毒物檢驗(yàn)在急性中毒診治中的作用課件

1、徐州市腫瘤醫(yī)院毒物徐州市腫瘤醫(yī)院毒物(dw)(dw)理化實(shí)驗(yàn)理化實(shí)驗(yàn)室室2016年年10月月毒物檢驗(yàn)在急性中毒毒物檢驗(yàn)在急性中毒診治診治(zhnzh)中的作用中的作用陶 剛 電 話( d i n h u )一頁(yè)，共三十三頁(yè)。毒物(dw)檢驗(yàn)簡(jiǎn)介診斷性的目的：通過(guò)對(duì)進(jìn)入體內(nèi)的毒物的分離鑒定，查清毒物及中毒原因。即是否中毒，是什么毒物引起的中毒。為中毒的診斷、急救和預(yù)防提供科學(xué)的依據(jù)。通過(guò)毒檢查清毒物對(duì)中毒病進(jìn)行診斷，就如同通過(guò)查明蟲(chóng)體和微生物對(duì)寄生蟲(chóng)病和傳染病進(jìn)行診斷一樣，如果查不清毒物，單憑病史、癥狀、病理變化等是很難對(duì)中毒病進(jìn)行確診的。預(yù)防性的目的：主要(zhyo)

2、通過(guò)食物、飲用水、所在的環(huán)境及機(jī)體的某些生理指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)測(cè)及早預(yù)防中毒病的發(fā)生。毒物(dw)檢驗(yàn)的目的 第二頁(yè)，共三十三頁(yè)。毒物檢驗(yàn)(jinyn)簡(jiǎn)介毒物檢驗(yàn)中的幾個(gè)主要環(huán)節(jié) 由于中毒往往在短時(shí)間內(nèi)造成嚴(yán)重后果，所以要求毒物檢驗(yàn)既要迅速又要結(jié)果正確無(wú)誤。毒物的種類(lèi)很多，中毒的原因也很復(fù)雜，在進(jìn)行毒檢之前，要考慮以下幾個(gè)問(wèn)題： （1）、有無(wú)中毒的可能，即是否(sh fu)為中毒？（2）、如果是中毒可能是何種毒物中毒？（3）、該取什么檢材？ （4）、用什么方法進(jìn)行檢驗(yàn)。 只有這幾個(gè)問(wèn)題明確了，毒檢工作才不致于白費(fèi)力，或少走彎路。第三頁(yè)，共三十三頁(yè)。4目目 錄錄1、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的重要性2、毒物理化實(shí)驗(yàn)室

3、開(kāi)展項(xiàng)目(xingm)3、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的質(zhì)量保證4、理化實(shí)驗(yàn)室展望第四頁(yè)，共三十三頁(yè)。51、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)(jin c)的重要性 急性中毒分析的應(yīng)對(duì)(yngdu)流程： 現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查 現(xiàn)場(chǎng)采樣 現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) 中毒 原因 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果對(duì)事件(shjin)病因確定，中毒患者病因的診斷和治療方案的確定均有重要的作用。 患者的生物材料測(cè)定結(jié)果可直接指示中毒原因和中毒程度，是事件應(yīng)對(duì)中必采的樣品。第五頁(yè)，共三十三頁(yè)。61-1、 常用(chn yn)臨床生物樣品 常用生物樣品的種類(lèi)、特點(diǎn)與采集常用生物樣品的種類(lèi)、特點(diǎn)與采集 血漿（ plasma ） 血樣 血清（ serum ） 全血（ whole blo

4、od ） 尿液（ urine ） 用于未知樣品的劑量回收、腎清除率及生物利用度的研究。 尿液未知樣品濃度變化大，應(yīng)測(cè)定(cdng)一定時(shí)間內(nèi)尿中 該物質(zhì)總量。 尿液與血液中未知樣品的相關(guān)性。 尿中未知樣品的呈現(xiàn)狀態(tài)。第六頁(yè)，共三十三頁(yè)。7尿樣：50ml，若不能及時(shí)測(cè)定，需4保存。血樣：采集血清，血漿和全血時(shí)防止溶血；臨時(shí)存放(cnfng)于4保存，否則須冷凍保存。蓋子顏色添加抗凝劑用途紅色無(wú)化學(xué)、血清學(xué)、血庫(kù)紫色EDTA 適用于血液常規(guī)檢查、糖化血紅蛋白綠色肝素鈉、肝素鋰、肝素胺化學(xué)黃色多茴香腦磺酸鈉血培養(yǎng)棕色肝素鈉鉛測(cè)定橘紅色促凝劑快速生化常用彩色(cis)真空采血容器常用生物(shngw)

