火燒跡地厚皮香對三葉鬼針草麻櫟化感作用研究畢業(yè)論文

1、 .楚 雄 師 學(xué) 院 本 科 生 畢 業(yè) 論 文題 目：火燒跡地厚皮香對三葉鬼針草、麻櫟化感作用研究專 業(yè)： 生物技術(shù)學(xué) 號：系 （院）：化學(xué)與生命科學(xué)系學(xué)生： 正超 指導(dǎo)教師：天星 職稱 副教授論文字?jǐn)?shù)： 7791 完成日期： 2013 年 5 月教 務(wù) 處 印 制32 / 40目錄摘要 關(guān)鍵詞 Abstract Key words前 言 11 材料與方法 11.1 材料 11.2 方法 11.2.1植株水浸液的的制備21.2.2種子萌發(fā)與幼苗生長的測定21.2.3脯氨酸含量的測定21.2.4 MDA含量測定21.2.5 POD活性的測定31.2.6細(xì)胞形態(tài)的觀察31.2.7細(xì)胞

2、形態(tài)的觀察32 結(jié)果與分析32.1厚皮香葉浸提液對三葉鬼針草和麻櫟種子萌發(fā)率的影響32.2厚皮香葉浸提液對三葉鬼針草麻櫟幼苗的株高影響42.3厚皮香葉浸提液對三葉鬼針草和麻櫟幼苗根長影響42.4厚皮香葉水浸液對三葉鬼針草植株脯氨酸含量影響52.5厚皮香水浸液濃度對三葉鬼針草和麻櫟MDA影響52.6厚皮香水浸液濃度對三葉鬼針草和麻櫟POD影響62.7三葉鬼針草和麻櫟細(xì)胞顯微形態(tài)觀察63 結(jié)論與討論 8參考文獻(xiàn) 9附錄 10致 32火燒跡地厚皮香對三葉鬼針草、麻櫟化感作用研究摘要：為探究火燒跡地優(yōu)勢物種的化感作用機(jī)理，以火燒跡地厚皮香（Ternstroemia gymnanthera (Wight

3、 et Arn.)Sprague）、麻櫟（Quercus acutissima Carruth）、三葉鬼針草（Biden pilosa L.）為材料。以厚皮香葉為供體，麻櫟和三葉鬼針草為受體，以厚皮香葉水浸液來研究其對種子萌發(fā)作用機(jī)理。設(shè)置5個濃度梯度的水浸液以與各3組平行組。比較種子萌發(fā)率、苗高和根長、莖尖和根尖細(xì)胞顯微觀察，幼苗相關(guān)酶活性與含量的測定：包括過氧化物酶(POD)、丙二醛(MDA)、脯氨酸含量的測定。結(jié)果表明：厚皮香葉片浸提液能不同程度地降低了三葉鬼針草和麻櫟種子發(fā)芽率、苗高和根長；尤其對三葉鬼針草的種子萌發(fā)和幼苗生長抑制作用顯著；高濃度時抑制效果顯著，較低濃度時，有微弱促進(jìn)作

4、用；受體植物麻櫟、厚皮香的脯氨酸、MDA含量隨濃度的升高表現(xiàn)為正相關(guān)，POD值在0.15g/ml時顯著升高。受體植物根尖和莖尖細(xì)胞隨著水浸液濃度的升高染色體數(shù)目呈下降趨勢。表明厚皮香厚皮對三葉鬼針草和麻櫟存在化感作用，且對三葉鬼針草作用更為顯著。關(guān)鍵詞：火燒跡地；化感作用；厚皮香；三葉鬼針草；麻櫟；萌發(fā)率；酶活性；染色體；Burned Ternstroemiaceae right Bidens, Quercus AllelopathyAbstract：To explore the burned area of dominant species, Allelopathy Mechanism to

5、 fire, thick skin fragrant trace (Ternstroemia gymnanthera (Wight et Arn.) Sprague), Quercus acutissima (Quercus acutissima Carruth), Bidens pilosa (Biden pilosa L.) as material. With muskmelon leaf as the donor, Quercus acutissima and Bidens pilosa as receptor, with water immersion thick-skinned le

6、aves to study the mechanism of seed germination. 5 the concentration gradient of the water extract and the 3 groups of parallel group. Comparison of seed germination rate, seedling height and root length, shoot and root tip cell microscopic observation, determination of enzyme activity and content o

