HIV實驗室SOP文件-新版

1、HIV實驗室SO四件-新版3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 0 頁共 70 頁目錄HIV 篩查實驗室的設(shè)置及人員情況3HIV 篩查實驗室工作治理程序4HIV 篩查實驗室工作流程圖6HIV 篩查實驗室規(guī)章制度7一、實驗室工作制度 7二、崗位責任制 7三、標本治理制度 8四、試劑治理制度 11五、污染區(qū)工作守那么 12六、清潔區(qū)工作守那么 13七、環(huán)境消毒隔離制度 13八、實驗臺消毒舉措 14九、廢棄物處置和實驗室消毒 15十、消毒液的配置及使用舉措 16十一、消防平安制度 16十二、生物平安防護制度

2、16十三、職業(yè)暴露的防護及處理舉措 17十四、篩查檢驗程序 18十五、檢測結(jié)果的判定方法 25十六、檢測結(jié)果報告規(guī)程25十七、檢測結(jié)果的判定方法 26十八、檢驗結(jié)果的解釋 27十九、檢測數(shù)據(jù)的記錄與保存 28二十、呈陽性反響標本的處理程序 28二十一、檢測數(shù)據(jù)季報方案和程序 29二十二、感染追蹤處理方案 30二十三、保密程序制度 31二十四、質(zhì)量治理制度 323 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 1 頁共 70 頁二十五、室內(nèi)質(zhì)控分析治理制 33二十六、外部質(zhì)控血清的制備和保存 34二十七、儀器的使用維

3、護 35人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒酶聯(lián)免疫法36程序 HIV-抗體初篩試驗標準操作酶聯(lián)免疫法37人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒酶聯(lián)免疫法38人類免疫缺陷病毒抗體檢測膠體金法39科華酶標儀的標準操作程序SOP40科華全自動洗板機標準操作規(guī)程40加樣器的維護保養(yǎng)程序41力口樣槍校準記錄41生物平安柜的標準操作程序SOP42離心機操作維護規(guī)程47室內(nèi)質(zhì)量限制的標準操作程序48室間質(zhì)量評價的標準操作程序EQA55實驗室意外和事故處理58艾滋病的職業(yè)暴露后預(yù)防60附表 1HIV 抗體篩查報告61附表 2HIV 抗體復檢檢測單62附表 3HIV 抗體檢測數(shù)季報表65附表 4 艾滋病職業(yè)暴露個案登記表6

4、6附表 5 艾滋病防治工作人員職業(yè)暴露事故匯總表 703 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 2 頁共 70 頁HIV篩查實驗室的設(shè)置及人員情況為了更好發(fā)揮艾滋病檢測在艾滋病防治工作中的作用,根據(jù)?全國艾滋病檢測技術(shù)標準?對于艾滋病的檢測要求,我院檢驗科設(shè)置了獨立的 HIHIV V 篩查實驗室.為了使檢測工作能夠正常進行,保證 HIVHIV檢測結(jié)果的正確性和準確性,我們不僅對工作環(huán)境條件和檢測設(shè)施加以整改,而且建立了完整的實驗室標準化操作規(guī)程,以保證 HIVHIV 檢測結(jié)果的準確有效.HIVHIV 檢測實

5、驗室分為清潔區(qū)、半污染區(qū)和操作區(qū),配備了專用的的生物平安柜、電腦、冰箱、酶標儀、洗板機、恒溫培養(yǎng)箱、離心機、高壓消毒鍋等設(shè)備和平安防護用品等.根據(jù)HIHIV V 檢測實驗室工作的需要,我科配備從事 HIHIV V檢測工作人員4 4 名,其中專職工作治理人員 3 3 名,副高級技術(shù)人員 1 1 名,中級衛(wèi)生技術(shù)職稱人員 3 3名,所有人員從業(yè)年限均在 7 7 年以上.并積極參加省級、市級舉辦的 HIVHIV 檢測技術(shù)培訓,不斷提升質(zhì)量意識、技術(shù)水平和業(yè)務(wù)水平,保證 HIVHIV 檢測工作的質(zhì)量.HIVHIV 篩查實驗室負責人：賈向東人員：孟曉虹呂華郭長城3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實

6、驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 3 頁共 70 頁HIV篩查實驗室工作治理程序一、目的對 HIV 篩查實驗室工作全過程進行限制,保證檢驗工作符合規(guī)定要求,提供可靠的檢驗數(shù)據(jù)和有效的檢驗報告.二、范圍適用于本實驗室開展的各類醫(yī)學檢驗工作的各個環(huán)節(jié).三、責任1、工作人員負責門診檢驗樣品的采集.2、工作人員負責住院檢驗樣品的接收.3、負責人負責組織協(xié)調(diào)完成檢驗任務(wù),并負責對檢驗工作質(zhì)量的監(jiān)督.4、工作人員負責執(zhí)行檢驗任務(wù),做好檢驗記錄,填報檢驗數(shù)據(jù).5、報告授權(quán)審核人負責檢驗報告的簽發(fā)、發(fā)放.6、實驗室負責人負責檢驗資料的歸檔保管計算機工作.四

7、、工作程序一、檢驗工作分類本實驗室的檢驗工作,根據(jù)標本的來源不同分為采樣檢驗和送樣檢驗,根據(jù)工作性質(zhì)分為常規(guī)標本檢驗和檢驗質(zhì)量抽檢委托復檢.二、委托復檢工作需按以下程序執(zhí)行：1、當面核對標本姓名、性別、年齡及標本質(zhì)量等資料；2、按要求進行檢驗；3、必要時委托方可全程參與檢驗過程；4、其余程序與常規(guī)檢驗標本相同.三、采樣及樣品治理3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 4 頁共 70 頁采樣執(zhí)行本科程序文件?標本采樣治理程序?.樣品接收、分發(fā)和保管處理,執(zhí)行本科程序文件?標本治理程序?和?標本采樣治理程序?

