毒物檢驗(yàn)在急性中毒診治中的作用課件

1、徐州市腫瘤醫(yī)院毒物徐州市腫瘤醫(yī)院毒物(dw)(dw)理化實(shí)驗(yàn)理化實(shí)驗(yàn)室室2016年年10月月毒物檢驗(yàn)在急性中毒毒物檢驗(yàn)在急性中毒診治診治(zhnzh)中的作用中的作用陶 剛 電 話( d i n h u )一頁，共三十三頁。毒物(dw)檢驗(yàn)簡介診斷性的目的：通過對進(jìn)入體內(nèi)的毒物的分離鑒定，查清毒物及中毒原因。即是否中毒，是什么毒物引起的中毒。為中毒的診斷、急救和預(yù)防提供科學(xué)的依據(jù)。通過毒檢查清毒物對中毒病進(jìn)行診斷，就如同通過查明蟲體和微生物對寄生蟲病和傳染病進(jìn)行診斷一樣，如果查不清毒物，單憑病史、癥狀、病理變化等是很難對中毒病進(jìn)行確診的。預(yù)防性的目的：主要(zhyo)

2、通過食物、飲用水、所在的環(huán)境及機(jī)體的某些生理指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)測及早預(yù)防中毒病的發(fā)生。毒物(dw)檢驗(yàn)的目的 第二頁，共三十三頁。毒物檢驗(yàn)(jinyn)簡介毒物檢驗(yàn)中的幾個(gè)主要環(huán)節(jié) 由于中毒往往在短時(shí)間內(nèi)造成嚴(yán)重后果，所以要求毒物檢驗(yàn)既要迅速又要結(jié)果正確無誤。毒物的種類很多，中毒的原因也很復(fù)雜，在進(jìn)行毒檢之前，要考慮以下幾個(gè)問題： （1）、有無中毒的可能，即是否(sh fu)為中毒？（2）、如果是中毒可能是何種毒物中毒？（3）、該取什么檢材？ （4）、用什么方法進(jìn)行檢驗(yàn)。 只有這幾個(gè)問題明確了，毒檢工作才不致于白費(fèi)力，或少走彎路。第三頁，共三十三頁。4目目 錄錄1、實(shí)驗(yàn)室檢測的重要性2、毒物理化實(shí)驗(yàn)室

3、開展項(xiàng)目(xingm)3、實(shí)驗(yàn)室檢測的質(zhì)量保證4、理化實(shí)驗(yàn)室展望第四頁，共三十三頁。51、實(shí)驗(yàn)室檢測(jin c)的重要性 急性中毒分析的應(yīng)對(yngdu)流程： 現(xiàn)場調(diào)查 現(xiàn)場采樣 現(xiàn)場檢測 實(shí)驗(yàn)室檢測 中毒 原因 實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果對事件(shjin)病因確定，中毒患者病因的診斷和治療方案的確定均有重要的作用。 患者的生物材料測定結(jié)果可直接指示中毒原因和中毒程度，是事件應(yīng)對中必采的樣品。第五頁，共三十三頁。61-1、 常用(chn yn)臨床生物樣品 常用生物樣品的種類、特點(diǎn)與采集常用生物樣品的種類、特點(diǎn)與采集 血漿（ plasma ） 血樣 血清（ serum ） 全血（ whole blo

4、od ） 尿液（ urine ） 用于未知樣品的劑量回收、腎清除率及生物利用度的研究。 尿液未知樣品濃度變化大，應(yīng)測定(cdng)一定時(shí)間內(nèi)尿中 該物質(zhì)總量。 尿液與血液中未知樣品的相關(guān)性。 尿中未知樣品的呈現(xiàn)狀態(tài)。第六頁，共三十三頁。7尿樣：50ml，若不能及時(shí)測定，需4保存。血樣：采集血清，血漿和全血時(shí)防止溶血；臨時(shí)存放(cnfng)于4保存，否則須冷凍保存。蓋子顏色添加抗凝劑用途紅色無化學(xué)、血清學(xué)、血庫紫色EDTA 適用于血液常規(guī)檢查、糖化血紅蛋白綠色肝素鈉、肝素鋰、肝素胺化學(xué)黃色多茴香腦磺酸鈉血培養(yǎng)棕色肝素鈉鉛測定橘紅色促凝劑快速生化常用彩色(cis)真空采血容器常用生物(shngw)