7、f seedlings: including peroxidase (POD), malondialdehyde (MDA), determination of proline content. The results show that: the thick leather leaf extract reduced the Bidens pilosa L. and Quercus acutissima seed germination rate, seedling height and root length; especially of Bidens pilosa Seeds Germin

8、ation and seedlings growth significantly inhibited when the concentration is high; the inhibitory effect, low concentration, weak role; Quercus acutissima, receptor plants Ternstroemia proline, MDA content increased with concentration is positively related to performance, the POD values increased si

9、gnificantly at 0.15 g/ml. The receptor plant root and stem tip cells increased with the chromosome number of the concentration of the extracts showed a downward trend. That thick skin fragrant thick skin of Bidens pilosa and Quercus acutissima the allelopathic effects of Bidens pilosa L, and the eff

10、ect is more significant.Key words：Burned area; allelopathy; Ternstroemia; Bidens pilosa; Quercus acutissima; germination rate; enzyme activity; chromosome;火燒跡地厚皮香、三葉鬼針草、麻櫟三者化感作用研究前言 化感作用是森林生態(tài)系統(tǒng)中廣泛存在的一種生態(tài)化學(xué)現(xiàn)象，是影響森林植物種群生長發(fā)育、結(jié)構(gòu)功能乃至整個生態(tài)系統(tǒng)群落演替的重要因素1。火災(zāi)能改變生態(tài)群落的結(jié)構(gòu)，火燒強(qiáng)度是山地格局變化的重要引致因子，隨著火燒強(qiáng)度的增加，森林水文調(diào)節(jié)能力降低幅度越

11、大，濕地面積增加越顯著，而未火燒區(qū)則變化很微弱。森林水文調(diào)節(jié)能力的變化則直接影響到山地水分來源3；在林業(yè)科學(xué)研究與林業(yè)生產(chǎn)實(shí)踐中，對于森林經(jīng)營過程中出現(xiàn)的連栽障礙、指導(dǎo)森林更新和建植、地力衰退、“土壤中毒”、對農(nóng)作物布局、果園經(jīng)營等生產(chǎn)實(shí)踐有廣闊的開發(fā)和應(yīng)用前景有重要的意義4。麻櫟(Quercus acutissima Carruth.)是櫟屬 (Quercus L) 落葉喬木。麻櫟喜歡在光線充足，土壤深厚的山坡地上生長，形成麻櫟樹林或與松樹組成混合樹林。它分布于我國北起南到，西到東部的大部分地區(qū)。具有木材材質(zhì)堅(jiān)硬、紋理美觀、耐腐耐水濕等優(yōu)良性狀，是珍貴的優(yōu)良建筑材和家具材用材樹種5。厚皮香T

12、ernstroemia gymnanthera (Wightet Arm.)Sprague.山茶科(Theaceae,Tea Family)厚皮香屬常綠喬木，高達(dá)15米，枝條灰綠色，無毛。葉倒卵形至長圓形，長37厘米，寬2厚皮香(5)3厘米，頂端鈍圓或短尖，基部楔形，全緣，表面綠色，背面淡綠色，中脈在表面下陷，側(cè)脈不明顯；葉柄長510毫米。花淡黃色，花柄長115厘米，稍下垂。果實(shí)圓球形，呈漿果狀，干燥，徑約15厘米，萼片宿存。 花期78月。目前有學(xué)者對其扦插繁殖與光照強(qiáng)度對其幼苗生長、種子特性與扦插繁殖、厚皮香植物群落特征與繁殖特性、厚皮香造林技術(shù)等繁殖方面進(jìn)行了大量而細(xì)致的研究6-7。三葉鬼

13、針草(Biden pilosa L.)為雙子葉植物綱菊目菊科鬼針草屬，一年生草本植物三葉鬼針草種子在 1530恒溫條件下萌發(fā)率均達(dá)到 80%以上，而且發(fā)芽快速而整齊，說明三葉鬼針草種子萌發(fā)的溫度圍很寬，溫度是影響三葉鬼針草種子萌發(fā)的重要生態(tài)因子。三葉鬼針草種子具有較好的初始萌發(fā)能力，無需經(jīng)過休眠，且不需經(jīng)過任何特殊處理就能快速而整齊的萌發(fā)。目前對三葉鬼針草研究較多主要是遮光對三葉鬼針草(Bidens pilosa)光合參數(shù)影響、環(huán)境保護(hù)方面對金屬富集、干旱脅迫、水提物對其他植物種子萌發(fā)影響以與三葉鬼針草中黃酮甙對煙草花葉病毒的抑制作用等，但很少有學(xué)者研究三葉鬼針草和木本植物化感作用的研究8-9

