(完整)高效液相色譜習題和答案解析

1、高效液相色譜法習題一、思考題1.從別離原理、儀器構造及應用范圍上簡要比擬氣相色譜及液相色譜的異同點.2.液相色譜中影響色譜峰展寬的因素有哪些？與氣相色譜相比擬,有哪些主要不同之處？3.在液相色譜中,提升柱效的途徑有哪些？其中最有效的途徑是什么？4.液相色譜有幾種類型？5.液-液分配色譜的保存機理是什么？這種類型的色譜在分析應用中,最適宜分離的物質是什么？6.液-固分配色譜的保存機理是什么？這種類型的色譜在分析應用中,最適宜別離的物質是什么？7 .化學鍵合色譜的保存機理是什么？這種類型的色譜在分析應用中,最適宜別離的物質是什么？8 .離子交換色譜的保存機理是什么？這種類型的色譜在分析應用中,最適

2、宜別離的物質是什么？9 .離子對色譜的保存機理是什么於種類型的色譜在分析應用中,最適宜別離的物質是什么？10 .空間排阻色譜的保存機理是什么？這種類型的色譜在分析應用中,最適宜別離的物質是什么？11 .在液-液分配色譜中,為什么可分為正相色譜及反相色譜？12 .何謂化學鍵合固定相？它有什么突出的優(yōu)點？13 .何謂化學抑制型離子色譜及非抑制型離子色譜？試述它們的根本原理14 .何謂梯度洗提？它與氣相色譜中的程序升溫有何異同之處？15.高效液相色譜進樣技術與氣相色譜進樣技術有和不同之處？16 .以液相色譜進行制備有什么優(yōu)點？17 .在毛細管中實現電泳別離有什么優(yōu)點?18 .試述CZE的根本原理19

3、 .試述CGE的根本原理20 .試述MECC勺根本原理二、選擇題.B高沸點大分子有機化合物所有化合物1 .液相色譜適宜的分析對象是A低沸點小分子有機化合物C所有有機化合物D2 .HPLCfGC的比擬,可忽略縱向擴散項,這主要是由于.A柱前壓力高B流速比GC勺快C流動相鉆度較小D柱溫低3 .組分在固定相中的質量為MAg,在流動相中的質量為MBg,而該組分在固定相中的濃度為CAg-mLb,在流動相中濃度為CBg-m,那么此組分的分配系數是.AmA/mBBmB/mACCB/CADCA/CB.4 .液相色譜定量分析時,不要求混合物中每一個組分都出峰的是A外標標準曲線法B內標法C面積歸一化法D|外標法5

4、 .在液相色譜中,為了改善別離的選擇性,以下舉措是有效的？A改變流動相種類1B改變固定相類型C增加流速D改變填料的粒度6 .在分配色譜法與化學鍵合相色譜法中,選擇不同類別的溶劑分子間作用力不同,以改善別離度,主要是.A提升分配系數比B容量因子增大C保存時間增長D色譜柱柱效提升7 .別離結構異構體,在下述四種方法中最適當的選擇是.A吸附色譜B反離子對色譜C親和色譜D空間排阻色譜8 .別離糖類化合物,選以下的柱子最適宜.AODS柱B硅膠柱C氨基鍵合相柱D條基鍵合相柱9 .在液相色譜中,梯度洗脫適用于別離.A異構體B沸點相近,官能團相同的化合物C沸點相差大的試樣D極性變化范圍寬的試樣10 .在高效液

5、相色譜中,采用254nm紫外限制器,下述溶劑的使用極限為.A甲醇210nmB乙酸乙醋260nmC丙酮330nm11吸附作用在下面哪種色譜方法中起主要作用.A液一液色譜法B液一固色譜法C鍵合相色譜法D離子交換法12 .當用硅膠為基質的填料作固定相時,流動相的pH范圍應為.A在中性區(qū)域B58C1一14D2813 .在液相色譜中,提升色譜柱柱效的最有效途徑是A減小填料粒度B適當升高柱溫C降低流動相的流速D增大流動相的流速14 .在正相色譜中,假設適當增大流動相極性那么.A樣品的k降低,tR降低B樣品的k增加,tR增加C相鄰組分的增加D對根本無影響樣品容量因子較小,假設想使要準確測量保存值有一定困難時