5、樣品的采集與保存第七頁，共三十三頁。8 體內(nèi)物質(zhì)分析是借助于現(xiàn)代化的儀器與技術(shù)來分析其在體內(nèi)數(shù)量與質(zhì)量的變化，主要考慮生物樣品的種類，被測定生物樣品的性質(zhì)和測定方法等方面的問題。目前，用于生物樣品分析的技術(shù)有很多，而利用待測組分或其化學(xué)反應(yīng)(huxu fnyng)生成物所表現(xiàn)出來的物理或物理化學(xué)特性，如光學(xué)特性、電化學(xué)特性等，應(yīng)用分析儀器進(jìn)行測量來計(jì)算待測組分含量的方法，即物理化學(xué)分析法為理化實(shí)驗(yàn)室常用方法。 1-2、生物樣品(yngpn)的常用分析技術(shù)第八頁，共三十三頁。92、毒物理化(lhu)實(shí)驗(yàn)室開展項(xiàng)目第九頁，共三十三頁。102-1、重金屬毒物(dw) 重金屬中毒是指重金屬元素或其化合

6、物引起的中毒，如汞中毒、鉛中毒等。重金屬能夠使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)發(fā)生(fshng)不可逆的改變，從而影響組織細(xì)胞功能，進(jìn)而影響人體健康。 典型重金屬中毒的癥狀：錳 早期錳中毒以神經(jīng)衰弱癥候群和植物神經(jīng)功能障礙為主，晚期有錐體外系受損的癥狀，有致癌致畸致突變效應(yīng)。第十頁，共三十三頁。112-1、重金屬毒物(dw) 原子吸收(xshu)分光光度計(jì) 鋅（Zn）、鎘（Cd）、砷（As）等汞(Hg)血鉛檢測(jin c)尿鉛檢測血汞檢測 尿汞檢測鉛(Pb)錳(Mn) 尿錳檢測 發(fā)錳檢測銅(Cu) 血銅檢測測汞儀：汞蒸氣通過進(jìn)入測汞儀的吸收池測定吸光度，根據(jù)光線減弱的程度可以測出氣體中的汞含量。 第十一頁，共三

7、十三頁。12 盡管錳、銅、鋅等重金屬是生命活動所需要的微量元素，但是大部分重金屬如汞、鉛、鎘等并非生命活動所必須，而且所有重金屬超過一定濃度都對人體有毒害作用。 檢測方法(fngf)：石墨爐原子吸收分光光度法 火焰原子吸收分光光度法 原理： 試樣經(jīng)灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度計(jì)石墨爐/火焰管中，電熱原子化/火焰原子化后吸收相應(yīng)的共振線，在一定濃度范圍內(nèi)，其吸收值與重金屬含量成正比，用標(biāo)準(zhǔn)系列定量。原子(yunz)吸收分光光度計(jì) 第十二頁，共三十三頁。132-2、氣體(qt)與揮發(fā)性毒物 一氧化碳（CO）中毒是含碳物質(zhì)燃燒不完全時(shí)的產(chǎn)物經(jīng)呼吸道吸入引起中毒。 CO易與血紅蛋白結(jié)合，形成碳

8、氧血紅蛋白，使血紅蛋白喪失攜氧能力，造成組織窒息。其對全身的組織細(xì)胞均有毒性作用，尤其(yuq)對大腦皮質(zhì)的影響最為嚴(yán)重。 檢測方法：血中碳氧血紅蛋白分光光度計(jì)的定量檢測。 臨床意義：用于CO中毒的臨床診斷，其中正常參考范圍小于3%。輕度中毒血液HbCO濃度為10%30%，中度中毒血液HbCO濃度為30%40%，重度中毒血液HbCO濃度可高達(dá)50%。 碳氧血紅蛋白碳氧血紅蛋白(xuhng dnbi)（HbCO） 第十三頁，共三十三頁。14碳氧血紅蛋白定量碳氧血紅蛋白定量(dngling)檢測檢測檢測原理： 分光光度法是通過雙波長吸光度比值法檢測血中HbCO，以碳氧血紅蛋白飽和度表示血液中HbC

9、O。利用(lyng)血液中的碳氧血紅蛋白吸光光譜特性在化學(xué)處理后的改變，進(jìn)行定量測定。紫外-可見(kjin)分光光度計(jì)第十四頁，共三十三頁。152-2、氣體(qt)與揮發(fā)性毒物 血液中乙醇檢測(jin c)：氣相色譜法測定混合物中乙醇的含量 氣相色譜法進(jìn)行(jnxng)血液中酒精含量的定性及定量檢測分析。氣相色譜中的氣-液色譜法屬于分配色譜，利用混合物中各組分在固定相與流動相之間分配情況不同，從而達(dá)到分離的目的。 氰化物檢測：硫氰酸鹽的定性檢測普魯士蘭快速檢驗(yàn)法：酸化的檢樣受熱后，氰化物變成氫氰酸逸出，在堿性條件下與硫酸亞鐵作用，生成亞鐵氰絡(luò)鹽，用酸酸化后，與高鐵離子反應(yīng)，生成普魯士藍(lán)。氣相色

