免疫組化診斷

1、免疫組織化學(xué)免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry)(immunohistochemistry)溫州市人民醫(yī)院病理科溫州市人民醫(yī)院病理科 潘丹潘丹 臨床病理診斷中常用的抗體簡介臨床病理診斷中常用的抗體簡介 人體組織細(xì)胞分類人體組織細(xì)胞分類 上皮細(xì)胞：包括鱗狀上皮，腺上皮，尿路上皮。上皮細(xì)胞：包括鱗狀上皮，腺上皮，尿路上皮。 間葉組織：包括脂肪，肌肉，血管，纖維結(jié)締組織，骨間葉組織：包括脂肪，肌肉，血管，纖維結(jié)締組織，骨和軟骨組織，間皮。和軟骨組織，間皮。 神經(jīng)組織：神經(jīng)元，膠質(zhì)細(xì)胞，神經(jīng)纖維。神經(jīng)組織：神經(jīng)元，膠質(zhì)細(xì)胞，神經(jīng)纖維。 淋巴造血：淋巴細(xì)胞，粒細(xì)胞，漿細(xì)胞，單核細(xì)胞。

2、淋巴造血：淋巴細(xì)胞，粒細(xì)胞，漿細(xì)胞，單核細(xì)胞。 內(nèi)分泌和神經(jīng)內(nèi)分泌組織：甲狀腺，腎上腺，垂體，胰內(nèi)分泌和神經(jīng)內(nèi)分泌組織：甲狀腺，腎上腺，垂體，胰腺的內(nèi)分泌腺，各器官的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞等腺的內(nèi)分泌腺，各器官的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞等 其他：黑色素細(xì)胞，性腺其他：黑色素細(xì)胞，性腺常用上皮性標(biāo)記物常用上皮性標(biāo)記物 l細(xì)胞角蛋白（細(xì)胞角蛋白（cytokeratin,CKcytokeratin,CK）l上皮膜抗原（上皮膜抗原（epithelial membrane antigen, EMAepithelial membrane antigen, EMA）l癌胚抗原（癌胚抗原（carcinoembryonic an

3、tigen,CEAcarcinoembryonic antigen,CEA）l其他：其他：villinvillin，Moc-31Moc-31，MUCMUC（粘蛋白）系列等（粘蛋白）系列等CytokeratinCytokeratin（keratinkeratin或或CKCK） 上皮細(xì)胞的骨架形成蛋白（中間絲），上皮細(xì)胞的骨架形成蛋白（中間絲），維持上皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能維持上皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能 分為分為I I型（型（ CK9-20CK9-20 ）和）和II II型型(CK1-8),(CK1-8),酸性和堿性細(xì)胞角蛋白，編碼基因分別酸性和堿性細(xì)胞角蛋白，編碼基因分別位于位于17q21.217q21.

4、2和和12q13.1312q13.13，共，共5454個基個基因因 表達(dá)方式與組織類型和細(xì)胞分化程度有表達(dá)方式與組織類型和細(xì)胞分化程度有關(guān)，具有高度的特異性關(guān)，具有高度的特異性 蛋白具有不同的分子量和等電點蛋白具有不同的分子量和等電點 細(xì)胞中細(xì)胞中keratinkeratin常成對出現(xiàn)（酸性和堿常成對出現(xiàn)（酸性和堿性配對出現(xiàn)）性配對出現(xiàn)） 根據(jù)氨基酸序根據(jù)氨基酸序列，將列，將KeratinKeratin按按分子量和等電點分子量和等電點進(jìn)行二維分類進(jìn)行二維分類CKCK抗體抗體廣譜的細(xì)胞角蛋白廣譜的細(xì)胞角蛋白抗體抗體特殊的細(xì)胞角蛋白特殊的細(xì)胞角蛋白抗體抗體常用的常用的CKCK抗體抗體AE1/AE3

5、:AE1/AE3:（CK panCK pan）l最常用，胞漿呈細(xì)絲狀陽性最常用，胞漿呈細(xì)絲狀陽性l正常上皮細(xì)胞陽性表達(dá)。正常上皮細(xì)胞陽性表達(dá)。l在其他非上皮，如肌成纖維細(xì)胞、蛛網(wǎng)膜細(xì)胞、平滑肌在其他非上皮，如肌成纖維細(xì)胞、蛛網(wǎng)膜細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、小血管內(nèi)皮細(xì)胞等常呈陽性表達(dá)細(xì)胞、小血管內(nèi)皮細(xì)胞等常呈陽性表達(dá)常用的常用的CKCK抗體抗體CK7CK7和和CK20CK20：分子量為分子量為54KD,54KD,正常乳腺，肺，尿路上皮、卵巢、子宮正常乳腺，肺，尿路上皮、卵巢、子宮內(nèi)膜陽性表達(dá)，胃腸道，肝細(xì)胞，前列腺陰性表達(dá)內(nèi)膜陽性表達(dá)，胃腸道，肝細(xì)胞，前列腺陰性表達(dá)主要用于乳腺癌，肺腺癌與胃腸道癌的診斷