6、,15 .用ODSft分析一有機弱酸混合物樣品,以某一比例甲醇一水為流動相時,容量因子適當增加,較好的方法是.A增加流動相中甲醇的比例B增加流動相中的水的比例C流動相中加人少量HAcD流動相中加人少量的氨水16 .如果樣品比擬復雜,相鄰兩峰間距離太近或操作條件不易限制穩(wěn)定,可選擇以下方法定性.A利用相對保存值定性B加人物增加峰高的方法定性C利用文獻保存值數據定性D與化學方法配合進行定性17 .液相色譜中通用型檢測器是.A紫外吸收檢測器B示差折光檢測器C熱導池檢測器D熒光檢測器18 .離子色譜的主要特點是A高壓、高效、高速、高分辨率、高靈敏度B采用柱后抑制技術和電導檢測,特別適合離子分析C采用了

7、陰離子專用檢測器,對陰離子分析有高靈敏度D采用紫外檢測器合柱壓衍生裝置,對離子分析有高效19 .高壓、高效、高速是現代液相色譜的特點,采用高壓主要是由于A可加快流速,縮短分析時間C采用了細粒度固定相所致20.液相色譜的Hu曲線A與氣相色譜的一樣,存在著CH隨流動相的流速增加而上升B高壓可使別離效率顯著提升D采用了填充毛細管柱HBH隨流動相的流速增加而下降DH受u影響很小21與氣相色譜相比,在液相色譜中.A分子擴散項很小,可忽略不計,速率方程式由兩項構成B渦流擴散項很小,可忽略不計,速率方程式由兩項構成C傳質阻力項很小,可忽略不計,速率方程式由兩項構成D速率方程式同樣由三項構成,兩者相同22 .

8、在液相色譜中,以下檢測器可在獲得色譜流出曲線的根底上,同時獲得被別離組分的三維彩色圖形的是.A光電二極管陣列檢測器B示差折光檢測器C熒光檢測器D電化學檢測器23 .不同類型的有機物,在極性吸附劑上的保存順序是.A飽和燒、烯煌、芳煌、醛B酸、烯煌、芳煌、飽和燒C烯燒、醛、飽和燒、芳煌D酸、芳煌、烯煌、飽和燒24 .氧化鋁固定相色譜柱不適合選哪種物質作流動相.A甲醇B正己烷C煤油D環(huán)烷酸25 .液相色譜中不影響色譜峰擴展的因素是.A渦流擴散項B分子擴散項C傳質擴散項D柱壓效應26 .在液相色譜中,常用作固定相又可用作鍵合相基體的物質是.A分子篩B硅膠C氧化鋁D活性炭27 .樣品中各組分的出柱順序與

9、流動相的性質無關的色譜是.A離子交換色譜B環(huán)糊精色譜C親和色譜D凝膠色譜28 .在液相色譜中,固體吸附劑適用于別離.A異構體B沸點相近,官能團相同的顆粒C沸點相差大的試樣D極性變換范圍29 .為測定鄰氨基苯酸中微量雜質苯胺,選擇下面哪種條件.A硅膠固定相,異丙酸一己烷流動相B硅膠固定相,水一甲醇流動相;CODS鍵合相,水一甲醇流動相DODS鍵合相,異丙醛一己烷流動相30 .在以硅膠為固定相的吸附柱色譜中,錯誤的說法是A組分的極性越強,被固定相吸附的作用越強B物質的相對分子質量越大,越有利于吸附C流動相的極性越強,組分越容易被固定相所吸附D吸附劑的活度系數越小,對組分的吸附力越大31 .鍵合相的

10、鍵合基團的碳鏈長度增長后.A極性減小B極性增大C載樣量增大D載樣量減小32.在反相色譜法中,假設以甲醇一水為流動相,增加甲醇的比例時,組分的容量因子化為.Ak與tR增大Bk與tR減小Ck與tR不變Dk增大,tR減小33水在下述色譜中,洗脫水平最弱作為底劑的是.A正相色譜法B反相色譜法C吸附色譜法D空間排斥色譜法34.在以下方法中,組分的縱向擴散可忽略不計的是.A毛細管氣相色譜法B高效液相色譜法C氣相色譜法D超臨界色譜法三、填空題1 .高效液相色譜儀一般可分為梯度淋洗系統(tǒng)、高壓輸液泵進樣系統(tǒng)和別離柱及檢測器等局部.2 .常用的高效液相色譜檢測器主要是紫外、示差折光和電化學檢測器等.3 .高效液相

