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文檔簡介
1、(以下內(nèi)容源于公司的產(chǎn)品說明書,僅供參考).簡介是一種液態(tài)的,無毒的組織保存試劑。它能迅速穩(wěn)定組織,保護(hù)非冷凍細(xì)胞于原位。獲得組織塊后,迅速浸泡在中保存,而不會引起的降解,這樣可以不必馬上處理樣品或?qū)悠防鋬鲈谝旱幸詡湟院筇幚?。?yīng)保存在室溫下,保質(zhì)期個月。女瞰置在C條件下則會引起沉淀,此時需加熱到C才可澄清。可廣泛應(yīng)用于多種脊椎動物樣品。包括腦、心、腎、脾、肝、睪丸、骨骼肌、脂肪、肺和胸腺。對大腸桿菌、果蠅、組織培養(yǎng)細(xì)胞、全血細(xì)胞和一些植物也有效。能否與提取試劑盒兼容?可與大多數(shù)提取方法相協(xié)調(diào)。特別是.,0,()0.如何使用只能用于新鮮組織,在浸入之前不能冷凍組織。簡單切碎組織樣品,任何一
2、邊的最大厚度不能大于(半個黃豆粒大?。缓髮⒔M織碎塊放入到倍體積的中保存。動物組織不會溶解或破壞組織樣品的結(jié)構(gòu)。如果需要的話,仍可將已經(jīng)平衡在溶液中的組織取出并分割成更小的塊再重新放入到中。小器官如鼠肝、腎和脾可以完整地保存在中。植物組織許多植物組織可以簡單浸泡在倍體積的中保存。具有自然屏障防止擴(kuò)散的植物如蠟表皮的葉組織可能需要先破壞其屏障,以允許進(jìn)入組織。組織培養(yǎng)細(xì)胞沉淀細(xì)胞,用洗一次,再用少量的懸浮細(xì)胞,然后加倍體積的保存。白細(xì)胞如果將白細(xì)胞從紅細(xì)胞和血清中分離出來,并按組織培養(yǎng)細(xì)胞一樣處理后,白細(xì)胞便能有效地保存在中。不要將全血、血漿或血清中的保存在中,因為它們蛋白含量過高,與混合后易
3、形成不溶的沉淀。細(xì)菌是抑菌的,雖然細(xì)菌在中不能生長,但細(xì)胞仍保持其完整性。大腸桿菌保存在中C條件下個月仍很完整,產(chǎn)生不降解的。中樣品的保存保存于c建議用于批量保存。將樣品在C條件下孵育過夜,然后從溶液中取出樣品保存于C。對于組織培養(yǎng)細(xì)胞,不必移去,只需簡單凍存整個溶液。實驗證明,細(xì)胞在c條件下凍存于溶液中并未出現(xiàn)溶解。樣品可隨后在室溫下解凍及再凍存,具的質(zhì)和量都不會受到影響。保存于c建議用于批量保存。將樣品在C條件下孵育過夜,然后轉(zhuǎn)移到C。樣品在C條件下不會凍結(jié),但在存貯緩沖液中會有結(jié)晶形成,這并不影響隨后的提取。樣品可隨后在室溫下解凍及再凍存,具的質(zhì)和量都不會受到影響。保存于c廠家認(rèn)為,目前
4、尚無證據(jù)證明樣品存于C個月內(nèi)會出現(xiàn)降解。中的樣品如果沒有冰箱:將樣品放在盡可能冷的環(huán)境中。如果周圍溫度超過C,應(yīng)盡可能使冰浴數(shù)小時。中樣品的提取組織用消毒銀子將組織從存貯溶液中取出,浸泡在提取溶液中一旦將組織放入提取溶液中,勻漿一定要迅速進(jìn)行。細(xì)胞從存貯在中的細(xì)胞中提取有兩種操作方法可供選擇:去除或者從細(xì)胞與的混合物中直接提取。.從中取出樣品去除因為的濃度比典型的細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)的濃度高,因此用通常沉淀活細(xì)胞的離心力無法沉淀中的細(xì)胞。離心沉淀細(xì)胞,去除。(細(xì)胞大約需要X,但其他細(xì)胞可能不能容忍這個速度,或者他們需要更大的離心力。)從中的細(xì)胞直接提取作為選擇,我們可以用一步法破碎提取溶液(如和)從沒有去除的細(xì)胞中純化。這可通過向細(xì)胞混合物中加入倍體積的一步提取溶液完成,其他照常。含吐溫-的的磷酸鹽緩沖液(簡稱為-)配制方法為:稱取磷酸二氫鉀(),磷酸氫二鈉(),氯化鈉(),氯化鉀(),吐溫,加水。配方():磷酸二氫鉀():,磷酸氫二鈉():,氯化鈉():,氯化鉀(),加去離子水約十足攪拌溶解,然后加入殺鹽酸調(diào)至,最后定容到。高溫高壓滅菌后室溫保存。緩沖液():,緩沖液一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用,具體試劑一般也有不同的
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