14、。對厚皮香、三葉鬼針草、麻櫟間的化感作用和機(jī)理研究有重要的意義，有助于我們更加合理地理解和解釋火災(zāi)后的優(yōu)勢物種現(xiàn)象，對森林的恢復(fù)重建工作提供一定的理論依據(jù)10。 1材料與方法1.1 材料于2012年10月在市西山公園（北緯N25°0156.58東經(jīng)E101°327.31海拔：1833.82米 ）火燒跡地收集麻櫟(Quercus acutissima Carruth.)、三葉鬼針草(Biden pilosa L.)、厚皮香Ternstroemia gymnanthera (Wightet Arm.)Sprague.成熟飽滿的種子備用并收集三種植物的葉片與根部制作水浸液備用。1

15、.2 方法1.2.1 植株水浸液的的制備將采集來的厚皮香葉片、根在室溫條件下陰干并打磨成粉，分別取120g、90g、60g、30g、15g，各加300 mL的蒸餾水恒溫25泡48 h，用濾紙雙重過濾后得到植株葉和根浸提液，濃度分別為0.40gmL、0.30gmL 、0.20gmL、0.10gmL、0.05gmL，靜置備用1.2.2 種子萌發(fā)與幼苗生長的測定挑選均勻飽滿、大小一致的麻櫟、厚皮香種子，用3%的雙氧水消毒30分鐘，然后用蒸餾水沖洗干凈。用規(guī)格10*15cm營養(yǎng)袋裝土培養(yǎng)，每組組設(shè)計(jì)五個濃度梯度，每個濃度設(shè)計(jì)3袋平行組，對照組5盆，每盆放置6粒麻櫟種子。每天觀察麻櫟和厚皮香種子的萌發(fā)（

16、胚根或胚軸破皮12mm時為萌發(fā)）情況，第7天完成統(tǒng)計(jì)，計(jì)算發(fā)芽率（GR）。計(jì)算公式如下：GR=（發(fā)芽種子數(shù)/供試種子數(shù)）×100%10天后統(tǒng)計(jì)幼苗的苗高、苗鮮重、苗干重、根干重、根鮮重。 分別計(jì)算發(fā)芽率、苗高、苗鮮重、苗干重、根干重、根鮮重的化感效應(yīng)指數(shù)（RI）和綜合化感效應(yīng)指數(shù)（SE）。計(jì)算公式如下：當(dāng)T>=C時， RI=1-C/T當(dāng)T<C時， RI=T/C-1C為對照值，T為處理值。RI>0為促進(jìn)作用，RI<0為抑制作用，絕對值的大小與強(qiáng)度一致。SE=總RI的平均值1.2.3 脯氨酸含量的測定11取地上部(芽鞘和葉子) 0. 5g, 用3 % 磺基水酸5m

17、L 研磨提取, 勻漿移至離心管中, 在沸水浴中提取10 min, 冷卻后, 3000 r/ min 離心10 min,取上清液待測；制作標(biāo)準(zhǔn)曲線 100 g/ m L 脯氨酸配制成0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10 g/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液。取標(biāo)準(zhǔn)溶液各2 mL, 加2 mL 3 % 磺基水酸, 2mL冰醋酸和4 mL 2.5 % 酸性茚三酮試劑于具塞試管中, 置沸水浴中顯色1h ,冷卻后加入4 mL 甲苯蓋好蓋子于旋渦混合儀上振0.5 min, 靜置分層, 吸取紅色甲苯相, 于波長520nm 測定OD 值,以O(shè)D值為縱坐標(biāo), 脯氨酸濃度(g/ mL) 為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。各取2 mL

18、 兩種上清液, 分別加入2mL 蒸餾水, 2mL 冰醋酸和4 mL2.5% 酸性茚三酮試劑, 與上述制作標(biāo)準(zhǔn)曲線一樣進(jìn)行顯色, 萃取和比色, 最后從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得脯氨酸含量。計(jì)算公式為：脯氨酸含量（ug/g）=X×5/2/樣重（g）。1.2.4 MDA含量測定11取植株上一定葉位的葉片，剪成小段，混勻,稱取0.3g放入冰浴的硯缽中，加少許石英砂和2ml0.05mol/LPH為7.8的磷酸緩沖液，研磨成勻漿。將勻漿轉(zhuǎn)移到試管中，再用2-3 ml0.05mol/L磷酸緩沖液分兩次沖洗，合并提取液；在提取液中加入5 ml 0.5%硫代巴比妥酸溶液，搖勻。將試管放入沸水中煮沸10分鐘（自試管溶

