地中海貧血篩查-血液學(xué)分析課件

1、地中海貧血篩查-血液學(xué)分析地中海貧血(pnxu)檢測血液學(xué)分析血液學(xué)分析(fnx)容敏逢容敏逢第一頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析主要(zhyo)內(nèi)容 篩查方案(fng n) 血液學(xué)分析 地貧基因型與臨床表現(xiàn)第二頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析地中海貧血地中海貧血(pnxu)(pnxu)篩查及產(chǎn)前診斷流程篩查及產(chǎn)前診斷流程被檢對象被檢對象（婚前或孕中期）（婚前或孕中期）血液學(xué)分析血液學(xué)分析（MCV ，Hb A2變化）變化）排除地貧排除地貧地貧攜帶者地貧攜帶者遺傳咨詢，配偶檢查遺傳咨詢，配偶檢查血液學(xué)分析血液學(xué)分析（MCV Hb A2變化）變化）地貧攜帶者地貧攜帶者排除地貧排

2、除地貧遺傳咨詢遺傳咨詢雙親基因分析雙親基因分析胎兒產(chǎn)前診斷胎兒產(chǎn)前診斷第三頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析地中海貧血的臨床地中海貧血的臨床(ln chun)特特征征小細(xì)胞低色素性溶血型貧血小細(xì)胞低色素性溶血型貧血( (中、重度中、重度) )黃疸黃疸肝脾腫大肝脾腫大 ( (脾大明顯脾大明顯) )骨髓擴增骨髓擴增發(fā)育遲緩發(fā)育遲緩合并感染合并感染Barts 水腫胎水腫胎(地貧地貧, ,宮內(nèi)或出生宮內(nèi)或出生(chshng)(chshng)后數(shù)小時內(nèi)死亡后數(shù)小時內(nèi)死亡) )第四頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析地貧血液學(xué)分析(fnx) 最常用(chn yn)的方法:紅細(xì)胞平均容積(MC

3、V)、紅細(xì)胞脆性試驗、Hb電泳聯(lián)合(linh)檢測進行篩查,發(fā)現(xiàn)異常者再進行基因診斷。第五頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析地中海貧血地中海貧血(pnxu)的血液學(xué)表型特征的血液學(xué)表型特征 RBC脆性脆性 RBC 參數(shù)參數(shù) MCV MCH 細(xì)胞形態(tài)變化細(xì)胞形態(tài)變化 Hb電泳分析電泳分析 Hb A2 ( ) 或或 ( ) Hb Barts ( ) Hb H ( ) Hb E ( ) 第六頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析貧血(pnxu)實驗室診斷程序貧血貧血(pnxu)的形態(tài)學(xué)分類的形態(tài)學(xué)分類貧血類型MCV（fl）MCH(pg)MCHC(g/L)特征小細(xì)胞低色素性貧血802420

4、0300珠蛋白合成異常，缺鐵性貧血，慢性失血小紅細(xì)胞正色素性貧血 8032320360骨髓呈巨幼紅細(xì)胞特征正紅細(xì)胞正色素性貧血801002732320360急性失血，急性溶血，再生障礙性貧血第七頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析第八頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析人類(rnli)不同時期血紅蛋白的組成人血紅蛋白的組成人血紅蛋白的組成 胚胎(piti)期血紅蛋白： Hb Gower 1 （x2 e2 ） Hb Gower 2 (2 e2) Hb Portland (x2 g2) 即Hb Portland 1 另有少量Hb Portland 2 (x2 2)，Hb Portlan

5、d 3 (x2 d2) 胎兒期主要血紅蛋白： HbF （2 g2 ） 成人主要血紅蛋白： HbA （ 2 2）約占血紅蛋白總量96.597.5% HbA2 （2 d2 ） 約占血紅蛋白總量2.53.5% HbF （ 2 g2）約占血紅蛋白總量1%以下。第九頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析 第十頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析地中海貧血表型陽性診斷參考(cnko)標(biāo)準(zhǔn)地中海貧血MCV82fL、HbA2 2.5%、HbF 2%、紅細(xì)胞形態(tài)異常，其中一項陽性者。地中海貧血MCV82fL、HbA2 3.5%、HbF 3.5%、紅細(xì)胞形態(tài)異常，其中一項陽性者。第十一頁，共二十四頁。地

