臨床基因擴增檢驗實驗室制度

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上臨床基因擴增檢驗實驗室管理制度1.0目的 建立臨床基因擴增檢驗實驗室的工作規(guī)范,確保分子診斷室正常工作。 2.0范圍 臨床基因擴增檢驗實驗室,包括試劑準備間、標本制備間、擴增間的使用及管理。 3.0職責 臨床基因擴增檢驗實驗室的工作人員必須遵守本文件的規(guī)定。 4.0內(nèi)容 4.1在進入實驗室前,在隔離臺戴好頭套口罩,穿上鞋套與實驗服。 4.2試劑準備間 4.2.1配電房先打開風機(先開送風機,再開排風機),再把空調(diào)系統(tǒng)打開。關(guān)閉時的順序相反。 4.2.2其它室的用品不得帶入本室。 4.2.3從PCR實驗室1號入口門進入實驗室,到達試劑準備間的緩沖間,脫下白色工作服,掛在

2、緩沖 間的左側(cè),在緩沖間的右側(cè)更換試劑準備間的專用工作服(藍色),進入試劑準備間,實驗中須戴一次性手套,手套常更換。 4.2.4打開已滅菌的超凈臺,通風一段時間,排走臭氧。取出當次實驗需配制和使用的試劑,其余試 劑要立即收好放回冰箱內(nèi)。 4.2.5操作應(yīng)在冰上進行。Taq酶盡量在配液的最后一步加入。應(yīng)減少dNTP反復(fù)凍融的次數(shù)。每次實 驗后將槍調(diào)至最大量程。加模板前打開廢液缸蓋,加完模板后務(wù)必蓋上廢液缸的蓋子。 4.2.6實驗作業(yè)完成時,應(yīng)及時清理工作臺,做好實驗登記,應(yīng)使用本室專用的記錄本和筆,打開超 凈臺的紫外燈旋鈕到20分鐘處。使用過的離心管、吸頭須置于3%的HCl溶液中浸泡、消毒后方可

3、棄之。 4.2.7打開傳遞窗門,墊上一次性手套,將配好的試劑放到傳遞窗里,關(guān)上傳遞窗門。 4.2.8在試劑緩沖間脫下工作服,穿上白色工作服。 4.3標本制備間 4.3.1在標本制備間的緩沖間,脫下白色工作服,換上標本制備間專用的工作服(粉紅色),進入標 本制備間。 4.3.2打開傳遞窗的門,取出配好的試劑,使用本區(qū)專用的加樣器和帶濾芯槍頭。 4.3.3實驗作業(yè)完成時,應(yīng)及時清理工作臺,使用過的離心管、帶濾芯槍頭須置于3%的HCl溶液中浸 泡、消毒后方可棄之。 4.3.4做好實驗登記,應(yīng)使用本室專用的記錄本和筆,打開超凈臺的紫外燈旋鈕到20分鐘處。4.3.5 打開傳遞窗門,墊上一次性手套,將配好

4、的試劑放到傳遞窗里,關(guān)上傳遞窗門。 4.3.6 提取基因組模板,提取過程中丟棄的槍頭、離心管和廢液請丟棄在此垃圾袋并于實驗結(jié)束后立 即將垃圾袋扎口丟棄。提取質(zhì)?？上忍崛∫吧唾|(zhì)粒再提取突變型質(zhì)粒。每次提取工作完成后擦拭臺面。 4.3.7 在試劑緩沖間脫下工作服,穿上白色工作服。 4.4 擴增間 4.4.1 在擴增間的緩沖間,脫下白色工作服,換上擴增間專用工作服(綠色)。 4.4.2 打開傳遞窗門,取出配好的試劑,關(guān)上傳遞窗門。 4.4.3 打開PCR 儀預(yù)熱20min 。 4.4.4 將反應(yīng)管放入PCR 儀中,關(guān)好門。 4.4.5 脫掉手套,設(shè)定程序,并命名。 4.4.6 結(jié)束后需待儀器冷卻后

