回收率加樣回收試驗(yàn)

1、回收率回收率包括絕對(duì)回收率和相對(duì)回收率。絕對(duì)回收率考察的是經(jīng)過(guò)樣品處理后能用于分析的藥物的比例。因?yàn)椴徽撌巧锘|(zhì)還是制劑輔料中的藥物，經(jīng)過(guò)樣品處理都有一定的損失。做為一個(gè)分析方法，絕對(duì)回收率一般要求大于50%才行。它是在空白基質(zhì)中定量加入藥物， 經(jīng)處理后與標(biāo)準(zhǔn)品的比值。標(biāo)準(zhǔn)品為流動(dòng)相直接稀釋而來(lái)，而不是同樣品一樣處理。若一樣，只是不加基質(zhì)來(lái)處理，可能會(huì)有很多影響因素被此屏蔽掉。如全部轉(zhuǎn)移有機(jī)相時(shí)只轉(zhuǎn)移了98%等。也就因此失去了絕對(duì)回收率的考察初衷。相對(duì)回收率嚴(yán)格來(lái)說(shuō)有兩種。一種是回收試驗(yàn)法，一種是加樣回收試驗(yàn)法。前者是在空白基質(zhì)中加入藥品，標(biāo)準(zhǔn)曲線也是同此，這種測(cè)定用得較多，但有標(biāo)準(zhǔn)曲線重復(fù)

2、測(cè)定的嫌疑。第二種是在已知濃度樣品中加入藥物，來(lái)和標(biāo)準(zhǔn)曲線比，標(biāo)準(zhǔn)曲線也是在基質(zhì)中加藥物。相對(duì)回收率主要考察準(zhǔn)確度?；厥章始訕踊厥赵囼?yàn)加樣回收就是在已知濃度的樣品里加該樣品量的 80%、100%、120%的對(duì)照品，然后測(cè)定結(jié)果各 3 次共 9 次，結(jié)果減去已知的量再除以加入量就是回收率， 一般都要求達(dá)到 95% 以上，即于已知被測(cè)成分含量的成藥中再精密加入一定量的被測(cè)成分純品，依法測(cè)定。測(cè)定值應(yīng)在線性范圍內(nèi)，用實(shí)測(cè)值與原樣品含被測(cè)成分量之差，除以加入純品量，計(jì)算回收率。A：樣品所含被測(cè)成分量B：加入純品量C：實(shí)測(cè)值回收率試驗(yàn)至少需進(jìn)行3 次試驗(yàn)（ n=3），或三組平行試驗(yàn)（ n=6），加入欲測(cè)

3、樣品或成分量相同或不同，后者則可進(jìn)一步驗(yàn)證測(cè)定方法取樣量多少更為適合。 為了反映各次回收率的實(shí)驗(yàn)波動(dòng)情況，建議除寫出各次試驗(yàn)的實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)，并計(jì)算實(shí)測(cè)值的均數(shù)，標(biāo)準(zhǔn)差（ S）及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（ RSD）。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差較小的實(shí)驗(yàn)波動(dòng)較小，重復(fù)性較好。計(jì)算方法如下：均值：123?nnn2標(biāo)準(zhǔn)差：Sn 1n 為每次實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)的個(gè)數(shù)， x 為 n 次實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)的總和， x2 為 n 次實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)之平方值的總和。 回收率一般要求在 95-105 ，有些方法操作步驟繁復(fù)，可要求在 90110。9 個(gè)回收率數(shù)據(jù)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）應(yīng)不大于 %。值得指出的是，在一些回收率試驗(yàn)中，常見到所謂的加樣回收測(cè)定，不是在樣品制備

4、開始時(shí)即加入純品，而是加到制備好的供試液中。這樣并不能說(shuō)明被測(cè)成分在提取、純化等步驟中是否損失。還有在薄層掃描測(cè)定時(shí)，將供試品溶液，對(duì)照品溶液分別點(diǎn)于薄層板上，同時(shí)將供試品與對(duì)照品溶液再重疊點(diǎn)于薄層板的同一原點(diǎn)上，測(cè)定計(jì)算，這只能反映板上回收率，而不是全部含量測(cè)定方法的回收率，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)不符合要求?；厥章视?jì)算P=(C2-C1)/C3×100%P：回收率C1：試樣測(cè)定值C1=m1/v1C2： : 標(biāo)樣測(cè)定值C2=m2/v2C3：加標(biāo)量C3=C0×V0/v2m： 加標(biāo)體積中的物質(zhì)含量m=C0×V0m1=試樣 中的物質(zhì)含量m2=加標(biāo)試樣中的物質(zhì)含量v1：試樣體積v2：加標(biāo)

5、試樣體積v2= v1+ V0V0：加標(biāo)體積C0：加標(biāo)用標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度1、當(dāng)加標(biāo)體積不影響分析結(jié)果時(shí)，即v2= v1C3= C0×V0/v1時(shí)P=(C2-C1) × v1/ (C0×V0)× 100%2、當(dāng)加標(biāo)體積影響分析結(jié)果時(shí)，即v2= v1+ C0 C2= (C0×V0)/(v1+ C0)時(shí)P=(C2-C1) × (v1+ C0)/ (C0×V0)× 100%以用品中所含物質(zhì)的量值計(jì)算加標(biāo)回收率將理論公式中各項(xiàng)均理解為量值時(shí)，則可以避開加標(biāo)體積帶來(lái)的麻煩，簡(jiǎn)明易懂，計(jì)算方便：P=(m2-m1) / m ×

6、 100% 或 P=(C2 × v2)-(C1 ×v1)/ (C0× V0)×100%吸光度值計(jì)算加標(biāo)回收率：由曲線公式 Y=Bx+a導(dǎo)出 X=Y-a/b當(dāng)以物質(zhì)量值計(jì)算加標(biāo)回收率時(shí)，可導(dǎo)出：P=Y2-Y1) /b ×C0×V0× 100%試中： Y2：加標(biāo)試樣吸光度Y1：試樣吸光度B ：曲線斜率上式的前提是： Y2-Y1aY0：空白管吸光度a：曲線截距當(dāng) Y2-Y1 a 時(shí)，加標(biāo)回收率職能用以下公式，否則回收率值增大。P=(C2×v2)-(C1 ×v1)/ (C0 ×V0)×100%結(jié)論：1、凡是可以用加標(biāo)回收率來(lái)評(píng)價(jià)分析方法和測(cè)量系統(tǒng)準(zhǔn)確度的分析項(xiàng)目，其加標(biāo)回收率的計(jì)算應(yīng)首先考慮采用以物質(zhì)的量值法計(jì)算；2、凡是可以用分光光度法分析的項(xiàng)目，當(dāng)試樣與空白的吸光度之差大于曲線