5、樣品的采集與保存第七頁(yè)，共三十三頁(yè)。8 體內(nèi)物質(zhì)分析是借助于現(xiàn)代化的儀器與技術(shù)來(lái)分析其在體內(nèi)數(shù)量與質(zhì)量的變化，主要考慮生物樣品的種類(lèi)，被測(cè)定生物樣品的性質(zhì)和測(cè)定方法等方面的問(wèn)題。目前，用于生物樣品分析的技術(shù)有很多，而利用待測(cè)組分或其化學(xué)反應(yīng)(huxu fnyng)生成物所表現(xiàn)出來(lái)的物理或物理化學(xué)特性，如光學(xué)特性、電化學(xué)特性等，應(yīng)用分析儀器進(jìn)行測(cè)量來(lái)計(jì)算待測(cè)組分含量的方法，即物理化學(xué)分析法為理化實(shí)驗(yàn)室常用方法。 1-2、生物樣品(yngpn)的常用分析技術(shù)第八頁(yè)，共三十三頁(yè)。92、毒物理化(lhu)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展項(xiàng)目第九頁(yè)，共三十三頁(yè)。102-1、重金屬毒物(dw) 重金屬中毒是指重金屬元素或其化合

6、物引起的中毒，如汞中毒、鉛中毒等。重金屬能夠使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)發(fā)生(fshng)不可逆的改變，從而影響組織細(xì)胞功能，進(jìn)而影響人體健康。 典型重金屬中毒的癥狀：錳 早期錳中毒以神經(jīng)衰弱癥候群和植物神經(jīng)功能障礙為主，晚期有錐體外系受損的癥狀，有致癌致畸致突變效應(yīng)。第十頁(yè)，共三十三頁(yè)。112-1、重金屬毒物(dw) 原子吸收(xshu)分光光度計(jì) 鋅（Zn）、鎘（Cd）、砷（As）等汞(Hg)血鉛檢測(cè)(jin c)尿鉛檢測(cè)血汞檢測(cè) 尿汞檢測(cè)鉛(Pb)錳(Mn) 尿錳檢測(cè) 發(fā)錳檢測(cè)銅(Cu) 血銅檢測(cè)測(cè)汞儀：汞蒸氣通過(guò)進(jìn)入測(cè)汞儀的吸收池測(cè)定吸光度，根據(jù)光線減弱的程度可以測(cè)出氣體中的汞含量。 第十一頁(yè)，共三

7、十三頁(yè)。12 盡管錳、銅、鋅等重金屬是生命活動(dòng)所需要的微量元素，但是大部分重金屬如汞、鉛、鎘等并非生命活動(dòng)所必須，而且所有重金屬超過(guò)一定濃度都對(duì)人體有毒害作用。 檢測(cè)方法(fngf)：石墨爐原子吸收分光光度法 火焰原子吸收分光光度法 原理： 試樣經(jīng)灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度計(jì)石墨爐/火焰管中，電熱原子化/火焰原子化后吸收相應(yīng)的共振線，在一定濃度范圍內(nèi)，其吸收值與重金屬含量成正比，用標(biāo)準(zhǔn)系列定量。原子(yunz)吸收分光光度計(jì) 第十二頁(yè)，共三十三頁(yè)。132-2、氣體(qt)與揮發(fā)性毒物 一氧化碳（CO）中毒是含碳物質(zhì)燃燒不完全時(shí)的產(chǎn)物經(jīng)呼吸道吸入引起中毒。 CO易與血紅蛋白結(jié)合，形成碳

