仔豬沙門氏菌病的診斷_防治藥物篩選與防控

1、恩施職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào) (綜合版 Journal of Enshi Technical College (Comprehensive Edition 仔豬副傷寒(Paratyphus swine又稱豬沙門氏菌 病(Swinesa lmonellosis, 是由沙門氏菌屬的豬霍亂沙 門 氏 菌 (S.choleraesuis, 鼠 傷 寒 沙 門 氏 菌 (S. typhimurium 、 腸炎沙門氏菌(S.enteritidis等血清型 的菌株引起的一種仔豬的高熱傳染病 1。 本病多發(fā) 于1-4月齡的仔豬, 急性病例表現(xiàn)為敗血癥, 慢性病 例為壞死性腸炎, 或卡他性或干酪性肺炎 2, 給養(yǎng)豬 業(yè)

2、造成重大經(jīng)濟(jì)損失, 而具有多重耐性的豬霍亂沙 門氏菌流行對人類健康具有很大的潛在威脅 3, 本 文采用常規(guī)細(xì)菌分離培養(yǎng)和生化試驗(yàn) 、 血清學(xué)凝集 試驗(yàn) 、 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對發(fā)病豬場疑似病料的細(xì)菌分離菌 株進(jìn)行鑒定,結(jié)果分離菌株符合沙門氏菌檢驗(yàn)標(biāo) 準(zhǔn), 采用紙片法進(jìn)行藥敏試驗(yàn), 篩選敏感藥物進(jìn)行 治療, 從而降低了養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)損失 。1發(fā)病情況湖北恩施自治州某中型豬場,飼養(yǎng)總頭數(shù)約 1,500頭, 2008年5月24日發(fā)現(xiàn)保育小豬發(fā)病, 豬只精 神不振, 厭食, 其耳翼 、 四肢末端及腹部發(fā)紺, 并有 黃色泥狀下痢現(xiàn)象,其發(fā)病率約16%,致死率約 40%, 畜主曾在飼料中添加磺胺嘧啶鈉以及注射青 霉素

3、, 但病情并無改善, 請當(dāng)?shù)孬F醫(yī)用泰樂菌素 、 阿 莫西林作肌肉注射, 未見明顯好轉(zhuǎn), 于2008年5月29 日向我院求援 。2臨床診斷2.1流行病學(xué)調(diào)查病例為散發(fā)性,周邊養(yǎng)殖戶未見豬只發(fā)病, 2008年5月14日,畜主從恩施某種豬場購進(jìn)一批仔 豬, 觀察一個(gè)星期后合群, 合群4天后發(fā)病, 感染豬 多是2-3月齡斷奶仔豬, 大豬與種豬未見發(fā)病, 同時(shí) 5月份以來, 恩施氣候多變, 陰雨連綿, 早晚溫差大, 加之豬場欄圈建設(shè)不合理, 飼養(yǎng)密度高, 嚴(yán)重?fù)頂D, 豬舍潮濕較污穢, 由此推斷, 引種 、 合群 、 氣候多變 、 飼養(yǎng)管理不善是本次發(fā)病誘因 。2.2臨床檢查急性型病豬, 初期體溫升高到4

4、1-42 , 精神沉 郁, 伏臥, 食欲廢絕, 呼吸困難, 步行搖晃, 嘔吐與腹 瀉, 有時(shí)有腹疼癥狀, 耳尖 、 頸 、 嘴尖 、 前胸 、 腹下 、 蹄 尖 、 尾根皮膚有藍(lán)紫色斑點(diǎn) 。 暴發(fā)初期, 少數(shù)病豬不 顯任何病狀死亡, 少數(shù)出現(xiàn)病狀后24h 即死亡, 多數(shù) 病程為2-4d , 病死率很高, 經(jīng)剖檢發(fā)現(xiàn)有急性敗血 癥變化 。亞急性病豬, 體溫40.5-41.5 , 精神不振, 食欲 減退, 寒顫喜臥扎堆, 上下眼瞼粘附黏性或膿性分 泌物, 病初便秘后下痢, 糞便淡黃色或淡綠色, 帶有仔豬沙門氏菌病的診斷 、 防治藥物篩選與防控 龔云登 1周代軍 2易志恩 3(1. 湖北恩施職業(yè)技術(shù)