5、方可取出PCR 儀里的試劑,取出時用鑷子將試劑條夾出,注意勿要使管 蓋打開,用三個PE 手套包好方可棄之。機器上不允許存放PCR 擴增產(chǎn)物,每次實驗后請自行及時清理PCR 擴增產(chǎn)物。 4.4.7 結(jié)束實驗后,到配電房先把空調(diào)系統(tǒng)關(guān)掉,再關(guān)掉排風機,之后關(guān)掉送風機。 4.4.8 文件的處理:當天所做的實驗結(jié)果,當天拷到部門電腦上處理,復(fù)制一份將文件名改為記錄本 上的命名?？蓪⒃囼灲Y(jié)果導(dǎo)到PPT 上,并標記。 4.5 傳遞窗的使用 4.5.1 傳遞窗每天早上滅菌20分鐘一次。當天使用可不用再次滅菌。將試劑放到傳遞窗時,在底下墊 上一層手套。 4.6 壓力監(jiān)控 4.6.1 每天早上空調(diào)運行半小時后,

6、記錄各PCR 實驗室的壓力差:試劑準備間:510;標本制備間: -5-10;擴增間:<-10。 各緩沖間的壓力為+5. 4.7 超凈臺的擺放 移液槍架 常用的實驗試劑 消毒液 廢液 缸 放置標本的離心管 槍頭盒 槍頭盒4.8實驗室衛(wèi)生管理 4.8.1禁止非工作人員進入實驗室;參觀實驗室等特殊情況須在實驗室管理員協(xié)助下進行。 4.8.2實驗室內(nèi)各工作人員應(yīng)有個人防護意識,進入實驗室時應(yīng)更換工作服和鞋子,穿著整潔,不留長 指甲,不佩戴首飾,長發(fā)應(yīng)束于腦后;禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲存食物;禁止將個人物品帶入實驗室;實驗室內(nèi)應(yīng)避免手口,手眼,手鼻接觸,以防止間接感染。 4.

7、8.3實驗結(jié)束后仍需保留使用的物質(zhì),應(yīng)移入具塞的容器中,并做好標識標簽,并寫清楚名稱、濃度、 配制日期、儲存溫度、有效期和配制人,并放置于相應(yīng)保存條件下;勿置室溫過夜。 4.8.4每天配制使用濃度的消毒液,放于固定地點,用于污染時消毒用,應(yīng)定期更換消毒液品種。 4.8.5每天上班8點45分先關(guān)實驗室紫外燈,然后開啟風扇,打開實驗室走廊窗戶。每天9點前每間 負責人填寫冰箱溫濕度記錄表。 4.8.6下午4點45分每間負責人填寫實驗室及冰箱溫濕度記錄表,清理實驗室衛(wèi)生,檢查實驗室垃圾 及廢液缸槍尖,生物垃圾放置于生物安全垃圾桶內(nèi),通知專門的垃圾轉(zhuǎn)運車進行清除。在生物 安全垃圾桶周邊噴灑84消毒液(按

8、1:9或者1:10比例配制)。 4.8.7每日衛(wèi)生打掃完后,在實驗室內(nèi)噴灑84消毒液,噴灑完,待20分鐘過后,對實驗室儀器表面 及實驗臺面要用干布擦拭一遍,再用清水清洗一遍,防止儀器被腐蝕。MX3000P儀器反應(yīng)孔用 75%酒精棉球擦拭,擦拭完后用清水擦拭。 4.8.8關(guān)閉風扇,開啟紫外燈,過夜。關(guān)閉實驗室走廊窗戶,噴灑84消毒液。 4.8.9第一、二間實驗室的3%鹽酸在實驗室內(nèi)配制,由當周值日人員負責。 4.8.10實驗服的清洗時間為每月的1、2、3、15、16、17日,1、15日洗第一間實驗服,2、16日洗第 二間實驗服,3、17日洗第三間實驗服,遇節(jié)假日順延。 4.8.11每周對回風口過濾網(wǎng)進行清洗,由當周值日人員負責。 4.8.12如遇加班,以上由加班人員負責;若有請假,請假人員需與其他人員協(xié)商調(diào)整,否則視為未執(zhí) 行。 4.8.13以上執(zhí)行情況每天都應(yīng)填寫記錄表,并由專人檢查確認簽字。 5.0注意事項 5.1.1PCR實驗室各室使用、進入及單一流向制度,請各位技術(shù)員不要貪方便,嚴格按照規(guī)程操作,以 免造成嚴重后果。 5.1.2dN