8、氧血紅蛋白，使血紅蛋白喪失攜氧能力，造成組織窒息。其對(duì)全身的組織細(xì)胞均有毒性作用，尤其(yuq)對(duì)大腦皮質(zhì)的影響最為嚴(yán)重。 檢測(cè)方法：血中碳氧血紅蛋白分光光度計(jì)的定量檢測(cè)。 臨床意義：用于CO中毒的臨床診斷，其中正常參考范圍小于3%。輕度中毒血液HbCO濃度為10%30%，中度中毒血液HbCO濃度為30%40%，重度中毒血液HbCO濃度可高達(dá)50%。 碳氧血紅蛋白碳氧血紅蛋白(xuhng dnbi)（HbCO） 第十三頁(yè)，共三十三頁(yè)。14碳氧血紅蛋白定量碳氧血紅蛋白定量(dngling)檢測(cè)檢測(cè)檢測(cè)原理： 分光光度法是通過(guò)雙波長(zhǎng)吸光度比值法檢測(cè)血中HbCO，以碳氧血紅蛋白飽和度表示血液中HbC

9、O。利用(lyng)血液中的碳氧血紅蛋白吸光光譜特性在化學(xué)處理后的改變，進(jìn)行定量測(cè)定。紫外-可見(jiàn)(kjin)分光光度計(jì)第十四頁(yè)，共三十三頁(yè)。152-2、氣體(qt)與揮發(fā)性毒物 血液中乙醇檢測(cè)(jin c)：氣相色譜法測(cè)定混合物中乙醇的含量 氣相色譜法進(jìn)行(jnxng)血液中酒精含量的定性及定量檢測(cè)分析。氣相色譜中的氣-液色譜法屬于分配色譜，利用混合物中各組分在固定相與流動(dòng)相之間分配情況不同，從而達(dá)到分離的目的。 氰化物檢測(cè)：硫氰酸鹽的定性檢測(cè)普魯士蘭快速檢驗(yàn)法：酸化的檢樣受熱后，氰化物變成氫氰酸逸出，在堿性條件下與硫酸亞鐵作用，生成亞鐵氰絡(luò)鹽，用酸酸化后，與高鐵離子反應(yīng)，生成普魯士藍(lán)。氣相色

10、譜儀第十五頁(yè)，共三十三頁(yè)。162-3、除草劑 百草枯又名殺草快、一掃光，速效觸滅型除草劑，噴灑后能很快發(fā)揮作用。正常情況下對(duì)環(huán)境無(wú)危害，但對(duì)人畜具有較強(qiáng)毒性。其主要特點(diǎn)致死量低、死亡率高、預(yù)后差。中毒(zhng d)多為自服或誤服，也可經(jīng)皮膚和呼吸道吸收損害上皮組織，于肺部聚集，導(dǎo)致肺纖維化和呼吸衰竭。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)：血、尿中百草枯進(jìn)行毒物分析。臨床表現(xiàn)：輕型-攝入量20mg/kg，多數(shù)患者死于肺功能衰竭；暴發(fā)型-攝入量40mg/kg，1-4天內(nèi)死于多臟器衰竭。第十六頁(yè)，共三十三頁(yè)。17定性檢測(cè)：化學(xué)法快速檢測(cè)通過(guò)顏色判斷體內(nèi)含量。定量檢測(cè)：液相色譜法檢測(cè)血液中百草枯及其衍生物的含量。方 法(fn

11、gf)液相色譜儀濃度從左至右依次遞增，顏色相應(yīng)加深。第十七頁(yè)，共三十三頁(yè)。182-4、殺鼠劑 毒鼠強(qiáng) 俗名“三步倒”、“聞到死”。一種化學(xué)劇毒藥，其毒性甚至比氰化物還要大100倍。 不易降解，可造成二次、三次中毒，故而世界上從未正式將其作為商品滅鼠藥。 毒性極大，動(dòng)物食入后，毒物未入胃便發(fā)作，每1000克體重使用0.2毫克，幾分鐘即可死亡。 對(duì)人的致死量為512mg，人口服(kuf)中毒后數(shù)分鐘至半小時(shí)內(nèi)發(fā)病，若不及時(shí)搶救，多于2小時(shí)內(nèi)死亡，但也有中毒較輕者，23天后才發(fā)病。第十八頁(yè)，共三十三頁(yè)。192-4、殺鼠劑化學(xué)名：四次甲基二砜四胺方法確證體外檢材預(yù)試動(dòng)物實(shí)驗(yàn)體內(nèi)檢材鑒別GCGC/MS快