6、與鑒別診斷主要用于乳腺癌，肺腺癌與胃腸道癌的診斷與鑒別診斷胰腺癌，膽管癌，卵巢和子宮內(nèi)膜腺癌，尿路上皮癌陽胰腺癌，膽管癌，卵巢和子宮內(nèi)膜腺癌，尿路上皮癌陽性表達(dá)。卵巢粘液性癌，前列腺癌，肝癌陰性表達(dá)性表達(dá)。卵巢粘液性癌，前列腺癌，肝癌陰性表達(dá)與與CK20CK20和其他抗體合用對判斷腺癌的來源具有重要價和其他抗體合用對判斷腺癌的來源具有重要價值。值。常用的常用的CKCK抗體抗體CK7CK7和和CK20CK20：分子量分子量46KD46KD，正常胃腸道，尿路上皮，正常胃腸道，尿路上皮，MerkelMerkel細(xì)胞陽性表細(xì)胞陽性表達(dá)，肝細(xì)胞，乳腺，肺陰性表達(dá)達(dá)，肝細(xì)胞，乳腺，肺陰性表達(dá)主要用于胃腸道

7、腺癌，卵巢粘液性癌，主要用于胃腸道腺癌，卵巢粘液性癌，MerkelMerkel細(xì)胞癌的診斷細(xì)胞癌的診斷鱗癌，甲狀腺腫瘤，胸腺瘤陰性表達(dá)鱗癌，甲狀腺腫瘤，胸腺瘤陰性表達(dá)膽道和胰管的腺癌，小腸類癌，前列腺和間皮陽性表達(dá)膽道和胰管的腺癌，小腸類癌，前列腺和間皮陽性表達(dá)與與CK7CK7和其他抗體合用對判斷腺癌的來源具有重要價值。和其他抗體合用對判斷腺癌的來源具有重要價值。常用的常用的CKCK抗體抗體CK5/CK6CK5/CK6：l分子量為分子量為58KD58KD和和56KD56KD的角蛋白，存在于鱗狀上皮、導(dǎo)管的角蛋白，存在于鱗狀上皮、導(dǎo)管上皮的基底細(xì)胞、肌上皮細(xì)胞和間皮細(xì)胞，腺上皮不表上皮的基底細(xì)胞

8、、肌上皮細(xì)胞和間皮細(xì)胞，腺上皮不表達(dá)達(dá)l用于鱗癌和腺癌鑒別，間皮瘤和腺癌的鑒別用于鱗癌和腺癌鑒別，間皮瘤和腺癌的鑒別l導(dǎo)管上皮良惡性增生的鑒別導(dǎo)管上皮良惡性增生的鑒別34BE1234BE12（CKHCKH）: : 高分子量細(xì)胞角蛋白，前列腺基高分子量細(xì)胞角蛋白，前列腺基底細(xì)胞標(biāo)記，用于前列腺癌的診斷。底細(xì)胞標(biāo)記，用于前列腺癌的診斷。CK19:CK19: 40KD 40KD的角蛋白，在單層上皮和間皮中表達(dá)，在的角蛋白，在單層上皮和間皮中表達(dá)，在肝細(xì)胞不表達(dá)，與肝細(xì)胞不表達(dá)，與CK7CK7聯(lián)合用于鑒別肝細(xì)胞癌和膽管細(xì)聯(lián)合用于鑒別肝細(xì)胞癌和膽管細(xì)胞癌；甲狀腺腫瘤中，甲狀腺乳頭狀癌常彌漫強陽性胞癌；甲

9、狀腺腫瘤中，甲狀腺乳頭狀癌常彌漫強陽性表達(dá)，良性和其他癌很少表達(dá)或灶性陽性表達(dá)。表達(dá)，良性和其他癌很少表達(dá)或灶性陽性表達(dá)。CK14CK14：50KD50KD的角蛋白，在復(fù)層上皮表達(dá)，是鱗狀上皮的角蛋白，在復(fù)層上皮表達(dá)，是鱗狀上皮的主要標(biāo)記物。的主要標(biāo)記物。常用的常用的CKCK抗體抗體 間葉組織的標(biāo)記物間葉組織的標(biāo)記物 波形蛋白（波形蛋白（vimentinvimentin， VIMVIM） 肌組織標(biāo)記物：肌組織標(biāo)記物：DesminDesmin（結(jié)蛋白）（結(jié)蛋白）, , actinactin（肌動蛋（肌動蛋白）白）, myogenin, myogenin（肌漿蛋白），（肌漿蛋白），MyoD1Myo

10、D1（肌調(diào)節(jié)蛋白（肌調(diào)節(jié)蛋白）等）等 脈管標(biāo)記：血管內(nèi)內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記物：脈管標(biāo)記：血管內(nèi)內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記物：CD34,CD31,CD34,CD31,淋巴管淋巴管D2-40D2-40 組織細(xì)胞的標(biāo)記物：組織細(xì)胞的標(biāo)記物：CD68, CD163,CD68, CD163,等等 間皮細(xì)胞的標(biāo)記物：間皮細(xì)胞的標(biāo)記物：calretinincalretinin，WT-1WT-1、mesothelialmesothelial等等 用于鑒別軟組織腫瘤的來源用于鑒別軟組織腫瘤的來源淋巴造血系統(tǒng)的標(biāo)記淋巴造血系統(tǒng)的標(biāo)記 淋巴造血組織，尤其淋巴細(xì)胞在其發(fā)育和分化過淋巴造血組織，尤其淋巴細(xì)胞在其發(fā)育和分化過程中能形成許多

11、分化性抗原，應(yīng)用這些分化性抗原程中能形成許多分化性抗原，應(yīng)用這些分化性抗原的特異性單克隆抗體能區(qū)分出免疫表型不同的細(xì)胞的特異性單克隆抗體能區(qū)分出免疫表型不同的細(xì)胞系，而且還能區(qū)分出同一細(xì)胞系的不同亞型和不同系，而且還能區(qū)分出同一細(xì)胞系的不同亞型和不同分化階段的細(xì)胞群，因此可以利用此特性來診斷和分化階段的細(xì)胞群，因此可以利用此特性來診斷和分類惡性淋巴瘤和白血病。分類惡性淋巴瘤和白血病。淋巴造血系統(tǒng)的標(biāo)記淋巴造血系統(tǒng)的標(biāo)記 白細(xì)胞共同抗原（白細(xì)胞共同抗原（leucocyte common leucocyte common antigen,LCA,CD45antigen,LCA,CD45） 免疫球蛋