8、.樣品一旦受理即給予受理編號.四、標本檢驗檢驗執(zhí)行本科程序文件?標本檢驗治理程序?和?檢驗工程標準操作規(guī)程?五、檢驗依據(jù)1、國家標準方法；2、部頒標準方法和檢驗標準；3、衛(wèi)生技術(shù)部門推薦使用方法；4、有關(guān)科技文獻或雜志上發(fā)表的方法；5、自編規(guī)程的使用執(zhí)行?檢驗方法確認程序?.六、檢驗實施檢驗人員按檢驗標準或作業(yè)指導書的要求按時完成檢驗任務(wù),并按程序文件?記錄檔案治理程序?做好原始記錄.七、檢驗報告的編制、復核和簽發(fā)按本科程序文件?檢驗報告治理程序?執(zhí)行.八、檢驗方法限制檢驗必須按?全國臨床檢驗操作規(guī)程?規(guī)定的方法或標準檢驗方法進行,也可用經(jīng)本科技術(shù)負責人批準的非標準檢驗方法進行.其他檢驗方法不

9、得采用.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 5 頁共 70 頁HIV篩查實驗室工作流程圖3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 6 頁共 70 頁HIV篩查實驗室規(guī)章制度一、實驗室工作制度1 .實驗室保持清潔整潔,儀器設(shè)備要擺放整潔,說明書手冊要妥善保管,原始記錄不得擅自修改和銷毀.2 .進入實驗室前要摘除首飾修剪指甲,以免投手套.3 .嚴禁在艾滋病實驗室進食,飲水,吸煙和化裝.4 .不要將與工作無關(guān)的物品帶入實

10、驗室.5 .進入實驗室要穿隔離衣,戴手套必要時戴雙層手套和防護眼鏡.6 .認真對待樣品,嚴格遵守操作規(guī)程.7 .采血時一定要注意平安,使用一次性注射器,謹慎操作預(yù)防刺傷皮膚以免造成污染.8 .嚴格執(zhí)行實驗室工作人員年度采血和備案年度,工作人員從事工作必須進行 HIV 抗體和乙肝,丙肝等肝炎病毒標記物的檢測,注射乙肝疫苗,每半年至一年進行一次抗體檢測,并保存笑血清樣品.二、崗位責任制1 .崗位責任制是保證工作質(zhì)量和醫(yī)療平安,提升工作效率的重要環(huán)節(jié).建立崗位責任制,做到人人分工責任明確,事事有人負責,立足本職,團結(jié)互助,相互協(xié)調(diào),保證各項任務(wù)的勝利完成.2 .HIV 篩查實驗室由有實踐經(jīng)驗的技術(shù)人

11、員負責.3 .牢固樹立把質(zhì)量放在第一位的思想,在工作中必須增強檢查和復查制度,以保證血液質(zhì)量及醫(yī)療平安.4 .交接工作必須認真負責,須核對實物和記錄,對工作一般情況、 存在問題和注意事項應(yīng)進行具體交待,否那么,發(fā)生問題由交班人負責.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 7 頁共 70 頁5 .職工臨時因故離開工作崗位,必須將工作委托給能勝任該項工作的人員,否那么,發(fā)生問題由原擔任該項工作者負責.6 .新參加工作的職工,在未熟悉和掌握工作前不能獨立工作不能頂崗位,在確能掌握經(jīng)考核合格前方可.7 .建立 H

12、IV 篩查實驗室專用的精密儀器和重要設(shè)備專責崗位制,其他人不得任意使用.嚴格根據(jù)儀器操作規(guī)程操作,不可擅自亂改設(shè)置.8 .但凡一物多人使用的,除共同負責外,應(yīng)指定一人為該崗位責任制負責人,負責指導正確操縱,定期平安檢查,經(jīng)常維護保養(yǎng),保持正常運轉(zhuǎn),該負責人有權(quán)制止任何違章操作和有害設(shè)備平安的行為.9 .人員責任分工：每日值班人員負責樣品的采集,接收,執(zhí)行檢驗任務(wù),做好檢驗記錄,填報檢驗數(shù)據(jù),簽發(fā)報告及實驗室儀器設(shè)備的日常維護和保養(yǎng).行政班人員負責協(xié)助值班人員做好實驗室的所有日常工作,并負責對檢驗工作質(zhì)量的監(jiān)督,檢驗報告的復核、 發(fā)放,結(jié)果的解釋,實驗室室內(nèi)消毒以及每日醫(yī)療廢棄物的消毒處理.實驗

13、室負責人負責檢驗資料的歸檔保管計算機工作.三、標本治理制度一、樣品的采集和處理艾滋病檢測最常用的樣品是血液,包括血清、血漿和全血.唾液或尿液有時也可作為測試樣品.常用的血液樣品的采集和處理方法如下：1、血清樣品采集和處理1 、 用一次性注射器 或真空采血管 抽取一定量靜脈血,室溫下自然放置 12h,待血液凝固、血塊收縮后再用 3000r/min 離心 15min,吸出血清備用2 、 如用濾紙片采樣,那么手指或耳垂局部嚴格按常規(guī)進行消毒,在刺破皮膚后,迅速把濾紙片沾上,切勿讓血液滴落在其它物體外表造成污染.采血后要待血樣枯燥后再包裝送檢.2、抗凝血樣品采集和處理3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV

14、 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 8 頁共 70 頁(1)、用加有抗凝劑的真空采血管(或一次性注射器抽取靜脈血,轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管),反復輕搖,別離血漿和血細胞備用.(2)、應(yīng)根據(jù)實驗要求選用適當?shù)目鼓齽?如 CD4+/CD8+T 淋巴細胞測定可選用K3EDTA 或肝素或枸檬酸鈉,HIV 病毒別離、核酸定性/定量檢測可選用 K3EDTA 或枸檬酸鈉.(3)、用于核酸定性檢測時,采集的抗凝全血應(yīng)在 48h 內(nèi)別離 PBMC 和血漿,否那么應(yīng)在 2448h 內(nèi)別離血漿和血細胞.3、采集樣品考前須知(1)、采集樣品原那么上應(yīng)按臨床采血

15、技術(shù)標準操作.(2)、采集樣品時應(yīng)注意平安,建議采用真空采血管及蝶形針具,以預(yù)防直接接觸血液；直接接觸 HIV 感染者/艾滋病(AIDS)病人血液/體液的操作,應(yīng)戴雙層手套.(3)、所有的血液、血清、未固定的組織和組織液樣品,均應(yīng)視為有潛在傳染性,都應(yīng)以平安的方式進行操作.(4)、應(yīng)象操作未知傳染風險樣品一樣,小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量限制和參考物質(zhì).用后的包裹應(yīng)進行消毒.(5)、 采血時一定要注意平安,采血用一次性注射器,謹慎操作,預(yù)防發(fā)生刺傷皮膚和造成外界污染.(6)、離心機要使用密閉的罐和密封頭,以防液體溢出或在超/高速離心時形成氣溶膠.(二)樣品的保存1、用于抗體檢測的