5、學(xué)院 , 湖北 恩施 445000;2. 恩施市畜牧獸醫(yī)局 , 湖北 恩施 445000;3. 恩施州畜牧獸醫(yī)局 , 湖北 恩施 445000摘要:仔豬副傷寒是由豬霍亂沙門氏菌 、 鼠傷寒沙門氏菌和腸炎沙門氏菌引起危害仔豬健康的傳染病, 主要臨床 癥狀表現(xiàn)為腹瀉, 急性出現(xiàn)敗血癥 。 對發(fā)病豬場疑似病料的分離菌株進(jìn)行鑒定, 結(jié)果分離菌株符合沙門氏菌檢驗(yàn)標(biāo) 準(zhǔn), 采用紙片法進(jìn)行藥敏試驗(yàn), 篩選敏感藥物進(jìn)行治療, 取得很好的效果, 降低了養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)損失 。關(guān)鍵詞:沙門氏桿菌 診斷 防控中圖分類號:S853文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編碼:0000-2011/ES(200903-0061-03收稿日期 :

6、2009-06-15作者簡介 :龔云登 (1965-, 男 , 恩施職業(yè)技術(shù)學(xué)院副教授 。 研究方向 :養(yǎng)殖技術(shù)推廣及動(dòng)物疫病防治 。61血液或假膜, 腹部皮膚出現(xiàn)彌漫性痂樣濕疹, 少數(shù) 病豬有咳嗽, 呼吸困難等癥狀, 極少康復(fù), 有些病豬 消瘦 、 營養(yǎng)不良 、 皮膚無彈性, 眼結(jié)膜蒼白, 估計(jì)病 程已達(dá)10d以上, 病死率40%。2.3剖檢病變急性型腹腔有少許積液, 胃底充血, 胃粘膜脫 落; 脾臟顯著腫大, 邊緣鈍, 呈暗紫色或藍(lán)色, 慢性 型有少量灰黃色結(jié)節(jié)病變, 切面呈藍(lán)紫色, 質(zhì)地如 橡皮樣, 脾漿膜面密覆纖維素滲出物, 肝臟腫大, 膽 囊中有小潰瘍;腸系膜淋巴結(jié)呈索狀腫脹且出血,

7、 腸壁水腫呈紫色, 腸道粘膜嚴(yán)重脫落, 嚴(yán)重部位好 象里面又套了一段腸, 腥臭, 大腸粘膜有麩皮樣壞 死物, 10d以上病例盲腸 、 結(jié)腸腸壁增厚, 粘膜上覆 蓋著一層彌漫性腐乳狀物質(zhì),剝開后底部紅色, 為 纖維素性壞死性腸炎, 病變突出于腸粘膜, 周邊似 堤狀, 中央稍凹陷, 表面粗糙, 有的出現(xiàn)不規(guī)則陳舊 性潰瘍灶, 腸管漿膜面也因纖維素及纖維附著而粘 連 。 腎腫大, 膀胱粘膜有出血點(diǎn); 胸腔可見肺水腫, 心包膜與心外膜粘連, 心包腔充滿纖維素使心臟呈 現(xiàn)絨毛心病變, 心內(nèi)膜有出血斑點(diǎn) 。3實(shí)驗(yàn)室檢查3.1涂片鏡檢無菌采取病豬心血 、 肝 、 脾涂片, 革蘭氏染色, 鏡檢可見兩端稍圓的細(xì)

8、長桿菌,革蘭氏染色陰性, 根據(jù)臨床癥狀 、 流行病學(xué)特征和剖檢病變, 疑似沙 門氏菌感染 。3.2細(xì)菌分離培養(yǎng)無菌采取病豬心血 、 肝 、 脾 、 淋巴結(jié)接種普通瓊 脂培養(yǎng)基 、 麥康凱瓊脂培養(yǎng)基和SS瓊脂平板培養(yǎng) 基 、 鮮血瓊脂培養(yǎng)基經(jīng)37 恒溫箱中培養(yǎng)24h后觀 察, 結(jié)果在普通瓊脂培養(yǎng)基上生長良好, 可見細(xì)小 、 邊緣光滑濕潤半透明菌落; 在麥康凱瓊脂上形成無 色 圓形 光滑 濕潤 微隆起半透明 、 邊緣整齊的灰白 色菌落,在SS瓊脂培養(yǎng)基上有無色透明的圓形菌 落;在鮮血瓊脂培養(yǎng)基上可見光滑稍隆起的菌落 。 根據(jù)培養(yǎng)特征, 初步診斷為沙門氏菌感染 。3.3細(xì)菌生化實(shí)驗(yàn)參考GB/T 47

