蜂房提取物對(duì)荷瘤鼠放化療的增效作用

1、    作者：魏金榮，張坤，關(guān)一夫，張岐山【摘要】  目的： 觀察蜂房乙醇提取物對(duì)荷H22肝癌小鼠的放化療增效作用。方法： 移植H22肝癌的小鼠模型，給予蜂房乙醇提取物與化療和放療聯(lián)合，計(jì)算抑瘤率及增效率。結(jié)果： 蜂房乙醇提取物對(duì)荷H22肝癌小鼠放化療的抑瘤率分別達(dá)60.5%和61.2%，增效率分別為33.3%和32.6%。結(jié)論： 蜂房乙醇提取物對(duì)荷H22肝癌小鼠的放化療均有明顯的增效作用。 【關(guān)鍵詞】  肝腫瘤，實(shí)驗(yàn)性； 小鼠； 蜂房提取物； H22肝癌Abstract Objective: To study t

2、he synergistic effects of ethanol extracts from honeybee hives on the therapeutic efficacy of chemotherapy and radiotherapy to transplanted H22 hepatoma in mice. Methods: The mice model transplanted with H22 hepatoma and received chemotherapy or radiotherapy treatment were fed with 85% ethanol extra

3、cts from honeybee hives for 15 days. After the treatment stopped, the masses of H22 hepatoma taken from the mice were weighed and the repression rates of tumor and the enhanced therapeutic efficacy were evaluated. Results: With radiotherapy and chemotherapy the repression rates of H22 hepatoma in mi

4、ce treated with the ethanol extracts were 61.2% and 60.5%, and the enhanced therapeutic rates were 32.6% and 33.3%, respectively. Conclusions: Ethanol extracts from honeybee hives have effects to enhance the therapeutic efficacy of chemotherapy or radiotherapy treatment on transplanted H22 hepatoma

5、in mice .Key words liver neoplasms,experimental; mice; honeybee hives extracts; H22 hepatoma    蜂房是具有抗菌、抗炎、抗病毒、抗?jié)?、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等多種藥理作用的中藥1。有研究表明，蜂房及其提取物對(duì)胃癌、肝癌、子宮頸癌等多種腫瘤細(xì)胞的體外生長(zhǎng)均有抑制作用2。前期研究表明蜂房乙醇提取物對(duì)小鼠S180實(shí)體瘤及艾氏腹水癌的體內(nèi)生長(zhǎng)也有明顯的抑制作用（另文待發(fā)表）。2006年9月2007年7月進(jìn)一步研究了蜂房乙醇提取物對(duì)荷H22肝癌小鼠放化療的增效作用。1  材料

6、與方法1.1  蜂房提取物的制備稱取蜂房（購(gòu)于天益堂藥房）100 g，用600 ml 85%乙醇浸泡后加熱回流3 h，濾過(guò)；藥渣再用400 ml 85%乙醇加熱回流3 h，濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮成清膏5.7 g，冰箱保存。使用前用生理鹽水配成0.048 g/ml、0.024 g/ml和0.012 g/ml 3個(gè)濃度，相當(dāng)于生藥的濃度分別為0.84 g/ml、0.42 g/ml和0.21 g/ml。1.2  實(shí)驗(yàn)材料昆明種小鼠由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供（合格證號(hào)：遼實(shí)動(dòng)字第521號(hào)），體重（20±2）g，雌雄各半。H22肝癌瘤株由北京中科院

7、藥物研究所提供。5-氟尿嘧啶（5-FU）針劑（天津力生藥廠生產(chǎn)，批號(hào)：051006），用前用生理鹽水稀釋成1 g/L。LMR-1.5/AL 日本東芝醫(yī)用電子直線加速器。1.3  蜂房提取物對(duì)H22荷瘤小鼠化療的作用在無(wú)菌條件下抽取生長(zhǎng)良好的H22肝癌小鼠的瘤液，用生理鹽水稀釋成2×107個(gè)/ml的細(xì)胞懸液，0.2 ml/只，小鼠后肢皮下接種。于瘤株接種后第2天將小鼠隨機(jī)分為7組，每組10只。對(duì)照組：25 ml/kg生理鹽水；5-FU組：0.01 g/kg；低劑量組：蜂房提取物0.3 g/kg；中劑量組：蜂房提取物0.6 g/kg；高劑量組：蜂房提取物1.2 g/k

8、g；5-FU加中劑量組：5-FU 0.01 g/kg加蜂房提取物0.6 g/kg；5-FU加高劑量組：5-FU 0.01 g/kg加蜂房提取物1.2 g/kg。對(duì)照組和5-FU組灌胃給予生理鹽水，其余各組灌胃給相應(yīng)劑量蜂房提取物，每日1次，連續(xù)15 d。除對(duì)照組和低、中、高劑量組外，于給藥同時(shí)腹腔注射5-FU，每日1次，連續(xù)3 d，停藥1 d，再連續(xù)給藥2 d（其余各組同法給予生理鹽水）。于第16天處死小鼠，取瘤稱重，計(jì)算抑瘤率和增效率3。1.4  蜂房提取物對(duì)H22荷瘤小鼠放療作用于瘤株接種后第2天將小鼠隨機(jī)分為4組，每組10只。對(duì)照組：生理鹽水；放療組：8、9、10 G

