梅毒檢測(cè)方法在疾病預(yù)防工作中的運(yùn)用

1、梅毒檢測(cè)方法在疾病預(yù)防工作中的運(yùn)用        【摘要】     目的 探討梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(TP-ELISA)、甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST)和梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)三種檢測(cè)方法在梅毒預(yù)防工作中的有效運(yùn)用。方法 使用TP-ELISA、TRUST對(duì)調(diào)查對(duì)象男-男同性(MSM)特殊人群共259人進(jìn)行初篩，再用TPPA法對(duì)89份梅毒檢測(cè)呈陽性的血清標(biāo)本進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)。選用兩家的TRUST試劑進(jìn)行比較，進(jìn)行結(jié)果差異性比較。結(jié)果 TP-ELISA、

2、TRUST和TPPA法的陽性率分別是100%、25.48%(另一廠家28.6%)、100%，TP-ELISA、TRUST和確診試驗(yàn)的符合率分別是100%、74.2%(另一廠家83.1%)。結(jié)論 最佳方案是先用梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)進(jìn)行篩選，再做確認(rèn)試驗(yàn)，具體情況可結(jié)合調(diào)查目的和檢測(cè)條件進(jìn)行選擇。     【關(guān)鍵詞】  梅毒血清學(xué)診斷;梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(TP-ELISA);甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST);螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)    梅毒是一種性接觸傳染病，現(xiàn)在蔓

3、延程度已非常嚴(yán)峻，對(duì)疾控機(jī)構(gòu)來說，了解梅毒的流行狀況和對(duì)重點(diǎn)人群的干預(yù)，是性病防控的一項(xiàng)重要工作。2010年56月，本區(qū)疾控中心參與了中國全球基金艾滋病項(xiàng)目，對(duì)男-男同性(MSM)這一人群進(jìn)行HIV、梅毒、丙肝項(xiàng)目的調(diào)查檢測(cè)。為了探索在人群調(diào)查中梅毒檢測(cè)方法的運(yùn)用上如何做到有效可行，為性病的防控工作提供科學(xué)的依據(jù)，筆者結(jié)合該項(xiàng)目對(duì)梅毒的檢測(cè)方法做進(jìn)一步的研究分析，現(xiàn)報(bào)告如下。1 資料與方法1.1 一般資料這次自愿來進(jìn)行的MSM人員共有259人，年齡2070歲，以3050歲青壯年為主。由本疾病預(yù)防控制中心組織對(duì)這些人員采血，按該基金項(xiàng)目統(tǒng)一工作要求進(jìn)行。1.2 試劑與儀器該基金項(xiàng)目要求用規(guī)定的試

4、劑TRUST(北京萬泰試劑有限公司)、TP-ELISA試劑盒(珠海麗珠試劑有限公司)同時(shí)進(jìn)行篩查。結(jié)果同時(shí)上報(bào)。為了進(jìn)一步了解，筆者增加了另一廠家的TRUST試劑和確認(rèn)試劑。另一廠家TRUST試劑為上海榮盛生物藥業(yè)有限公司、TPPA試劑盒是日本富士瑞必歐株式會(huì)社提供。TP-ELISA使用儀器：Thermo MULTISKAN ASCENT全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析儀。TRUST使用儀器：江蘇省姜堰市天力醫(yī)療器械廠TL2000B型梅毒自動(dòng)旋轉(zhuǎn)儀。1.3 方法按照試劑盒的說明書操作方法。按以下步驟進(jìn)行。(1)采用TP-ELISA、TRUST(北京萬泰)對(duì)259份樣本進(jìn)行篩查(基金項(xiàng)目統(tǒng)一要求)。(2)對(duì)篩

