淺談乙型肝炎血清標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的臨床意義

1、淺談乙型肝炎血清標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的臨床意義         【摘要】  目的  檢測(cè)乙肝患者血清中乙肝兩對(duì)半（HBV-M）、HBV-DNA和乙肝病毒前S1（PreS1）蛋白，探討各檢測(cè)項(xiàng)目的臨床意義。方法 采用時(shí)間分辨熒光免疫法檢測(cè)HBV-M，熒光定量PCR法檢測(cè)HBV-DNA，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)PreS1蛋白。結(jié)果  215例乙肝感染者HBV-DNA檢出率為64.2%，PreS1檢出率為56.3%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；

2、77例HBeAg陽(yáng)性樣本中HBV-DNA和PreS1的檢出率分別為93.6%和91.0%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；以138例HBV-DNA陽(yáng)性為標(biāo)準(zhǔn)，PreS1檢測(cè)與HBV-DNA符合率為87.7%，HBeAg與HBV-DNA的符合率為56.5%，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.01）。結(jié)論  PreS1蛋白在判斷HBV復(fù)制狀態(tài)和傳染性上優(yōu)于HBeAg，無(wú)法開(kāi)展HBV-DNA定量檢測(cè)的醫(yī)院可以采用PreS1蛋白代替HBV-DNA；有條件的醫(yī)院應(yīng)聯(lián)合檢測(cè)，提高實(shí)驗(yàn)室診斷的靈敏性和準(zhǔn)確性。 【關(guān)鍵詞】  乙型肝炎 血清標(biāo)志物 

3、0;檢測(cè)  臨床意義     乙型病毒（HBV）性肝炎是我國(guó)常見(jiàn)的傳染病之一，對(duì)人類(lèi)的健康帶來(lái)極大的危害。目前實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)HBV主要包括乙肝兩對(duì)半（HBV-M）、HBV-DNA和乙肝病毒前S1（PreS1）蛋白。由于HBV-DNA定量檢測(cè)技術(shù)所需實(shí)驗(yàn)條件高，易受環(huán)境污染影響，操作復(fù)雜，一般基層醫(yī)院難以開(kāi)展。以往觀點(diǎn)認(rèn)為HBeAg是監(jiān)測(cè)乙肝病毒是否存在復(fù)制及具有傳染性的指標(biāo)，近來(lái)不少研究證明PreS1蛋白也可作為HBV復(fù)制的標(biāo)志物，HBeAg轉(zhuǎn)陰并不一定意味病毒停止復(fù)制1，因此不能僅僅以HBeAg來(lái)判斷病毒病毒是否存在復(fù)制及具有傳染性的指

4、標(biāo)。本文對(duì)215例HBV感染者血清樣本所測(cè)HBV-M、HBV-DNA和PreS1蛋白結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，探討各項(xiàng)檢測(cè)的臨床意義。     1  對(duì)象和方法     1.1研究對(duì)象  乙肝組215例，215例HBV感染者血清樣本均來(lái)自我院2006年2月至2007年1月門(mén)診及住院患者，其中男126例，女89例，年齡14-68歲，平均43歲。健康對(duì)照組50例，均來(lái)自我院健康體檢者。     1.2檢測(cè)方法  HBV-M定量

5、檢測(cè)采用時(shí)間分辨熒光免疫法，HBV-DNA檢測(cè)采用熒光定量PCR法，PreS蛋白1檢測(cè)采用ELISA法。     1.3試劑和儀器  HBV-M定量檢測(cè)試劑和時(shí)間分辨熒光分析儀由上海新波生物技術(shù)股份有限公司提供；HBV-DNA檢測(cè)試劑和儀器由深圳匹基生物技術(shù)有限公司提供；PreS1蛋白檢測(cè)試劑盒由上海復(fù)星長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供，酶標(biāo)儀為伯樂(lè)-550型。均嚴(yán)格按試劑說(shuō)明書(shū)操作。     1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理  率的比較采用x2檢驗(yàn)進(jìn)行分析處理。    

6、; 2  結(jié)果     2.1 不同HBV感染模式HBV-DNA和PreS1的檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。     表1 不同HBV感染模式HBV-DNA和PreS1的檢測(cè)結(jié)果（n,%）           注：分別代表HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。     215例HBV感染者HBV-DNA檢出率為

7、64.2%（138/215），PreS1檢出率為56.3%（121/215），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=2.806，P0.05）。     77例HBeAg陽(yáng)性樣本中HBV-DNA和PreS1的檢出率分別為93.6%和91.0%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=0.361，P0.05）。137例HBeAg陰性樣本中HBV-DNA和PreS1的檢出率分別為47.4%和36.5%，表明HBeAg轉(zhuǎn)陰時(shí)仍有病毒復(fù)制的可能。     2.2  HBV-DNA與PreS1、HBeAg的檢測(cè)結(jié)果比較見(jiàn)表2。 