19、液中出現(xiàn)小氣泡開始計(jì)時），到時間后立即將試管取出并放入冷水浴中；帶試管溶液冷卻后，3000 g離心15min，取上清液并量其體積。以0.5%硫代巴比妥酸溶液為空白測532nm、600nm、450nm處的吸光度；結(jié)果計(jì)算:MDA（mmol.g-1FW）=6.452*（A652-A600）-0.559*A450*Vt/Vs*FW；式中，Vt:提取液總體積（ml），Vs：測定用提取液體積（ml），F(xiàn)W：樣品鮮重（g）。1.2.5 POD活性的測定12稱取植物材料1g, 加20 m mol/ L KH2PO45 mL, 于研缽中研磨成勻漿, 以4000 r/min 離心15 min, 收集上清液保存在

20、冷處, 所得殘?jiān)儆? mL KH2PO4 溶液提取一次, 合并兩次上清液；取光徑1cm 比色杯2只, 于1只中加入反應(yīng)混合液3 mL, KH2PO4 1mL, 作為校零對照, 另1只中加入反應(yīng)混合液3mL, 上述酶液1mL(如酶活性過高可適當(dāng)稀釋)，立即開啟秒表計(jì)時，于分光光度計(jì)470nm波長下測量OD 值, 每隔1min 讀數(shù)一次。以每分鐘OD 變化值表示酶活性大小, 即以O(shè)D470/min/mg 蛋白質(zhì)(或鮮重g) 表示。蛋白質(zhì)含量測定按Folin 法進(jìn)行或用考馬斯亮藍(lán)法測定。1.2.6 細(xì)胞形態(tài)的觀察 制作不同濃度處理的三葉鬼針草和麻櫟植株根和莖尖顯微切片，探索其細(xì)胞形態(tài)的變化。1.2

21、.7數(shù)據(jù)處理采用Excel、SPSS Statistics 18.0進(jìn)行分析與整理。2 結(jié)果與分析2.1 厚皮香葉浸提液對三葉鬼針草和麻櫟種子萌發(fā)率的影響從表1可以看出，厚皮香葉浸提液對三葉鬼針草種子萌發(fā)的影響表現(xiàn)為抑制，隨著厚皮香葉浸提液濃度的升高，種子的萌發(fā)率降低。把麻櫟種子的萌發(fā)率進(jìn)行單因素方差分析，P0.000，說明厚皮香葉的浸提液對麻櫟種子萌發(fā)的影響達(dá)到極顯著水平。0.15g/ml的厚皮香葉浸提液與對照組差異顯著（P=0.45），其它濃度下，差異達(dá)到極顯著水平（附錄1），說明厚皮香葉浸提液對三葉鬼針草種子萌發(fā)具有顯著的抑制作用。隨著厚皮香葉浸提液濃度的升高，三葉鬼針草種子萌發(fā)率受到影

22、響，對麻櫟種子萌發(fā)的抑制作用增強(qiáng)。把萌發(fā)率的化感指數(shù)進(jìn)行單因素方差分析，P0.000，說明各濃度間的化感效應(yīng)指數(shù)差異達(dá)到極顯著水平。綜上所述，厚皮香葉浸液對三葉鬼針草和麻櫟種子萌發(fā)率作用明顯，可能作為化感作用的一項(xiàng)生理指標(biāo)。表1 厚皮香葉浸提液對三葉鬼針草和麻櫟種子萌發(fā)與幼苗生長的影響Table .1 thick skin Geranium effects of extracts on Germination and seedling growth of Bidens pilosa and seeds of Quercus acutissima水浸液濃度(g/ml)受體植物萌發(fā)率（%）株高（c

23、m）根長（cm）ck三葉鬼針草92.019.70008.9324麻櫟89.618.033015.90000.05三葉鬼針草73.014.5300*8.2638麻櫟78.0*16.200013.43330.10三葉鬼針草73.015.53306.8000*麻櫟75.7*7.7000*11.9607*0.15三葉鬼針草55.0*17.8003.9542*麻櫟44.0*5.7333*5.687*0.20三葉鬼針草26.0*9.4330*4.7667*麻櫟73.3*7.667*6.764*0.25三葉鬼針草30.0*9.7000*4.7000*麻櫟74.0*9.3667*6.4000注：* 表示實(shí)驗(yàn)組

