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1、病原性球菌與檢驗(yàn) 對(duì)人有致病性的球菌主要引起化膿性炎癥對(duì)人有致病性的球菌主要引起化膿性炎癥(ynzhng)(ynzhng), ,又稱(chēng)又稱(chēng)化膿性球菌化膿性球菌。G G+ +C C:葡萄球菌、鏈球菌、肺炎鏈球菌:葡萄球菌、鏈球菌、肺炎鏈球菌G G- -C C:腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布蘭漢:腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布蘭漢菌菌第一頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn) 1. 了解病原性球菌的概念及種類(lèi)。 2. 熟悉(shx)常見(jiàn)病原性球菌的主要生物學(xué)特性、致病性和免疫性。 3. 掌握葡萄球菌、鏈球菌、腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌的檢驗(yàn)程序和檢驗(yàn)方法。 學(xué)習(xí)目的(md)與要求第二頁(yè),共一百二十頁(yè)。
2、病原性球菌與檢驗(yàn)第三頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(一)形態(tài)與染色(一)形態(tài)與染色 G G+ +, 球形,無(wú)鞭毛、無(wú)芽孢,呈葡萄球形,無(wú)鞭毛、無(wú)芽孢,呈葡萄(p to)(p to)串狀排列。串狀排列。第四頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(二)培養(yǎng)特性(二)培養(yǎng)特性營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng):要求不高,耐鹽。:要求不高,耐鹽。 液體液體:均勻渾濁生長(zhǎng):均勻渾濁生長(zhǎng)(shngzhng)(shngzhng) 普通瓊脂平板普通瓊脂平板: 血液瓊脂平板血液瓊脂平板:高鹽甘露醇平板高鹽甘露醇平板:金黃色葡萄球菌為:金黃色葡萄球菌為淡橙黃色菌落淡橙黃色菌落(jnlu);其他葡萄球菌為其他葡萄球菌為白色菌落白色菌落。第五
3、頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(三)生化反應(yīng)(三)生化反應(yīng)(fnyng)(fnyng)活潑活潑分解多種糖類(lèi)、蛋白質(zhì)、氨基酸。分解多種糖類(lèi)、蛋白質(zhì)、氨基酸。( (如:如:葡萄糖,麥芽糖,蔗糖,甘露醇)葡萄糖,麥芽糖,蔗糖,甘露醇)觸酶()觸酶()(區(qū)別于鏈球菌屬)(區(qū)別于鏈球菌屬)第六頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(四)抗原構(gòu)造(四)抗原構(gòu)造、蛋白抗原()蛋白抗原()、多糖多糖(du tn)(du tn)抗原抗原金黃色葡萄球菌:核糖醇磷壁酸金黃色葡萄球菌:核糖醇磷壁酸(檢測(cè)磷壁酸有助于金葡菌感染診斷)(檢測(cè)磷壁酸有助于金葡菌感染診斷)凝固酶():甘油磷壁酸凝固酶():甘油磷壁酸第七頁(yè),共
4、一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(五)分類(lèi)(五)分類(lèi): :個(gè)種及亞種個(gè)種及亞種、按色素分類(lèi)按色素分類(lèi):金、白、檸:金、白、檸、按凝固按凝固(nngg)(nngg)酶分類(lèi)酶分類(lèi):凝固酶陰性、凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌凝固酶陰性、凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌、按噬菌體分類(lèi)按噬菌體分類(lèi):金葡菌分為:金葡菌分為5 5群群2626型型 4. 4. 據(jù)色素、生化反應(yīng)分:據(jù)色素、生化反應(yīng)分: 金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌第八頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn) 三種三種(sn zhn)(sn zhn)葡萄球菌的主要性狀葡萄球菌的主要性狀性狀性狀金黃色金黃色葡萄球菌葡萄球菌表表