11、色譜中的梯度洗脫技術類似于氣相色譜中的程序升溫,相的組成與極性,而不是溫度.k與保存時間tR的變流量限制系統(tǒng)熒光、電導不過前者連續(xù)改變的是流動2mm的稱為細管或微管徑柱；內32 高效液相色譜柱按內徑大小大致可分為三種類型：內徑小于徑在2-5mm范圍內的是常規(guī)高效液相色譜柱；內徑大于5mm的一般成為半制備柱或制備柱.33 高效液相色譜固定相的性質和結構的差異,使別離機理不同而構成各種色譜類型,主要有液-固吸附色譜、液-液分配色譜、排阻色譜、親和色譜而畫子交換色譜等.34 在液-液分配色譜中,對于親水固定液采用流動相,即流動相的極性固定相的極性稱為正相分配色譜.35 正相分配色譜適用于別離化合物、

12、極性的先流出、極性的后流出.36 流動相常用的脫氣方法有、和.37 高壓輸液泵是高效液相色譜儀的關鍵部件之一,按其工作原理各可一和一兩大類.38 .離子對色譜分配容量k與萃取平衡常數Krp關系：正相離子對色譜；反相離子對色譜.39 .離子對色譜法是把加人流動相中,被分析樣品離子與生成中性離子對,從而增加了樣品離子在非極性固定相中的,使增加,從而改善別離效果.40 .無抑制離子色譜法的固定相采用離子交換樹脂,流動相是溶液,采用檢測器.41 .在液相色譜中,溶質分子與極性吸附中央的相互作用,會隨溶質分子上官能團極性的或官能團數目的而增加,這會使溶質在固定相上的保存值.42 .色譜操作時,如果超載,

13、即進樣量超過柱容量,那么柱效迅速,峰變.43 .、是現代液相色譜的顯著特點,其固定相多采用.44 .高效液相色譜的開展趨勢是減小和以提升柱效.45 .在液相色譜中,為改善別離度并調整出峰時間,可通過改變流動相和的方法到達.46 .在液相色譜中,速率理論方程中的項很小,可忽略不計,vanDeemter方程式可寫成.47 .通過化學反響,將鍵合到外表,此固定相稱為化學鍵合固定相.48 .與液一液分配色譜相憶一鍵合相色譜的主要優(yōu)點是化學鍵合固定相穩(wěn)定,在使用過程中:適用于;適合于k范圍寬的樣品分析.49 .液相色譜流動相應使用黏度溶劑,可減小溶質的,有利于提升柱效.50 .在液相色譜中,色譜特別適合

14、于別離異構體,洗脫方式適用于別離極性變化范圍寬的試樣.51 .以ODSW合固定相,甲醇一為流動相時,該色譜條件為色譜.52 .用凝膠為固定相,利用凝膠的與被別離組分分子間的相對大小關系,而別離、分析的色譜法,稱為空間排阻凝膠色譜法.凝膠色譜的選擇性只能通過選擇適宜的來實現.53 .在正相色譜中,極性的組分先出峰,極性的組分后出峰.四、正誤判斷1 .液一液色譜流動相與被別離物質相互作用,流動相極性的微小變化,都會使組分的保存值出現較大的改變.2 .利用離子交換劑作固定相的色譜法稱為離子交換色譜法.3 .紫外吸收檢測器是離子交換色譜法通用型檢測器.4 .檢測器性能好壞將對組分別離產生直接影響.5

15、.色譜歸一化法只能適用于檢測器對所有組分均有響應的情況.6 .高效液相色譜適用于大分子,熱不穩(wěn)定及生物試樣的分析.7 .高效液相色譜中通常采用調節(jié)別離溫度和流動相流速來改善別離效果.8 .離子交換鍵合固定相具有機械性能穩(wěn)定,可使用小粒度固定相和高柱壓來實現快速別離.9 .離子色譜中,在分析柱和檢測器之間增加了一個“抑制柱,以增加洗脫液本底電導.10 .在液相色譜中為預防固定相的流失,流動相與固定相的極性差異越大越好.11 .正相分配色譜的流動相極性大于固定相極性.12 .反相分配色譜適于非極性化合物的別離.13 .高效液相色譜法采用梯度洗脫,是為了改變被測組分的保存值,提升別離度.14 .液相

16、色譜柱一般采用不銹鋼柱、玻璃填充柱.15 .液相色譜固定相通常為粒度510m16 .示差折光檢測器是屬于通用型檢測器,適于梯度淋洗色譜.17 .離子交換色譜主要選用有機物作流動相.18 .體積排阻色譜所用的溶劑應與凝膠相似,主要是預防溶劑吸附.19 .在液一液色譜中,為改善別離效果,可采用梯度洗脫.20 .化學鍵合固定相具有良好的熱穩(wěn)定性,不易吸水,不易流失,可用梯度洗脫.21 .液相色譜的流動相又稱為淋洗液,改變淋洗液的組成、極性可顯著改變組分別離效果.22 .液相色譜指的是流動相是液體,固定相也是液體的色譜.23 .高效液相色譜柱柱效高,但凡能用液相色譜分析的樣品不用氣相色譜法分析.24