16、血清或血漿樣品,應(yīng)存放于-20C 以下,短期(1 周)內(nèi)進行檢測的樣品可存放于 2-8C.2、用于抗原和核酸檢測的血漿和血細胞樣品應(yīng)凍存于-20C 以下,進行病毒RNA 檢測的樣品如需保存 3 個月以上應(yīng)置于-80C03、用于 CD4+/CD8+T 淋巴細胞測定的樣品不能長期保存,樣品采集時間超過 48h 那么不可檢測.(三)樣品的運送3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 9 頁共 70 頁1、實驗室間傳遞的樣品應(yīng)為血清或血漿,除特殊情況外一般不運送全血.2、應(yīng)采用 WHO 提出的三級包裝系統(tǒng)：第一層容

17、器： 裝樣品,要求防滲漏.樣品應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi),試管上應(yīng)有明顯的標記,標明樣品的編號或受檢者姓名、種類和采集時間.在試管的周圍應(yīng)墊有緩沖吸水材料,以免碰碎.隨樣品應(yīng)附有送檢單,送檢單應(yīng)與樣品分開放置.第二層容器：要求耐受性好、防滲漏、容納并保護第一層容器,可以裝假設(shè)干個第一層容器.將試管裝入專用帶蓋的容器內(nèi),容器的材料要易于消毒處理.第三層容器：放在一個運輸用外層包裝內(nèi),應(yīng)易于消毒.在第三層容器外面要貼標簽數(shù)量,收、發(fā)件人.3、血清和血漿樣品應(yīng)在 28c 條件下由專人運送.用于 CD4+/CD8+T 淋巴細胞測定的樣品應(yīng)在室溫下 1823c 運送.每一包裝的體積以不超過 50ml 為宜.4、

18、運送感染性材料必須有記錄.5、 如別離血漿仍有困難,可直接將抗凝血-20C 以下凍存,采用冰壺冷藏運輸,預(yù)防凍融.6、特殊情況下如需對個別樣品進行復測,可以用特快專遞形式投寄,但必須按三級包裝系統(tǒng)將盛樣品的試管包扎好,預(yù)防使用玻璃容器,以保證不會破碎和溢漏.四.樣本接收和拒收標準1、簽收：實行雙簽制度,送檢者及實驗室驗收人員均需簽名.2、認真查對姓名,性別,年齡,住院號,病區(qū)/床號,檢測目的及工程等.對不符合要求者記入拒收標本記錄表中,并及時通知采樣單位,正確及時地補采樣本,以免延誤病人的檢測報告.3、對符合檢測要求的標本及時進行唯一性編號詳見標本唯一性編號標準操作程序并記入可接收標本記錄表中

19、.4、含有感染性樣品的包裹必須在具有處理感染源設(shè)備的實驗室內(nèi)由經(jīng)過培訓、穿戴防護衣的工作人員翻開,用后的包裹應(yīng)進行消毒.4.1、核對樣品與送檢單,檢查樣品管有無破損和溢漏.如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的樣品移出,對樣品管和盛器進行消毒,同時報告科主任等3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 10 頁共 70 頁有關(guān)領(lǐng)導和專家.4.2、檢查樣品的狀況,記錄有無溶血、污染、血脂高及黃疸等情況.如果污染過重認為樣品不能接受,那么應(yīng)將樣品平安廢棄.并要將樣品情況立即通知送樣人.4.3、 翻開標本容器時要小心,以防內(nèi)容

20、物潑濺.樣品處理時假設(shè)內(nèi)容物有可能濺出,那么應(yīng)在生物平安柜中戴手套進行.同時應(yīng)戴口罩、防護眼睛,以防皮膚或粘膜污染.4.4、 接收樣品時應(yīng)填寫樣品接收單.五標本檢測1、離心機要使用密閉的罐和密封頭,以防液體溢出或在超/高速離心時形成氣溶膠.復核標本接收過程中的每一步驟,在檢測過程中,應(yīng)嚴格根據(jù)標準化操作規(guī)程.2、在標本足夠的情況下,不能浪費、隨意丟棄或損壞標本.應(yīng)象操作未知傳染風險樣品一樣,小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量限制和參考物質(zhì).用后的包裹應(yīng)進行消毒六、標本處理檢驗標本先用含 2-3g/L 有效氯消毒劑浸泡半小時,再用高壓鍋高壓消毒.然后用雙層專用黃色醫(yī)用垃圾袋專人收集所有廢

21、棄醫(yī)用垃圾.送專門存放醫(yī)用垃圾處統(tǒng)一焚化處理.四、試劑治理制度一、采購與審批科主任根據(jù)需要定期擬定采購方案,交由院領(lǐng)導審批,批核后由科主任交與器械科,有器械科與經(jīng)銷聯(lián)系二、驗收與登記倉管負責人根據(jù)供給商提供的試劑及清單對數(shù)量、品種、品牌、包裝等進行驗收,并將入庫數(shù)據(jù)登記.三、貯存3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 11 頁共 70 頁冷藏試劑統(tǒng)一存放在 HIV 實驗室專用的冰箱內(nèi),冷箱保管及溫度限制由倉管負責人負責.HIV 試劑一般應(yīng) 28c 避光保存,在有效期內(nèi)使用.四、出庫治理各室提出試劑中領(lǐng),倉

22、管人填寫出庫單據(jù),認領(lǐng)人簽名后出庫.五、其它1、試劑的保存應(yīng)嚴格根據(jù)要求存放,以保證有效期內(nèi)能有效地使用,杜絕浪費現(xiàn)象.2、倉管人應(yīng)對試劑庫存定期檢查,不使用過期變質(zhì)的試劑.3、易燃,易爆試劑應(yīng)分開存放遠離火源和電源.4、劇毒試劑必須由科主任和負責科室保衛(wèi)的同志負責保存,放保險箱內(nèi),使用時應(yīng)有兩人在場,并做好登記.五：污染區(qū)工作守那么做好污染區(qū)實驗室廢棄物的消毒處理,未經(jīng)實驗室治理人員許可不得進入污染區(qū).1 1、但凡被血液、體液污染的物品要先消毒滅菌后清洗.2 2、嚴格操作程序,做好各種實驗記錄,實驗陽性標本保存至 5 5年,經(jīng)過免疫印記確診的陰性標本也要保存,不得擅自處理.3 3、禁止用口吸

23、液體,必須使用移液器操作.4 4、操作中有標本等外濺時,應(yīng)及時消毒,對大量濺出的高濃度污染物在清潔前先用 1%1%次氯酸鈉溶液浸泡,然后戴上手套擦洗.5 5、每次實驗后,要對工作臺面消毒,用 0.2%-1%0.2%-1%次氯酸鈉溶液噴灑和浸泡.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 12 頁共 70 頁6 6、離開實驗室前要脫去手套,隔離衣等防護物品,放入指定污桶,用肥皂和流水洗手.六：清潔區(qū)工作守那么1 1、實驗室是檢驗工作的場所,要保持清潔、安靜、物品擺放要整潔.2 2、清潔的防護服置于實驗室清潔區(qū)內(nèi)

