.3.1雛鴨母源抗體消長(zhǎng)情況的測(cè)定分別對(duì)3批肉種鴨商品代和3批產(chǎn)蛋鴨商品代的雛鴨進(jìn)行母源抗體測(cè)定，每批1日齡雛鴨80只，每2d采血1次，測(cè)定雛鴨母源抗體，直到AI-HlW31og2。1.

10、3.2疫苗首次免疫鴨抗體產(chǎn)生期試驗(yàn)分別選擇3批肉種鴨商品代和3批產(chǎn)蛋鴨商品代的714日齡雛鴨進(jìn)行試驗(yàn)，每組免疫60只，首次免疫劑量：每只鴨頸背部皮下注射0.3mL；免疫后1、2、3、4、6、8、10周各采血一次，測(cè)定A1-HI抗體的消長(zhǎng)情況，確定抗體最早產(chǎn)生時(shí)間。同時(shí)各組分別設(shè)30只條件相同的鴨不免疫禽流感疫苗作對(duì)照。1.3.3不同日齡維鴨首免效果觀察試驗(yàn)選擇肉種鴨商品代和產(chǎn)蛋鴨商品代的雛鴨進(jìn)行試驗(yàn)，分別于3、5、7、9、14、19日齡進(jìn)行免疫，每組免疫60只，各組在半開放鴨舍中隔離飼養(yǎng)，免疫劑量為0.3mL/只。免疫前檢測(cè)母源抗體水平，免疫后每周采血1次，測(cè)定AI-HI抗體的消長(zhǎng)情況，觀察分

11、析不同品種鴨的最佳免疫日齡。1.3.4種鴨的免疫程序及抗體消長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)定1000只肉種鴨和1000只地方產(chǎn)蛋種鴨全部進(jìn)行二次免疫（714日齡初免，60日齡二次免疫），在120日齡時(shí)各組均分為兩部分，其中500只進(jìn)行第三次免疫（在二次免疫基礎(chǔ)t,120日齡加強(qiáng)免疫一次）。首免劑最為0.3mL/只，二次和三次免疫均為0.5mL/Ro免疫后14周每周檢測(cè)抗體1次，分析抗體上升規(guī)律；之后每2月采血1次，測(cè)定AI-HI抗體的持續(xù)期。試驗(yàn)分別在肉鴨場(chǎng)和蛋鴨場(chǎng)進(jìn)行。2結(jié)果與分析2.1雛鴨母源抗體消長(zhǎng)情況的測(cè)定結(jié)果分別對(duì)3批肉種鴨商品代和3批產(chǎn)蛋鴨商品代的雛鴨進(jìn)行母源抗體測(cè)定，結(jié)果（表1）表明，57日齡雛鴨A

12、I-HI母源抗體水平維持在較高水平，此后1周快速下降,15-17日齡母源抗體水平降至4.0log2以下。表1雛鴨母源抗體消長(zhǎng)情況的測(cè)定5=5）不同n的兼鴨AI-HI母源抗體水平（log!）77出1357911131517192118.2(79)8.4(8-9)7.6(78)6.6(67)6.2(67)5.4(56)5.2(46)4.8(46)4.2(46)3.80-4)3.6(3-4)蛋鴨27.4(7-8)7.6(79)6.8(67)6.6(67)5.6(67)5.4(5-6)5.2(4%)4.4(45)3.8(34)3.8(34)3.4(34)35.2(56)5.4(56)5.2(5-6)5

13、.0(46)4.6(4-5)4.4(45)4.0(35)3.8(34)3.2(34)3.4(34)3.2(34)19.0(8-10)9.2(9-10)8.8(89)8.6(8-9)7.8(78)6.8(位7)6.4(67)5.6(56)4.2(45)3.2(34)3.0(34)肉鴨27.6(78)7.6(79)6.8(6-7)6.6(67)5.4(56)5.4(56)5.0(46)4.4(45)3.8(34)3.8(34)3.4(34)37.8(78)7.6(7-9)6.8(67)6.6(6-7)5.4(56)5.0(46)5.0(46)4.4(45)3.6(34)3.4(3-4)3.2(34