9、89.4-2003食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 有關(guān)沙門氏菌檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生化鑒定, 取典型菌 落接種生化鑒定管 (杭州天和微生物試劑有限公司 生產(chǎn), 37 培養(yǎng)18-24h,結(jié)果分離菌能發(fā)酵三糖鐵 (TSI 、 葡萄糖 、 乳糖 、 木糖 、 衛(wèi)矛醇 、 麥芽糖 、 鼠李糖和 山梨醇產(chǎn)酸產(chǎn)氣, 不分解乳糖 、 棉籽糖 、 蔗糖; H:S產(chǎn) 生試驗(yàn) 、 M.R試驗(yàn)陽性; 尿素 、 靛基質(zhì) 、 V-P試驗(yàn)陰性, 生化實(shí)驗(yàn)結(jié)果與沙門氏菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)符合 4。3.4血清學(xué)反應(yīng)采用玻板凝集法, 用白金耳挑取可疑沙門氏桿 菌培養(yǎng)物少許, 置于清潔載玻片上和蒸餾水混勻, , 在玻片上滴加l滴A F多價(jià)O血清 (蘭州生

10、物研究所 生產(chǎn), 在滴1滴蒸餾水作對照, 20min后在顯微鏡觀 察, 可以看到四周呈透明 、 顆粒狀 、 成絮狀的凝集塊 為陽性反應(yīng) 5。3.5動(dòng)物實(shí)驗(yàn)挑取分離培養(yǎng)好的菌落, 培養(yǎng)過夜, 用無菌生 理鹽水無菌10倍稀釋備用, 取5只成年健康小白鼠, 腹腔接種0.2ml 。 對照組5只小鼠用0.2ml無菌生理鹽 水腹腔接種 7。 連續(xù)觀察2周, 結(jié)果試驗(yàn)組小白鼠全 部死亡, 腹圍增大, 剖檢見腹水 。 肝臟質(zhì)脆 、 腫大 、 出 血 、 壞死點(diǎn) 。 腎腫大 、 充血 。 胃幽門出血 、 粘膜脫落 、 變薄與肝粘連 、 表明有纖維素滲出 。 肺出血 、 有壞死 點(diǎn) 、 有纖維素性滲出 。 脾臟腫

11、大 、 充血 。 十二指出血 、 腸壁變薄 、 充滿黃色水樣內(nèi)容物 。 腸系膜及腸系膜 淋巴結(jié)水腫 、 出血 。 無菌采取死亡小白鼠肝臟做細(xì) 菌分離培養(yǎng), 經(jīng)鑒定與原分離菌株特征相符 。 根據(jù)細(xì)菌的形態(tài)特征 、 生化試驗(yàn) 、 血清學(xué)反應(yīng) 、 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果, 確診為沙門氏菌感染 。3.6藥敏試驗(yàn)按常規(guī)干紙片法進(jìn)行 (杭州天和微生物試劑有 限公司生產(chǎn), 結(jié)果鹽酸環(huán)丙沙星 、 鹽酸多西環(huán)素 、 乳 酸諾氟沙星 、 恩諾沙星 、 氟苯尼考高敏; 卡那霉素 、 呋喃唑酮 、 泰樂菌素 、 多粘菌素中敏; 青霉素 、 阿莫 西林 、 鏈霉素 、 土霉素 、 林肯霉素 、 磺胺類藥低敏 。 4治療方法發(fā)病仔