6、中海貧血篩查-血液學(xué)分析血紅蛋白血紅蛋白(xuhng dnbi)電電泳圖譜泳圖譜1 2 3 4 51. 1. 正常人正常人HBHB2. 2. 輕型輕型(qn(qn xn xn) ) 地貧地貧 3. 3. 異常異常HB E HB E 雜合子雜合子4. 4. 新生兒新生兒HB BartHB Barts s (4 )( ( 地貧標(biāo)準(zhǔn)地貧標(biāo)準(zhǔn)型型）5. HB H 5. HB H (4 )Normal AA2 AE Barts AF HA+ +- -500V, 25min第十二頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析全自動血紅蛋白(xuhng dnbi)瓊脂糖凝膠電泳圖譜 1、正常成人HbA2,無Hb

7、F區(qū)帶; 2、成人HbA2升高,但HbF堿變性(binxng)含量正常,圖譜中不能掃描出HbF區(qū)帶; 3、成人HbA2升高,HbF堿變性含量稍高于正常,圖譜中可見淺染HbF區(qū)帶; 4、成人HbA2升高,HbF堿變性含量高于正常,圖譜中可見一淺染HbF區(qū)帶;5、成人HbA2升高,HbF堿變性含量明顯高于正常,圖譜中可見一清晰HbF區(qū)帶。第十三頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析a-珠蛋白基因突變珠蛋白基因突變(j yn t bin)及其遺傳學(xué)及其遺傳學(xué)分型分型 就遺傳單體就遺傳單體(dn t)型而言型而言a-珠蛋白基因突變可分成三類：珠蛋白基因突變可分成三類： a-地貧2缺失突變 左缺失

8、（-a4.2） ，右缺失（-a3.7） 、-a2.7 a-地貧I缺失突變 基因型為（-）， 包括：-SEA、-THAI、-FIL及-HW a-地貧非缺失突變 基因型為（a aT） ，包括： a aCS， a a QS ， a a wsHbH病基因型可分成缺失(qu sh)型和非缺失(qu sh)型兩種： 缺失突變基因型：（-a3.7/-）、（-a4.2/-）及(-a2.7/-) 非缺失突變基因型： （aaT/-）和（aaT/ aaT ） 第十四頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析a-地中海貧血臨床(ln chun)類型 根據(jù)臨床表現(xiàn)嚴(yán)重(ynzhng)程度，可分成以下四種靜止型靜止型a-

9、地貧地貧 （aaa-）或（aaa aT） 出生時臍血血紅蛋白含少量Hb Barts，-般少于5 患者無臨床癥狀輕型（標(biāo)準(zhǔn)型）輕型（標(biāo)準(zhǔn)型）a-地貧地貧 （a a /-）或（a-a-） 出生時臍血血紅蛋白Hb Barts占5-10%患者多無明顯臨床癥狀,實驗室檢查可小細(xì)胞低色素性貧血，MCH和MCV均較低血紅蛋白血紅蛋白H病病 （-a /-），或（a -/-），或（a aT /-），或（a aTa aT） 出生時臍血Hb Barts約占20-30，此時HbH含量較低；但出生后Hb Barts含量迅速降低，HbH含量逐漸增高。通常成年期患者HbH含量會持續(xù)在4%-20%范圍內(nèi)。 終生輕度至中度貧血

10、和肝脾腫大等，但差異較大 .實驗室檢查可見小細(xì)胞低色素性貧血，紅細(xì)胞內(nèi)可見包涵體HB Barts胎兒水腫綜合胎兒水腫綜合征（征（-/-） Barts為主, 少量Hb H 和HbPortland患胎多于妊娠晚期（3440周）或產(chǎn)后數(shù)小時內(nèi)死亡 第十五頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析 -珠蛋白基因珠蛋白基因(jyn)的突變的突變 -珠蛋白基因點突變：珠蛋白基因點突變： -珠蛋白基因最常見的突變類型。包括單堿基置換和數(shù)個堿基缺失或插人突變。在中國-地貧群體中 41/42（-TCTT）、IV S-654(CT), CD17(AT), -28（AG）和CD71/72（+A）等5種突變最常見，約

11、占總突變率90%以上 大片段缺失： 缺失突變涉及基因組上較大片段的缺失包括-地貧和遺傳性胎兒血紅蛋白(xuhng dnbi)持存癥(hereditary persistance of fetal hemoglobin,HPFH)。此外，G-和A -珠蛋白基因啟動子區(qū)的突變也可導(dǎo)致HPFH。第十六頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析突變(tbin)類型 編碼區(qū)的無義突變、移碼突變和起始密碼(m m)突變：如CD41-42，CD71-72 ，CD17突變后形成終止子，表現(xiàn)為0。 非編碼區(qū)IVS-1和IVS-2突變?nèi)鏘VS-II-654突變影響mRNA的拼接，表現(xiàn)為。 影響轉(zhuǎn)錄的突變：如-28