24、與對照組的差異顯著性。* 表示差異顯著。* 表示差異極顯著。P=0.05。下表同。2.2 厚皮香葉浸提液對三葉鬼針草麻櫟幼苗的株高影響附錄1可以看出，厚皮香葉浸提液對麻櫟幼苗的苗高的影響表現(xiàn)為抑制，隨著厚皮香葉浸提液濃度的升高，幼苗的株高降低。把麻櫟幼苗的株高進(jìn)行單因素方差分析，P0.000，說明各濃度間的株高差異極顯著。0.05g/ml處理的實(shí)驗(yàn)組的幼苗株高與對照組的幼苗株高差異不顯著（P=0.85）；其它濃度下的幼苗的株高與對照組的差異極顯著（P0.000）。說明低濃度下的厚皮香葉浸提液對麻櫟幼苗的株高沒有明顯影響，高濃度下的厚皮香葉浸提液對麻櫟幼苗的株高影響顯著。隨著厚皮香葉浸提液濃度的

25、升高，麻櫟幼苗株高的化感指數(shù)增大，對麻櫟幼苗株高的抑制作用增強(qiáng)。把株高的化感指數(shù)進(jìn)行單因素方差分析，P0.000，說明各濃度間的化感效應(yīng)指數(shù)差異達(dá)到極顯著水平。0.05g/ml（P=0.200）、0.10g/ml(P=0.079)、0.15g/ml(P=0.057)濃度下的實(shí)驗(yàn)組的幼苗株高與對照組差異不顯著,0.20g/ml（P=0.010）、0.25g/ml(P=0.027)的株高化感效應(yīng)與對照組的差異顯著,說明低濃度的厚皮香葉浸提液對麻櫟幼苗株高的化感指數(shù)影響不顯著，高濃度下影響顯著。這表明幼苗株高可能不是衡量化感作用的敏感指標(biāo)。2.3 厚皮香葉浸提液對三葉鬼針草和麻櫟幼苗根長影響從附錄5

26、可以看出，厚皮香葉浸提液對麻櫟幼苗根長表現(xiàn)為抑制，隨著厚皮香葉浸提液濃度的升高，幼苗根長降低。把麻櫟幼苗根長進(jìn)行單因素方差分析，P0.000，說明厚皮香葉的浸提液對麻櫟幼苗根長的影響達(dá)到極顯著水平。各個實(shí)驗(yàn)組幼苗根長與對照組差異極顯著（P0.000），說明厚皮香葉浸提液對麻櫟幼苗根長具有極顯著的抑制作用。從附錄6可以看出，隨著厚皮香葉浸提液濃度的升高，三葉鬼針草幼苗根長的化感指數(shù)增大，對三葉鬼針草幼苗根長的抑制作用增強(qiáng)。把根長的化感指數(shù)進(jìn)行單因素方差分析，P0.000，說明各濃度間的化感效應(yīng)指數(shù)差異達(dá)到極顯著水平。所有實(shí)驗(yàn)組的根長的化感指數(shù)都與對照組的化感指數(shù)差異極顯著（P0.000），說明各

27、濃度的厚皮香葉浸提液對麻櫟幼苗根長的化感效應(yīng)極顯著。這表明幼苗根長是衡量化感作用的敏感指標(biāo)。2.4 厚皮香葉水浸液對三葉鬼針草植株脯氨酸含量影響圖1 厚皮香葉浸液對三葉鬼針草和麻櫟脯氨酸含量影響Fig. 1 Effect of Geranium extract thick skin of Bidens pilosa and Quercus acutissima proline content.在正常情況下，植物脯氨酸含量總是較低的，逆境條件下植物體游離脯氨酸含量約為正常情況下的數(shù)十至數(shù)百倍13-15，一般來講，脯氨酸積累量與植物抗逆性呈正相關(guān)。由圖1分析可知，在一樣濃度處理下，麻櫟的脯氨酸含量