24、存放處.檢驗人員工作時應(yīng)按要求穿工作服、工作衣、帽、專用鞋等.3 3、禁止將與檢驗工作無關(guān)的物品帶入檢驗室,禁止在檢驗室內(nèi)會客、抽煙、吃東西.4 4、注意平安,下班后、節(jié)假日必須切斷水源、氣源、電源,關(guān)好門窗.5 5、嚴禁將污染區(qū)的物品帶入清潔區(qū).6 6、妥善保管儀器、設(shè)備的說明書、操作規(guī)程、原始記錄表、零部件、常用工具、電源線、連接線要排列整潔.7 7、檢驗室須配置消防設(shè)備,并經(jīng)常檢查待用狀態(tài),任何人不得擅自挪用或挪動.七、環(huán)境消毒隔離制度1、 實驗室應(yīng)分為清潔區(qū)和操作區(qū),清潔區(qū)要注意保護不受污染.操作有氣溶膠可能的標本應(yīng)配置生物平安柜及其它防護設(shè)置,如紫外線燈,排氣扇等操作區(qū)的工作臺及地面

25、每日用消毒液擦拭一次,有污染時隨時消毒,每周大掃除一次.2、采血室每日操作前用清水擦拭操作臺一次,采血結(jié)束用消毒液擦拭操作臺、桌子和地面一次,紫外線每日照射消毒二次,每月空氣細菌培養(yǎng)一次,紫外線強度定期測定.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 13 頁共 70 頁3、各種檢驗標本的收集,送檢必須用相應(yīng)指定的容器留取,不得外溢污染.4、靜脈及末稍采血,應(yīng)嚴格執(zhí)行消毒隔離舉措,靜脈抽血做到一人一針一筒一巾一帶一消毒,所用止血帶及紙墊每日消毒,末稍采血一人一片一管,杜絕交叉污染.5、一次性醫(yī)用器具包括采血針

26、,注射器、尿杯、血紅蛋白微量吸血吸管,應(yīng)嚴格做好領(lǐng)發(fā)登記,注射器先浸泡消毒后由供給室一對一調(diào)換,統(tǒng)一處理,其余一次性器具浸泡消毒后裝入污物袋送燃燒爐燃燒.6、檢驗人員在進行靜脈抽血時應(yīng)嚴格遵守無菌操作技術(shù),操作前必須洗手必須戴好帽子與口罩,操作臺和手被污染時應(yīng)用肥皂和流水認真洗手,必要時用消毒液浸泡雙手,酒精、碘酒瓶每周更換消毒兩次.7、溢出試管外的血液,應(yīng)立即用碘酒棉簽擦拭干凈,注意預(yù)防玻璃碎片刺傷手,并注意試管有無破裂.8、當針頭和碎玻璃刺傷手時,用流水沖洗,擠出血水,應(yīng)立即用碘酒消毒局部.9、實驗室操作時應(yīng)戴上手套.吸取標本,離心振蕩等應(yīng)嚴格按操作規(guī)程,防止自身和實驗室受污染.10、已檢

27、查標本與容器分別浸泡于次氯酸鈉2000mg/L中兩小時后,標本傾棄,一次性容器送燃燒,重復使用的經(jīng)清洗消毒和滅菌后再使用,均要有記錄.有毒化學試劑和放射性試劑使用后要經(jīng)無害化處理,預(yù)防污染環(huán)境.11、非科室工作人員不準進入實驗室,外來人員參觀需經(jīng)科主任同意方可進入.八、實驗臺消毒舉措1、實驗臺消毒舉措必須符合艾滋病實驗室的通用生物平安要求.由專人按特定程序和方法進行清潔和消毒.2、臺面的清潔消毒,保持清潔、濕式清掃.每天開始工作前用濕布抹擦 1次,地面用濕拖把擦 1 次,禁用干抹干掃.抹布和拖把等清潔用具實驗室專用,不得混用,用后洗凈晾干,下班前用含氯消毒劑次氯酸鈉,含有效氯 2000mg/L

28、、0.20.5%過氧乙酸或 75%乙醇抹擦 1 次.也可用便捷式高強度紫外線消毒器近距離照射消毒.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 14 頁共 70 頁3、應(yīng)象操作未知傳染風險樣品一樣進行消毒與滅菌,小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的血液、質(zhì)量限制和參考物質(zhì),假設(shè)被上述物品明顯污染,如具傳染性的標本或培養(yǎng)物外溢,濺潑或器皿打破,灑落于臺面,應(yīng)立即用消毒液消毒,用 5000mg/L 有效氯消毒劑、 過氧乙酸或乙醇灑于污染的臺面,并使消毒液浸過污染外表,保持 3060min 后再擦,拖把用后浸于上述

29、消毒液內(nèi) 1h 以上.4、各類在實驗室實驗臺上操作后的廢棄物品均應(yīng)視作物染物分類處理,所有廢棄物應(yīng)視為 HIV 污染物品,根據(jù)?傳染病防治法?處理.九、廢棄物處置和實驗室消毒1、廢棄物處置廢棄物處置應(yīng)符合?實驗室生物平安通用要求?GB19489-2004和?消毒技術(shù)標準2002 年版0從艾滋病實驗室出來的所有廢棄物,包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它物品,均應(yīng)視為感染性廢棄物,應(yīng)置于專用的密封防漏容器中,平安運至消毒室,并在高壓消毒后再進行處理或廢棄.2、HIV 常用的物理消毒方法壓力蒸汽消毒,121C,保持 1520min;枯燥空氣烘箱消毒干烤消毒,140C,保持 23h.3、HIV 常用的化

30、學消毒方法HIV 最常用的化學消毒劑是含氯消毒劑次氯酸鈉,含有效氯 20005000mg/L、75%乙醇和 2%戊二醛,保持 1030min.4、廢棄物缸：5000mg/L 次氯酸鈉.5、生物平安柜工作臺面和儀器外表：75%乙醇.6、溢出物：5000mg/L 次氯酸鈉.7、污染的臺面和器具：2000mg/L 次氯酸鈉,也可以用過氧化氫或過氧乙酸.器械可用 2%戊二醛浸泡消毒.十、消毒液的配制及使用舉措1、HIV 實驗室最常用的化學消毒劑是含氯消毒劑次氯酸鈉,含有效氯2000-5000mg/L、75%乙醇和 2%戊二醛,保持 1030min.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO

