四環(huán)素方法測定的不確定度(終)

1、動(dòng)物源性食品中四環(huán)素測定的不確定度評定1. 概述按GB/T 213172007的要求測定動(dòng)物性食品中的四環(huán)素殘留。通過對實(shí)驗(yàn)過程各因素分析、計(jì)算和組合，從而評定其不確定度。2. 測量程序圖：標(biāo)準(zhǔn)值動(dòng)物性食品中四環(huán)素殘留測量程序圖如下：儀器隨機(jī)性溫度V容Vi稀釋過程響應(yīng)信號儲(chǔ)備液校準(zhǔn)V移殘留藥物含量(g/kg)均勻性稱樣m樣品代表性液液溶解溶解定容樣品提取提取因子V容回收率樣品重復(fù)性實(shí)驗(yàn)2.被測量樣品中四環(huán)素的含量X可以表示為：(1)式中：X-樣品中四環(huán)素的含量（µg/kg）AX-待測液中四環(huán)素的峰面積cs-標(biāo)準(zhǔn)溶液中四環(huán)素的濃度（µg/mL）V-定容體積（mL）As-標(biāo)準(zhǔn)液

2、中四環(huán)素的峰面積M-樣品重量（g）3 不確定度來源分析根據(jù)測量程序分析，在本測量過程中主要是稱樣質(zhì)量、單一重復(fù)測定待測液中四環(huán)素峰面積、四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置、單一重復(fù)測定測定標(biāo)準(zhǔn)液中四環(huán)素的峰面積、樣品轉(zhuǎn)移、稀釋、定容體積以及回收率對該方法的影響?？紤]了這些影響量后，數(shù)學(xué)模型為：×××××××(2)式中：均勻化因子提取因子 液液萃取因子濃縮因子溶解因子稀釋至標(biāo)準(zhǔn)體積因子回收率因子3.1配制四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的不確定度3.1.1四環(huán)素純度的不確定度uP(standard) 按供應(yīng)商目錄所給純度為96.5±1，即0.9

3、65±0.01，按均勻分布轉(zhuǎn)換成標(biāo)準(zhǔn)偏差為uP(standard)/P(standard)=0.000173/0.965=0.0001793.1.2標(biāo)準(zhǔn)品稱量的不確定度： 稱量不確定度來自兩個(gè)方面：第一， 稱量變動(dòng)性，在50g 以內(nèi)，變動(dòng)性標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.08 mg；第二， 天平校正產(chǎn)生的不確定度，按上海市計(jì)量測試技術(shù)研究院校準(zhǔn)證書給出的在95%置信概率時(shí)為0.3mg，換算成標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.3/1.96=0.153mg. 此兩項(xiàng)合成得出稱量的標(biāo)準(zhǔn)偏差為： 0.01733.1.3配制的四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液不確定度使用50mL 容量瓶配制四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，其不確定度包括三個(gè)部分：第一， 容量瓶體

4、積的不確定度，按GB128061991實(shí)驗(yàn)室玻璃儀器單標(biāo)線容量瓶規(guī)定：A級單標(biāo)線50mL容量瓶的容量允許差為±0.03mL，按均勻分布換算成標(biāo)準(zhǔn)偏差為；第二， 充滿液體至容量瓶刻度的變動(dòng)性，可通過重復(fù)稱量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，重復(fù)10次統(tǒng)計(jì)出標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.008 mL；第三，由于玻璃的膨脹系數(shù)很小，因溫度引起的體積變化可以忽略不計(jì)。綜合上述三個(gè)影響因子，配置四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液濃度的標(biāo)準(zhǔn)不確定度為： uCstock= (3) = 2.77mg/L相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度為3.1.4.配制的四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)工作液的不確定度 現(xiàn)分析由標(biāo)準(zhǔn)貯備液配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液所產(chǎn)生的不確定度。用濃度為200mg/L的標(biāo)準(zhǔn)

5、溶液配制2.0mg/L標(biāo)準(zhǔn)工作液。 將貯備液（200±2.77mg·L-1）按1：100，稀釋得到2.0mg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液，故：C2.0=Cstock/f100 （4）其中 C2.02.0mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度Cstock貯備液濃度f100 Vf/Vi （5） 其中 f100 稀釋因子Vf 稀釋后體積Vi 稀釋前體積這里1：100稀釋是采用1ml移液管和100ml容量瓶來完成的；故 （6）對1ml移液管和100ml容量瓶進(jìn)行不確定度分析，由標(biāo)定、刻度充滿及校準(zhǔn)和使用溫度不同三個(gè)不確定度來源合成給出V1、V100的不確定度列于表1中。表1 移液管和容量瓶的不確定度項(xiàng)目描述u (