28、高于三葉鬼針草的，在不同濃度的厚皮香葉浸液濃度處理后脯氨酸含量均隨著濃度的增大不同程度的升高。三葉鬼針草和麻櫟脯氨酸含量均高于對照組，0.05、0.10、0.15、0.20、0.25濃度處理下三葉鬼針草脯氨酸含量分 別增加了1.02倍、1.23倍、1.36倍、1.48倍。麻櫟脯氨酸含量增加了1.23倍、1.45倍、1.56倍、1.69倍、1.86倍.表明厚皮香水浸液濃度對麻櫟的影響大于對三葉鬼針草。另一方面麻櫟脯氨酸含量增加幅度高于三葉鬼針草的。由此說明麻櫟抗逆行強(qiáng)于三葉鬼針草。2.5 厚皮香水浸液濃度對三葉鬼針草和麻櫟MDA影響圖2 厚皮香葉浸液對三葉鬼針草和麻櫟MDA含量影響Fig. 2

29、Effect of thick leather leaf extract of Bidens pilosa and Quercus acutissima MDA content.植物處在在逆境條件下，往往發(fā)生膜脂過氧化作用，丙二醛(MDA)是其產(chǎn)物之一，通常作為化感等逆境傷害的指標(biāo)16。標(biāo)由圖2可見，三葉鬼針草和麻櫟的丙二醛含量均呈升高降低升高的趨勢，在水浸液濃度0.15g/ml時達(dá)到一個高峰，說明膜脂過氧化程度加大，即細(xì)胞膜受到了損害，但隨后出現(xiàn)了回落，說明植物體的防御體系起到了一定的作用，使細(xì)胞膜傷害程度降低17-19。隨水浸液濃度的增加，丙二醛的量達(dá)到了一定的累積，麻櫟在0.15g/ml

30、、0.20g/ml處理時的MDA含量分別是相應(yīng)對照組的1.072倍、1.714倍；而三葉鬼針草在0.15g/ml、0.20g/ml處理時的MDA含量分別是對照組的0.778倍、0.823倍。說明一樣水浸液濃度下，麻櫟比三葉鬼針草葉片的細(xì)胞膜透性增加幅度更大, 膜脂過氧化水平升高, 膜結(jié)構(gòu)受損傷程度相對較大, 細(xì)胞物質(zhì)的外滲加重, 其受到影響較大，由此可知，隨著水浸液濃度增大，麻櫟的受害程度較大。2.6厚皮香水浸液濃度對三葉鬼針草和麻櫟POD影響圖3 厚皮香葉浸液對三葉鬼針草和麻櫟POD活性的影響Fig. 3 Effect of thick leather leaf extract of Bid

31、ens pilosa and Quercus acutissima POD activityPOD是屬于抗氧化酶 能清除植物在逆境中產(chǎn)生的超氧化物自由基 保護(hù)植物免遭氧化逆境傷害植是物體的一種保護(hù)酶類，是與衰老有關(guān)的一種酶，在植物體的作用具有非專一性，它即與膜脂過氧化有關(guān)，又可以清除細(xì)胞體產(chǎn)生較少的O2-,與植物的抗逆能力密切相關(guān)20。在不同濃度水浸液處理的兩種受體植物POD活性均呈先升高后降低的相似趨勢，其中在0.15g/ml達(dá)到峰值，隨后開始下降，最終低于對照組，說明在一定的濃度處理下，植物細(xì)胞忍耐活性氧的水平可能存在一個閥值，超過了這個閥值，就會導(dǎo)致植物受到極大的傷害21-26。隨著水浸

32、液濃度的加大，在0.15g/ml、和0.20g/ml三葉鬼針草的POD 活性分別是相應(yīng)對照的0.574、0.344倍，麻櫟的POD 活性分別是相應(yīng)對照的0.817、0.465倍。表明一樣濃度下麻櫟的POD 活性明顯高于三葉鬼針草，且降幅較小，對O2- 、H2O2 等活性氧的清除能力較強(qiáng), 其抗旱性相對較強(qiáng)27。同時表明厚皮香的水浸液對麻櫟的化感作用更為顯著。2.7 三葉鬼針草和麻櫟細(xì)胞顯微形態(tài)觀察將不同濃度厚皮香葉水浸澆灌處理的三葉鬼針草莖尖做顯微壓片觀察，顯微鏡放大10*40倍，其結(jié)果如以下圖片顯示，隨著水浸液濃度的升高染色體數(shù)目減少。 Ck 0.05 g/ml 0.10g/ml0.15g/