8、0;   表2  HBV-DNA與PreS1、HBeAg的檢測(cè)結(jié)果比較（n）                    以138例HBV-DNA陽(yáng)性為標(biāo)準(zhǔn)，PreS1檢測(cè)與HBV-DNA符合率為87.7%（121/138），HBeAg與HBV-DNA的符合率為56.5%（78/138），兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=33.304，P0.01）。PreS1和 HBe

9、Ag與HBV-DNA的總符合率為85.6%（184/215）和66.5%（143/215），兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=21.461，P0.01）。     2.3  50例健康對(duì)照組樣本中HBsAg、HBV-DNA和PreS1檢測(cè)均為陰性。     3  討論     HBV是嗜肝細(xì)胞病毒，病毒附著于肝細(xì)胞膜上，PreS1蛋白含有肝細(xì)胞膜受體，即PreS1蛋白的氨基酸21-47片段，是HBV與肝細(xì)胞的直接結(jié)合位點(diǎn)，變異的病毒只要這一片

10、段完好就有傳染性，且PreS1蛋白的體液免疫應(yīng)答常在急性HBV的早期出現(xiàn)。     表1資料顯示，在215例HBV感染者中HBV-DNA檢出率為64.2%，PreS1蛋白檢出率為56.3%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05），表明兩者有較好的一致性，HBV-DNA定量檢測(cè)可直接體現(xiàn)HBV存在，PreS1蛋白則間接反映HBV存在。HBeAg是病毒復(fù)制和具有傳染性的標(biāo)志，HBeAg陽(yáng)性樣本中HBV-DNA和PreS1蛋白的檢出率分別為93.6%和91.0%，可見(jiàn)二者與其呈正相關(guān)，具有相同的檢測(cè)意義。而在HBeAg陰性樣本中HBV-DNA和PreS1蛋白的檢出率分

11、別為47.4%和36.5%，說(shuō)明HBeAg轉(zhuǎn)陰并不能排除存在病毒的復(fù)制和感染。HBV感染宿主后為逃避宿主的免疫應(yīng)答而發(fā)生前C區(qū)與C區(qū)基因的突變導(dǎo)致C區(qū)變異，不能產(chǎn)生HBeAg，但這并不影響病毒復(fù)制，造成HBV的持續(xù)感染。HBV-DNA和PreS1蛋白可替代或補(bǔ)充HBV-M的檢測(cè)，避免因HBeAg變異而產(chǎn)生的誤導(dǎo)，對(duì)區(qū)分患者是否處于感染期有重要參考價(jià)值。HBV-DNA的檢測(cè)解決了免疫學(xué)檢測(cè)的“窗口期”問(wèn)題，是判斷HBV為近期感染還是既往感染的直接證據(jù)。以HBV-DNA陽(yáng)性為標(biāo)準(zhǔn)，PreS1蛋白檢測(cè)的陽(yáng)性符合率及總符合率高于HBeAg，說(shuō)明在判斷HBV是否存在復(fù)制和具有傳染性方面優(yōu)于HBeAg，可

12、真實(shí)反映病毒存在及復(fù)制活躍程度。50例健康對(duì)照組PreS1蛋白均為陰性，說(shuō)明該蛋白僅存在于HBsAg陽(yáng)性樣本中，試驗(yàn)的特異性好。表2中HBV-DNA和PreS1蛋白檢測(cè)存在一定交叉陽(yáng)性和交叉陰性，這可能與病毒管狀顆粒上存在PreS1蛋白而不是HBV-DNA有關(guān)，因此兩者的檢測(cè)不能完全取代。     HBV-DNA定量檢測(cè)敏感性和特異性很高，但對(duì)實(shí)驗(yàn)條件和檢驗(yàn)人員要求也高，中小型醫(yī)院難以開(kāi)展；ELISA法方法簡(jiǎn)便，易于操作，不需特殊儀器和高標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室，便于推廣，適合中小型醫(yī)院常規(guī)開(kāi)展。對(duì)于無(wú)法檢測(cè)HBV-DNA而HBeAg陰性的血清，PreS1蛋白雖不能完全代替HBV-DNA，但在判斷病毒復(fù)制狀態(tài)和傳染性上優(yōu)于HBeAg。總之，由于HBV的變異性及檢測(cè)方法的局限性，有條件的單位應(yīng)同時(shí)開(kāi)展這些檢測(cè)項(xiàng)目，以彌補(bǔ)各項(xiàng)指標(biāo)的相互不足，提高實(shí)驗(yàn)室診斷的靈敏性和準(zhǔn)確性，為臨床診斷和療效觀察提供可靠依據(jù)。 參 考