5、 皮皮葡萄球菌葡萄球菌腐腐 生生葡萄球菌葡萄球菌 色色 素素金黃色白色白色或檸檬色血漿凝固酶血漿凝固酶+溶血素溶血素+耐熱核酸酶耐熱核酸酶+甘露醇甘露醇+SPA+致病性致病性強(qiáng)弱無(wú)第九頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(六)抵抗力(六)抵抗力 無(wú)芽胞菌中最強(qiáng),耐干燥,對(duì)石炭酸、升無(wú)芽胞菌中最強(qiáng),耐干燥,對(duì)石炭酸、升汞、龍膽紫敏感。汞、龍膽紫敏感。 易產(chǎn)生耐藥性變異,如:耐甲氧西林金黃易產(chǎn)生耐藥性變異,如:耐甲氧西林金黃色葡萄球菌色葡萄球菌(p to qi jn)(p to qi jn)(MRSAMRSA)。)。MRSAMRSA常呈多重常呈多重耐藥,對(duì)青霉素、氧氟沙星及紅霉素的敏感率分耐藥,對(duì)青
6、霉素、氧氟沙星及紅霉素的敏感率分別為別為1.3%1.3%、3%3%及及14%14%。第十頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn) 長(zhǎng)期住院長(zhǎng)期住院(zh yun)(zh yun)、反復(fù)使用各種廣譜抗菌藥物反復(fù)使用各種廣譜抗菌藥物、燒燒傷傷或或有傷口的病人有傷口的病人及及與與MRSAMRSA定植或感染的病人接觸定植或感染的病人接觸都是都是造成院內(nèi)造成院內(nèi)MRSAMRSA流行的危險(xiǎn)因素。流行的危險(xiǎn)因素。MRSAMRSA定植或感染的人員定植或感染的人員及院內(nèi)環(huán)境污染是引起院內(nèi)流行的主要來(lái)源。及院內(nèi)環(huán)境污染是引起院內(nèi)流行的主要來(lái)源。 MRSAMRSA定植或感染的人員及院內(nèi)環(huán)境污染是引起院內(nèi)流定植或感染的人員
7、及院內(nèi)環(huán)境污染是引起院內(nèi)流行的主要來(lái)源行的主要來(lái)源。 耐甲氧西林耐甲氧西林(x ln)(x ln)金黃色葡萄球菌(金黃色葡萄球菌(MRSAMRSA)第十一頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)( (一一) )致病物質(zhì)致病物質(zhì) 金黃色葡萄球菌產(chǎn)生多種侵襲性酶與外毒素。金黃色葡萄球菌產(chǎn)生多種侵襲性酶與外毒素。 1 1血漿凝固酶(血漿凝固酶(coagulase)coagulase): 分:結(jié)合型凝固酶、游離型凝固酶。分:結(jié)合型凝固酶、游離型凝固酶。 鑒別鑒別(jinbi)(jinbi)金黃色葡萄球菌的重要指標(biāo)。金黃色葡萄球菌的重要指標(biāo)。2 2葡萄球菌葡萄球菌(p to qi jn)(p to qi jn
8、)溶血素(溶血素(staphylolysinstaphylolysin)第十二頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)3 3殺白細(xì)胞素(殺白細(xì)胞素(leukocidinleukocidin)4 4腸毒素(腸毒素(enterotoxinenterotoxin):): (A A、B B、C1C1、C2C2、C3C3、D D、E E、G G、H 9H 9個(gè)血清型)個(gè)血清型)5 5表皮剝脫表皮剝脫(bo tu)(bo tu)毒素(毒素(exfoliative toxinexfoliative toxin)6. 6. 毒性休克綜合征毒素毒性休克綜合征毒素1 1(toxic shock syndrome tox