12、，-29的突變影響基因的轉(zhuǎn)錄，表現(xiàn)為 。第十七頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析地貧的基因型與表現(xiàn)型 重型重型 -地中海貧血地中海貧血/ 、0/ 0 、0/ （純合子或雙重雜合子）所有患者有組織缺氧癥狀所有患者有組織缺氧癥狀(zhngzhung)(zhngzhung)，可出現(xiàn)，可出現(xiàn)“地中海貧血面容地中海貧血面容”，生長發(fā)育遲緩。，生長發(fā)育遲緩。紅細(xì)胞體積小且低色素。過剩的游離紅細(xì)胞體積小且低色素。過剩的游離 鏈形成鏈形成 鏈包涵體，引起溶血性貧血，靠輸血維鏈包涵體，引起溶血性貧血，靠輸血維持生命。持生命。實驗室檢查主要可見：血紅蛋白定量約為20-30g/L或更低；紅細(xì)胞體積細(xì)小，形態(tài)

13、不一，靶形紅細(xì)胞較常見，網(wǎng)織紅細(xì)胞增高；血紅蛋白電泳時HbA缺乏或嚴(yán)重缺乏，HbF增高達(dá)30以上（偶可達(dá)90%以上）。 輕型輕型 -地中海貧血地中海貧血A/ 、A/ 0 （雜合子）患者癥狀較輕，輕度貧血，輕度肝脾腫大。紅細(xì)胞脆性降低，小細(xì)胞，低色素，患者癥狀較輕，輕度貧血，輕度肝脾腫大。紅細(xì)胞脆性降低，小細(xì)胞，低色素，MCVMCV、MCHMCH較低。較低。實驗室檢查實驗室檢查(jinch)可見：可見：血紅蛋白定量約為血紅蛋白定量約為90-120g/L或更低或更低;小細(xì)胞低色素性貧血，小細(xì)胞低色素性貧血，MCH和和MCV分別為分別為2022pg和和5070fl;紅細(xì)胞脆性降低；紅細(xì)胞脆性降低；約

14、約50%患者患者HbF增高，約為增高，約為1-3%，甚少大于，甚少大于5%；HbA2量增高量增高（達(dá)（達(dá)4%-8%）。）。 第十八頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析地貧的基因型與表現(xiàn)型 中間型中間型 -地中海貧血地中海貧血/ 、/ 0 （純合子或雙重雜合子）患者臨床癥狀介于重型和輕型之間，如中度偏重貧血，生長發(fā)育遲緩，黃疸等。患者臨床癥狀介于重型和輕型之間，如中度偏重貧血，生長發(fā)育遲緩，黃疸等。血液檢查呈小細(xì)胞低色素貧血癥。血液檢查呈小細(xì)胞低色素貧血癥。實驗室檢查呈小細(xì)胞低色素性貧血癥改變，血紅蛋白定量部分患者可低至實驗室檢查呈小細(xì)胞低色素性貧血癥改變，血紅蛋白定量部分患者可低至60g

15、/L，但也有患者高達(dá)，但也有患者高達(dá)100-120g/L本型患者通常屬某些本型患者通常屬某些(mu xi)-地中海貧血變異型純合子，如日地中海貧血變異型純合子，如日+地貧（高地貧（高F）+(高高 F)地貧或地貧或兩種不同變異型地中海貧血的雙重雜合子，如兩種不同變異型地中海貧血的雙重雜合子，如+地貧地貧+地貧。地貧。第十九頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析血液學(xué)分析(fnx)的敏感性和特異性 RBC脆性假陰性脆性假陰性 血常規(guī)檢測血常規(guī)檢測(MCV)對靜止型地貧有小概率的漏檢對靜止型地貧有小概率的漏檢靜止型a-地貧患者多無臨床癥狀E/N基因型患者的MCV十分接近篩查值這部分地貧患者極易漏

16、診(lu zhn) 通過通過Hb電泳可對電泳可對-地貧進行明確診斷地貧進行明確診斷HbA2輕度增高診斷-地貧的敏感性可達(dá)96.8%,特異性可達(dá)97.4% Hb電泳對輕型電泳對輕型-地貧無診斷意義地貧無診斷意義 輕型-地貧無HbBarts(4)和HbH 第二十頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析 -地中海貧血復(fù)合地中海貧血復(fù)合(fh)-地中海貧血時多表現(xiàn)為地中海貧血時多表現(xiàn)為-地中海地中海貧血的特征貧血的特征,造成造成-地貧漏檢地貧漏檢. 地中海貧血合并缺鐵性貧血造成地貧漏檢地中海貧血合并缺鐵性貧血造成地貧漏檢.第二十一頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析第二十二頁，共二十四頁。地中海貧血篩查-血液學(xué)分析謝謝(xi xie)！亞能生物(shngw)技術(shù)