乳與乳制品非常規(guī)理化指標(biāo)檢驗煙酸和煙酸銨的檢測

1、乳與乳制品非常規(guī)理化指標(biāo)檢驗煙酸和煙酸銨的檢測YLNB 5.131. 依據(jù)：GB/T 5413.15 19972. 方法提要樣品經(jīng)熱水萃取、酸性沉淀蛋白質(zhì)后，以反相C18色譜柱分離，用紫外檢測器定量。3. 試劑3. 1 鹽酸溶液：c(HCI)為5.0mol/L3. 2氫氧化鈉溶液：c(NaOH)為5.0moI/L3. 3高氯酸：體積分?jǐn)?shù)為60%3. 4無水甲醇：色譜純3. 5異丙醇：色譜純3. 6辛烷磺酸鈉：優(yōu)級純3. 7標(biāo)準(zhǔn)溶液3. 7. 1煙酸及煙酰胺標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，濃度為100卩g/mL。稱取煙酸及煙酰胺標(biāo)準(zhǔn)品各 10.0mg，用水溶解，然后分 別定容至100mL容量瓶中。3. 7. 2煙

2、酸及煙酰胺混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，濃度為 5卩g/mL。各取5.0mL上述標(biāo)準(zhǔn)中間溶液于100mL容量瓶中，用水定容(煙酸、煙酰胺濃度均為 5卩g/mL)。4. 儀器4. 1高效液相色譜儀：帶紫外檢測器。4. 2色譜柱：15cmX 4.6mm,或同等性能的反相 C18柱。4. 3酸度計。4. 4超聲波振蕩器。5. 方法5. 1樣品預(yù)處理5. 1. 1稱樣：精確稱取樣品5.0g （精確至小數(shù)點(diǎn)后第四位）， 放入100mL錐形瓶中。5. 1. 2提?。涸谏鲜鲥F形瓶中，加入約60C的蒸餾水25mL, 搖勻后，置于超聲波振器中振搖10min。5. 1. 3沉淀：待樣品溶液降至室溫后，用鹽酸溶液（10.1 ）

3、調(diào)節(jié)樣品溶液的pH值至1.70 ,放置2min后，再用氫氧化鈉溶 液（10.2 ）調(diào)節(jié)樣品溶液的pH值至4.50。5. 1. 4定容：將樣品溶液轉(zhuǎn)至 50mL容量瓶中，用蒸餾水反 復(fù)沖洗錐形瓶，洗瓶合并于 50mL容量瓶中，用水定容至刻度 后，倒入漏斗中自然過濾。取此濾液約10mL,經(jīng)0.45 時微孔濾膜加壓過濾，即樣品溶液。5. 2儀器工作條件檢測器靈敏度：0.002AU/mV。檢測器波長：261nm柱溫：25C。流速：1.00mL/min 。流動相：體積分?jǐn)?shù)為7.0%的甲醇、體積分?jǐn)?shù)為2.0%的異丙醇、1g/L辛烷磺酸鈉的水溶液，用高氯酸調(diào)pH=2.10進(jìn)樣量：20卩I5. 3定量分析5. 3. 1上機(jī)測定：注射一定量的樣品溶液進(jìn)入液相色譜儀，得到峰面積A ;注射與樣品溶液相同體積的標(biāo)準(zhǔn)工作液 進(jìn)入色譜儀，得到峰面積 Bi。6. 結(jié)果計算樣品中煙酸的含量 (mg/100g)=人+% (1)式中：X,樣品中煙酸的含量， mg/100g;%樣品中煙酰胺的含量， mg/100g。其中X1或X2 :(2)X1 (X2) =Ai 八Bi 5式中：m樣品的質(zhì)量， g;Ai 由4. 3. 1所得的樣品溶液的峰面積；Bi由4. 3. 1所得的標(biāo)準(zhǔn)工作液的峰面積；cx標(biāo)準(zhǔn)工作液中