6、Vi)(ml)相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度u (Vi)/ViV11ml移液管0.0080.008V100100ml容量瓶0.100.0010由公式（6）可得 u(f100)=0.00806×1000.806將以上各值列于表2中。表2 貯備液及稀釋因子不確定度項(xiàng)目值標(biāo)準(zhǔn)不確定度u相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度Cstock200mg/L2.770.0138f1001000.8060.00806由（4）式可得 u(C2.0)=2.0×0.016=0.032mg/L3.2.樣品稱量的不確定度稱量由下列數(shù)據(jù)獲得：稱量樣品的質(zhì)量為5.00g，稱量不確定度來自兩個(gè)方面：第一， 稱量變動(dòng)性，在50g以內(nèi)，變動(dòng)性標(biāo)準(zhǔn)

7、偏差為0.08mg；第二， 天平校正產(chǎn)生的不確定度，按上海市計(jì)量測試技術(shù)研究院校準(zhǔn)證書給出的在95置信概率時(shí)為0.3 mg，換算成標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.3/1.960.153mg。 此兩項(xiàng)合成得出稱量的標(biāo)準(zhǔn)偏差為： 0.00003463.3. fhom由于將樣品整體攪碎，樣品非常均勻，因此該項(xiàng)不予考慮。3.4. fext 在溶液中添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，進(jìn)行提取試驗(yàn)，同時(shí)在樣品中添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，其主要影響因素為震蕩時(shí)間與震蕩速度，以及提取溶液的體積，此步驟的影響用添加標(biāo)準(zhǔn)品的樣品和四環(huán)素樣品的分析來考慮。因添加樣品18個(gè)，單次相對標(biāo)準(zhǔn)差為0.14，故fext的相對標(biāo)準(zhǔn)差為u(fext)=0.14/=0.0333.

8、5. fll在試驗(yàn)中的液液萃取，其主要影響不確定度的因素來自于萃取震蕩的時(shí)間，以及萃取的次數(shù)，經(jīng)檢驗(yàn)算得：u(fll)0.00013.6. fcon 因四環(huán)素在氮吹儀上恒溫恒流吹干，在此不予考慮。3.7. fsol 在試驗(yàn)過程中其主要不確定度的來源為，低量溶液溶解部分還存在于瓶壁等處的物質(zhì)未被完全溶解下來，經(jīng)檢驗(yàn)算得 U(fsol)0.0023.3. fdil 樣品濃縮氮吹后，用1 ml移液管溶解定容，對1ml移液管進(jìn)行不確定度分析，由標(biāo)定、刻度充滿及校準(zhǔn)和使用溫度不同三個(gè)不確定度來源合成給出V1的不確定度列于表2中,故u(fdil)=0.0083.9. Vi儀器自動(dòng)進(jìn)樣器，儀器制造商給出定量

9、管的體積不確定度為±0. 05l。樣品進(jìn)樣體積為10l，故相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度為:u(Vi)/Vi=0.05l/10l=0.0053.10.樣品溶液中四環(huán)素峰面積Ax的不確定度重復(fù)測量單一樣品10次，取峰面積平均值作為樣品峰面積。樣品峰面積見表3.表3 單一樣品重復(fù)測定峰面積序號12345678910Ax965574986855986723976542968756963218978995971352961534967982根據(jù)JJF 1059-1999公式（12）計(jì)算Ax相對標(biāo)準(zhǔn)偏差Sp=0.00942。測定結(jié)果以平行樣算術(shù)平均值表示，因此單次測定結(jié)果重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差Sp(Ax)= u(A

10、x)=0.00942/=0.00297。3.11. 標(biāo)準(zhǔn)溶液中四環(huán)素峰面積As的不確定度重復(fù)測量標(biāo)準(zhǔn)溶液10次，取峰面積平均值作為標(biāo)準(zhǔn)品峰面積。標(biāo)準(zhǔn)品峰面積見表4. 表4 標(biāo)準(zhǔn)重復(fù)測定峰面積序號12345678910As927237926873925964936210932384933621925326936258933335938772根據(jù)JJF 1059-1999公式（12）計(jì)算As相對標(biāo)準(zhǔn)偏差Sp=0.00524。測定結(jié)果以平行樣算術(shù)平均值表示，因此單次測定結(jié)果重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差Sp(As)= u(As)=0.00524/=0.00165。3.12. 回收率的不確定度 實(shí)驗(yàn)方法的回收率是在1

11、00附近擺動(dòng)，基本在70110之間。這里引起的不確定度應(yīng)該加以考慮。由此回收率的相對不確定度為4 不確定度分量匯總表表5給出測量動(dòng)物性食品中的四環(huán)素殘留的各測量不確定度分量匯總表。表5測量不確定度分量匯總表項(xiàng)目量值標(biāo)準(zhǔn)不確定度相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度P standard0.9650.0001730.000179mstandard10mg0.173mg0.0173Cs2.0mg/L0.032mg/L0.016M5.000.173 mg0.0000346fhom1.000fext1.00.0330.033fll1.000fcon1.000fsol1.00.0020.002Vi10 l0.050.005fdil1.00.0080.008Ax972753916700.00942As93159848830.00524frec1.00.1150.1154 不確定度的合成、擴(kuò)展和表示 合成相對不確定度 即（0.01732+0.0162+0.00003462+0.0332+0.0001