9、ic shock syndrome toxin 1, TSST1toxin 1, TSST1)第十三頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(二)所致疾?。ǘ┧录膊?jbng)(jbng) 1 1侵襲性疾?。呵忠u性疾病:(1 1)皮膚軟組織感染皮膚軟組織感染特點(diǎn):病灶局限且膿汁粘稠特點(diǎn):病灶局限且膿汁粘稠 (2 2)內(nèi)臟器官感染內(nèi)臟器官感染(gnrn)(gnrn)(3 3)全身全身(qun shn)(qun shn)感染感染(4 4)尿路感染尿路感染第十四頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)2 2毒素毒素(d s)(d s)性疾病性疾?。? 1)食物中毒食物中毒(2 2)燙傷樣皮膚綜合征燙傷樣皮膚
10、綜合征 由表皮由表皮(biop)(biop)剝脫毒素引起。剝脫毒素引起。(3 3)毒性毒性(d xn)(d xn)休克綜合征休克綜合征 由由TSST1TSST1引起引起(4 4)假膜性腸炎假膜性腸炎第十五頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn) 人類(lèi)人類(lèi)(rnli)(rnli)凝固酶陰性葡萄球菌(凝固酶陰性葡萄球菌(CNSCNS)感染)感染中以中以表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌的感染最為常見(jiàn)。的感染最為常見(jiàn)。 CNSCNS主要引起以下幾種感染:泌尿系感染,主要引起以下幾種感染:泌尿系感染,細(xì)菌性心內(nèi)膜炎,敗血癥等,其中大多為醫(yī)院細(xì)菌性心內(nèi)膜炎,敗血癥等,其中大多為醫(yī)院內(nèi)感染。此外,心臟起搏器安裝、置換人工
11、心內(nèi)感染。此外,心臟起搏器安裝、置換人工心臟瓣膜、長(zhǎng)期腹膜透析、靜脈滴注等亦可造成臟瓣膜、長(zhǎng)期腹膜透析、靜脈滴注等亦可造成凝固酶陰性葡萄球菌的感染。凝固酶陰性葡萄球菌的感染。3 3、凝固酶陰性、凝固酶陰性(ynxng)(ynxng)葡萄球菌的致病性葡萄球菌的致病性第十六頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)三、微三、微 生生 物物 學(xué)學(xué) 檢檢 驗(yàn)驗(yàn)n(一)標(biāo)本采集(一)標(biāo)本采集(cij)n(二)檢驗(yàn)程序(二)檢驗(yàn)程序n(三)檢驗(yàn)方法(三)檢驗(yàn)方法第十七頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)三、微三、微 生生 物物 學(xué)學(xué) 檢檢 驗(yàn)驗(yàn)(一)標(biāo)本采集(一)標(biāo)本采集根據(jù)病情采集標(biāo)本根據(jù)病情采集標(biāo)本種類(lèi)種類(lèi):膿
12、液、傷口分泌物、穿刺液、血液:膿液、傷口分泌物、穿刺液、血液(xuy)(xuy)、尿液、痰液、腦脊液、糞便等。、尿液、痰液、腦脊液、糞便等。 注意注意:無(wú)菌操作,避免污染。:無(wú)菌操作,避免污染。第十八頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(二)葡萄球菌(p to qi jn)檢驗(yàn)程序膿液、咽拭子、穿刺膿液、咽拭子、穿刺(chunc)液液尿液、痰液尿液、痰液腦脊液血液腦脊液血液(xuy)糞便、嘔吐糞便、嘔吐物物直接涂片染色直接涂片染色增菌培養(yǎng)增菌培養(yǎng)分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)(血平板)(血平板)分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)(高鹽甘露醇平(高鹽甘露醇平板)板)取可疑菌落取可疑菌落鑒定試驗(yàn)藥敏試驗(yàn)鑒定試驗(yàn)藥敏試驗(yàn)涂片染色涂片