31、汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 15 頁共 70 頁2、含氯消毒劑的配制：次氯酸鈉原液使用前進行 1:201:50 稀釋(2000-5000mg/L)或聯(lián)昌84使用前進行1:101:25(2000-5000mg/L)稀釋后,用于實驗室內(nèi)的消毒.3、乙醇,俗稱酒精,能夠殺滅多種細菌,對 HIV 病毒有一定的殺滅作用,7075%的效果最好.因此,使用前新鮮配置足量 7075%的乙醇,用于生物安全柜、工作臺面和儀器外表的消毒,可以到達最正確的消毒效果.4、過氧乙酸也是目前使用比擬廣泛的一種高效消毒劑,新鮮配置 13%的過氧乙酸熏蒸,用于地面、墻壁、實驗器材

32、及實驗室內(nèi)資料、文件、書本等物品的消毒.0.04%的過氧乙酸用于實驗室工作人員手浸泡 120 分鐘,再用肥皂洗手.5、2%戊二醛用于可浸泡物品的消毒,醫(yī)療器械等.6、 HIV 實驗室常用化學消毒劑的配置,本著多用多配,少用少配,現(xiàn)用現(xiàn)配的原那么,保證消毒劑使用時的濃度,保證消毒效果.十一、消防平安制度1、根據(jù)誰主管、誰負責的原那么,實行科室負責制.2、主管領(lǐng)導和保衛(wèi)科對全體職工經(jīng)常進行消防平安教育,提升思想熟悉,掌握消防知識和消防器材的使用.3、嚴格執(zhí)行?平安防火治理制度?各種火種與易燃易爆物品,必須嚴格分區(qū),保持一定的平安距離.實驗室實施單向流向制度,通道不得亂堆放易燃爆物品和雜物.4、嚴禁

33、在實驗室內(nèi)吸煙.5、電器的安裝與撤除,必須由電工進行,嚴禁亂接電源,亂后電線.6、各種機電設(shè)備、高溫電器設(shè)備、耐高壓容器和設(shè)施,使用時必須有專人負責,隨時檢查,消除隱患,嚴防事故發(fā)生.7、各防火區(qū)域設(shè)置的消防器材和設(shè)備,應(yīng)定期進行檢查,維修和更換,隨時處于完好狀態(tài),并不得隨便挪動.8、任何人發(fā)現(xiàn)火、水災(zāi)等隱患者,必須及時向科領(lǐng)導報告.科主任及時向院領(lǐng)導報告,及時做好善事處理工作.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 16 頁共 70 頁十二、生物平安防護制度1、上崗工作人員應(yīng)是經(jīng)過崗前平安與技術(shù)培訓,取

34、得合格證,具有獨立工作水平的人員.2、進入實驗室應(yīng)穿隔離衣、戴手套,必要時如對篩查陽性標本進行復測或檢測高危標本要戴防護眼鏡,預(yù)防污染暴露的皮膚和衣物.3、嚴格根據(jù)操作規(guī)程操作.操作過程中,不得用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等.4、操作時可能發(fā)生的觸電、失火、玻璃割傷、針頭刺傷、燒傷、不慎中毒、傳染性標本的污染,有應(yīng)急處理的方法,有關(guān)工作人員均應(yīng)熟悉.5、操作中手套破損,應(yīng)立即丟棄,洗手后戴上新手套繼續(xù)操作,不慎發(fā)生瀉漏,應(yīng)立即根據(jù)?發(fā)生職業(yè)暴露后的處理舉措?,進行處理.6、預(yù)防腐蝕、灼傷、中毒、火災(zāi)和爆炸等事件發(fā)生.7、實驗操作完畢后,應(yīng)根據(jù)實驗室清理與消毒程序,進行善后

35、處理.同時記錄相關(guān)資料與數(shù)據(jù)并存檔.8、工作結(jié)束后,應(yīng)先洗戴手套的手,然后脫去手套丟棄,再脫去工作衣,用肥皂和流動水洗手后離開實驗室.9、注意平安,隨手關(guān)門,做好水,電,門的平安保衛(wèi)工作,防火防盜防水.十三、職業(yè)暴露的防護及處理舉措HIV 檢測實驗室職業(yè)暴露是指檢驗工作人員在從事檢測工作過程中意外被艾滋病病毒感染者或者艾滋病病人的血液、 體液污染了皮膚或者粘膜,或者被含有艾滋病病毒的血液、體液污染了的針頭及其他利器刺破皮膚,有可能被艾滋病病毒感染的情況.一、防護舉措：1 .醫(yī)務(wù)人員進行有可能接觸病人血液、 體液的診療和護理操作時必須戴手套,操作完畢,脫去手套后立即洗手,必要時進行手消毒.2 .

36、在診療、護理操作過程中,有可能發(fā)生血液、體液飛濺到醫(yī)務(wù)人員的面部時,醫(yī)務(wù)人員應(yīng)當戴手套、具有防滲透性能的口罩、防護眼鏡；有可能發(fā)生血液、體3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 17 頁共 70 頁液大面積飛濺或者有可能污染醫(yī)務(wù)人員的身體時,還應(yīng)當穿戴具有防滲透性能的隔離衣或者圍裙.3 .醫(yī)務(wù)人員手部皮膚發(fā)生破損,在進行有可能接觸病人血液、體液的診療和護理操作時必須戴雙層手套.4 .醫(yī)務(wù)人員在進行侵襲性診療,護理操作過程中,要保證充足的光線,并特別注意預(yù)防被針頭、縫合針、刀片等銳器刺傷或者劃傷.5 .使用

37、后的銳器應(yīng)當直接放入耐刺、防滲漏的利器盒,也可使用具有平安性能的注射器、輸液器等醫(yī)用銳器,以防刺傷.6 .禁止將使用后的一次性針頭重新套上針頭套.禁止用手直接接觸使用后的針頭、刀片等銳器.二、處理舉措：1 .用肥皂液和流動水清洗污染的皮膚,用生理鹽水沖洗粘膜.2 .如有傷口,應(yīng)當在傷口旁端輕輕擠壓,盡可能擠出損傷處的血液,再用肥皂液和流動水進行沖洗,禁止進行傷口的局部擠壓.3 .受傷部位的傷口沖洗后,應(yīng)當用消毒液,如 75%的酒精或者 0.5%的碘伏等進行消毒,并包扎傷口；被暴露的粘膜,應(yīng)當反復用生理鹽水沖洗干凈.4 .在暴露后的 0 周、第四周、第八周、第十二周及六個月時抽血進行檢測艾滋病病