12、白免疫球蛋白(immunoglobulin Ig)(immunoglobulin Ig) 全全B B細(xì)胞標(biāo)記物細(xì)胞標(biāo)記物:CD20, CD79a, PAX5, Bob1:CD20, CD79a, PAX5, Bob1等等 全全T T細(xì)胞標(biāo)記物：細(xì)胞標(biāo)記物：CD3CD3胞膜胞膜, CD43, CD5, CD7,CD2, CD43, CD5, CD7,CD2等等 T T淋巴細(xì)胞亞群標(biāo)記物：淋巴細(xì)胞亞群標(biāo)記物：CD4,CD8CD4,CD8 粒細(xì)胞和單核粒細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞相關(guān)標(biāo)記物巨噬細(xì)胞相關(guān)標(biāo)記物:MPO, CD34,CD68:MPO, CD34,CD68等等 漿細(xì)胞標(biāo)記：漿細(xì)胞標(biāo)記：CD38CD

13、38，CD138CD138 其他：其他：CD30,TDT,CD15CD30,TDT,CD15，CD56CD56，ALKALK，MUM1MUM1神經(jīng)組織標(biāo)記物神經(jīng)組織標(biāo)記物 膠質(zhì)纖維酸性蛋白膠質(zhì)纖維酸性蛋白 (glial fibrillary acidic protein (glial fibrillary acidic protein GFAP) GFAP) S-lOO S-lOO蛋白蛋白(S100 Protein) (S100 Protein) 神經(jīng)元特異性烯醇酶神經(jīng)元特異性烯醇酶 (Neuron Specific Enolase(Neuron Specific Enolase，NSE)NS

14、E) 髓磷脂堿性蛋白髓磷脂堿性蛋白(myelin basic protein(myelin basic protein，MBP)MBP)神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)標(biāo)記物神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)標(biāo)記物 lNSE(Neuron Specific Enolase,NSE(Neuron Specific Enolase,神經(jīng)元特異性烯醇酶神經(jīng)元特異性烯醇酶) )lCgA(chromogranin A CgA(chromogranin A 嗜鉻顆粒蛋白嗜鉻顆粒蛋白A)A)lSyn(synaptophysin Syn(synaptophysin 突觸囊泡蛋白突觸囊泡蛋白) )lCD56CD56器官或組織特異性抗原標(biāo)記物器官或組

15、織特異性抗原標(biāo)記物 l前列腺標(biāo)記物：前列腺標(biāo)記物： PSAPSA， PSAPPSAP，PSMAPSMA，P504sP504sl甲狀腺標(biāo)記物：甲狀腺標(biāo)記物：TGTG，CTCT，TTF-1TTF-1l甲狀旁腺：甲狀旁腺：PTHPTHl黑色素細(xì)胞標(biāo)記物：黑色素細(xì)胞標(biāo)記物：MB45MB45，S100S100，MelanAMelanAl肺腺癌的標(biāo)記物：肺腺癌的標(biāo)記物：TTF-1TTF-1，SP-ASP-A和和B B， Napsin ANapsin Al肝細(xì)胞癌標(biāo)記物：肝細(xì)胞癌標(biāo)記物：Hep-1Hep-1l乳腺：乳腺： MammaglobioMammaglobio，GCDFP15GCDFP15l結(jié)腸：結(jié)腸

16、： CDX2CDX2，B-cateninB-cateninl宮頸癌：宮頸癌：P16P16病原體的標(biāo)記病原體的標(biāo)記 EBVEBV HPVHPV HBsAg HBsAg 和和HBCAgHBCAg與腫瘤預(yù)后相關(guān)的標(biāo)記物lKi67Ki67：核陽性，與腫瘤增殖相關(guān)，細(xì)胞周期中除：核陽性，與腫瘤增殖相關(guān)，細(xì)胞周期中除G0G0期細(xì)期細(xì)胞外，其余細(xì)胞均表達(dá)。腫瘤陽性細(xì)胞數(shù)越高，預(yù)后越胞外，其余細(xì)胞均表達(dá)。腫瘤陽性細(xì)胞數(shù)越高，預(yù)后越差。差。lP53P53：核陽性，腫瘤抑制基因，突變型：核陽性，腫瘤抑制基因，突變型P53P53蛋白穩(wěn)定表達(dá)蛋白穩(wěn)定表達(dá)，P53P53蛋白陽性表明腫瘤預(yù)后差。蛋白陽性表明腫瘤預(yù)后差。l

17、nm23nm23：胞漿陽性，抗轉(zhuǎn)移基因，其表達(dá)降低與腫瘤的高：胞漿陽性，抗轉(zhuǎn)移基因，其表達(dá)降低與腫瘤的高轉(zhuǎn)移能力，復(fù)發(fā)相關(guān)。轉(zhuǎn)移能力，復(fù)發(fā)相關(guān)。與腫瘤多藥耐藥相關(guān)的標(biāo)記物Her-2Her-2ERCC1ERCC1PRM1PRM1BRCA1BRCA1作用機(jī)制作用機(jī)制抗凋亡，參與調(diào)抗凋亡，參與調(diào)節(jié)節(jié)P13K/AKP13K/AK途徑和途徑和MAPKMAPK激活途徑激活途徑過表達(dá)使停滯在過表達(dá)使停滯在G2/MG2/M期的損傷期的損傷DNADNA迅速恢復(fù)迅速恢復(fù)DNADNA修復(fù)的限速修復(fù)的限速酶，吉西他濱的酶，吉西他濱的結(jié)合位點結(jié)合位點高表達(dá)使細(xì)胞修高表達(dá)使細(xì)胞修復(fù)能力增強復(fù)能力增強陽性部位陽性部位胞膜胞

