株銅綠假單胞菌的耐藥性分析與研究

1、 584株銅綠假單胞菌的耐藥性分析與研究 1方 清 2蘇丹虹 3曾曉軍1廣州市白云區(qū)中醫(yī)醫(yī)院 2廣州醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院 3廣州市白云區(qū)龍歸華僑醫(yī)院摘 要 目的 監(jiān)測本單位的病原菌對抗菌藥物的敏惑性與耐藥性，從而提高抗生素的治療效果，針對性地選用抗菌藥物，控制醫(yī)院銅綠低單胞菌感染的發(fā)生率。方法 采用vitek-2的ID-GNB鑒定卡和AST-GN藥敏卡和K-B法手工藥敏鑒定檢測，用銅綠假單胞菌ATCC27853、大腸埃希菌ATCC25922進行質量控制。結果 丁胺卡那霉素、哌拉西林/他唑巴坦抗菌作用最強；美洛培南、哌拉西林、妥布霉素、頭孢吡肟、亞胺培南、慶大霉素次之；頭孢曲松、頭孢唑肟、頭孢噻肟

2、、頭孢他啶、四環(huán)素、復方新諾明等的抗菌作用最弱。結論 單一抗生素對銅綠假單胞菌的治療不理想，易出現(xiàn)耐藥株，主張聯(lián)合用藥。 關鍵詞 抗生素；銅綠假單胞菌；耐藥性 銅綠假單胞菌是氧化酶陽性非發(fā)酵革蘭陰性桿菌，是臨床常見的條件致病菌，對于住院患者，特別是重癥(如ICU)患者，能引起醫(yī)院獲得性肺炎，成為醫(yī)院嚴重的感染病原菌。由于臨床抗生素的預防用藥和不合理使用造成該菌耐藥性日趨嚴重，引起院內感染逐年增加，目前已出現(xiàn)高度耐藥的銅綠假單胞菌。因此，加強對銅綠假單胞菌的耐藥性監(jiān)測，了解其耐藥性及變遷，對有效治療和預防該菌的院內感染十分重要。筆者從本院2004年1月-2007年9月的住院和門診患者的標本中分離

3、出584株銅綠假單胞菌，對其藥敏結果進行分析，現(xiàn)報道如下。 1 材 料1.1 菌株來源 我院2004年1月2007年9月住院、門診患者標本中分離出來的584株銅綠假單胞菌。1.2 儀器與試劑 使用法國生物梅里埃公司BACT ALERT 3D血液培養(yǎng)儀和vitek-2型全自動微生物鑒定/藥敏測試儀，ID-GNB革蘭氏陰性桿菌鑒定卡和AST-GN藥敏鑒定卡。1.3 K-B手工藥敏紙片 英國oxoid公司生產，由法國生物梅里埃公司提供。1.4 培養(yǎng)基 廣東江門凱林公司生產羊血瓊脂培養(yǎng)基,巧克力瓊脂培養(yǎng)基和MH瓊脂培養(yǎng)基。1.5 質控菌株大腸埃希菌ATCC25922和銅綠假單胞菌ATCC27853由法

4、國生物梅里埃公司提供。 2 方 法 采用法國梅里埃公司vitek-2型全自動微生物鑒定/藥敏測試儀，上ID-GNB革蘭氏陰性桿菌鑒定卡，AST-GN藥敏鑒定卡和K-B法手工藥敏鑒定檢測，按NCCLS標準判斷結果。用銅綠假單胞菌ATCC27853、大腸埃希菌ATCC25922進行質量控制。 3 結 果3.1 584株銅綠假單胞菌的標本分布與感染特點 見表1。顯示銅綠假單胞菌的侵入部位既可在機體深部，也可在表層，且以呼吸道感染居多。表1 584株銅綠假單胞菌的標本分布與百分率標本來源 檢出銅綠假單胞菌株數(shù) 占總數(shù)百分率(%)痰 444 76.03中段尿 67 11.50胸水 29 4.97傷口分泌

5、物 15 2.57血液 10 1.71咽拭子 8 1.37膽汁和腹 6 1.00大便 5 0.85_ 3.2 藥敏試驗結果 見表2。以丁胺卡那霉素、哌拉西林/他唑巴坦抗菌作用最強；美洛培南、哌拉西林、妥布霉素、頭孢吡肟、亞胺培南、慶大霉素次之；頭孢曲松、頭孢唑肟、頭孢噻肟、頭孢他啶、四環(huán)素、復方新諾明等的抗菌作用最弱。表2 584株銅綠假單胞菌藥敏實驗結果抗生素名稱 實驗株數(shù) 敏感性（%） 敏感（S） 中介（I） 耐藥（R） 丁胺卡那霉素 572 82.10 6.81 10.80氨曲南A 524 33.70 35.80 30.10環(huán)丙沙星 583 45.40 8.74 44.70頭孢曲松 47

6、3 1.69 2.32 95.90頭孢吡肟 583 60.20 13.20 26.40慶大霉素 576 55.30 9.20 35.20 亞胺培南 584 57.30 8.04 34.40左旋氧氟沙星 468 47.20 9.61 39.50美洛培南 528 64.50 9.28 25.90哌拉西林 564 67.50 0.17 32.00復方新諾明 561 2.31 0.35 97.10頭孢噻肟 489 0.81 1.63 97.50替卡西林/棒酸 517 43.90 0 55.80四環(huán)素 412 1.21 0 98.70替卡西林 465 37.80 0.21 61.90妥布霉素 529 6