12、豬隔離治療, 抗菌消炎選擇敏感藥物氟 苯尼考5-10ml 腹腔注射 (或后海穴注射 , l次/日, 連 注3-7d或鹽酸環(huán)丙沙星注射液5mg/kg 體重, 作肌肉 注射, l 次/12h, 連用3-7d, 內(nèi)服乳酸諾氟沙星10m/kg 體重, 每日2次連用5d, 同時(shí)內(nèi)服復(fù)方新諾明片, 1片 /7kg, 每天2次, 連服3-7天 。輔助治療則補(bǔ)充電解質(zhì)防止脫水, 在飲水中添 加口服補(bǔ)液鹽, 促進(jìn)體液平街, 同時(shí)在飲水中加入 葡萄糖 、 電解多維補(bǔ)充能量和維生素 。 強(qiáng)心:使用安 那加注射液:肌注0.5-1.0g/頭 。 解熱:對于高熱(41 發(fā)病豬可肌注安乃近注射液 。5防控措施疫苗接種:未發(fā)

13、病仔豬, 使用仔豬副傷寒弱毒 凍干菌苗, 按使用說明書, 用氫氧化鋁生理鹽水稀 釋, 30日齡仔豬, 肌肉注射1毫升(1頭份 。 口服免疫 時(shí), 按規(guī)定稀釋和拌料, 空腹喂苗, 用涼開水按每頭 份5毫升稀釋, 每頭灌服5毫升, 或拌少量飼料喂服62并保證每頭豬均能吃到足夠的菌苗,確保免疫效 果 。藥物預(yù)防:未發(fā)病豬群, 用鹽酸多西環(huán)素 (每噸 飼料添加150g +阿散酸 (每噸飼料添加150g , 連續(xù) 使用5-7天, 然后將劑量減半, 再連續(xù)使用2周; 也可 用恩諾沙星 (或環(huán)丙沙星,諾氟沙星 、 氧氟沙星 +TMP:每噸飼料添加本類藥物120g, TMP50g, 連續(xù) 使用5天, 然后劑量

14、減半, 繼續(xù)使用1周 。消毒措施:確實(shí)做好消毒工作, 以消毒水對全 場豬只進(jìn)行噴霧消毒, 來降低環(huán)境中的細(xì)菌量 。 對 病豬及帶菌豬排泄物及污染的飼料 、 飲水 、 用具 、 食 槽 、 圈舍要徹底清潔并消毒, 經(jīng)常保持圈干燥, 勤換 墊草, 對病死豬只應(yīng)作無害化處理 。飼養(yǎng)管理:堅(jiān)持自繁自養(yǎng), 仔豬要提前補(bǔ)料, 斷 乳仔豬根據(jù)體質(zhì)強(qiáng)弱大小, 分槽飼喂, 給以優(yōu)質(zhì)而 易消化的多樣化飼料, 適當(dāng)補(bǔ)充礦物質(zhì), 增強(qiáng)仔豬 抵抗力; 防止突然更換飼料, 保持舍內(nèi)通風(fēng), 降低飼 養(yǎng)密度, 以減少應(yīng)激因素影響; 飼料中選擇性添加 適量抗生素預(yù)防細(xì)菌性疾病 。通過采取針對性的治療和防控措施后, 發(fā)病豬 場除

15、8頭嚴(yán)重病例死亡外, 病情逐漸得到控制, 20天 后恢復(fù)正常 。6討論沙門氏菌的致病機(jī)理與細(xì)菌的毒力質(zhì)粒 、 產(chǎn)生 的內(nèi)毒素和腸毒素有關(guān), 毒力質(zhì)粒主要引起沙門菌 性腸炎 。 當(dāng)不良因素刺激使動(dòng)物處于應(yīng)激狀態(tài)時(shí), 腸道正常菌群失調(diào), 腸蠕動(dòng)緩慢, 促使沙門菌移居 于小腸下端和結(jié)腸段生長繁殖; 進(jìn)而移居于小腸下 端和結(jié)腸后段, 腸黏膜組織中的樹突狀細(xì)胞從上皮 細(xì)胞間伸出樹突, 直接將腸腔中的細(xì)菌攝入并增殖 6, 感染鄰近細(xì)胞或進(jìn)人固有層細(xì)胞, 也可被吞噬細(xì) 胞吞噬而進(jìn)人局部淋巴結(jié);機(jī)體受病菌侵害后, 刺 激前列腺素分泌, 從而激活腺苷酸環(huán)化酶, 使血管 內(nèi)的水分 、 HCO-3和Cl-向腸道外滲