18、膜胞核胞核胞漿胞漿胞漿胞漿/ /核核判斷標(biāo)準(zhǔn)判斷標(biāo)準(zhǔn) + +耐藥藥物耐藥藥物環(huán)磷酰胺環(huán)磷酰胺三苯氧胺三苯氧胺氨甲喋呤氨甲喋呤順氯氨鉑順氯氨鉑吉西他濱吉西他濱/ /順鉑順鉑順鉑順鉑與腫瘤多藥耐藥相關(guān)的標(biāo)記物MDR1MDR1GSTGSTTSTSMDM2MDM2作用機(jī)制作用機(jī)制藥泵作用藥泵作用解毒作用解毒作用解毒作用解毒作用轉(zhuǎn)化作用轉(zhuǎn)化作用陽性部位陽性部位胞膜和漿胞膜和漿胞漿胞漿胞漿胞漿胞漿胞漿判斷標(biāo)準(zhǔn)判斷標(biāo)準(zhǔn) + +10%10%耐藥藥物耐藥藥物恩環(huán)類恩環(huán)類紫衫類紫衫類長春花堿（新堿）長春花堿（新堿）順鉑順鉑恩環(huán)類恩環(huán)類氮芥氮芥環(huán)磷酰胺環(huán)磷酰胺5-FU5-FU多藥耐藥多藥耐藥與腫瘤靶向藥物有關(guān)的免疫

19、標(biāo)記物作用靶點作用靶點腫瘤類型腫瘤類型Tratugumab(Tratugumab(赫賽汀）赫賽?。〩ER2HER2乳腺癌和胃癌乳腺癌和胃癌CetuximabCetuximab（艾比妥）（艾比妥）EGFREGFR結(jié)腸癌，肺腺癌結(jié)腸癌，肺腺癌BevacizumabBevacizumab（阿瓦斯?。ò⑼咚雇。￢EGFVEGF轉(zhuǎn)移性大腸癌，腎癌轉(zhuǎn)移性大腸癌，腎癌LmatinibLmatinib（格列衛(wèi)）（格列衛(wèi)）C-KitC-Kit胃腸道間質(zhì)瘤，慢粒胃腸道間質(zhì)瘤，慢粒RituximabRituximab（美羅華）（美羅華）CD20CD20淋巴瘤淋巴瘤免疫組織化學(xué)在外科病理診斷中的應(yīng)用免疫組織化學(xué)在外

20、科病理診斷中的應(yīng)用免疫組織化學(xué)在外科病理診斷中的應(yīng)用免疫組織化學(xué)在外科病理診斷中的應(yīng)用 惡性腫瘤惡性腫瘤 組織的起源組織的起源? ? 良性還是惡性良性還是惡性? ? 腫瘤是原位還是侵襲性腫瘤是原位還是侵襲性? ? 腫瘤分類腫瘤分類? ? 癌的預(yù)后（包括分期）癌的預(yù)后（包括分期） 決定治療的靶向決定治療的靶向 其它方面其它方面 . .未分化惡性腫瘤的性質(zhì)未分化惡性腫瘤的性質(zhì)? ? 最佳首選的抗體組合方案：最佳首選的抗體組合方案：CK-panCK-pan（如（如MNF-116MNF-116），或雞尾酒調(diào)制的），或雞尾酒調(diào)制的CKCK抗體抗體 （上皮性腫瘤）（上皮性腫瘤）LCALCA（淋巴瘤）（淋巴

21、瘤）S100S100蛋白（惡性黑色素瘤，雖然一些癌會陽性蛋白（惡性黑色素瘤，雖然一些癌會陽性表達(dá)）表達(dá)）惡性腫瘤的性質(zhì)惡性腫瘤的性質(zhì)LCALCACytokeratinCytokeratinS100S100淋巴瘤淋巴瘤+ +* *- - -癌癌- -+ +-/+-/+惡性黑色素瘤惡性黑色素瘤- - -+ +肉瘤肉瘤- - -（有時（有時 + +）-/+-/+ 一些淋巴瘤一些淋巴瘤 LCA LCA 陰性表達(dá)陰性表達(dá), , 尤其是間變性大細(xì)胞性淋巴瘤尤其是間變性大細(xì)胞性淋巴瘤和淋巴母細(xì)胞性淋巴瘤和淋巴母細(xì)胞性淋巴瘤 兒童小圓細(xì)胞腫瘤的性質(zhì)兒童小圓細(xì)胞腫瘤的性質(zhì) 淋巴瘤淋巴瘤/ /白血病白血病: :

22、LCA+, CD99+/LCA+, CD99+/ 橫紋肌肉瘤橫紋肌肉瘤: : Desmin+, MyoD1+, myogenin+Desmin+, MyoD1+, myogenin+ EwingEwing肉瘤肉瘤/ /PNET: CD99+, Syn PNET: CD99+, Syn /+/+、s-100+s-100+ 神經(jīng)母細(xì)胞瘤神經(jīng)母細(xì)胞瘤: : CD99CD99, Syn+,CGA+, Syn+,CGA+、 NF+NF+ 促結(jié)締組織生成性小細(xì)胞腫瘤促結(jié)締組織生成性小細(xì)胞腫瘤: : CK +, Desmin+, CK +, Desmin+, WT1+WT1+癌可能的起源癌可能的起源 較常見