5、查陽性標(biāo)本再TPPA種方法進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)。(3)用另一廠家TRUST試劑(上海榮盛)對(duì)進(jìn)行TP-ELISA結(jié)果陽性標(biāo)本進(jìn)行試驗(yàn)。2 結(jié)果按試劑盒說明書操作和判斷，結(jié)果匯總?cè)缦隆?1)對(duì)259份血清標(biāo)本，TRUST(北京萬泰)篩查結(jié)果:陽性66份，陽性率為25.5%; 采用TP-ELISA方法，陽性89份，陽性率為34.4%。66份TRUST陽性標(biāo)本TP-ELISA方法結(jié)果全部陽性。(2)對(duì)89份初篩陽性的標(biāo)本TPPP法做確認(rèn)試驗(yàn)為最后結(jié)果，檢測(cè)結(jié)果89份陽性。(3)上海榮盛生物藥業(yè)有限公司的TRUST試劑檢測(cè)結(jié)果，標(biāo)本259份，陽性結(jié)果74份，陽性率為28.6%。74份標(biāo)本TP-ELISA方法結(jié)

6、果全部陽性。TPPP法確證試驗(yàn)結(jié)果全部陽性。(4)比較兩個(gè)廠家試劑檢測(cè)結(jié)果，2 =2.1412，按=0.05水準(zhǔn)，兩個(gè)廠家試劑差異無顯著性。(表1、表2、表3)表1 不同方法檢測(cè)結(jié)果表2 不同廠家TRUST試劑的檢測(cè)結(jié)果表3 不同方法和確診試驗(yàn)結(jié)果符合性比較3 討論目前用于梅毒血清學(xué)的檢驗(yàn)方法主要有：非梅毒螺旋體血清試驗(yàn)即甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST)，TP-ELISA檢測(cè)梅毒特異性抗體，TPPA用于梅毒的確認(rèn)實(shí)驗(yàn)，不同的檢測(cè)方法都有其特殊的應(yīng)用價(jià)值，在臨床上TRUST方法常用篩選及判斷治療的效果，在疾控方面，由于TRUST方法硬件要求低、操作簡(jiǎn)單，較適用于流行病學(xué)調(diào)查的梅毒篩查方法，也

7、更適合廣泛的基層醫(yī)療和保健單位使用。但TRUST方法陽性率明顯偏低，尤其是對(duì)早期和治療期梅毒可呈陰性反應(yīng)。結(jié)果觀察易受到室溫和操作技術(shù)等影響，結(jié)果的判斷主觀性較強(qiáng)，肉眼觀察很細(xì)顆粒時(shí)，弱陽性和陰性較難界定，雖然不同廠家的試劑結(jié)果有差異，但總的來說陽性率還是明顯偏低。這次TP-ELISA和TPPAT符合率100%，但限于樣本量較小，大多資料表明TP-ELISA和TPPAT符合率較高1。該方法試劑成本低，原始數(shù)據(jù)易于保存;TP-ELISA陽性只能說明正處于感染期或曾經(jīng)感染過，不能判斷梅毒疾病活動(dòng)與否，確定傳染性的大小。TPPA是一種高特異性、敏感性較好的梅毒血清學(xué)診斷檢測(cè)方法。TPPA的靈敏度和特異性比前兩種方法都高，是臨床常用的梅毒確認(rèn)試驗(yàn)，也可以進(jìn)行效果測(cè)定，但試劑成本高，操作繁瑣，耗時(shí)較長，不適合大量標(biāo)本的篩查，適合于前兩種方法測(cè)定陽性后的確認(rèn)試驗(yàn)。綜上所述，在疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)，可以根據(jù)工作目的選擇梅毒的檢測(cè)方法，有條件的檢測(cè)機(jī)構(gòu)，選擇TRUST和TP-ELISA方法初篩，再用TPPA方法確認(rèn)。TRUS(+)、TP-ELISA(+)、TPPA(+)并且TRUS滴度高的對(duì)象是傳染性比較強(qiáng)的病人，是重點(diǎn)防控對(duì)象。為了掌握人群中梅毒螺旋體感染狀況，可選用TP-ELISA;如果基礎(chǔ)醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行基層的人群普查，限于儀器設(shè)備的缺乏，可進(jìn)行TRUST方法的篩選，所檢陽性結(jié)果可作為梅