38、毒抗體.5 .預(yù)防性用藥應(yīng)當在發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后盡早開始,最好在四小時內(nèi)實施,最遲不得超過二十四小時；即使超過 24 小時,也應(yīng)當實施預(yù)防性用藥,連續(xù)使用 28 天.6 .發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后立即通知院感科備案、評估.十四、篩查檢驗程序1、篩查試劑必須是經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督治理局注冊批準、批批檢合格、在有效期內(nèi)的試劑.推薦使用經(jīng)臨床質(zhì)量評估敏感性和特異性高的試劑.2、篩查方法一,膠體金法3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 18 頁共 70 頁樣品的采集和保存1 .采集靜脈的血清、血漿樣本必須在

39、無菌條件下,并預(yù)防樣品溶血.2 .如果血清和血漿樣品收集后 7 天內(nèi)檢測,樣品須放在 2-8C 保存,如果大于 7 天那么須冷凍保存.操作步驟在使用此測試卡前必須仔細閱讀試劑的說明書,需嚴格根據(jù)試劑說明書執(zhí)行有關(guān)操作,否那么無法保證可靠的結(jié)果.1 .將待測標本從儲存條件下取出,平衡至室溫并編號.2 .將所需數(shù)量的測試卡從包裝盒中取出平衡至室溫,翻開鋁箔包裝袋,平置于臺面上.3 .用微量加樣器取 50 口樣本血清,加到測試卡的加樣處.4 .加樣后,陽性標本可在 130 分鐘內(nèi)檢出.經(jīng)過試驗確證,反響時間 從加樣后計算起超過 30 分鐘將對實驗結(jié)果的觀察造成影響,因此,建議 30 分鐘再最終觀察并

40、記錄實驗結(jié)果.結(jié)果判斷陽性:測試卡在檢測區(qū)和對照區(qū)位置出現(xiàn)兩條紫紅色條帶.如果檢測區(qū)的紫紅色條帶隱約可見,建議對該樣本重復試驗,并使用其他方法確認.陰性:測試卡只在對照區(qū)位置出現(xiàn)一條紫紅色條帶.失效:對照區(qū)未出現(xiàn)紫紅色條帶,說明不正確的操作過程或試劑盒已變質(zhì)損壞或者是樣本中抗體的含量過高.在此情況下,應(yīng)再次仔細閱讀說明書,并將待測樣本稀釋后用新的測試卡重新測試.注意:測試區(qū)T內(nèi)的紫紅色條帶可呈現(xiàn)顏色深淺的現(xiàn)象.但是,在規(guī)定的觀察時間內(nèi),不管該色帶顏色深淺,即使只有非常弱的色帶也應(yīng)判定為陽性結(jié)果.二,酶聯(lián)免疫法1 珠海麗珠原理及用途：本品系用純化基因工程人類免疫缺陷病毒 I 型和 H 型填HIV

41、-1/HIV-2 璘抗原合成肽或基因重組蛋白,包被的微孔板和酶標記的HIV-1/HIV-2 抗原及其他試劑組成.應(yīng)用雙抗原夾心法原理檢測人血清或血漿中3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 19 頁共 70 頁的 HIV-1/HIV-2 抗體.試劑盒成分 HIV 抗原包被板 12 孔 X8,HIV 酶標記物 7m1X1 瓶,陰性對照 1mlX1 瓶,陽性對照 1mlX1 瓶,20 倍濃縮洗液 50mlX1 瓶,底物緩沖液 7mlX1 瓶,底物液 7mlX1 瓶,終止液 7mlX1 瓶,封口袋 1 個,說明

42、書 1 份操作方法將試劑盒平衡至室溫,取出所需的條板,剩余的即時封存.用去離子水和蒸儲水20倍稀釋濃縮洗滌液.將所需數(shù)量的條板固定于支架按順序編號設(shè)置樣品孔、外部對照孔、陽性對照孔和陰性對照孔況每次實驗需設(shè)外部對照 1 孔陽性對照 2 孔陰性對照 3 孔.在樣品孔中參加 50ul 待測樣品,陰性、 陽性對照及外部對照每孔參加 50ul,輕拍混勻.置 37c 溫育 60 分鐘.將孔內(nèi)液體甩干,置洗板機用洗滌液充分洗滌 5 遍,扣干.每孔參加 50ul酶標記物,輕拍混勻,置 37c 溫育 30 分鐘.重復步驟.每孔參加 50ul 底物緩沖液和50ul 底物液,輕拍混勻,置 37c 避光溫育 30

43、分鐘.每孔參加 50ul 終止液終止顯色反響,用酶標儀雙波長 450nm/630nm 測定各孔 A 值.結(jié)果判定臨界值況 Cutoff=0.15 十陰性對照的平均 A值 陰性對照的平均A值小于 0.08按 0.08計算,大于0.08按實際值計算 ,樣品的 A 值Cutoff 值為 HIV 抗體陽性；樣品的 ACutoff 值為 HIV 抗體陰性.2 北京萬泰試劑廠家：北京萬泰生物工程公司試劑類型：雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法儀器：a.洗板機 b.酶標儀 c.恒溫箱標本的采集與要求1 病人的準備：無特殊要求.2 標本的類型：無溶血的血清或血漿.3 標本準備： 取無菌試管采集全血 2ml,待血液凝固后離心

44、別離血清,標本應(yīng)無溶血現(xiàn)象.標本采集后應(yīng)及時測定,如不能及時測定,將別離后的血泊樣本放置于 46c冰箱保存不超過 4 天,-20C 以下保存可延長一個月,-80C 一下可長期保存.不合要求的樣本按樣本拒收制度執(zhí)行.操作步驟1、配液：將 50ml 濃縮洗滌液用蒸儲水或去離子水 20 倍稀釋至 1000ml 備用.2、編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板設(shè)陰性對照 3 孔、陽性對照 I型 2 孔,外部對照 1 孔.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 20 頁共 70 頁3、加樣：分別在相應(yīng)孔中參加待檢中品、

45、陰陽對照、外部對照各 100 口.4、溫育：封板后 37+1C60min5、洗滌：洗板機洗 5 遍.6、加酶：每孔參加酶標試劑 100J.7、溫育：37+1C30min8、洗滌：洗板機洗 5 遍9、顯色：各孔參加 A、B 顯色液 504,混勻,37+1C30mino10、測定：參加終止液 50 口,450nm/620nm 波長測定各孔 ODfi.結(jié)果判斷：陰性對照孔 ODfi0,80,試驗有效.臨界值(CUTOFF 的計算臨界值=陰性對照孔 ODi值 Nc+0.12.陽性判定： 樣品 OD大于等于臨界值(CUTOFF 為 HIV 抗體陽性,樣品小于臨界值為陰性.(注意：初試陽性標本應(yīng)重新取樣進