23、的臨床情況：較常見的臨床情況：淋巴結(jié)或其它部位不明起源的轉(zhuǎn)移癌淋巴結(jié)或其它部位不明起源的轉(zhuǎn)移癌卵巢腺癌，懷疑為胃腸道癌轉(zhuǎn)移卵巢腺癌，懷疑為胃腸道癌轉(zhuǎn)移膀胱腺癌，懷疑為侵犯膀胱腺癌，懷疑為侵犯/ /轉(zhuǎn)移的前列腺癌或結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移的前列腺癌或結(jié)腸癌有結(jié)腸癌病史的患者肺部有一孤立性結(jié)節(jié)：結(jié)腸癌有結(jié)腸癌病史的患者肺部有一孤立性結(jié)節(jié)：結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移還是新的肺原發(fā)性腫瘤？轉(zhuǎn)移還是新的肺原發(fā)性腫瘤？不明起源癌的免疫組織化學(xué)應(yīng)用不明起源癌的免疫組織化學(xué)應(yīng)用器官特異性標(biāo)記物 甲狀腺：Thyroglobulin（在100% 濾泡和乳頭狀癌+）TTF-1 Calcitonin（在90% 髓樣癌+） 前列腺: PSA 女性生

24、殖道：CA125（黏液型常常陰性；間皮瘤和有時肺、乳腺及胰膽管腺癌會表達(dá)陽性）不明起源癌的免疫組織化學(xué)應(yīng)用不明起源癌的免疫組織化學(xué)應(yīng)用器官特異性標(biāo)記物 肺：TTF-1（80% 腺癌陽性） 乳腺：Mmaglobin/GCDFP-15（50% 病例陽性；但涎腺和汗腺也會陽性） 肝：HEP-1（90%陽性） 腸：CDX-2 （100%一致性強陽性） 膀胱：Uroplakin（50%陽性）應(yīng)用特殊的應(yīng)用特殊的CKCK抗體：抗體：不明起源的腺癌不明起源的腺癌CK7 和 CK20 都是非器官特異性標(biāo)記物，但對腺癌的起源判斷十分有用 CK 7CK 7CK20CK20CK7+ CK20+CK7+ CK20+-

25、 - 女性生殖道黏液腺癌女性生殖道黏液腺癌- - 一些胃癌一些胃癌- -胰腺癌胰腺癌- -膽管癌膽管癌CK7+ CK20 CK7+ CK20 - - 各種腺癌各種腺癌- - 肺癌肺癌- - 乳腺癌乳腺癌- - 女性生殖道癌女性生殖道癌CK7 CK7 CK20+ CK20+- - 胃腸腺癌胃腸腺癌CK7 CK7 CK20 CK20 - - 前列腺癌前列腺癌- - 腎細(xì)胞癌腎細(xì)胞癌- - 肝細(xì)胞癌肝細(xì)胞癌 舉例：舉例：CK7CK7和和CK20CK20聯(lián)合應(yīng)用：聯(lián)合應(yīng)用： 3535歲女性，左頸淋巴結(jié)腫大，活檢提示為轉(zhuǎn)移性腺癌歲女性，左頸淋巴結(jié)腫大，活檢提示為轉(zhuǎn)移性腺癌，CTCT掃描未發(fā)現(xiàn)原發(fā)灶，免疫

26、組化標(biāo)記顯示腫瘤細(xì)胞掃描未發(fā)現(xiàn)原發(fā)灶，免疫組化標(biāo)記顯示腫瘤細(xì)胞表達(dá)表達(dá)CK7CK7（- -），），CK20(+)CK20(+)，CDX2CDX2（+ +），提示結(jié)直腸），提示結(jié)直腸來源，腸鏡檢查在橫結(jié)腸發(fā)現(xiàn)來源，腸鏡檢查在橫結(jié)腸發(fā)現(xiàn)12mm12mm的病灶，活檢證的病灶，活檢證實為腺癌。實為腺癌。不明起源的鱗癌或鱗樣癌中的不明起源的鱗癌或鱗樣癌中的免疫組織化學(xué)應(yīng)用免疫組織化學(xué)應(yīng)用 因為不同部位的鱗狀細(xì)胞或鱗狀細(xì)胞癌并不顯示其獨特的免疫表型，鑒別較困難 CD5：陽性支持胸腺起源 CK20：陽性提示為膀胱的移行細(xì)胞癌不明起源的小細(xì)胞癌中不明起源的小細(xì)胞癌中免疫組織化學(xué)的應(yīng)用免疫組織化學(xué)的應(yīng)用 CK2

27、0：Merkels 細(xì)胞癌陽性表達(dá) TTF-1：90% 肺小細(xì)胞癌陽性表達(dá)，但在肺外的小細(xì)胞癌也會陽性（40%）卵巢腺癌：原發(fā)還是腸起源卵巢腺癌：原發(fā)還是腸起源? ?卵巢起源卵巢起源腸起源腸起源CK7CK7+ +CK20CK20 ( (但常會黏液腺癌陽性但常會黏液腺癌陽性表達(dá)表達(dá)) )+ +CDX-2CDX-2 ( (但黏液型可以陽性但黏液型可以陽性) )+ +膀胱活檢腺癌：膀胱活檢腺癌： 原發(fā)，前列腺還是結(jié)直腸起源原發(fā)，前列腺還是結(jié)直腸起源? ?膀胱腺癌膀胱腺癌前列腺癌前列腺癌結(jié)直腸腺癌結(jié)直腸腺癌CK7CK7+ (65-80%)+ (65-80%)CK20CK20+ (50-85%)+ (5

