鄰二氮菲吸光光度法測(cè)定鐵實(shí)驗(yàn)操作方法

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上實(shí)驗(yàn)儀器一：紫外-可見分光光度計(jì)的使用鄰二氮菲吸光光度法測(cè)定鐵一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 初步熟悉分光光度計(jì)的使用方法。2. 熟悉測(cè)繪吸收光譜的一般方法。3. 學(xué)習(xí)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量方法。二、實(shí)驗(yàn)原理在建立一個(gè)新的吸收光譜法時(shí)，必須進(jìn)行一系列條件試驗(yàn)，包括顯色化合物的吸收光譜曲線（簡(jiǎn)稱吸收光譜）的繪制、選擇合適的測(cè)定波長(zhǎng)、顯色劑濃度和溶液pH值的選擇及顯色化合物影響等。此外，還要研究顯色化合物符合朗伯比爾定律的濃度范圍、干擾離子的影響及其排除的方法等。本實(shí)驗(yàn)利用分光光度計(jì)能連續(xù)變換波長(zhǎng)的性能，測(cè)定鄰二氮菲Fe2+的吸收光譜，并選擇合適的測(cè)定波長(zhǎng)。在pH=39的溶液中，F(xiàn)e2+與鄰二氮

2、菲（phen）生成穩(wěn)定的橙紅色絡(luò)合物，max508nm,1.1×104L/（mol·cm），lg3=21.3(20) （橙紅色）Fe3+與鄰二氮菲生成1：3的淡藍(lán)色絡(luò)合物（lg3=14.1），故顯色前應(yīng)先用鹽酸羥胺將Fe3+還原為Fe2+，其反應(yīng)為在508nm處測(cè)定吸光度值，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法可求得水樣中Fe2的含量。若用鹽酸羥胺等還原劑將水中Fe3還原為Fe2，則本法可測(cè)定水中總鐵、Fe2和Fe3各自的含量。三、儀器與試劑1儀器722型分光光度計(jì)、酸度計(jì)、容量瓶（50mL）、吸量管（5mL，10mL）等。2試劑（1）鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確稱取0.2152克優(yōu)級(jí)純鐵銨礬（NH4Fe（SO

3、4 )2 ·12H2O）于小燒杯中，加水溶解，加入6molL HCl溶液5mL，定量轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中稀釋至刻度，搖勻。所得溶液每毫升含鐵0.100 mg（即100ug/mL）。（2）0.15鄰二氮菲（又稱鄰菲咯琳）水溶液：稱取1.5g鄰二氮菲，先用510mL 95乙醇溶解，再用蒸餾水稀釋到1000mL。（3）10鹽酸羥胺水溶液（新鮮配制）；（4）HAcNaAc緩沖溶液（pH4.6）：稱取136g優(yōu)級(jí)純醋酸鈉，加120 mL冰醋酸，加水溶解后，稀釋到500mL。（5）0.1molL NaOH溶液（6）0.1molL HCL溶液四、實(shí)驗(yàn)步驟(一)實(shí)驗(yàn)條件的選擇1吸收曲線的制作和測(cè)

4、量波長(zhǎng)的選擇：用吸量管吸取0.0，1.0mL鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液（100g/ml），分別注入兩個(gè)50mL比色管中，各加入1mL鹽酸羥胺溶液，2mL鄰二氮菲，5mL HAc-NaAc，用水稀釋至刻度，搖勻。放置10min后，用1cm比色皿，以試劑空白（即0.0mL鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液）為參比溶液，在440560nm之間，每隔10nm測(cè)一次吸光度，在最大吸收峰附近，每隔5nm測(cè)定一次吸光度。在坐標(biāo)紙上，以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)，繪制A和關(guān)系的吸收曲線。從吸收曲線上選擇測(cè)定Fe的適宜波長(zhǎng)，一般選用最大吸收波長(zhǎng)max。 2酸度影響于8只50 mL容量瓶（或比色皿）中，用刻度移液管各加入1.0 mL 100g/ml

5、的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液，再加入1 mL鹽酸羥胺溶液和2mL鄰二氮菲溶液，搖勻。然后分別加入NaOH溶液0.0 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL、3.0 mL。用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。放置10 min后分別測(cè)定各溶液的pH值和吸光度。吸光度測(cè)定條件為：1cm比色皿，蒸餾水作參比，測(cè)定波長(zhǎng)為max。3顯色劑用量的影響取7個(gè)50 mL容量瓶（或比色皿），依次加入1.0 mL 100g/ml的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液，1mL鹽酸羥胺溶液搖勻。再分別加入鄰二氮菲溶液0.1 mL、0.3 mL、0.5 mL、0.8 mL、1.0 mL、2.0 mL、4.0 mL，加入5.