46、行雙孔復試,復試陽性者應(yīng)按?全國艾滋病檢測技術(shù)標準?進行確證實驗.3,廈門英科新創(chuàng)【試劑名稱】人類免疫缺陷病毒 HIV(1+2 型)抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)【漢語拼音】RENLEIMIANYIQUEXIANBINGDU(HIV1+2XING)KANGTIZHENDUANSHIJIHE(MEILIANMIANYIFA)【英文名】HIV(1+2)AntibodiesELISAKit【檢測原理】本試劑盒采用雙抗原夾心兩步法檢測人血清或血漿樣本中的(HIV1/2)型抗體.采用多種HIV-1 和 HIV-2 的特異性抗原制作預(yù)包被板及酶結(jié)合物.當待檢樣本中存在 HIV 抗體時,在反響過程中形成“周相

47、HIV抗原-HIV抗體-酶標記HIV抗原的免疫復合物,參加底物后形成顯色反響.【適用范圍】人類免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗體輔助診斷及獻血員篩查.【試劑組成】序號組分名稱數(shù)量包裝規(guī)格序號組分名稱數(shù)量包裝規(guī)格1 微孔板 1 包 8X12T6 顯色劑 A1 瓶 7ml3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 21 頁共 70 頁2 酶標抗原 1 瓶 14ml7 顯色劑 B1 瓶 7ml3 陽性對照 1 瓶 1ml8 終止液 1 瓶 7ml4 陰性對照 1 瓶 1ml9 說明書 1 份5 洗滌液 2 瓶 25m

48、l10 自封袋 1 個11 封板膜 3 張【樣品的采集和保存】1 .采集靜脈的血清、血漿樣本應(yīng)在無菌條件下保存,并預(yù)防樣品溶血及反復凍溶.2 .血清和血漿樣品收集后如果無法在當天檢測,樣品須在 2-8C 保存；如果大于 7天那么須冷凍保存.【操作步驟】:在使用本檢測試劑前必須仔細閱讀使用說明書.1 .平衡:將試劑盒各組分從盒中取出,平衡至室溫18C-25C,微孔板開封后按需要取用,余者及時以自封袋封存.2 .配液:濃縮洗滌液配置前充分搖勻 如有晶體應(yīng)充分溶解,濃縮洗滌液和蒸儲水或去離子水按 1:19 稀釋后使用.3 .編號:取所需數(shù)量微孔條固定于支架,按序編號.4 .加樣:按順序分別在相應(yīng)孔參

49、加 50 仙 l 待測樣品及陰、陽性對照血清.5 .溫育:覆上封板膜,置 37c 溫育 30 分鐘.6 .洗滌:用洗滌液充分洗滌 5 次,洗滌完后扣干每次應(yīng)保持 30-60 秒的浸泡時間.7 .加酶:分別在每孔中參加酶標抗原 100 仙 l.8 .溫育:覆上封板膜,置 37c 溫育 30 分鐘.9 .洗滌:用洗滌液充分洗滌 5 次,洗滌完后扣干每次應(yīng)保持 30-60 秒的浸泡時間.10 .顯色:每孔加底物 A、B 各 50 口,輕拍混勻,覆上封板膜,37c 暗置 20 分鐘.11 終止:每孔參加終止液 50 仙 l,混勻.12.測定:用酶標儀單波長 450nm 或雙波長 450/630nm 測

50、定各孔 OD 值用單波長測定時,需設(shè)空白對照一孔,30 分鐘內(nèi)完成測定,并記錄結(jié)果.【結(jié)果判定】|1、陽性對照均值應(yīng)大于陰性對照均值 0.60 以上且陰性對照均值小于 0.10 方可認3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 22 頁共 70 頁為本次實驗有效.2、 臨界值計算：CutoffValue=0.10+陰性對照均值 假設(shè)陰性對照均值小于 0.05,以 0.05計.3、 樣本 OD 值大于或等于臨界值為初篩陽性,小于臨界值為陰性.初篩陽性者重新取樣雙孔復試,復試陽性者應(yīng)根據(jù)“全國 HIV 檢測治理標

51、準送 HIV 確認實驗室進行確認試驗.【考前須知】1、 本檢測試劑僅用于體外診斷試驗.僅用于人血清或血漿樣本,其它體液和樣品可能得不到準確的結(jié)果.2、本試劑的使用單位必須是經(jīng)當?shù)匦l(wèi)生行政部門批準的 HIV 初篩實驗室.3、樣本的加樣建議使用微量加樣器準確參加.酶標抗原需用微量加液器加液,并經(jīng)常校對其準確性.加酶標記抗原時,注意勿使微量加液器的加樣頭接觸樣本以預(yù)防樣本間相互污染.加試劑前,應(yīng)先將試劑瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次,使液體混勻.4、封板膜為一次性使用,每次使用后請丟棄,重復使用將導致嚴重污染.5、HIV 檢測必須符合 HIV 實驗室治理標準和生物平安守那么的規(guī)定,嚴格預(yù)防交叉感染,嚴格健全和執(zhí)行消毒隔

52、離制度.所有樣品、 洗滌液和各種廢棄物應(yīng)按傳染物處理.對于那些含有感染源和疑心含有感染源的物質(zhì)應(yīng)有適宜的生物平安保證程序,下列為有關(guān)考前須知但不僅限于此：* 帶手套處理樣本和試劑* 不要用嘴吸樣* 不可在處理這些物品時吸煙、進食、喝飲料、美容和處理隱形眼鏡* 用消毒劑對濺出的樣本或試劑進行消毒* 按當?shù)氐挠嘘P(guān)條例來消毒和處理所有樣本、試劑和潛在的污染物*試劑各組份在正當處理和保存的情況下直至效期都保持穩(wěn)定,不能使用過效期的試劑盒6、HIV 抗體檢定結(jié)果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.樣本的酶標儀讀值與樣本中抗體的滴度沒有一定的必然聯(lián)系.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任

53、部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 23 頁共 70 頁7、任何一種測試都不能絕對保證樣本中沒有低濃度的抗體存在,所以陰性結(jié)果任何時候不能排除含有 HIV 暴露和感染的可能.8、每板建議設(shè)陰、陽性對照血清各兩孔,設(shè)空白對照時,不加樣本及酶標抗原,其余各步相同.9、 洗滌液應(yīng)先取出預(yù)先稀釋,洗滌時各孔均須加滿但應(yīng)預(yù)防溢流,預(yù)防孔口內(nèi)有游離酶未能洗凈.10、不同品名、不同批號的試劑不可混用,以免產(chǎn)生錯誤結(jié)果.【貯藏】儲存:2-8C 避光保存【有效期】十二個月【批準文號】3、復檢試驗：對初篩呈陽性反響的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的篩查試劑重復檢測.如兩