17、.在液相色譜中,流動相的流速變化對柱效影響不大.25 .液相色譜的Hu曲線與氣相色譜的H-u一樣,流速都存在一個最低點.26 .液相色譜的中引起色譜擴展的主要原因是分子擴散項.27 .正相鍵合色譜的固定相為非弱極性固定相,反相色譜的固定相為極性固定相.28 .某人用凝膠色譜別離易高聚物樣品,別離情況很差,他改變流動相的組成后,別離情況大為改良,這種說法對嗎？29 .在離子交換色譜中使用的固定相也屬于一種鍵合固定相.30 .離子對色譜也可分為正相離子和反相離子對色譜,反相離子對色譜,通常采用極性固定相.高效液項色譜法習題解答一、思考題1 .從別離原理、儀器構造及應用范圍上簡要比擬氣相色譜及液相色

18、譜的異同點.答：二者都是根據樣品組分與流動相和固定相相互作用力的差異進行別離的.從儀器構造上看,液相色譜需要增加高壓泵以提升流動相的流動速度,克服阻力.同時液相色譜所采用的固定相種類要比氣相色譜豐富的多,別離方式也比擬多樣.氣相色譜的檢測器主要采用熱導檢測器、氫焰檢測器和火焰光度檢測器等.而液相色譜那么多使用紫外檢測器、熒光檢測器及電化學檢測器等.但是二者均可與MS等聯用.二者均具別離水平高、靈敏度高、分析速度快,操作方便等優(yōu)點,但沸點太高的物質或熱穩(wěn)定性差的物質難以用氣相色譜進行分析.而只要試樣能夠制成溶液,既可用于HPLO析,而不受沸點高、熱穩(wěn)定性差、相對分子量大的限制.2 .液相色譜中影

19、響色譜峰展寬的因素有哪些？與氣相色譜相比擬,有哪些主要不同之處？答：液相色譜中引起色譜峰擴展的主要因素為渦流擴散、流動的流動相傳質、滯留的流動相傳質以及柱外效應.在氣相色譜中徑向擴散往往比擬顯著,而液相色譜中徑向擴散的影響較弱,往往可以忽略.另外,在液相色譜中還存在比擬顯著的滯留流動相傳質及柱外效應.3 .在液相色譜中,提升柱效的途徑有哪些？其中最有效的途徑是什么？答：液相色譜中提升柱效的途徑主要有：(1)提升柱內填料裝填的均勻性；(2)改良固定相：(3)粒度；選擇薄殼形擔體；選用低粘度的流動相；(4)適當提升柱溫其中,減小粒度是最有效的途徑.4 .液相色譜有幾種類型？答：液相色譜有以下幾種類

20、型：液-液分配色譜；液-固吸附色譜；化學鍵合色譜；離子交換色譜；離子對色譜；空間排阻色譜等.5 .液-液分配色譜的保存機理是什么？這種類型的色譜在分析應用中,最適宜別離的物質是什么？答：液一液分配色譜的保存機理是通過組分在固定相和流動相間的屢次分配進行別離的.可以別離各種無機、有機化合物.6 .液-固分配色譜的保存機理是什么？這種類型的色譜在分析應用中,最適宜別離的物質是什么？答：液-固吸附色譜是通過組分在兩相間的屢次吸附與解吸平衡實現別離的.最適宜別離的物質為中等相對分子質量的油溶性試樣,但凡能夠用薄層色譜別離的物質均可用此法別離.7 .化學鍵合色譜的保存機理是什么？這種類型的色譜在分析應用

21、中,最適宜別離的物質是什么？答：化學鍵合色譜中由于鍵合基團不能全部覆蓋具有吸附水平的載體,所以同時遵循吸附和分配的機理,最適宜別離的物質為與液-液色譜相同.8 .離子交換色譜的保存機理是什么？這種類型的色譜在分析應用中,最適宜別離的物質是什么？答：離子交換色譜和離子色譜是通過組分與固定相間親合力差異而實現別離的.各種離子及在溶液中能夠離解的物質均可實現別離,包括無機化合物、有機物及生物分子,如氨基酸、核酸及蛋白質等.9 .離子對色譜的保存機理是什么於種類型的色譜在分析應用中,最適宜別離的物質是什么？答：在離子對色譜色譜中,樣品組分進入色譜柱后,組分的離子與對離子相互作用生成中性化合物,從而被固