16、出,引起急性回 腸炎和結(jié)腸炎 。 內(nèi)毒素主要引起沙門菌性敗血癥 。 沙門菌細(xì)胞壁中的脂多糖是一種毒力因子 。 它由一 種低聚糖芯 (稱為0特異鍵 和一種脂質(zhì)A成分所組 成 8, 是內(nèi)毒素的主要成份, 可引發(fā)沙門菌性敗血 癥, 導(dǎo)致動(dòng)物發(fā)熱 、 黏膜出血 、 白細(xì)胞先減少后增 多 、 血小板減少 、 肝糖消耗 、 低血糖癥, 造成微循環(huán) 障礙, 以致休克死亡 。 腸毒素是有些沙門菌如鼠傷 寒沙門菌某些菌株 、 都柏林沙門菌等產(chǎn)生, 是一種 使動(dòng)物發(fā)生沙門菌性腸炎的毒力因子 9。仔豬副傷寒爆發(fā)常與繼發(fā)感染 、 免疫抑制 、 環(huán)境因素 、 應(yīng)激因素等有關(guān) 10。 繼發(fā)感染是豬沙門氏菌 爆發(fā)的重要原因

17、, 尤其是繼發(fā)于某些病毒和細(xì)菌性 疾病, 例如豬瘟 、 藍(lán)耳病 、 豬傳染性胃腸炎 、 豬流行 性腹瀉 、 豬梭菌性腸炎 、 仔豬黃白痢等 。 免疫抑制性 因素如豬瘟 、 藍(lán)耳病 、 圓環(huán)病毒病等會(huì)使豬體的抵 抗力降低, 從而使沙門氏菌入侵機(jī)體, 導(dǎo)致豬只發(fā) 病 。 環(huán)境因素是仔豬副傷寒爆發(fā)不可忽視的誘因, 豬場內(nèi)病豬 、 帶菌豬排泄物含大量沙門氏菌, 極易 污染飼料 、 飲水和器具, 形成強(qiáng)大的污染源; 另外從 空氣中漂浮進(jìn)來的病原菌也極易突破呼吸道粘膜 進(jìn)一步感染豬群 11。 應(yīng)激因素也應(yīng)引起足夠重視, 斷 奶豬購進(jìn)和運(yùn)輸造成車內(nèi)擁擠 、 飲水不充足 、 車內(nèi) 溫度散發(fā)困難 、 缺氧等 1

18、2, 都會(huì)使豬體的抵抗力降 低, 從而使沙門氏菌入侵機(jī)體, 導(dǎo)致發(fā)病 ?？傊? 豬場控制仔豬副傷寒沙門氏菌病必須采 取自繁自養(yǎng) 、 嚴(yán)格隔離檢疫 、 預(yù)防接種 、 定期消毒 、 藥物預(yù)防 、 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理等綜合防控措施, 才能取 得滿意的效果 。參考文獻(xiàn) :1蔡寶祥.家畜傳染病學(xué)(第四版 M.北京:中國農(nóng)業(yè)出版 社 , 2001:52-58.2潘耀謙, 張春杰, 劉思當(dāng). 豬病診治彩色圖譜M.北 京 :中國農(nóng)業(yè)出版社 , 2004.3賈愛卿, 郭愛珍, 劉繼紅等.致病性豬源鼠傷寒沙門氏菌 的耐藥特征鑒定及耐藥性 消 除 研 究 J.微 生 物 學(xué) 報(bào) , 2006, 46(5:789-795.4汪誠天, 葉祝年, 王云芳.獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)手冊M.上 海 :上?？茖W(xué)技術(shù)出版社 , 1984.5張以芳.動(dòng)物微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)z.昆明:云南農(nóng)業(yè) 大學(xué) , 2001.6蔡寶祥.家畜傳染病學(xué)(第四版 M.北京:中國農(nóng)業(yè)出版 社 , 2001:52-58.7徐引弟, 郭愛珍, 賈愛卿等.豬霍亂沙門氏菌的快速分離 鑒定 J.畜牧與獸醫(yī) , 2007, 39