28、0-85%)+ +PSAPSA+ +CDX-2CDX-2+ (80%)+ (80%)+ +-catenin (-catenin (細(xì)胞核細(xì)胞核) )+ +肺腺癌：原發(fā)還是結(jié)直腸起源肺腺癌：原發(fā)還是結(jié)直腸起源? ?肺起源肺起源結(jié)直腸起源結(jié)直腸起源CK7CK7+ +CK20CK20+ +TTF-1TTF-1+ +CDX-2CDX-2+ +腫瘤良惡性鑒別腫瘤良惡性鑒別 在以下一些情況形態(tài)學(xué)診斷困難：在活檢組織中擠壓變形的細(xì)胞是癌細(xì)胞還是正常的淋巴細(xì)胞?黏膜活檢中藏有癌細(xì)胞嗎?增殖的細(xì)胞是良性增生還是惡性腫瘤?人為擠壓的活檢標(biāo)本人為擠壓的活檢標(biāo)本 有些活檢（如支氣管活檢）顯示人為擠壓或燒灼（小細(xì)胞癌常

29、見）：不能確認(rèn)失常的細(xì)胞是否為癌細(xì)胞 若 CK 陽性的非正常上皮細(xì)胞存在于一定的部位（如間質(zhì)）或以某種組織結(jié)構(gòu)（如浸潤性條索）存在則可診斷為癌 不需再次活檢就可作出診斷鼻咽部活檢：有沒有癌鼻咽部活檢：有沒有癌? ? 對部分鼻咽癌（NPC）病例診斷較難，因為腫瘤細(xì)胞被大量的淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞所掩蓋（淋巴上皮癌樣） CK-pan 染色: 仔細(xì)觀察異常的陽性表現(xiàn)，如在完整的黏膜組織中有不規(guī)則的島狀、帶狀或單個分散的陽性細(xì)胞（正常僅表面及隱窩上皮細(xì)胞CK+）胃活檢：是彌漫型癌胃活檢：是彌漫型癌? ? 胃活檢可能有不易察覺的彌漫性癌；對印戒細(xì)胞癌和黏液細(xì)胞癌的鑒別可能困難 CK-pan染色：存在于固有膜中

30、異常部位（正常沒有CK+的細(xì)胞）和以異常結(jié)構(gòu)（單個或索狀細(xì)胞）存在的腫瘤細(xì)胞可被來辯認(rèn)出來漿膜腔積液或活檢：異常細(xì)胞漿膜腔積液或活檢：異常細(xì)胞是癌細(xì)胞還是反應(yīng)性間皮細(xì)胞是癌細(xì)胞還是反應(yīng)性間皮細(xì)胞? ? 漿膜腔積液或活檢中的一些異常細(xì)胞很難確定是癌細(xì)漿膜腔積液或活檢中的一些異常細(xì)胞很難確定是癌細(xì)胞還是反應(yīng)性間皮細(xì)胞胞還是反應(yīng)性間皮細(xì)胞 免疫組織化學(xué)的應(yīng)用：免疫組織化學(xué)的應(yīng)用：BerEP4 BerEP4 或或 MOC-31MOC-31：陽性傾向為癌：陽性傾向為癌TTF-1TTF-1：肺癌表達(dá)陽性：肺癌表達(dá)陽性CalretininCalretinin：陽性傾向為間皮細(xì)胞：陽性傾向為間皮細(xì)胞反應(yīng)性淋巴

31、組織增生還是淋巴瘤反應(yīng)性淋巴組織增生還是淋巴瘤? ? 診斷一個淋巴瘤須符合以下條件：診斷一個淋巴瘤須符合以下條件：異常免疫結(jié)構(gòu)異常免疫結(jié)構(gòu)侵襲性侵襲性/ /破壞性的依據(jù)破壞性的依據(jù)異常的免疫表型異常的免疫表型正常免疫結(jié)構(gòu)正常免疫結(jié)構(gòu) （反應(yīng)性淋巴組織：淋巴結(jié)或結(jié)外）（反應(yīng)性淋巴組織：淋巴結(jié)或結(jié)外）B B 淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞( (CD20+) CD20+) 形成的結(jié)節(jié)形成的結(jié)節(jié)T T 淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞( (CD3+)CD3+)；僅孤立的小群細(xì)胞或僅孤立的小群細(xì)胞或小群小群 CD20+CD20+細(xì)胞細(xì)胞表明表明 B B 細(xì)胞淋巴瘤的異常免疫結(jié)構(gòu)細(xì)胞淋巴瘤的異常免疫結(jié)構(gòu)B B 淋巴細(xì)胞濾泡淋巴細(xì)胞濾泡

32、 （CD20+CD20+）彌漫成片彌漫成片CD20+ CD20+ 的的B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞* *異常免疫表型不適用于異常免疫表型不適用于T T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤, ,因為反應(yīng)性病變會有成片因為反應(yīng)性病變會有成片的的T T淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞乳腺：導(dǎo)管增生或?qū)Ч茉话┤橄伲簩?dǎo)管增生或?qū)Ч茉话? ? 導(dǎo)管增生與DCIS很難鑒別-這對病人的治療非常關(guān)鍵 在芯針穿刺中更加困難 免疫組化方法：高分子量 CK（如 34E12）在良性病變強陽性表達(dá)，但在 DCIS 通常陰性ER 在良性病變中通常呈局灶性陽性表達(dá)，而在低度DCIS 呈彌漫強陽性表達(dá)，提示為克?。[瘤）性過程CK5/6、CK14原位癌或浸潤性