12、速定性試驗(yàn)：硫酸-鹽酸苯肼顯色測(cè)定微量毒鼠強(qiáng)。第十九頁(yè)，共三十三頁(yè)。202-5、染色體和微核 微核（micronucleus, 簡(jiǎn)稱(chēng)MCN），是真核類(lèi)生物細(xì)胞(xbo)中的一種異常結(jié)構(gòu)，是染色體畸變?cè)陂g期細(xì)胞(xbo)中的一種表現(xiàn)形式。目前國(guó)內(nèi)外不少部門(mén)已把微核測(cè)試用于輻射損傷、輻射防護(hù)、化學(xué)誘變劑、新藥試驗(yàn)、食品添加劑的安全評(píng)價(jià)，以及染色體遺傳疾病和癌癥前期診斷等各個(gè)方面。 染色體（Chromosome）檢查，是用外周血在細(xì)胞生長(zhǎng)刺激因子作用下，培養(yǎng)、獲得大量分裂細(xì)胞，固定(gdng)于載玻片上，在顯微鏡下觀察染色體的結(jié)構(gòu)和數(shù)量。適用于放射性損傷、白血病及其它腫瘤患者、接觸過(guò)有害物質(zhì)者、生殖

13、功能障礙者等。 第二十頁(yè)，共三十三頁(yè)。2-6、高鐵血紅蛋白(xuhng dnbi) 亞 硝 酸 鹽 的 檢 驗(yàn)(jinyn)亞硝酸鹽是一種血液毒物，進(jìn)入血液循環(huán)后作為強(qiáng)氧化劑，迅速將血紅蛋白氧化成為高鐵（Fe3+）血紅蛋白，使該部分血紅蛋白失去攜氧釋氧功能，導(dǎo)致組織缺氧的一種急性、亞急性中毒。常態(tài)(chngti)下，亞硝酸鹽通常呈白色或淺黃色顆粒結(jié)晶，形似食鹽，因此常因誤食而中毒。臨床上以黏膜發(fā)紺、血液褐變、呼吸困難、胃腸道炎癥。檢驗(yàn)方法：氰化高鐵血紅蛋白定量測(cè)定法。 第二十一頁(yè)，共三十三頁(yè)。22原理：高鐵血紅蛋白（methemoglobin，MetHb）為血紅蛋白的氧化物，其在波長(zhǎng)632nm

14、處有吸收帶。目前(mqin)標(biāo)準(zhǔn)化的試驗(yàn)方法是氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法，該類(lèi)方法基于弱酸性MetHb加入氰化物后形成氰化MetHb（MetHb-CN），在630nm處的特征吸收峰會(huì)消失。根據(jù)加入氰化物前后密度的變化量來(lái)計(jì)算MetHb的含量。 該法是國(guó)際血液標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)推薦的參考方法，具有操作簡(jiǎn)單、顯色快、結(jié)果穩(wěn)定可靠等優(yōu)點(diǎn)，其致命(zhmng)的弱點(diǎn)是氰化鉀試劑劇毒，應(yīng)合理使用并保管。紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)第二十二頁(yè)，共三十三頁(yè)。232-7、尿-氨基(nj)乙酰丙酸原理(yunl)：ALA+乙酰乙酸乙酯 顯色液，形成紅色化合物 比色定量萃取液 +吡咯(blu)化合物100PH=4.6乙酸乙酯萃取5

15、54nm 尿-氨基乙酰丙酸（-aminolevulinic acid，簡(jiǎn)稱(chēng)-ALA）檢測(cè)是診斷鉛中毒的指標(biāo)。-ALA活性上升是對(duì)鉛的特異性反映，作為驅(qū)鉛療效觀察指標(biāo)，應(yīng)用于鉛接觸人員健康監(jiān)護(hù)指標(biāo)。第二十三頁(yè)，共三十三頁(yè)。242-8、氟氟是人體內(nèi)必須的微量元素。在人體內(nèi)的分布主要集中(jzhng)在骨骼、牙齒、指甲和毛發(fā)中，尤以牙釉質(zhì)中含量最多。骨骼中以長(zhǎng)骨的含氟量最高。 飲水占人體氟來(lái)源的65%，長(zhǎng)期生活在高氟環(huán)境的居民主要通過(guò)飲水等攝入過(guò)量氟而引起的以氟斑牙和氟骨癥為特征的全身慢性蓄積性疾病。檢查方法：血氟、尿氟、水氟離子選擇電極定量測(cè)定法。 第二十四頁(yè)，共三十三頁(yè)。25氟離子選擇電極(di