13、染色血漿凝固酶血漿凝固酶耐熱核酸酶耐熱核酸酶其他鑒定試驗(yàn)其他鑒定試驗(yàn)報(bào)告報(bào)告初初 報(bào)報(bào)第十九頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(三)檢驗(yàn)(jinyn)方法 1、直接涂片、直接涂片 適用于:正常情況下無(wú)菌的標(biāo)本(如腦脊液)適用于:正常情況下無(wú)菌的標(biāo)本(如腦脊液) 伴有炎癥細(xì)胞伴有炎癥細(xì)胞(xbo)的其他體液標(biāo)本、膿液等的其他體液標(biāo)本、膿液等初步報(bào)告:初步報(bào)告:“查見(jiàn)革蘭陽(yáng)性葡萄查見(jiàn)革蘭陽(yáng)性葡萄(p to)狀排列球菌,狀排列球菌,疑為葡萄疑為葡萄(p to)球菌球菌”或:或:“查見(jiàn)類(lèi)似葡萄球菌的革蘭陽(yáng)性球菌查見(jiàn)類(lèi)似葡萄球菌的革蘭陽(yáng)性球菌” 第二十頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)2 2、分離、分離
14、(fnl)(fnl)培養(yǎng)培養(yǎng) 50ml50ml葡萄糖肉湯(增菌)葡萄糖肉湯(增菌) 渾濁渾濁(hnzhu)(hnzhu)無(wú)菌(無(wú)菌(7 7天)天)報(bào)告報(bào)告(bogo):無(wú)菌生長(zhǎng)無(wú)菌生長(zhǎng)腦脊液腦脊液、膿液、膿液、穿刺液、咽拭、穿刺液、咽拭、尿液尿液血平板血平板血液標(biāo)本血液標(biāo)本5ml5ml糞便、糞便、嘔吐物嘔吐物高鹽甘露醇高鹽甘露醇平板平板第二十一頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(三)檢驗(yàn)(jinyn)方法3 3、鑒定試驗(yàn)、鑒定試驗(yàn)(1 1)血漿凝固酶試驗(yàn):金黃色葡萄球菌()血漿凝固酶試驗(yàn):金黃色葡萄球菌(+ +)(2 2)甘露醇發(fā)酵試驗(yàn):金黃色葡萄球菌()甘露醇發(fā)酵試驗(yàn):金黃色葡萄球菌(+ +
15、)(3 3)耐熱核酸酶試驗(yàn):金黃色葡萄球菌()耐熱核酸酶試驗(yàn):金黃色葡萄球菌(+ +)()腸毒素測(cè)定()腸毒素測(cè)定(cdng)(cdng): 金黃色葡萄球菌產(chǎn)生金黃色葡萄球菌產(chǎn)生(5 5)SPASPA檢測(cè):檢測(cè): 金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌(6 6)凝固酶陽(yáng)性和凝固酶陰性的葡萄球菌鑒定)凝固酶陽(yáng)性和凝固酶陰性的葡萄球菌鑒定(7 7)APIAPI葡萄球菌鑒定試劑盒葡萄球菌鑒定試劑盒第二十二頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(四)結(jié)果評(píng)價(jià)(pngji)和報(bào)告n1 1、金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌:無(wú)論任何標(biāo)本中分離到均:無(wú)論任何標(biāo)本中分離到均 應(yīng)應(yīng)鑒定并報(bào)告臨床。鑒定并報(bào)告臨床。n2 2、表皮葡
16、萄球菌及腐生葡萄球菌表皮葡萄球菌及腐生葡萄球菌:從輸液導(dǎo)管、:從輸液導(dǎo)管、人工植入組織中分離到,應(yīng)視為致病菌。人工植入組織中分離到,應(yīng)視為致病菌。n3 3、尿培養(yǎng)計(jì)數(shù)尿培養(yǎng)計(jì)數(shù):10103 3-10-104 4為陽(yáng)性菌尿標(biāo)準(zhǔn)。為陽(yáng)性菌尿標(biāo)準(zhǔn)。n4 4、其他凝固其他凝固(nngg)(nngg)酶陰性葡萄球菌酶陰性葡萄球菌:引起感染流行:引起感染流行或治療失敗時(shí),應(yīng)鑒定到種?;蛑委熓r(shí),應(yīng)鑒定到種。n5 5、金黃色葡萄球菌(金黃色葡萄球菌(MRSA)MRSA):頭孢菌素類(lèi)抗生素體:頭孢菌素類(lèi)抗生素體外藥敏試驗(yàn)為敏感時(shí),不應(yīng)報(bào)告,因體內(nèi)試驗(yàn)已證外藥敏試驗(yàn)為敏感時(shí),不應(yīng)報(bào)告,因體內(nèi)試驗(yàn)已證實(shí)實(shí)MRS