10、譜儀第十五頁，共三十三頁。162-3、除草劑 百草枯又名殺草快、一掃光，速效觸滅型除草劑，噴灑后能很快發(fā)揮作用。正常情況下對環(huán)境無危害，但對人畜具有較強(qiáng)毒性。其主要特點(diǎn)致死量低、死亡率高、預(yù)后差。中毒(zhng d)多為自服或誤服，也可經(jīng)皮膚和呼吸道吸收損害上皮組織，于肺部聚集，導(dǎo)致肺纖維化和呼吸衰竭。實(shí)驗(yàn)室檢測：血、尿中百草枯進(jìn)行毒物分析。臨床表現(xiàn)：輕型-攝入量20mg/kg，多數(shù)患者死于肺功能衰竭；暴發(fā)型-攝入量40mg/kg，1-4天內(nèi)死于多臟器衰竭。第十六頁，共三十三頁。17定性檢測：化學(xué)法快速檢測通過顏色判斷體內(nèi)含量。定量檢測：液相色譜法檢測血液中百草枯及其衍生物的含量。方 法(fn

11、gf)液相色譜儀濃度從左至右依次遞增，顏色相應(yīng)加深。第十七頁，共三十三頁。182-4、殺鼠劑 毒鼠強(qiáng) 俗名“三步倒”、“聞到死”。一種化學(xué)劇毒藥，其毒性甚至比氰化物還要大100倍。 不易降解，可造成二次、三次中毒，故而世界上從未正式將其作為商品滅鼠藥。 毒性極大，動物食入后，毒物未入胃便發(fā)作，每1000克體重使用0.2毫克，幾分鐘即可死亡。 對人的致死量為512mg，人口服(kuf)中毒后數(shù)分鐘至半小時(shí)內(nèi)發(fā)病，若不及時(shí)搶救，多于2小時(shí)內(nèi)死亡，但也有中毒較輕者，23天后才發(fā)病。第十八頁，共三十三頁。192-4、殺鼠劑化學(xué)名：四次甲基二砜四胺方法確證體外檢材預(yù)試動物實(shí)驗(yàn)體內(nèi)檢材鑒別GCGC/MS快

12、速定性試驗(yàn)：硫酸-鹽酸苯肼顯色測定微量毒鼠強(qiáng)。第十九頁，共三十三頁。202-5、染色體和微核 微核（micronucleus, 簡稱MCN），是真核類生物細(xì)胞(xbo)中的一種異常結(jié)構(gòu)，是染色體畸變在間期細(xì)胞(xbo)中的一種表現(xiàn)形式。目前國內(nèi)外不少部門已把微核測試用于輻射損傷、輻射防護(hù)、化學(xué)誘變劑、新藥試驗(yàn)、食品添加劑的安全評價(jià)，以及染色體遺傳疾病和癌癥前期診斷等各個(gè)方面。 染色體（Chromosome）檢查，是用外周血在細(xì)胞生長刺激因子作用下，培養(yǎng)、獲得大量分裂細(xì)胞，固定(gdng)于載玻片上，在顯微鏡下觀察染色體的結(jié)構(gòu)和數(shù)量。適用于放射性損傷、白血病及其它腫瘤患者、接觸過有害物質(zhì)者、生殖

13、功能障礙者等。 第二十頁，共三十三頁。2-6、高鐵血紅蛋白(xuhng dnbi) 亞 硝 酸 鹽 的 檢 驗(yàn)(jinyn)亞硝酸鹽是一種血液毒物，進(jìn)入血液循環(huán)后作為強(qiáng)氧化劑，迅速將血紅蛋白氧化成為高鐵（Fe3+）血紅蛋白，使該部分血紅蛋白失去攜氧釋氧功能，導(dǎo)致組織缺氧的一種急性、亞急性中毒。常態(tài)(chngti)下，亞硝酸鹽通常呈白色或淺黃色顆粒結(jié)晶，形似食鹽，因此常因誤食而中毒。臨床上以黏膜發(fā)紺、血液褐變、呼吸困難、胃腸道炎癥。檢驗(yàn)方法：氰化高鐵血紅蛋白定量測定法。 第二十一頁，共三十三頁。22原理：高鐵血紅蛋白（methemoglobin，MetHb）為血紅蛋白的氧化物，其在波長632nm

14、處有吸收帶。目前(mqin)標(biāo)準(zhǔn)化的試驗(yàn)方法是氰化高鐵血紅蛋白測定法，該類方法基于弱酸性MetHb加入氰化物后形成氰化MetHb（MetHb-CN），在630nm處的特征吸收峰會消失。根據(jù)加入氰化物前后密度的變化量來計(jì)算MetHb的含量。 該法是國際血液標(biāo)準(zhǔn)化委員會推薦的參考方法，具有操作簡單、顯色快、結(jié)果穩(wěn)定可靠等優(yōu)點(diǎn)，其致命(zhmng)的弱點(diǎn)是氰化鉀試劑劇毒，應(yīng)合理使用并保管。紫外-可見分光光度計(jì)第二十二頁，共三十三頁。232-7、尿-氨基(nj)乙酰丙酸原理(yunl)：ALA+乙酰乙酸乙酯 顯色液，形成紅色化合物 比色定量萃取液 +吡咯(blu)化合物100PH=4.6乙酸乙酯萃取5