14、)2.2疫苗首次免疫鴨抗體產(chǎn)生期試驗(yàn)結(jié)果由表2、表3可見，肉鴨和蛋鴨分別在7J4日齡免疫,2周后可檢測(cè)到AI-HI抗體,4周時(shí)抗體達(dá)到4.01og2以上，但抗體水平不一致，抗體平均幾何滴度達(dá)不到51og2；抗體水平持續(xù)4周之后開始下降，母源抗體對(duì)疫苗免疫效果影響不大。2.3不同日齡雛鴨首免效果觀察由表4、表5可見，鴨35日齡免疫時(shí)抗體上升慢，免疫效果差,AI-HI抗體水平為351og2。719日齡免疫時(shí)抗體水平在免疫后2周開始上升,46周達(dá)高峰。根據(jù)母源抗體情況，肉鴨79日齡首免較好，蛋鴨14-19日齡首免較好（非禽流感流行區(qū)）。3.4肉種鴨及產(chǎn)蛋種鴨免疫程序及抗體消長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)定由表6、表7可

15、見，二次免疫1周后鴨抗體水平開始上升，持續(xù)時(shí)間8個(gè)月（300日齡），二次免疫后8個(gè)月其AI-HI平均抗體水平為5.61og2,最高抗體水平為9.01og2；三次免疫2周后其抗體水平持續(xù)上表2肉鴨首次免疫抗體產(chǎn)生期測(cè)定（n=5）試驗(yàn)批次鴨數(shù)首免免疫笊免疫前后鴨體內(nèi)AI-H1抗體水平（Iog2）與分組只日齡ml/只01周2周3周4周6周8周10周免疫組6070.3W2W223.4(3-4)4.8(46)5.0(46)4.6(45)4.4(35)1對(duì)照狙307W2W2W2W2W2蚤2W2W2免疫組26070.37.6(78)6.2(6-7)42(3-5)3.4(35)4.6(4-6)5.2(4-6)

16、4.8(45)4.2(35)對(duì)照蛆3077.6(78)6.4(&7)4.4(4-5)3.4(34)2.8(24)W2W2W2免疫組3對(duì)照組6070.37.8(78)6.2(6-7)4.4(4-5)3.6(3-5)4.8(46)4.8(46)4.6(45)4.4(35)3077.8(7-8)6.8(67)4.6(45)3.4(3-4)2.8(24)2W2W2表3S費(fèi)鴨首次免疫抗體產(chǎn)生期測(cè)定（n=5）試驗(yàn)批次與分組鴨數(shù)首免免疫量免疫前后鴨體內(nèi)AI-HI抗體水平（log2）只日齡ml?只01周2周3周4周6周8周10周免疫組160140.3W2W23.4(34)4.2(35)4.6(46)5

17、.0(46)5.2(5Y)4.8(46)1對(duì)照組3014W2W2W2W22W222免疫組2對(duì)照祖60140.33.8(34)3.4(3-4)3.4(34)4.0(3-5)4.4(45)4.8(46)5.0(46)4.6(45)30143.8(34)3.4(3Y)W2<2W2W2W2W2免疫組60140.33.2(34)3.2(34)3.4(34)4.4(3-5)4.8(46)5.0(46)5.2(46)4.8(46)對(duì)照組30143.2(34)3.2(34)W2W2W2W2W2W2表4不同日齡肉鴨首免效果觀察（n=5）試驗(yàn)分蛆鴨數(shù)免疫皺ml/只免疫前后鴨體內(nèi)AI-H1抗體水平（log2）

18、母源抗體1周2周3周4周6周8周10周3日齡600.37.6(79)5.4(56)3.6(34)4.0(35)4.4(35)4.4(45)4.2(45)4.0(35)5日齡600.36.8(6-7)5.4(56)3.4(34)4.0(35)4.4(35)4.4(35)4.2(4-5)4.2(35)7日齡600.36.4(67)4.4(45)4.4(35)4.6(46)5.2(46)4.8(45)4.2(45)4.4(3-5)9日齡600.35.4(56)3.6(34)4.4(45)4.8(46)5.2(46)5.2(4-6)4.8(45)4.4(45)14日齡600.34.4(45)3.2(3