33、癌原位癌或浸潤性癌? ? 在腺管周圍有基底或肌上皮細(xì)胞的器官，此問題已能夠解決，如乳腺、前列腺、涎腺 在原位病變中，仍然有完整的基底或肌上皮細(xì)胞圍繞，雖然有時拉長或稀疏了，而浸潤性病變周圍缺乏這些細(xì)胞乳腺的原位癌或浸潤性癌乳腺的原位癌或浸潤性癌? ? Actin、calponin 或 p63能清晰地顯示乳腺肌上皮細(xì)胞硬化性腺病與小管癌的鑒別小葉癌化的導(dǎo)管內(nèi)癌/硬化性腺病還是真正的浸潤性癌?前列腺原位癌還是浸潤性癌前列腺原位癌還是浸潤性癌? ? 34E12、CK14或 p63能清晰地顯示基底細(xì)胞PIN還是前列腺浸潤性癌? 擁擠或看上去不尋常的腺泡病灶：良性（如硬化性腺病或腺?。┻€是前列腺癌淋巴瘤

34、的分類淋巴瘤的分類 由于現(xiàn)代淋巴瘤分類需要免疫組織化學(xué)支持，因此應(yīng)該應(yīng)用免疫組化染色標(biāo)記 B B祖細(xì)胞祖細(xì)胞前前B B細(xì)胞細(xì)胞未成熟的未成熟的B B細(xì)胞細(xì)胞成熟的成熟的B B細(xì)胞細(xì)胞激活的激活的 B B 細(xì)胞細(xì)胞漿細(xì)胞漿細(xì)胞前體細(xì)胞前體細(xì)胞; ; 非抗原依賴型非抗原依賴型初始初始 B B細(xì)胞細(xì)胞; ; 非抗原依賴型非抗原依賴型生發(fā)中心和標(biāo)志生發(fā)中心和標(biāo)志; ; 抗原依賴型抗原依賴型TdTTdTCD20, CD22CD20, CD22CD19, PAX5CD19, PAX5CD79aCD79aCD10CD10Bcl-6Bcl-6CD138CD138細(xì)胞漿細(xì)胞漿 CD22CD22淋巴瘤分類淋巴瘤分

35、類CD20 CD20 和和 CD3 CD3 組合組合CD20+CD20+B B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤; ;必要時增加必要時增加其它標(biāo)記物染色其它標(biāo)記物染色CD3+CD3+T T或或NKNK細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤; ;如需要可增加如需要可增加其它標(biāo)記物染色其它標(biāo)記物染色（如（如CD56, CD30CD56, CD30）CD20-CD20- CD3- CD3-非淋巴造血系統(tǒng)腫瘤非淋巴造血系統(tǒng)腫瘤? ?漿細(xì)胞瘤漿細(xì)胞瘤? ?漿母細(xì)胞性淋巴瘤漿母細(xì)胞性淋巴瘤? ?T T 細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤? ?淋巴母細(xì)胞性淋巴瘤淋巴母細(xì)胞性淋巴瘤? ?內(nèi)分泌腫瘤的分類內(nèi)分泌腫瘤的分類 檢測激素產(chǎn)物胰島細(xì)胞瘤：分泌胰島素

36、的腫瘤很少為惡性，而分泌胃泌素或胰高血糖素的腫瘤常為惡性垂體腺瘤：高泌乳素血癥是由泌乳素瘤（腫瘤細(xì)胞prolactin +）還是由于泌乳素抑制因子紊亂刺激泌乳素分泌的另一類腫瘤軟組織腫瘤的分類軟組織腫瘤的分類 標(biāo)記物是有限的纖維組織細(xì)胞瘤沒有可靠的標(biāo)記物S100：神經(jīng)鞘膜腫瘤 (良性：彌漫；惡性：片狀或甚至陰性)EMA：神經(jīng)束膜瘤, 滑膜肉瘤Actin，desmin：肌和肌纖維母細(xì)胞腫瘤Cytokeratin：滑膜肉瘤、上皮樣肉瘤、橫紋肌樣瘤軟組織腫瘤的分類軟組織腫瘤的分類CD31：血管腫瘤CD34：血管腫瘤、孤立性纖維性腫瘤、隆突性皮膚纖維肉瘤、血管周細(xì)胞瘤、梭形細(xì)胞脂肪瘤、上皮樣肉瘤CD9

37、9：Ewings肉瘤/PNETHMB45：血管周上皮樣細(xì)胞腫瘤重要的特異性標(biāo)記物，如血管平滑肌脂肪瘤、淋巴管肌瘤病、糖瘤肝臟腫瘤的分類肝臟腫瘤的分類 是肝細(xì)胞肝癌（HCC）還是上皮樣血管平滑肌脂肪瘤HCC最好的標(biāo)記物是HEP-1（陽性 90%）HMB-45標(biāo)記上皮樣血管平滑肌脂肪瘤性腺腫瘤的分類性腺腫瘤的分類 支持性索腫瘤診斷的幾種標(biāo)記物：InhibinCD99 Melan-A/MART-1 生殖細(xì)胞腫瘤標(biāo)記物：PLAPc-kit/CD117胸膜起源的惡性腫瘤分類胸膜起源的惡性腫瘤分類 鑒別間皮瘤與腺癌非常困難 支持間皮瘤診斷的標(biāo)記Calretinin高分子量CK（如CK5/6）WT1 支持腺