17、AMRSA對(duì)該類(lèi)抗生素耐藥。對(duì)該類(lèi)抗生素耐藥。第二十三頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)第二十四頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)第二十五頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(一)形態(tài)與染色(一)形態(tài)與染色 G G+ +,球形或橢圓形,球形或橢圓形,呈鏈狀排列呈鏈狀排列(pili)(pili),無(wú),無(wú)鞭毛、無(wú)芽胞,有莢鞭毛、無(wú)芽胞,有莢膜。膜。第二十六頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(二)培養(yǎng)特性(二)培養(yǎng)特性條件條件:營(yíng)養(yǎng)要求較高,多數(shù)為兼性厭氧菌,少:營(yíng)養(yǎng)要求較高,多數(shù)為兼性厭氧菌,少 數(shù)專(zhuān)性厭氧。數(shù)專(zhuān)性厭氧。液體液體:沉淀生長(zhǎng)(絮狀或顆粒狀)。:沉淀生長(zhǎng)(絮狀或顆粒狀)。普通瓊脂普通瓊脂
18、(qingzh)(qingzh)平板平板:不生長(zhǎng)。:不生長(zhǎng)。血液瓊脂平板血液瓊脂平板:第二十七頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(三)生化反應(yīng)(三)生化反應(yīng) 活潑活潑分解多種糖類(lèi)分解多種糖類(lèi)(tn li)(tn li)、蛋白質(zhì)、氨基酸。、蛋白質(zhì)、氨基酸。 菊糖(菊糖(- -) 膽汁溶菌試驗(yàn)(膽汁溶菌試驗(yàn)(- -) optochinoptochin敏感試驗(yàn)(敏感試驗(yàn)(- -) 觸酶(觸酶(- -)(區(qū)別于葡萄球菌屬)(區(qū)別于葡萄球菌屬)(區(qū)別(區(qū)別(qbi)(qbi)甲鏈與肺鏈)甲鏈與肺鏈)第二十八頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(四)抗原構(gòu)造(四)抗原構(gòu)造、多糖多糖(du tn)(du tn
19、)抗原(抗原(C C抗原)抗原): 群特異性。群特異性。、蛋白抗原(蛋白抗原(M M、T T、R R、S S) 型特異性,與致病有關(guān)的是型特異性,與致病有關(guān)的是M M蛋白抗原蛋白抗原。 3 3、核蛋白抗原:無(wú)特異性。、核蛋白抗原:無(wú)特異性。第二十九頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)多糖多糖(du tn)抗原抗原蛋白質(zhì)抗原蛋白質(zhì)抗原(kngyun)核蛋白核蛋白抗原抗原(kngyun)鏈球菌抗原構(gòu)造模式圖鏈球菌抗原構(gòu)造模式圖莢膜莢膜第三十頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(五)分類(lèi)(五)分類(lèi) 4040個(gè)種及亞種個(gè)種及亞種、按溶血情況分類(lèi)、按溶血情況分類(lèi): (1 1)甲型溶血性鏈球菌甲型溶血性鏈球菌
20、:菌落周?chē)?2mm寬的草綠溶血環(huán),稱(chēng)甲型溶血或溶血。為條件條件(tiojin)(tiojin)致病菌致病菌。 (2 2)乙型溶血性鏈球菌乙型溶血性鏈球菌:菌落周?chē)纬梢粋€(gè)24mm寬的透明溶血環(huán),稱(chēng)乙型溶血或溶血。又稱(chēng)溶血性鏈球菌。致病力強(qiáng),引起多種疾病。致病力強(qiáng),引起多種疾病。 (3 3)丙型鏈球菌丙型鏈球菌:無(wú)溶血環(huán),:無(wú)溶血環(huán),不致病不致病第三十一頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)、按抗原結(jié)構(gòu)分類(lèi)、按抗原結(jié)構(gòu)分類(lèi)(fn li)(fn li): 按按C C抗原分群:抗原分群:ABCD20ABCD20群,對(duì)人致病的以群,對(duì)人致病的以A A群群為主。為主。 按按M M蛋白分型:如蛋白分型:如A