19、4)4.4(35)4.8(46)5.2(46)5.2(4)4.8(45)4.4(45)19H齡600.33.4(34)3.2(34)4.4(4-5)4.8(46)5.2(46)5.2(46)4.8(45)4.4(45)衰5不同日齡蛋鴨首免效果觀察（n=5）試驗(yàn)分蛆竺免疫量免疫前后精體內(nèi)AI-H1抗體水平（Iog2）ml7只母源抗體1周2周3周4周6周8周10周3日齡600.38.2(8-9)6.4(67)4.6(45)4.2(35)4.4(35)4.4(4-5)4.2(45)4.0(35)5日齡600.37.6(78)5.4(56)4.2(34)4.4(3-5)4.8(45)4.4(45)4.

20、2(45)4.2(35)7日齡600.36.8(6-7)4.8(45)4.4(35)4.6(4-6)5.2(46)5.2(56)4.2(45)4.2(3-5)9日酸600.36.2(56)4.6(45)4.4(45)4.8(46)5.4(56)5.2(46)4.6(45)4.4(45)140齡600.34.8(46)3.2(3-4)4.4(3-5)4.8(46)5.2(46)5.2(46)4.8(45)4.4(45)19日齡600.33.8(34)3.2(34)4.4(45)4.8(4-6)5.2(46)5.2(46)4.8(45)4.4(45)升，持續(xù)時(shí)間10個(gè)月以上（420日齡），三次免疫

21、后10個(gè)月其AI-HI平均抗體水平為7.61og2以上，最高抗體水平為11.01og2。肉種鴨及產(chǎn)蛋種鴨分別在60日齡和120日齡進(jìn)行二次和三次免疫效果基本一致。3小結(jié)與討論1）本研究表明，不同品種的雛鴨，母源抗體水平在57日齡維持在較高水平，此后1周快速下降。不同日齡雛鴨首免效果觀察結(jié)果表明，35日齡免疫時(shí)鴨抗體水平上升慢，免疫效果差,7-19B齡免疫時(shí)鴨抗體水平在2周時(shí)開始上升,46周達(dá)高峰。根據(jù)母源抗體情況，肉鴨79日齡首免較好，蛋鴨1419日齡首免較好（非禽流感流行區(qū)）。疫苗首次免疫鴨抗體產(chǎn)生期試驗(yàn)結(jié)果表明，肉鴨和蛋鴨分別在7、14日齡免疫,2周后可檢測(cè)到AI-HI抗體,4周時(shí)其抗體水

22、平達(dá)到4.01og2以上，但抗體水平不一致，抗體平均幾何滴度達(dá)不到5.01og2；抗體水平持表6肉種鴨抗體消長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)定（n=5）試驗(yàn)分組鴨數(shù)免疫日齡免疫后不同時(shí)間鴨體內(nèi)體內(nèi)AI-HI抗體（log2）01周2周3周4周2月4月6月8月10月二次免疫500604.2(45)4.6(46)5.4(56)6.0(57)6.6(6-8)7.0(69)6.4(58)6.0(57)5.6(56)5.0(46)三次免疫5001207.0(6-9)6.6(68)7.8(79)8.2(79)8.4(7-10)9.4(8-11)8.8(8-10)8.4(79)8.0(79)7.8(79)表7蛋種鴨抗體消長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)

23、定（n=5）試莪分組鴨數(shù)免疫免疫后不同時(shí)間時(shí)體內(nèi)體內(nèi)AI-HI抗體（log2）只日齡0周2周3周4周2月4月6月8月10月二次免疫三次免疫500604.2(45)4.4(46)5.2(56)6.2(5-7)6.6(68)7.2(69)6.4(58)5.8(5-7)5.6(56)5.0(46)5001207.2(6-9)6.8(68)7.6(79)8.0(79)8.6(7-10)9.2(8-11)8.8(8-10)8.6(7-9)8.2(7-9)7.6(79)續(xù)4周之后開始下降；母源抗體對(duì)疫苗免疫效果影響不大。而二次免疫后AI-HI抗體滴度明顯上升，且維持時(shí)間長(zhǎng)。因此，在臨床生產(chǎn)實(shí)踐中必須對(duì)鴨進(jìn)