33、ml 0.20g/ml 0.25g/ml將不同濃度厚皮香葉水浸澆灌處理的麻櫟莖尖做顯微壓片觀察，顯微鏡放大10*40倍，其結(jié)果下圖顯示，隨著水浸液濃度的升高一樣視野中畸變細(xì)胞逐漸增多，許多細(xì)胞出現(xiàn)無核狀態(tài)，僅有可見細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)ck 0.05 g/ml 0.10 g/ml ck 0.20 g/ml 0.25 g/ml將不同濃度厚皮香葉水浸澆灌處理的麻櫟根尖做顯微壓片觀察，顯微鏡放大10*40倍，其結(jié)果如以下圖片顯示，隨著水浸液濃度的升高染色體數(shù)目減少。 0.01 g/mlCk0.15 g/ml0.15g/ml 0.25 g/ml0.20 g/ml0.15 g/ml將不同濃度厚皮香葉水浸澆灌處理的三

34、葉鬼針草根尖做顯微壓片觀察，顯微鏡放大10*40倍，其結(jié)果如以下圖片顯示，隨著水浸液濃度的升高染色體數(shù)目減少。不規(guī)則細(xì)胞數(shù)目呈上升趨勢， 就上面圖綜合來看，0.25水浸液濃度處理的三葉鬼針草莖尖細(xì)胞發(fā)生畸變，體積增大，與其他組差異較為明顯，染色體隨著水浸液濃度的升高呈現(xiàn)下降趨勢。而根尖切片顯示細(xì)胞形態(tài)無明顯差異，但染色體數(shù)目呈下降趨勢；麻櫟莖尖切片顯示出細(xì)胞形態(tài)一致，但其染色體數(shù)目整體較少，根尖切片顯示，水浸液濃度由低到高處理的植株讓色體數(shù)目呈下降的趨勢。由于本實(shí)驗(yàn)切片數(shù)目的因素此結(jié)果可能存在一定偶然性。3.結(jié)論與討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：厚皮香葉浸提對三葉鬼針草和麻櫟均表現(xiàn)出化感作用。不同濃度的厚皮

35、香葉浸提液對三葉鬼針草和麻櫟種子萌發(fā)與幼苗生長的影響程度不同。從總體趨勢來看，化感效應(yīng)是隨著厚皮香葉浸提液濃度升高而增大。絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)組測定參數(shù)都與對照組的差異性達(dá)到了極顯著水平。厚皮香葉的不同濃度的浸提液對三葉鬼針草和麻櫟的綜合化感效應(yīng)都表現(xiàn)為抑制并達(dá)到了顯著水平，我們可以初步認(rèn)為厚皮香葉浸提液對大麥種子萌發(fā)與幼苗生長具有顯著的抑制性。本實(shí)驗(yàn)就厚皮香對三葉鬼針草和麻櫟種子萌發(fā)與幼苗生長與細(xì)胞形態(tài)做了一個初步的探究，旨在探索化感作用對植株生理生化指標(biāo)的影響。數(shù)據(jù)顯示當(dāng)厚皮香葉浸液濃度為0.10 g/ml-0.15g /ml是對三葉鬼針草和麻櫟種子的萌發(fā)影響效果顯著，其對株高和根長的影響也達(dá)到了

36、最大值；受體植物體相關(guān)酶活性與含量也發(fā)生較大變化，其中在一樣濃度處理下，麻櫟的脯氨酸含量高于三葉鬼針草的，在不同濃度的厚皮香葉浸液濃度處理后脯氨酸含量均隨著濃度的增大不同程度的升高。三葉鬼針草和麻櫟脯氨酸含量均高于對照組，0.05、0.10、0.15、0.20、0.25濃度處理下三葉鬼針草脯氨酸含量分 別增加了1.02倍、1.23倍、1.36倍、1.48倍。麻櫟脯氨酸含量增加了1.23倍、1.45倍、1.56倍、1.69倍、1.86倍.表明厚皮香水浸液濃度對麻櫟的影響大于對三葉鬼針草。MDA、POD含量均在0.10-0.15 g/ml 達(dá)到最大值。和麻櫟相比三葉鬼針草體的相關(guān)保護(hù)性酶活性均低于

