嗜熱細(xì)菌β-糖苷酶的突變酶tnglye338a在寡糖合成中的應(yīng)用

1、應(yīng)用化學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文 精品論文 嗜熱細(xì)菌-糖苷酶的突變酶TnglyE338A在寡糖合成中的應(yīng)用關(guān)鍵詞：寡糖合成 糖苷合成酶 酶促反應(yīng) 轉(zhuǎn)糖基效率 糖基供體 糖基受體摘要：傳統(tǒng)的化學(xué)法和酶法在大規(guī)模合成寡糖方面都有一定局限性。近年來，分子生物學(xué)技術(shù)大大推動(dòng)了糖苷酶合成寡糖的研究，將糖苷酶催化中心親核體氨基酸定點(diǎn)突變?yōu)榉怯H核體氨基酸，導(dǎo)致酶的原有水解活性喪失，只催化糖苷鍵合成反應(yīng)，寡糖產(chǎn)量大幅度提高，人工產(chǎn)生了一類新酶-糖苷合成酶。 本文以非解朊棲熱菌HG-102的耐熱-糖苷酶為對(duì)象，通過基因定點(diǎn)突變將-糖苷酶的催化中心親核體氨基酸置換為非親核體氨基酸獲得耐熱-糖苷合成酶TnglyE338A，并通

2、過有機(jī)合成制備-糖苷合成酶TnglyE338A酶促反應(yīng)的各種底物-糖基供體和糖基受體，嘗試不同的糖基供體和糖基受體，制備出了寡糖和多糖。并通過正交實(shí)驗(yàn)對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行了的優(yōu)化(緩沖液pH為8.8、酶的用量為90g、反應(yīng)溫度為55)使-糖苷合成酶TnglyE338A的轉(zhuǎn)糖基效率達(dá)到25.9。目前國(guó)際上還沒有關(guān)于耐熱糖苷合成酶合成寡糖和多糖的報(bào)道，這為今后開發(fā)寡糖及多糖的工業(yè)化生產(chǎn)提供了可能。正文內(nèi)容 傳統(tǒng)的化學(xué)法和酶法在大規(guī)模合成寡糖方面都有一定局限性。近年來，分子生物學(xué)技術(shù)大大推動(dòng)了糖苷酶合成寡糖的研究，將糖苷酶催化中心親核體氨基酸定點(diǎn)突變?yōu)榉怯H核體氨基酸，導(dǎo)致酶的原有水解活性喪失，只催化糖苷鍵

3、合成反應(yīng)，寡糖產(chǎn)量大幅度提高，人工產(chǎn)生了一類新酶-糖苷合成酶。 本文以非解朊棲熱菌HG-102的耐熱-糖苷酶為對(duì)象，通過基因定點(diǎn)突變將-糖苷酶的催化中心親核體氨基酸置換為非親核體氨基酸獲得耐熱-糖苷合成酶TnglyE338A，并通過有機(jī)合成制備-糖苷合成酶TnglyE338A酶促反應(yīng)的各種底物-糖基供體和糖基受體，嘗試不同的糖基供體和糖基受體，制備出了寡糖和多糖。并通過正交實(shí)驗(yàn)對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行了的優(yōu)化(緩沖液pH為8.8、酶的用量為90g、反應(yīng)溫度為55)使-糖苷合成酶TnglyE338A的轉(zhuǎn)糖基效率達(dá)到25.9。目前國(guó)際上還沒有關(guān)于耐熱糖苷合成酶合成寡糖和多糖的報(bào)道，這為今后開發(fā)寡糖及多糖的工

4、業(yè)化生產(chǎn)提供了可能。傳統(tǒng)的化學(xué)法和酶法在大規(guī)模合成寡糖方面都有一定局限性。近年來，分子生物學(xué)技術(shù)大大推動(dòng)了糖苷酶合成寡糖的研究，將糖苷酶催化中心親核體氨基酸定點(diǎn)突變?yōu)榉怯H核體氨基酸，導(dǎo)致酶的原有水解活性喪失，只催化糖苷鍵合成反應(yīng)，寡糖產(chǎn)量大幅度提高，人工產(chǎn)生了一類新酶-糖苷合成酶。 本文以非解朊棲熱菌HG-102的耐熱-糖苷酶為對(duì)象，通過基因定點(diǎn)突變將-糖苷酶的催化中心親核體氨基酸置換為非親核體氨基酸獲得耐熱-糖苷合成酶TnglyE338A，并通過有機(jī)合成制備-糖苷合成酶TnglyE338A酶促反應(yīng)的各種底物-糖基供體和糖基受體，嘗試不同的糖基供體和糖基受體，制備出了寡糖和多糖。并通過正交實(shí)驗(yàn)