7、5.00 5.10 29.80哌拉西林/他唑巴坦 575 80.80 0 18.90頭孢唑肟 405 1.48 0.74 97.70頭孢他啶 583 50.70 12.80 36.10 4 討 論 銅綠假單胞菌廣泛分布于自然界，正常人皮膚、呼吸道、腸道，醫(yī)院病房及醫(yī)療器械等均有此菌存在，因此，很容易造成機會性感染。近年來，銅綠假單胞菌的臨床感染逐漸增多，其耐藥菌株也有不同的變化1。銅綠假單胞菌的耐藥機制復雜，主要與以下因素有關：細菌產生抗菌活性酶，如金屬-內酰胺酶、氨基糖苷鈍化酶； 細菌改變藥物作用的靶位，如青霉素結合蛋白(PBPS)，使DNA旋轉酶結構發(fā)生改變，從而逃避抗菌藥物的抗菌作用；外

8、膜通透性降低；生物膜形成；主動泵出系統(tǒng)等，其中主動泵出系統(tǒng)在銅綠假單胞菌多耐藥機制中起著主導作用2。 本研究發(fā)現(xiàn)，青霉素類的派拉西林和替卡西林的4年的平均耐藥率分別達到32%和61.9%，已基本失去治療作用。但當二者與-內酞胺酶抑制劑聯(lián)合用藥后，派拉西林-他哇巴坦表現(xiàn)出較強的抗菌活力，4年的平均抑菌率達80.80%，耐藥率僅為18.9%，而替卡西林-棒酸的抗菌活性增強不顯著。有研究表明，美國僅有24%的醫(yī)院顯示了銅綠假單胞菌對派拉西林-他哇巴坦的高敏性3，這可能與不同國家臨床分離菌株差異及臨床治療方案不同有關。頭抱菌素類藥物曾經(jīng)是經(jīng)典的抗銅綠假單胞菌藥物，本實驗表明除頭孢吡肟外，頭孢曲松、頭孢

9、噻肟、頭孢唑肟、頭孢他啶、已基本失去抗菌作用。頭孢吡肟的耐藥率也已經(jīng)達到了26.40%，這可能與過去第3、4代頭抱菌素的被大量使用有關。氟哇諾酮類的環(huán)丙沙星和左氧氟沙星，其4年的平均耐藥率分別為44.7%和39.5%，臨床使用價值不大。氨基糖苷類抗生素妥布霉素和丁胺卡那霉素的抗菌效果較好，但耐藥性也在不斷升高，其中妥布霉素的耐藥率已達29.8%。丁胺卡那霉素的耐藥率較低為10.8%，但應注意丁胺卡那霉素對耳、腎臟有一定的毒性，而銅綠假單胞菌多見于老年人或有嚴重基礎疾病的患者，臨床應短期內應用此類抗生素，并與-內酞胺類藥物聯(lián)合應用。碳青酶烯類抗生素的亞胺培南和美羅培南比其他-內酞胺類更耐受-內酞

10、胺酶，且與所有的青霉素結合蛋白，特別是與青霉素結合蛋白2(PBP2)具有較強的親和力，從而顯示出了較強的抑菌活性，成為治療院內嚴重感染、多重耐藥菌感染的有效抗菌藥物。由于臨床上廣泛使用，近年來，銅綠假單胞菌對其耐藥性也在逐步上升4。本研究中，美羅培南的抗菌活性為64.50%，耐藥率已達到了25.9%，而亞胺培南的耐藥率已達到了34.4%，基本失去使用價值，應引起重視。 總之，本實驗結果表明，在本地區(qū)丁胺卡那霉素、哌拉西林/他唑巴坦抗菌作用最強；美洛培南、哌拉西林、妥布霉素、頭孢吡肟、亞胺培南、慶大霉素次之；頭孢曲松、頭孢唑肟、頭孢噻肟、頭孢他啶、四環(huán)素、復方新諾明等的抗菌作用最弱。但臨床抗感染

11、經(jīng)驗證明，單一抗生素對大多數(shù)革蘭陰性桿菌尤其是銅綠假單胞菌的治療不理想，易出現(xiàn)耐藥株，故應采用NCCLS等主張的多使用聯(lián)合用藥5，同時為了提高抗生素治療效果，應經(jīng)常監(jiān)測本地區(qū)、本單位的病原菌對抗菌藥物的敏感性與耐藥特性，根據(jù)藥敏結果有針對性地選用抗菌藥物，控制醫(yī)院銅綠假單胞菌感染的發(fā)生率。參考文獻:1 馬均定，吳智剛，陳啟然.銅綠假單胞菌耐藥特性的分析及臨床抗感染用藥的方向性初探J.海南醫(yī)藥，2005,16(11):11 5- 11 6 .2 何林，張立軍，李勇長.銅綠假單胞菌對22種抗生素耐藥性J. 中華醫(yī)院感染學, 2002,12(11);853-855.3 Lee K, Lee HS, Jang Sj, etal. Antinlicobial resistance surveillance of bacteria in l999 in Korea with a apecial reference to resistance of enterococctio vancomycin and gram-negative bacilli