37、麻櫟，說明在以厚皮香葉浸葉澆灌的環(huán)境中麻櫟更占優(yōu)勢。細(xì)胞形態(tài)來看三葉鬼針草莖尖細(xì)胞發(fā)畸變，而在麻櫟細(xì)胞未發(fā)現(xiàn)。初步比較，厚皮香葉浸液均對三葉鬼針草和麻櫟表現(xiàn)出較強(qiáng)的化感作用，比較可知對三葉鬼針草的化感作用強(qiáng)于三葉鬼針草，這與火燒跡地調(diào)查結(jié)果麻櫟的種群規(guī)模大于三葉鬼針草的種群規(guī)模相一致。綜上所述本論文從生理生化水平與細(xì)胞水平對化感作用進(jìn)行初步系統(tǒng)的探究，從植物種子萌發(fā)率到體酶的變化，到形態(tài)差異最后到細(xì)胞結(jié)構(gòu)差異做了較為全面的探索。但還有許多不足之處如實(shí)驗(yàn)規(guī)模，植物的生化指標(biāo)未能很好覆蓋，對化感作用的解釋還缺乏說服力，實(shí)驗(yàn)方案的系統(tǒng)性還有待于進(jìn)一步的完善。參考文獻(xiàn)1 杜明廣, 曉坤, 崧. 森林植

38、物化感作用研究現(xiàn)狀與發(fā)展方向. 林業(yè)勘查設(shè)計(jì), 2009(1).2 亮亮,天來, 恩平. 作物化感作用研究進(jìn)展J. 農(nóng)業(yè)科學(xué), 2007, 35(25): 77387740.3 徐震邦.主要伴生樹種樹葉對紅松生長的影響J.林業(yè)科學(xué),1972(4): 357-360.4 昌順, 昆.人工林地力的衰退與維護(hù)研究綜述 J.世界林業(yè)研究2005, 18(1).5 袁久志, 啟時. 麻櫟葉的化學(xué)成分研究.J 1990(1).6 徐濤, 王躍華, 連計(jì).厚皮香植物的種子特性與扦插繁殖的初步研究大學(xué)學(xué)報 (自然科學(xué)版) .2004, (5).7 曉萍, 麗慶. 日本厚皮香的扦插繁殖與光照強(qiáng)度對其幼苗生長的影

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44、7373%0.104762717172727377%73.33%0.104459707071717171%0.104462677172727272%0.153646515454545454%55%0.153951545454545454%0.153746565757575757%0.202021222325252626%26%0.201819232525272727%0.201415181821212525%0.251012121415192828%30%0.251517202428283232%0.251820222430303030%描述三葉鬼針草種子萌發(fā)率N均值標(biāo)準(zhǔn)差標(biāo)準(zhǔn)誤均值的 95%

45、 置信區(qū)間極小值極大值下限上限ck3.9267.01528.00882.8887.9646.91.940.053.7300.01000.00577.7052.7548.72.740.103.7333.03215.01856.6535.8132.71.770.153.6633.02082.01202.6116.7150.64.680.203.2600.01000.00577.2352.2848.25.270.253.5733.08737.05044.3563.7904.50.67總數(shù)18.6478.21187.04994.5424.7531.25.94方差齊性檢驗(yàn)三葉鬼針草種子萌發(fā)率Levene

46、 統(tǒng)計(jì)量df1df2顯著性5.082512.010ANOVA三葉鬼針草種子萌發(fā)率平方和df均方F顯著性組間（組合）.7445.14993.656.000線性項(xiàng)對比.4521.452284.318.000偏差.2924.07345.990.000組.01912.002總數(shù).76317多重比較三葉鬼針草種子萌發(fā)率LSD(I) 厚皮香葉浸液濃度(J) 厚皮香葉浸液濃度均值差 (I-J)標(biāo)準(zhǔn)誤顯著性95% 置信區(qū)間下限上限dimension2ckdimension30.05.19667*.03255.000.1258.26760.10.19333*.03255.000.1224.26420.15.26

47、333*.03255.000.1924.33420.20.66667*.03255.000.5958.73760.25.35333*.03255.000.2824.42420.05dimension3ck-.19667*.03255.000-.2676-.12580.10-.00333.03255.920-.0742.06760.15.06667.03255.063-.0042.13760.20.47000*.03255.000.3991.54090.25.15667*.03255.000.0858.22760.10dimension3ck-.19333*.03255.000-.2642-.1

48、2240.05.00333.03255.920-.0676.07420.15.07000.03255.053-.0009.14090.20.47333*.03255.000.4024.54420.25.16000*.03255.000.0891.23090.15dimension3ck-.26333*.03255.000-.3342-.19240.05-.06667.03255.063-.1376.00420.10-.07000.03255.053-.1409.00090.20.40333*.03255.000.3324.47420.25.09000*.03255.017.0191.16090.20dimension3ck-.66667*.03255.000-.7376-.59580.05-.47000*.03255.000-.5409-.39910.10-.47333*.03255.000-.5442-.40240.15-.40333*.03255.000