5、對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行了的優(yōu)化(緩沖液pH為8.8、酶的用量為90g、反應(yīng)溫度為55)使-糖苷合成酶TnglyE338A的轉(zhuǎn)糖基效率達(dá)到25.9。目前國(guó)際上還沒有關(guān)于耐熱糖苷合成酶合成寡糖和多糖的報(bào)道，這為今后開發(fā)寡糖及多糖的工業(yè)化生產(chǎn)提供了可能。傳統(tǒng)的化學(xué)法和酶法在大規(guī)模合成寡糖方面都有一定局限性。近年來，分子生物學(xué)技術(shù)大大推動(dòng)了糖苷酶合成寡糖的研究，將糖苷酶催化中心親核體氨基酸定點(diǎn)突變?yōu)榉怯H核體氨基酸，導(dǎo)致酶的原有水解活性喪失，只催化糖苷鍵合成反應(yīng)，寡糖產(chǎn)量大幅度提高，人工產(chǎn)生了一類新酶-糖苷合成酶。 本文以非解朊棲熱菌HG-102的耐熱-糖苷酶為對(duì)象，通過基因定點(diǎn)突變將-糖苷酶的催化中心親核體氨

6、基酸置換為非親核體氨基酸獲得耐熱-糖苷合成酶TnglyE338A，并通過有機(jī)合成制備-糖苷合成酶TnglyE338A酶促反應(yīng)的各種底物-糖基供體和糖基受體，嘗試不同的糖基供體和糖基受體，制備出了寡糖和多糖。并通過正交實(shí)驗(yàn)對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行了的優(yōu)化(緩沖液pH為8.8、酶的用量為90g、反應(yīng)溫度為55)使-糖苷合成酶TnglyE338A的轉(zhuǎn)糖基效率達(dá)到25.9。目前國(guó)際上還沒有關(guān)于耐熱糖苷合成酶合成寡糖和多糖的報(bào)道，這為今后開發(fā)寡糖及多糖的工業(yè)化生產(chǎn)提供了可能。傳統(tǒng)的化學(xué)法和酶法在大規(guī)模合成寡糖方面都有一定局限性。近年來，分子生物學(xué)技術(shù)大大推動(dòng)了糖苷酶合成寡糖的研究，將糖苷酶催化中心親核體氨基酸定點(diǎn)

7、突變?yōu)榉怯H核體氨基酸，導(dǎo)致酶的原有水解活性喪失，只催化糖苷鍵合成反應(yīng)，寡糖產(chǎn)量大幅度提高，人工產(chǎn)生了一類新酶-糖苷合成酶。 本文以非解朊棲熱菌HG-102的耐熱-糖苷酶為對(duì)象，通過基因定點(diǎn)突變將-糖苷酶的催化中心親核體氨基酸置換為非親核體氨基酸獲得耐熱-糖苷合成酶TnglyE338A，并通過有機(jī)合成制備-糖苷合成酶TnglyE338A酶促反應(yīng)的各種底物-糖基供體和糖基受體，嘗試不同的糖基供體和糖基受體，制備出了寡糖和多糖。并通過正交實(shí)驗(yàn)對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行了的優(yōu)化(緩沖液pH為8.8、酶的用量為90g、反應(yīng)溫度為55)使-糖苷合成酶TnglyE338A的轉(zhuǎn)糖基效率達(dá)到25.9。目前國(guó)際上還沒有關(guān)于耐

8、熱糖苷合成酶合成寡糖和多糖的報(bào)道，這為今后開發(fā)寡糖及多糖的工業(yè)化生產(chǎn)提供了可能。傳統(tǒng)的化學(xué)法和酶法在大規(guī)模合成寡糖方面都有一定局限性。近年來，分子生物學(xué)技術(shù)大大推動(dòng)了糖苷酶合成寡糖的研究，將糖苷酶催化中心親核體氨基酸定點(diǎn)突變?yōu)榉怯H核體氨基酸，導(dǎo)致酶的原有水解活性喪失，只催化糖苷鍵合成反應(yīng)，寡糖產(chǎn)量大幅度提高，人工產(chǎn)生了一類新酶-糖苷合成酶。 本文以非解朊棲熱菌HG-102的耐熱-糖苷酶為對(duì)象，通過基因定點(diǎn)突變將-糖苷酶的催化中心親核體氨基酸置換為非親核體氨基酸獲得耐熱-糖苷合成酶TnglyE338A，并通過有機(jī)合成制備-糖苷合成酶TnglyE338A酶促反應(yīng)的各種底物-糖基供體和糖基受體，嘗試