38、癌診斷的標(biāo)記BerEP4（盡管在間皮瘤中偶爾也有陽性表達(dá)）MOC-31TTF-1（肺源性腺癌）腫瘤的預(yù)后判斷：預(yù)后因子腫瘤的預(yù)后判斷：預(yù)后因子 激素受體，如 ER/PR+ 在乳腺癌中提示良好預(yù)后 增殖標(biāo)記物（Ki67）是某些類型腫瘤的預(yù)后因子 癌基因及抑癌基因產(chǎn)物，c-erbB2, Rb, p16, p21, p27, ALK1腫瘤的預(yù)后判斷：預(yù)后因子腫瘤的預(yù)后判斷：預(yù)后因子 在某些淋巴瘤中，免疫組化標(biāo)記可以提供預(yù)后信息高Ki67表達(dá)與套細(xì)胞淋巴瘤的不良預(yù)后有關(guān)間變性大細(xì)胞淋巴瘤：ALK+者預(yù)后好于ALK-者原發(fā)性系統(tǒng)性原發(fā)性系統(tǒng)性 ALCLALCL的總體生存率的總體生存率(Falini et

39、 al, 1999)(Falini et al, 1999)0510年ALCL, ALK+100%50%ALCL, ALK-腫瘤預(yù)后因素：病變范圍腫瘤預(yù)后因素：病變范圍 由于有些腫瘤呈彌漫性生長方式而且細(xì)胞較?。ㄅc間由于有些腫瘤呈彌漫性生長方式而且細(xì)胞較?。ㄅc間質(zhì)細(xì)胞相似），因此很難確定其病變范圍，如彌漫性胃癌質(zhì)細(xì)胞相似），因此很難確定其病變范圍，如彌漫性胃癌、乳腺小葉癌。、乳腺小葉癌。CK-panCK-pan能夠顯示所有腫瘤細(xì)胞能夠顯示所有腫瘤細(xì)胞腫瘤預(yù)后因素：病變范圍腫瘤預(yù)后因素：病變范圍 在腫瘤切除標(biāo)本中，由于切緣燒灼后的出現(xiàn)的假象，很難判斷切緣擠壓的細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞還是炎癥細(xì)胞，標(biāo)記CK

40、-pan可以解決這一問題腫瘤預(yù)后因素：隱匿性轉(zhuǎn)移的分期腫瘤預(yù)后因素：隱匿性轉(zhuǎn)移的分期 淋巴結(jié)和骨髓微轉(zhuǎn)移通常提示預(yù)后差 對形態(tài)學(xué)上陰性的前哨淋巴結(jié)，應(yīng)常規(guī)應(yīng)用免疫染色：乳腺癌使用 CK黑色素瘤使用 S100 或 HMB45 前哨淋巴結(jié)陽性提示應(yīng)進(jìn)行淋巴結(jié)清掃確定治療的靶分子確定治療的靶分子 針對腫瘤細(xì)胞已知畸變或特異性的生物學(xué)特征的靶向治療方法日益增多 靶向治療費用常常較高，所以判斷腫瘤是否會對治療有反應(yīng)是非常重要的 需要明確是否有相關(guān)靶分子的表達(dá) 免疫染色的可靠性和可重復(fù)性至關(guān)重要（陽性/陰性和染色強度）確定治療的靶分子確定治療的靶分子 乳腺癌：激素受體（ER, PR）激素（如 Tamoxi

41、fen）用于乳腺癌治療已有相當(dāng)長的時間了ER/PR陽性表達(dá)的腫瘤比陰性更敏感確定治療的靶分子確定治療的靶分子 抗-CD20（Rituximab）：愈來愈多地用于 B 細(xì)胞淋巴瘤和結(jié)節(jié)性淋巴細(xì)胞為主型Hodgkins淋巴瘤的治療只有表達(dá) CD20有反應(yīng)治療后，殘余或復(fù)發(fā)的腫瘤會出現(xiàn) CD20 失表達(dá)（抗-CD20 不再有效）確定治療的靶分子確定治療的靶分子 抗c-erbB2（Herceptin, Trastuzumab）已在表達(dá)、尤其是強陽性表達(dá)c-erbB2 的乳腺癌病人有效。確定治療的靶分子確定治療的靶分子 STI-571（Gleevec, Imatinib），是酪胺酸激酶受體抑制劑，對胃腸

42、間質(zhì)瘤治療有效顯然在進(jìn)行治療前須確證c-kit/CD117的陽性表達(dá)腫瘤學(xué)家常要求病理學(xué)家對各種肉瘤進(jìn)行 c-kit 染色，希望對陽性病例進(jìn)行 STI-571 治療決定治療靶分子決定治療靶分子 抗表皮生長因子受體（anti-EGFR, Gefitinib）：應(yīng)用在肺癌、頭頸部癌及一些其它類型的癌的治療EGFR 正常表達(dá)在上皮細(xì)胞，通常在癌組織中強陽性表達(dá)證實診斷證實診斷 有時根據(jù)形態(tài)學(xué)特征已確定或幾乎確定診斷，但因為病變罕見或必需免疫組織化學(xué)證實時，要做一些有針對性、有限的免疫組化染色。證實診斷證實診斷 某些病變的診斷可得以證實:Rosai-Dorfman 疾?。⊿100 蛋白）郎格罕氏細(xì)胞組織細(xì)胞增生癥（S100 蛋白, CD1a）胃腸道間質(zhì)瘤（c-kit/CD117）類癌（Syn/CgA）感染, 如 CMV, 皰疹, 肺孢子囊蟲, 弓形蟲病例1 女，36歲