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1、苦瓜皂甙對(duì)應(yīng)激致高血壓大鼠 2009-05-26 16:26 口腔醫(yī)學(xué)系4隊(duì) 肖勇 惠小勇 1實(shí)驗(yàn)背景 苦瓜為堇目葫蘆科苦瓜屬植物苦瓜的果實(shí),別名涼瓜,是著名的民間中草藥。在我國(guó)已有500多年的應(yīng)用歷史。最早記載苦瓜的是明代的<<滇南草本>>,<<本草綱目>>中記載:苦瓜具有 “除邪熱,解勞乏,清心明目”等功效。 苦瓜果實(shí)含苦瓜素,苦瓜混苷,苦瓜皂苷F1,F(xiàn)2,G,I
2、,K,L等;又含5-羥色氨酸,谷氨基酸,丙氨基酸等八種氨基酸。苦瓜皂苷具有降血糖血脂,抗氧化,提高免疫能力,降低膽固醇,抗愛(ài)滋病病毒和抗腫瘤等生理功能1。但是對(duì)于它的降血壓的作用尚無(wú)報(bào)道。2 研究?jī)?nèi)容 本實(shí)驗(yàn)主要探究苦瓜提取物苦瓜皂苷對(duì)于高血壓大鼠的降血壓作用,所以此實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)日常保健和臨床用藥具有一定的指導(dǎo)意義。 采用動(dòng)物電擊足底結(jié)合噪聲刺激, 15d后建立大鼠的應(yīng)激高血壓模型。然后對(duì)實(shí)驗(yàn)組大鼠灌胃苦瓜提取物(自制),并從用藥的第六天對(duì)所有大鼠用尾動(dòng)脈測(cè)壓法測(cè)大鼠尾動(dòng)脈收縮壓。3 器材和藥品
3、60; 大鼠 、動(dòng)脈測(cè)壓儀、電子秤、SD大鼠20只、灌胃器、干苦瓜、萃取所需全套裝置、乙醇、NO檢測(cè)試劑盒。4方法與步驟4.1制備苦瓜提取液體 制備苦瓜提取物2 將3kg干苦瓜用20目濾布擠壓過(guò)濾,與4下靜置12h,虹吸出上清液,即得苦瓜提取物藥液約1.8L,與 4下保存?zhèn)溆?。取備用苦瓜提取物藥?.4L通過(guò)已預(yù)才處理并填充好的500ml大孔樹(shù)脂吸附柱,控制流出速度為0.3L/ h ,收集流出液。當(dāng)流出液的體積達(dá)0.24L后開(kāi)始,每20min嘗試一次流出液的口味。結(jié)果發(fā)現(xiàn),當(dāng)流出液的體積在0.32L時(shí),沒(méi)有苦味,當(dāng)流出液的體積在0.3
4、4L時(shí),稍有苦味,當(dāng)流出液的體積在0.36L時(shí),有明顯苦味。綜合考慮各種條件影響,確定吸附過(guò)程的藥液與樹(shù)脂的比為:藥液:樹(shù)脂=30:1 (v/v),流出液的速度為0.3L/H 。取備用苦瓜提取物藥液1L,按上述吸附條件通過(guò)已預(yù)處理并填充好的500ml大孔樹(shù)脂吸附柱,收集流出液,整個(gè)吸附過(guò)程需約2h左右。再將收集到的流出物經(jīng)噴霧干燥,得淺黃色粉末4.3g,即為苦瓜提取物。此藥粉口感無(wú)苦味,性溫。取備用苦瓜提取物藥液1L直接噴霧干燥,得棕褐色提取物0.8 g,即為帶苦味的苦瓜提取物對(duì)照品。4.2建立大鼠應(yīng)激高血壓模型 3 每天給與動(dòng)物電擊足底結(jié)合噪聲刺激,每天2 次,每次2 h ,應(yīng)激時(shí)將動(dòng)物放在
5、22 cm ×22 cm ×26 cm 籠內(nèi),籠子底部由細(xì)的銅柵構(gòu)成,通過(guò)銅柵給動(dòng)物足底電脈沖刺激,刺激脈沖每2 s25 s 之間隨機(jī)發(fā)生一次,刺激脈沖電壓為80 V ,每次持續(xù)時(shí)間50 ms ,電刺激時(shí),由蜂鳴器發(fā)出噪聲(80 db100 db ,時(shí)程50 ms) 。15 d即可建立大鼠應(yīng)激高血壓模型。4.3實(shí)驗(yàn)分組 將健康雄性SD大鼠21 只,體重180220 g ,隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組A和實(shí)驗(yàn)組B,每組7只,建立應(yīng)激性高血壓模型。在建立模型的同時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)組A每日灌胃苦瓜提取物10 ml/kg。模型建立完成后對(duì)大鼠進(jìn)行灌胃,實(shí)驗(yàn)組B:每日灌胃苦瓜提取物10
6、ml/kg;對(duì)照組:每日灌胃生理鹽水10 ml/kg,在第六天灌喂之前進(jìn)行大鼠尾動(dòng)脈測(cè)其收縮壓,此后,每天與灌喂之前進(jìn)行血壓測(cè)量,并完成下表 12345678910實(shí)驗(yàn)A組1 2 3 4 &
7、#160; 5 6 7 實(shí)驗(yàn)B組1 2
8、0; 3 4 5 6 7
9、; 對(duì)照組1 2 3 4
10、0;5 6 7 5 實(shí)驗(yàn)預(yù)計(jì)結(jié)果 苦瓜皂甙可以改善血管內(nèi)皮功能4,增加血液內(nèi)NO的含量,對(duì)身體有一定的降血壓作用。參 考 文 獻(xiàn)1 田亞維. 苦瓜的研究概述 醫(yī)學(xué)信息2002 年10
11、月第15 卷第10 期2 龍萍 熊思沁 等 精制苦瓜提取物的制備及其降糖作用中國(guó)藥師2006年第9卷第9期 3 胡旺平化長(zhǎng)林魏勁波 應(yīng)激性高血壓大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)內(nèi)一氧化氮合酶陽(yáng)性神經(jīng)元的變化 CHINESE JOURNAL OF ANATOMY Vol125 No15 2002 4 王威,石元?jiǎng)?尹黎明,黃丹,謝莎麗 苦瓜素大豆異黃酮及其復(fù)合物對(duì)高脂大鼠血脂和血漿一氧化氮的影響 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào) 第27 卷第10 期2005年5月干苦瓜50元SD大鼠21只21×25=525元NO試劑盒200其他50元合計(jì)825經(jīng) 費(fèi) 預(yù)
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