9、不同的糖基供體和糖基受體，制備出了寡糖和多糖。并通過正交實(shí)驗(yàn)對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行了的優(yōu)化(緩沖液pH為8.8、酶的用量為90g、反應(yīng)溫度為55)使-糖苷合成酶TnglyE338A的轉(zhuǎn)糖基效率達(dá)到25.9。目前國(guó)際上還沒有關(guān)于耐熱糖苷合成酶合成寡糖和多糖的報(bào)道，這為今后開發(fā)寡糖及多糖的工業(yè)化生產(chǎn)提供了可能。傳統(tǒng)的化學(xué)法和酶法在大規(guī)模合成寡糖方面都有一定局限性。近年來，分子生物學(xué)技術(shù)大大推動(dòng)了糖苷酶合成寡糖的研究，將糖苷酶催化中心親核體氨基酸定點(diǎn)突變?yōu)榉怯H核體氨基酸，導(dǎo)致酶的原有水解活性喪失，只催化糖苷鍵合成反應(yīng)，寡糖產(chǎn)量大幅度提高，人工產(chǎn)生了一類新酶-糖苷合成酶。 本文以非解朊棲熱菌HG-102的耐熱

10、-糖苷酶為對(duì)象，通過基因定點(diǎn)突變將-糖苷酶的催化中心親核體氨基酸置換為非親核體氨基酸獲得耐熱-糖苷合成酶TnglyE338A，并通過有機(jī)合成制備-糖苷合成酶TnglyE338A酶促反應(yīng)的各種底物-糖基供體和糖基受體，嘗試不同的糖基供體和糖基受體，制備出了寡糖和多糖。并通過正交實(shí)驗(yàn)對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行了的優(yōu)化(緩沖液pH為8.8、酶的用量為90g、反應(yīng)溫度為55)使-糖苷合成酶TnglyE338A的轉(zhuǎn)糖基效率達(dá)到25.9。目前國(guó)際上還沒有關(guān)于耐熱糖苷合成酶合成寡糖和多糖的報(bào)道，這為今后開發(fā)寡糖及多糖的工業(yè)化生產(chǎn)提供了可能。傳統(tǒng)的化學(xué)法和酶法在大規(guī)模合成寡糖方面都有一定局限性。近年來，分子生物學(xué)技術(shù)大大

11、推動(dòng)了糖苷酶合成寡糖的研究，將糖苷酶催化中心親核體氨基酸定點(diǎn)突變?yōu)榉怯H核體氨基酸，導(dǎo)致酶的原有水解活性喪失，只催化糖苷鍵合成反應(yīng)，寡糖產(chǎn)量大幅度提高，人工產(chǎn)生了一類新酶-糖苷合成酶。 本文以非解朊棲熱菌HG-102的耐熱-糖苷酶為對(duì)象，通過基因定點(diǎn)突變將-糖苷酶的催化中心親核體氨基酸置換為非親核體氨基酸獲得耐熱-糖苷合成酶TnglyE338A，并通過有機(jī)合成制備-糖苷合成酶TnglyE338A酶促反應(yīng)的各種底物-糖基供體和糖基受體，嘗試不同的糖基供體和糖基受體，制備出了寡糖和多糖。并通過正交實(shí)驗(yàn)對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行了的優(yōu)化(緩沖液pH為8.8、酶的用量為90g、反應(yīng)溫度為55)使-糖苷合成酶Tngl

12、yE338A的轉(zhuǎn)糖基效率達(dá)到25.9。目前國(guó)際上還沒有關(guān)于耐熱糖苷合成酶合成寡糖和多糖的報(bào)道，這為今后開發(fā)寡糖及多糖的工業(yè)化生產(chǎn)提供了可能。傳統(tǒng)的化學(xué)法和酶法在大規(guī)模合成寡糖方面都有一定局限性。近年來，分子生物學(xué)技術(shù)大大推動(dòng)了糖苷酶合成寡糖的研究，將糖苷酶催化中心親核體氨基酸定點(diǎn)突變?yōu)榉怯H核體氨基酸，導(dǎo)致酶的原有水解活性喪失，只催化糖苷鍵合成反應(yīng)，寡糖產(chǎn)量大幅度提高，人工產(chǎn)生了一類新酶-糖苷合成酶。 本文以非解朊棲熱菌HG-102的耐熱-糖苷酶為對(duì)象，通過基因定點(diǎn)突變將-糖苷酶的催化中心親核體氨基酸置換為非親核體氨基酸獲得耐熱-糖苷合成酶TnglyE338A，并通過有機(jī)合成制備-糖苷合成酶Tn