22、定相分配或吸附進而實現別離的.各種有機酸堿特別是核酸、核甘、生物堿等的別離是離子對色譜的特點.10 .空間排阻色譜的保存機理是什么？這種類型的色譜在分析應用中,最適宜別離的物質是什么？答：空間排阻色譜是利用凝膠固定相的孔徑與被別離組分分子間的相對大小關系,而別離、分析的方法.最適宜別離的物質是：另外,尚有手性色譜、膠束色譜、環(huán)糊精色譜及親合色譜等機理.11 .在液-液分配色譜中,為什么可分為正相色譜及反相色譜？答：采用正相及反相色譜是為了降低固定液在流動相中的溶解度從而預防固定液的流失.12 .何謂化學鍵合固定相？它有什么突出的優(yōu)點？答：利用化學反響將固定液的官能團鍵合在載體外表形成的固定相稱

23、為化學鍵合固定相.優(yōu)點：固定相外表沒有液坑,比一般液體固定相傳質快的多；無固定相流失,增加了色譜柱的穩(wěn)定性及壽命；可以鍵合不同的官能團,能靈活地改變選擇性,可應用與多種色譜類型及樣品的分析；有利于梯度洗提,也有利于配用靈敏的檢測器和儲分的收集.13 .何謂化學抑制型離子色譜及非抑制型離子色譜？試述它們的根本原理答：在離子色譜中檢測器為電導檢測器,以電解質溶液作為流動相,為了消除強電解質背景對電導檢測器RHNaOHRNaH2ORHNaXRNaHX的干擾,通常除了分析柱外,還增加一根抑制柱,這種雙柱型離子色譜法稱為化學抑制型離子色譜法.例如,為了別離陰離子,常使用NaOH§液為流動相,鈉

24、離子的干擾非常嚴重,這時可在分析柱后加一根抑制柱,其中裝填高容量H+型陽離子交換樹脂,通過離子交換,使NaOH?；癁殡妼е岛苄〉腍bO,從而消除了背景電導的影響.但是如果選用低電導的流動相(如1X10-45X10-4M的苯甲酸鹽或鄰苯二甲酸鹽),那么由于背景電導較低,不干擾樣品的檢測,這時候不必加抑制柱,只使用分析柱,稱為非抑制型離子色譜法.14 .何謂梯度洗提？它與氣相色譜中的程序升溫有何異同之處？答：在一個分析周期內,按一定程序不斷改變流動相的組成或濃度配比,稱為梯度洗提,是改良液相色譜別離的重要手段.梯度洗提與氣相色譜中的程序升溫類似,但是前者連續(xù)改變的是流動相的極性、pH或離子強度,而

25、后者改變的溫度.程序升溫也是改良氣相色譜別離的重要手段.15 .高效液相色譜進樣技術與氣相色譜進樣技術有和不同之處？答：在液相色譜中為了承受高壓,常常采用停流進樣與高壓定量進樣閥進樣的方式.16 .以液相色譜進行制備有什么優(yōu)點？答：以液相色譜進行制備時,別離條件溫和,別離檢測中不會導致試樣被破壞,切易于回收原物.17 .在毛細管中實現電泳別離有什么優(yōu)點？答：毛細管由于散熱效率很高,可以減少因焦耳熱效應造成的區(qū)帶展寬,因而可以采用較高的電壓,克服了傳統(tǒng)電泳技術的局限,極大地提升別離效率,而且別離時間縮短,試樣分析范圍寬,檢測限低.對于大分子的別離往往比色譜方法具有更高的柱效.18 .試述CZE的

26、根本原理答：毛細管區(qū)帶電泳CZB是在指外加電場的作用下,溶質在毛細管內的背景電解質溶液中以一定速度遷移而形成一個一個獨立的溶質帶的電泳模式,其別離根底是淌度的差異.由于中性物質的淌度差為零,所以不能別離中性物質.帶電粒子的遷移速度為電泳速度與電滲流的矢量和.在緩沖溶液中帶正電的粒子由于遷移方向與電滲流相同,流動速度最快,最先流出,負電荷粒子的運動方向與電滲流相反,最后流出,中性粒子的電泳速度與電滲流相同,因而遷移速度介于二者之間.這樣各種粒子因差速遷移而到達區(qū)帶別離,這就是CZE的別離原理.19 .試述CGE的根本原理答：毛細管凝膠電泳CGE是毛細管內填充凝膠或其他篩分介質,如交聯或非交聯的聚丙烯酰胺.荷質比相等,但