54、種試劑復測均呈陰性反響,那么報告 HIV 抗體陰性；如均呈陽性反響,或一陰一陽,需送艾滋病確認實驗室進行確認見圖 1.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 24 頁共 70 頁送確認實驗室確認報告圖1HIV抗體篩查檢測流程4、初篩試驗結(jié)果的報告對 HIV 抗體篩查試驗,呈陰性反響者可出具“HIV 抗體陰性報告(可用附表 1);對初篩試驗呈陽性反響者不能出陽性報告,可出具“HIV 抗體待復查報告(附表 1).8、初篩試驗呈陽性反響樣品的轉(zhuǎn)送如需送上級實驗室進行復測或確認,需要填寫“HIV 抗體復測送檢單(

55、附表2),經(jīng) 1 名檢驗人員和 1 名具有中級以上技術(shù)職稱的人員審核簽字.送當?shù)匕滩『Y查中央實驗室,再轉(zhuǎn)送艾滋病確認實驗室,或在本實驗室復檢后直接送確認實驗室.9、對篩查陰性和陽性者,均需做好檢測后咨詢.十五、檢測結(jié)果的判定方法1、HIV 測定(膠體金法)結(jié)果的判定方法(1)、陽性：出現(xiàn)兩條或三條紅線均為陽性反響.(2)、陰性：僅出現(xiàn)質(zhì)控一條紅線,那么實驗結(jié)果為陰性.(3)、無效：如無紅線(或只有反響線)出現(xiàn),說明實驗無效,須重新檢測.2、HIV 測定(ELISA 法)結(jié)果的判定方法(1)、計算臨界值 CO(cut-off)值.(2)、臨界值=陰性對照 A 均值+0.12(3)、正常情況下,

56、陰性對照孔的 OD 值 00.10 假設(shè) 1 孔陰性對照的 OD 值0.1 應(yīng)舍棄,假設(shè)有 2 孔或 2 孔以上陰性對照的 OD 值0.1,應(yīng)重復實驗.).樣品 OD 值(臨界值者為 HIV 抗體陰性.(4)、正常情況下,陽性對照孔的 OD 值0.80 假設(shè) 1 孔陽性對照的.口值3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 25 頁共 70 頁0.8應(yīng)舍棄,假設(shè)有 2 孔或 2孔以上陽性對照的 OD 值0.8,應(yīng)重復實驗.樣品 OD值可缶界值者為 HIV 抗體陽性.十六、檢測結(jié)果報告規(guī)程1、從事 HIV 檢測

57、工作的技術(shù)人員必須接受過上崗前的培訓和定期復訓.2、HIV 檢測工作必須在獨立的實驗室內(nèi)進行.3、初篩檢測試劑必須是經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督治理局注冊批準、中國藥品生物制品檢定所批批檢合格且在有效期內(nèi)的試劑.4、根據(jù)?全國艾滋病檢測技術(shù)標準?的要求建立健全質(zhì)量治理制度、實驗室平安標準操作規(guī)程、平安防護工作等.5、檢測結(jié)果報告前應(yīng)填寫好原始實驗記錄資料,包括試驗日期,試驗操作記錄,檢測樣品及空白、陰、陽對照結(jié)果,S/CO 值、臨界值、試劑廠家、批號、效期,檢測人、復核人簽名等.6、將試驗結(jié)果存檔保存,處理試驗廢物,擦凈實驗臺,做好實驗室消毒衛(wèi)生.7、結(jié)果報告：對呈陰性反響的樣品,可出具“HIV 抗體篩

58、查報告(見附表1)陰性報告；對呈陽性反響的樣品,須進行復檢,不能出陽性報告.8、復檢試驗：對初篩呈陽性反響的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的篩查試劑重復檢測.如兩種試劑復測均呈陰性反響,那么報告“HIV 抗體篩查報告(見附表 1)陰性；如均呈陽性反響,或一陰一陽,那么應(yīng)根據(jù)?全國HIV 檢測治理標準?的要求送艾滋病確認實驗室進行確證試驗.十七、檢測結(jié)果的判定方法1、HIV 測定(膠體金法)結(jié)果的判定方法(1)、陽性：出現(xiàn)兩條或三條紅線均為陽性反響.(2)、陰性：僅出現(xiàn)質(zhì)控一條紅線,那么實驗結(jié)果為陰性.(3)、無效：如無紅線(或只有反響線)出現(xiàn),說明實驗無效,須重新檢測.2、HIV

59、測定(ELISA 法)結(jié)果的判定方法(1)、計算臨界值 CO(cut-off)值.3 河南省鶴壁市中醫(yī)院檢驗科HIV 篩查實驗室 SO 汽件責任部門檢驗科文件編號202105版次/頁碼第 1 版第 3 次修改第 26 頁共 70 頁2、臨界值=陰性對照 A 均值+0.123、正常情況下,陰性對照孔的 OD 值 00.10 假設(shè) 1 孔陰性對照的 OD 值0.1應(yīng)舍棄,假設(shè)有 2 孔或 2 孔以上陰性對照的 OD 值0.1,應(yīng)重復實驗.樣品 OD 值臨界值者為 HIV 抗體陰性.4、正常情況下,陽性對照孔的 OD 值0.80 假設(shè) 1 孔陽性對照的 OD 侑0.8應(yīng)舍棄,假設(shè)有 2 孔或 2 孔

60、以上陽性對照的 OD 值0.8,應(yīng)重復實驗.樣品 OD 值可缶界值者為 HIV 抗體陽性.十八、檢驗結(jié)果的解釋HIV 抗體檢測的結(jié)果有三種,分別是陽性、陰性和不確定,絕大多數(shù)情況下都是陽性或陰性,出現(xiàn)不確定結(jié)果的情況很少.一、陽性結(jié)果的解釋1、 說明一個人感染了 HIV,具有傳播性當一個人 HIV 抗體檢測結(jié)果為陽性,說明這個人已經(jīng)感染了 HIV,具有把 HIV 傳播給別人的可能.2、不能判斷發(fā)病與否,不能判斷疾病的進展.HIV 抗體檢測結(jié)果只能說明一個人是否感染了 HIV,陽性結(jié)果并非就意味著一個人已經(jīng)得了艾滋病,也不能說明患者處于疾病開展的哪個階段.假設(shè)要判斷疾病的進展,那么要做另外的實驗