13、glyE338A酶促反應(yīng)的各種底物-糖基供體和糖基受體，嘗試不同的糖基供體和糖基受體，制備出了寡糖和多糖。并通過正交實(shí)驗(yàn)對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行了的優(yōu)化(緩沖液pH為8.8、酶的用量為90g、反應(yīng)溫度為55)使-糖苷合成酶TnglyE338A的轉(zhuǎn)糖基效率達(dá)到25.9。目前國(guó)際上還沒有關(guān)于耐熱糖苷合成酶合成寡糖和多糖的報(bào)道，這為今后開發(fā)寡糖及多糖的工業(yè)化生產(chǎn)提供了可能。傳統(tǒng)的化學(xué)法和酶法在大規(guī)模合成寡糖方面都有一定局限性。近年來，分子生物學(xué)技術(shù)大大推動(dòng)了糖苷酶合成寡糖的研究，將糖苷酶催化中心親核體氨基酸定點(diǎn)突變?yōu)榉怯H核體氨基酸，導(dǎo)致酶的原有水解活性喪失，只催化糖苷鍵合成反應(yīng)，寡糖產(chǎn)量大幅度提高，人工產(chǎn)生了

14、一類新酶-糖苷合成酶。 本文以非解朊棲熱菌HG-102的耐熱-糖苷酶為對(duì)象，通過基因定點(diǎn)突變將-糖苷酶的催化中心親核體氨基酸置換為非親核體氨基酸獲得耐熱-糖苷合成酶TnglyE338A，并通過有機(jī)合成制備-糖苷合成酶TnglyE338A酶促反應(yīng)的各種底物-糖基供體和糖基受體，嘗試不同的糖基供體和糖基受體，制備出了寡糖和多糖。并通過正交實(shí)驗(yàn)對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行了的優(yōu)化(緩沖液pH為8.8、酶的用量為90g、反應(yīng)溫度為55)使-糖苷合成酶TnglyE338A的轉(zhuǎn)糖基效率達(dá)到25.9。目前國(guó)際上還沒有關(guān)于耐熱糖苷合成酶合成寡糖和多糖的報(bào)道，這為今后開發(fā)寡糖及多糖的工業(yè)化生產(chǎn)提供了可能。傳統(tǒng)的化學(xué)法和酶法在

15、大規(guī)模合成寡糖方面都有一定局限性。近年來，分子生物學(xué)技術(shù)大大推動(dòng)了糖苷酶合成寡糖的研究，將糖苷酶催化中心親核體氨基酸定點(diǎn)突變?yōu)榉怯H核體氨基酸，導(dǎo)致酶的原有水解活性喪失，只催化糖苷鍵合成反應(yīng)，寡糖產(chǎn)量大幅度提高，人工產(chǎn)生了一類新酶-糖苷合成酶。 本文以非解朊棲熱菌HG-102的耐熱-糖苷酶為對(duì)象，通過基因定點(diǎn)突變將-糖苷酶的催化中心親核體氨基酸置換為非親核體氨基酸獲得耐熱-糖苷合成酶TnglyE338A，并通過有機(jī)合成制備-糖苷合成酶TnglyE338A酶促反應(yīng)的各種底物-糖基供體和糖基受體，嘗試不同的糖基供體和糖基受體，制備出了寡糖和多糖。并通過正交實(shí)驗(yàn)對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行了的優(yōu)化(緩沖液pH為8.

16、8、酶的用量為90g、反應(yīng)溫度為55)使-糖苷合成酶TnglyE338A的轉(zhuǎn)糖基效率達(dá)到25.9。目前國(guó)際上還沒有關(guān)于耐熱糖苷合成酶合成寡糖和多糖的報(bào)道，這為今后開發(fā)寡糖及多糖的工業(yè)化生產(chǎn)提供了可能。特別提醒：正文內(nèi)容由PDF文件轉(zhuǎn)碼生成，如您電腦未有相應(yīng)轉(zhuǎn)換碼，則無法顯示正文內(nèi)容，請(qǐng)您下載相應(yīng)軟件，下載地址為 。如還不能顯示，可以聯(lián)系我q q 1627550258 ，提供原格式文檔。 " 垐垯櫃換燙梯葺銠?endstreamendobj2x滌?U'閩AZ箾FTP鈦X飼?狛P?燚?琯嫼b?袍*甒?颙嫯'?4)=r宵?i?j彺帖B3锝檡骹>笪yLrQ#?0鯖l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛>渓?擗#?"?#綫G劌#K芿$?7.耟?Wa癳$Fb癳$Fb癳$Fb癳$Fb癳$Fb癳$