16、nj)定量測(cè)定法原理： 氟化鑭單晶膜對(duì)氟離子有選擇性，在氟化鑭電極膜兩側(cè)的不同濃度(nngd)氟溶液之間存在電位差，這種電位差通常稱(chēng)為膜電位。膜電位的大小與氟化物溶液的離子濃度(nngd)有關(guān)。氟電極與飽和甘汞電極組成一對(duì)原電池。利用電動(dòng)勢(shì)與離子活度負(fù)對(duì)數(shù)值的線性關(guān)系求出檢測(cè)樣中氟離子濃度(nngd)。氟離子選擇(xunz)電極儀第二十五頁(yè)，共三十三頁(yè)。263、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)(jin c)的質(zhì)量保證 第二十六頁(yè)，共三十三頁(yè)。273-1、實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)(jinyn)質(zhì)量 正確的檢驗(yàn)(jinyn)結(jié)果 在正確的時(shí)間 基于正確的樣本 取自正確的患者 正確的數(shù)據(jù)解釋 基于正確的參考范圍 基于合適的成本第二十

17、七頁(yè)，共三十三頁(yè)。28 3-2、職業(yè)衛(wèi)生(wishng)檢測(cè)方法的基本要求實(shí) 驗(yàn) 室 檢 查(jinch):檢查所用的試驗(yàn)器具、材料、樣品等是否正確、符合要求；檢驗(yàn)方法是否正確；檢驗(yàn)儀器、設(shè)備運(yùn)行是否正常；檢查實(shí)驗(yàn)(shyn)操作有無(wú)差錯(cuò)。第二十八頁(yè)，共三十三頁(yè)。293-3、實(shí)驗(yàn)室常用(chn yn)檢測(cè)方法光譜法 分子光譜原子光譜色譜法 氣相色譜液相色譜離子色譜電化學(xué)法 電位溶出電位分析法電導(dǎo)法第二十九頁(yè)，共三十三頁(yè)。303-4、 檢測(cè)(jin c)方法的性能指標(biāo) l 精密度：表示數(shù)值的離散(lsn)程度，反應(yīng)分析方法的系統(tǒng)誤差的大小。l 準(zhǔn)確度：表示測(cè)得值和樣品真值的符合程度，是指測(cè)定結(jié)果與真實(shí)值間的誤差。其由方法的總體誤差引起，但主要由系統(tǒng)誤差決定。l靈敏度：反應(yīng)分析實(shí)驗(yàn)室和測(cè)試系統(tǒng)的場(chǎng)地與基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室及分析人員的水平。l 檢出限、測(cè)定下限第三十頁(yè)，共三十三頁(yè)。31理化理化(lhu)實(shí)驗(yàn)室展望實(shí)驗(yàn)室展望理化檢驗(yàn)，是對(duì)物質(zhì)的組成、結(jié)構(gòu)、性質(zhì)等物理化學(xué)屬性進(jìn)行分析檢測(cè)的技術(shù)。徐州市腫瘤醫(yī)院自建立毒物檢驗(yàn)理化實(shí)驗(yàn)室以來(lái)，依據(jù)現(xiàn)代分析儀器和電子計(jì)算機(jī)技術(shù)聯(lián)用基礎(chǔ)上的先進(jìn)科學(xué)檢驗(yàn)手段，把自動(dòng)化和智能化涵蓋于檢驗(yàn)過(guò)程中，從而把衛(wèi)生理化檢驗(yàn)帶入到現(xiàn)代化發(fā)展階段(jidun)。理化檢驗(yàn)是環(huán)境科學(xué)的有力助手，為生命科學(xué)做出了重