浮游菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、目的：建立潔凈（區(qū)）室浮游菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。范圍：適用于潔凈（區(qū)）室浮游菌監(jiān)測(cè)。責(zé)任：QC人員負(fù)責(zé)實(shí)施，QA人員負(fù)責(zé)監(jiān)督。內(nèi)容：1取樣前準(zhǔn)備工作：1.1 依據(jù)檢測(cè)區(qū)域的取樣點(diǎn)數(shù)，按照培養(yǎng)基配制、滅菌標(biāo)準(zhǔn)操作程序制備適量的營1.2 在超凈工作臺(tái)內(nèi)，以無菌操作法將配制好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基以每皿約15ml的裝量分裝，待培養(yǎng)基凝固后移出潔凈區(qū)。1.3 將制備的營養(yǎng)瓊脂平皿倒置于隔水式恒溫水浴培養(yǎng)箱內(nèi)于3035c培養(yǎng)48小時(shí)。取出逐個(gè)檢查，確認(rèn)無菌落數(shù)后即可使用。1.4 采樣：將上述制備好的營養(yǎng)瓊脂平皿交與QA人員取樣。2.儀器、設(shè)備和培養(yǎng)基：5 所用的儀器、設(shè)備和培養(yǎng)基：5.3 浮游菌采樣器5.3 培

2、養(yǎng)皿（小90mrK15mm5.3 培養(yǎng)基（營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基）5.3 恒溫培養(yǎng)箱5 儀器、設(shè)備、培養(yǎng)基的要求：5.4 浮游菌采樣器：5.4.1 浮游菌采樣器必須要有流量計(jì)和定時(shí)器。5.4.1 應(yīng)嚴(yán)格按儀器說明書的要求進(jìn)行操作。5.4.1 采樣器必須按儀器的檢定周期，定期對(duì)儀器作檢定，以保證測(cè)試數(shù)據(jù)的可靠性，檢驗(yàn)項(xiàng)目有：定時(shí)器，轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速，流量計(jì)。1.2.1.4每次測(cè)試前應(yīng)先接通電源，啟動(dòng)真空抽氣泵，然后調(diào)節(jié)流量計(jì)和定時(shí)器?？諝獠蓸恿扛鶕?jù)需要選定，已知采樣器的流量（L/min）,設(shè)定采樣時(shí)間（min）兩者相乘即得采樣量（L）。采樣口必須用便于消毒及化學(xué)性能穩(wěn)定的材料制造，采樣管嚴(yán)禁滲漏，內(nèi)壁應(yīng)光滑，采

3、樣管的長度應(yīng)根據(jù)測(cè)定點(diǎn)的高度定，盡量減少彎曲。3.測(cè)試方法：測(cè)試用儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。采樣器進(jìn)入被測(cè)房間前先用消毒劑滅菌。用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。采樣前，先用消毒劑消毒采樣器的頂盤、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面，采樣結(jié)束再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤。采樣口及采樣管使用前必須高溫滅菌，如用消毒劑對(duì)采樣管的外壁、內(nèi)壁進(jìn)行消毒，應(yīng)將管中的殘留液倒掉并晾干。采樣者應(yīng)穿戴與被測(cè)潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手用消毒劑消毒。采樣程序：儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開動(dòng)真空泵抽氣，使儀器的殘余消毒劑蒸發(fā)，時(shí)間不少于5min,并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋

4、子后調(diào)節(jié)采樣品縫隙高度。置采樣器于采樣點(diǎn)后，開啟采樣器、轉(zhuǎn)動(dòng)定時(shí)器，根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時(shí)間。4測(cè)試規(guī)則：測(cè)試狀態(tài)：浮游菌測(cè)試前微生物限度檢查室已經(jīng)消毒過。測(cè)試狀態(tài)為靜態(tài)測(cè)試，并在報(bào)告中注明測(cè)試狀態(tài)。測(cè)試人員：測(cè)試人員必須穿戴符和被測(cè)環(huán)境級(jí)別的工作服。靜態(tài)測(cè)試時(shí)，室內(nèi)人員不得多于2人。測(cè)試時(shí)間：對(duì)單向流，測(cè)試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于10min后開始。對(duì)非單向流，測(cè)試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于30min后開始。最少采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置，最小采樣量，見下表：回積（m2潔凈度級(jí)別ABC驗(yàn)證監(jiān)測(cè)驗(yàn)證監(jiān)測(cè)驗(yàn)證監(jiān)測(cè)<10231212->10-<2042212->20-<

5、4083212->40-<100164412->100-<20040-10-3->200-40080-20-6-400160-40-13-工作區(qū)測(cè)點(diǎn)位置離地0.8m1.5m左右，送風(fēng)口測(cè)點(diǎn)位置離開送風(fēng)面30cm左右;可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加測(cè)點(diǎn)。每個(gè)采樣點(diǎn)一般采樣一次對(duì)于單向流或送風(fēng)口，采樣器采樣管口朝向應(yīng)正對(duì)氣流方向；對(duì)于非單向流，采樣管口向上。布置采樣點(diǎn)時(shí)，至少應(yīng)離開塵粒較集中的回風(fēng)口1m以上。采樣時(shí)，測(cè)試人員應(yīng)站在采樣口的下風(fēng)側(cè)。5培養(yǎng)：取樣結(jié)束后將平皿復(fù)倒置隔水式恒溫水浴培養(yǎng)箱內(nèi)于3035c培養(yǎng)48小時(shí)。并以未采樣的營養(yǎng)瓊脂平皿作對(duì)照皿。6菌落計(jì)數(shù)：用肉眼直接計(jì)數(shù)，然后用5-10倍放大鏡檢查，是否遺漏。若培養(yǎng)皿上有2個(gè)或2個(gè)以上菌落重疊，可分辨時(shí)，仍以2個(gè)或2個(gè)以上的菌落計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)：培養(yǎng)結(jié)束，將上述培養(yǎng)后的平皿取出，逐個(gè)點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)，必要時(shí)用放大鏡檢查，并記錄。7結(jié)果計(jì)算：7.1平均菌落數(shù)的計(jì)算見下式：m1m2mn平均菌落數(shù)m=N式中：m為該房間（或區(qū)域）的平均菌落數(shù)；ml、m2mn為該房間（或區(qū)域）各取樣點(diǎn)的菌落數(shù)；