9、y；放療加中劑量組：放療8、9、10 Gy，蜂房提取物0.6 g/kg；放療加高劑量組：放療8、9、10 Gy，蜂房提取物1.2 g/kg。后兩組灌胃給藥，每日1次，連續(xù)15 d（前兩組給生理鹽水）。除對(duì)照組外于給藥第7天開(kāi)始加放射治療（電子線）?；A(chǔ)量8 Gy/d，每日1次，連續(xù)3 d，劑量遞增，8、9、10 Gy。于第16天處死小鼠，取瘤稱重，計(jì)算抑瘤率和增效率3。1.5  統(tǒng)計(jì)學(xué)方法實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用t檢驗(yàn)作統(tǒng)計(jì)分析。2  結(jié)果2.1  蜂房提取物對(duì)H22荷瘤小鼠化療的增效作用中、高劑量蜂房提取物對(duì)小鼠H22肝癌的生長(zhǎng)均有明顯抑制作用

10、，抑瘤率為34.8%和38.4%，與對(duì)照組比較差異具有顯著性（P0.05）。中、高劑量蜂房提取物對(duì)小鼠H22肝癌的5-FU治療均有增效作用，增效率分別為24.3%和32.6%。高劑量蜂房提取物增效顯著，與5-FU組比較P0.05，見(jiàn)表1。表1  蜂房提取物對(duì)H22荷瘤小鼠化療的增效作用（略）2.2  蜂房提取物對(duì)H22荷瘤小鼠放療的增效作用中、高劑量蜂房提取物對(duì)小鼠H22肝癌的化療均有增效作用，增效率分別為12.3%和33.3%。與對(duì)照組比較，放療聯(lián)合給藥組抑瘤率差異顯著（P0.01），見(jiàn)表2。表2  蜂房提取物對(duì)H22荷瘤小鼠放療的

11、增效作用（略）3  討論中藥蜂房用于治療腫瘤早有記載4。傳統(tǒng)的用藥方法多為水煎服或外用，而且具有一定的毒副作用，因此，提取其抗腫瘤的有效成分成為中藥開(kāi)發(fā)的方向。蜂房的化學(xué)成分十分復(fù)雜，利用不同溶劑所得到的蜂房提取物也顯示了不同的藥理作用1。國(guó)內(nèi)外的研究表明，蜂房的主要成分蜂膠對(duì)人肝癌、口腔癌、子宮頸癌、乳腺癌、胸腺癌、結(jié)腸腺癌及皮膚癌等多種細(xì)胞株的生長(zhǎng)都有抑制作用5,6。有人對(duì)蜂膠提取物抗腫瘤作用機(jī)制的研究結(jié)果表明，蜂膠的乙醇提取物能提高荷S180肉瘤小鼠的免疫系統(tǒng)活性7。目前對(duì)于蜂房抗腫瘤作用研究也多限于體外，蜂房乙醇提取物對(duì)活體腫瘤的抑制作用報(bào)道很少8。前期研究工作表明

12、，蜂房的85%乙醇提取物對(duì)小鼠S180實(shí)體瘤和艾氏腹水癌均有較好的抑制作用。本文用蜂房的85%乙醇提取物對(duì)H22肝癌荷瘤鼠進(jìn)行了放化療增效作用的研究，結(jié)果表明，蜂房提取物的1.2 g/kg、0.6 g/kg 2個(gè)劑量組與空白對(duì)照組相比，使H22肝癌小鼠的腫瘤重量顯著降低（P0.05），抑瘤率達(dá)38.4%，且有劑量依賴關(guān)系。使5-FU化療及電子線放療的H22肝癌小鼠的腫瘤重量降低非常顯著（P0.001），抑瘤率分別達(dá)61.2%和60.5%，增效率分別達(dá)32.6%和33.3%。說(shuō)明蜂房乙醇提取物對(duì)H22肝癌荷瘤小鼠的放化療有顯著的增效作用。這可為進(jìn)一步深入研究及藥物開(kāi)發(fā)所需的臨床試驗(yàn)提供科學(xué)依據(jù)。

13、【參考文獻(xiàn)】  1武鴻翔.露蜂房中化學(xué)成分的研究與臨床應(yīng)用概況J.云南中醫(yī)中藥雜志, 2001（3）:29-30.2李彥.蜂房藥理作用研究進(jìn)展J.中醫(yī)藥信息, 2004（5）: 21-22.3徐淑云，卞如廉，陳修.藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法學(xué)M.北京：人民衛(wèi)生出版社，1994：14321440.4蔡新.蜂房治療癌腫的臨床應(yīng)用J.江蘇中醫(yī), 1993（6）: 33.5Matsuno T, Matsumoto Y, Saito M, et al. Isolation and characterization of cytotoxic diterpenoid isomers from propolisJ. Z Naturf