6、0ml的HAcNaAc，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。放置10 min后測(cè)定各溶液的吸光度。吸光度測(cè)定條件為：1cm比色皿，以蒸餾水作參比，測(cè)定波長(zhǎng)為max。（二）鐵含量的測(cè)定1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作：用移液管吸取100g·mL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液10mL于100mL容量瓶中，加入2mL 6mol·L-1的HCl，用水稀釋至刻度，搖勻。此溶液每毫升含F(xiàn)e3+ 10g。在6個(gè)50mL容量瓶（或比色管）中，用吸量管分別加入0.0, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0mL 10g·mL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別加入1mL鹽酸羥胺，2mL Phen，5mL HAcNaAc溶液，每加

7、一種試劑后搖勻。然后，用水稀釋至刻度，搖勻后放置10min。用1cm比色皿，以試劑為空白（即0.0mL鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液），在所選擇的波長(zhǎng)下，測(cè)量各溶液的吸光度。以含鐵量為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。用繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線，重新查出相應(yīng)鐵濃度的吸光度，計(jì)算Fe2+Phen絡(luò)合物的摩爾吸光系數(shù)。2試樣中鐵的測(cè)定準(zhǔn)確吸取適量試液于50ml比色管中，按標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作步驟，加入各種試劑，測(cè)量吸光度。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出和計(jì)算試液中鐵的含量（g·mL-1）。五、數(shù)據(jù)記錄與處理1繪制A-，得出max2繪制A-pH，得出最佳pH范圍3繪制A-Vphen，得出phen最佳使用體積4繪制工作曲線，從工作曲線

8、上找出未知試樣的含量，并計(jì)算水樣中的鐵含量（g·mL-1）六、注意事項(xiàng) 1. 本實(shí)驗(yàn)旨在學(xué)會(huì)分光光度法測(cè)定水中微量物質(zhì)時(shí)的最基本操作條件、原理和方法以及722型分光光度計(jì)的使用。因此，要仔細(xì)閱讀儀器說(shuō)明書，了解儀器的構(gòu)造和各個(gè)旋鈕的功能；在使用時(shí)，一定要遵守操作規(guī)程和聽從老師的指導(dǎo)。 2. 在每次測(cè)定前，應(yīng)首先作比色皿配對(duì)性試驗(yàn)。方法是：將同樣厚度的4個(gè)比色皿分別編號(hào)，都裝空白溶液，在508nm處測(cè)定各比色皿的吸光度（或透光率），結(jié)果應(yīng)相同。若有顯著差異，應(yīng)將比色皿重新洗滌后再裝空白溶液測(cè)定，直到吸光度（或透光率）一致。若經(jīng)過(guò)多次洗滌，仍有顯著差異，則用下法校正： （1）以吸光度最小

9、的比色皿為0，測(cè)定其余三個(gè)比色皿的吸光度值作為校正值。 （2）測(cè)定水樣或溶液時(shí)，以吸光度為零的比色皿作空白，用其它各皿裝溶液，測(cè)各吸光度值減去所用比色皿的校正值。溶液吸光度測(cè)量值的校正示例比色皿編號(hào)空白溶液校正值（A）顯色溶液測(cè)得值（A）校正后測(cè)得值（A）10.00.0空白20.00440.20410.20030.00880.40890.40040.02230.62340.6013. 拿取比色皿時(shí)，只能用手指捏住毛玻璃的兩面，手指不得接觸其透光面。盛好溶液（至比色皿高度的4/5處）后，先用濾紙輕輕吸去外部的水（或溶液），再用擦鏡紙輕輕擦拭透光面，直至潔凈透明。另外，還應(yīng)注意比色皿內(nèi)不得粘附小氣泡，否則影響透光率。4. 測(cè)量之前，比色皿需用被測(cè)溶液蕩洗23次。然后再盛溶液。比色皿用畢后，應(yīng)立即取出，用自來(lái)水及蒸餾水洗凈、倒立晾干。5. 儀器不測(cè)定時(shí)，應(yīng)打開暗箱蓋，以保護(hù)光電管。6. 繪制吸收光譜時(shí)應(yīng)選擇恰當(dāng)?shù)淖鴺?biāo)比例，曲線應(yīng)光滑。七、思考題1. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)算在最大吸收波長(zhǎng)下，鄰二氮菲-Fe（）的摩爾吸收系數(shù)。你的計(jì)算值與文獻(xiàn)值1.1×104是否一致？如不一致，請(qǐng)作解