15、54nm 尿-氨基乙酰丙酸（-aminolevulinic acid，簡稱-ALA）檢測是診斷鉛中毒的指標(biāo)。-ALA活性上升是對鉛的特異性反映，作為驅(qū)鉛療效觀察指標(biāo)，應(yīng)用于鉛接觸人員健康監(jiān)護(hù)指標(biāo)。第二十三頁，共三十三頁。242-8、氟氟是人體內(nèi)必須的微量元素。在人體內(nèi)的分布主要集中(jzhng)在骨骼、牙齒、指甲和毛發(fā)中，尤以牙釉質(zhì)中含量最多。骨骼中以長骨的含氟量最高。 飲水占人體氟來源的65%，長期生活在高氟環(huán)境的居民主要通過飲水等攝入過量氟而引起的以氟斑牙和氟骨癥為特征的全身慢性蓄積性疾病。檢查方法：血氟、尿氟、水氟離子選擇電極定量測定法。 第二十四頁，共三十三頁。25氟離子選擇電極(di

16、nj)定量測定法原理： 氟化鑭單晶膜對氟離子有選擇性，在氟化鑭電極膜兩側(cè)的不同濃度(nngd)氟溶液之間存在電位差，這種電位差通常稱為膜電位。膜電位的大小與氟化物溶液的離子濃度(nngd)有關(guān)。氟電極與飽和甘汞電極組成一對原電池。利用電動勢與離子活度負(fù)對數(shù)值的線性關(guān)系求出檢測樣中氟離子濃度(nngd)。氟離子選擇(xunz)電極儀第二十五頁，共三十三頁。263、實(shí)驗(yàn)室檢測(jin c)的質(zhì)量保證 第二十六頁，共三十三頁。273-1、實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)(jinyn)質(zhì)量 正確的檢驗(yàn)(jinyn)結(jié)果 在正確的時(shí)間 基于正確的樣本 取自正確的患者 正確的數(shù)據(jù)解釋 基于正確的參考范圍 基于合適的成本第二十

17、七頁，共三十三頁。28 3-2、職業(yè)衛(wèi)生(wishng)檢測方法的基本要求實(shí) 驗(yàn) 室 檢 查(jinch):檢查所用的試驗(yàn)器具、材料、樣品等是否正確、符合要求；檢驗(yàn)方法是否正確；檢驗(yàn)儀器、設(shè)備運(yùn)行是否正常；檢查實(shí)驗(yàn)(shyn)操作有無差錯(cuò)。第二十八頁，共三十三頁。293-3、實(shí)驗(yàn)室常用(chn yn)檢測方法光譜法 分子光譜原子光譜色譜法 氣相色譜液相色譜離子色譜電化學(xué)法 電位溶出電位分析法電導(dǎo)法第二十九頁，共三十三頁。303-4、 檢測(jin c)方法的性能指標(biāo) l 精密度：表示數(shù)值的離散(lsn)程度，反應(yīng)分析方法的系統(tǒng)誤差的大小。l 準(zhǔn)確度：表示測得值和樣品真值的符合程度，是指測定結(jié)果與真實(shí)值間的誤差。其由方法的總體誤差引起，但主要由系統(tǒng)誤差決定。l靈敏度：反應(yīng)分析實(shí)驗(yàn)室和測試系統(tǒng)的場地與基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室及分析人員的水平。l 檢出限、測定下限第三十頁，共三十三頁。31理化理化(lhu)實(shí)驗(yàn)室展望實(shí)驗(yàn)室展望理化檢驗(yàn)，是對物質(zhì)的組成、結(jié)構(gòu)、性質(zhì)等物理化學(xué)屬性進(jìn)行分析檢測的技術(shù)。徐州市腫瘤醫(yī)院自建立毒物檢驗(yàn)理化實(shí)驗(yàn)室以來，依據(jù)現(xiàn)代分析儀器和電子計(jì)算機(jī)技術(shù)聯(lián)用基礎(chǔ)上的先進(jìn)科學(xué)檢驗(yàn)手段，把自動化和智能化涵蓋于檢驗(yàn)過程中，從而把衛(wèi)生理化檢驗(yàn)帶入到現(xiàn)代化發(fā)展階段(jidun)。理化檢驗(yàn)是環(huán)境科學(xué)的有力助手，為生命科學(xué)做出了重