24、行二次免疫，尤其是種用鴨最好在開產(chǎn)前23周根據(jù)情況進(jìn)行三免,確保有效抗體的持續(xù)時(shí)間。2）關(guān)于鴨禽流感免疫有效抗體問題，根據(jù)姜北宇等血所做的H5亞型禽流感疫苗免疫后HI抗體與攻毒保護(hù)率的關(guān)系的研究結(jié)果，當(dāng)免疫雞HIW23時(shí)，攻毒后全部發(fā)病死亡；HI=24時(shí)，攻毒保護(hù)率為77.4%；HI=25時(shí)，攻毒保護(hù)率為97.4%；HIN26時(shí)，攻毒保護(hù)率為100%。這與其他一些研究人員所得結(jié)果基本一致。由于條件的限制，本研究未做抗體水平與攻毒保護(hù)率關(guān)系的相關(guān)性試驗(yàn)，國內(nèi)也尚未見相關(guān)報(bào)道，但根據(jù)作者多年對(duì)水禽的臨床診斷經(jīng)驗(yàn)認(rèn)為，以上的相關(guān)性試驗(yàn)結(jié)果可用于評(píng)價(jià)禽流感疫苗免疫效果時(shí)參考。3）肉種鴨及產(chǎn)蛋種鴨免疫程

25、序及抗體消長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)定結(jié)果表明，二次免疫1周后鴨抗體水平開始上升，持續(xù)時(shí)間8個(gè)月（300日齡），二次免疫后8個(gè)月其A1-HI平均抗體水平為5.61og2,最高抗體水平為9.01og2；三次免疫2周后鴨抗體水平持續(xù)上升，持續(xù)時(shí)間10個(gè)月以上（420日齡），三次免疫后10個(gè)月其AI-HI平均抗體水平為7.61og2以上，最高抗體水平為11.0k）g2。因此商品蛋鴨推薦二次免疫程序，種鴨推薦三次免疫程序，商品肉鴨推薦79日齡首免。4）堅(jiān)持定期檢測(cè)鴨群AI-H1抗體，是確保鴨禽流感疫苗免疫成功的關(guān)鍵措施，不同年齡、不同品種、不同飼養(yǎng)條件鴨群的禽流感疫苗免疫效果均會(huì)有一定的差異，應(yīng)根據(jù)不同情況，制定適合

26、本場(chǎng)的禽流感免疫程序，確保養(yǎng)鴨業(yè)健康發(fā)展。參考文獻(xiàn)：1美】Bw卡爾尼克禽病學(xué)M.第十版.高福.劉文軍譯.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1999.743-746.2 劉秀梵.家養(yǎng)水愈A型流感病毒和新城疫病毒的感染和臨床疾病A.第15屆世界禽病大會(huì)性中國畜牧冉醫(yī)學(xué)會(huì)2007年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集C.北京：中國畜牧善醫(yī)學(xué)會(huì),2007.87-95.3 于睫震.中國的禽流感A.第15屆世界禽病大會(huì)實(shí)中國畜牧?xí)r醫(yī)學(xué)會(huì)2007年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集C.北京：中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)，2007.134-137.4 甘孟侯.全球禽流感的流行形勢(shì)J.中國預(yù)防善醫(yī)學(xué)報(bào).2004,26（6）:468-470.5 中國冉藥典委員會(huì).中華人民共和國魯藥典（2005年版）M.北京：中國農(nóng)業(yè)出版It,2006.6 姜北宇，劉月煥，?？〗?等.H5亞型禽流感疫苗對(duì)特禽及水禽的免疫效果觀察:J.中國獸藥雜志,2005,39（9）：23-25.（責(zé)任編輯曾德芳）（上接第5212頁）(8):10