21、 A群:群:100100個(gè)型,個(gè)型,B B群:群:4 4型,型,C C群:群:1313個(gè)型。個(gè)型。(五)分類(lèi)(五)分類(lèi)(fn li)(fn li)第三十二頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(六)抵抗力(六)抵抗力不強(qiáng),不強(qiáng),6030min6030min殺死,對(duì)多種消毒劑敏感殺死,對(duì)多種消毒劑敏感(mngn)(mngn)。乙鏈:對(duì)青霉素、四環(huán)素、紅霉素等敏感。乙鏈:對(duì)青霉素、四環(huán)素、紅霉素等敏感。第三十三頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(一)致病物質(zhì)(一)致病物質(zhì) 1 1、鏈球菌溶血素鏈球菌溶血素 (1 1)鏈球菌溶血素鏈球菌溶血素O (SLO)O (SLO) SLO SLO抗體抗體(kngt
22、)(kngt) 抗鏈球菌溶血素抗鏈球菌溶血素O O試驗(yàn)試驗(yàn):協(xié)助診斷風(fēng)濕熱(:協(xié)助診斷風(fēng)濕熱(1:400)1:400) (2 2)鏈球菌溶血素)鏈球菌溶血素S (SLS)S (SLS):無(wú)抗原性。:無(wú)抗原性。2 2、致熱外毒素致熱外毒素(猩紅熱毒素(猩紅熱毒素(d s)(d s)/ /紅疹毒素紅疹毒素(d s)(d s))3 3、M M蛋白蛋白第三十四頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn) 4 4、透明質(zhì)酸酶透明質(zhì)酸酶 5 5、鏈激酶鏈激酶 6 6、鏈道酶鏈道酶第三十五頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(二)所致疾?。ǘ┧录膊?主要由主要由A A群鏈球菌引起。群鏈球菌引起。 1 1、化膿性感染
23、:、化膿性感染:由由皮膚傷口侵入皮膚傷口侵入,經(jīng)呼吸道侵入經(jīng)呼吸道侵入,其他,其他 途徑(如途徑(如產(chǎn)褥熱、蜂窩組織產(chǎn)褥熱、蜂窩組織(zzh)(zzh)炎炎) 特點(diǎn):特點(diǎn):病灶界限不清病灶界限不清, ,膿汁稀薄膿汁稀薄2 2中毒性疾病中毒性疾?。盒杉t熱猩紅熱 由產(chǎn)生致熱外毒素的由產(chǎn)生致熱外毒素的A A族鏈族鏈球菌所致球菌所致(su zh)(su zh)的急性呼吸道傳染病。的急性呼吸道傳染病。第三十六頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)3 3變態(tài)反應(yīng)變態(tài)反應(yīng)(bin ti fn yng)(bin ti fn yng)性疾?。盒约膊。?風(fēng)濕熱風(fēng)濕熱 急性腎小球腎炎急性腎小球腎炎4 4其他疾病其他疾病
24、(jbng)(jbng): 甲型(草綠色)鏈球菌:引起亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜甲型(草綠色)鏈球菌:引起亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎。炎。第三十七頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)三、微生物學(xué)三、微生物學(xué)(wi shn w xu)(wi shn w xu)檢驗(yàn)檢驗(yàn)n(一)標(biāo)本采集(一)標(biāo)本采集n(二)檢驗(yàn)(二)檢驗(yàn)(jinyn)程序程序n(三)檢驗(yàn)方法(三)檢驗(yàn)方法第三十八頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(一)標(biāo)本(一)標(biāo)本(biobn)(biobn)采集采集根據(jù)病情采集標(biāo)本根據(jù)病情采集標(biāo)本種類(lèi)種類(lèi):膿液、鼻咽拭子、血液等:膿液、鼻咽拭子、血液等 風(fēng)濕熱查血清抗體風(fēng)濕熱查血清抗體第三十九頁(yè),共一百二十頁(yè)。
25、病原性球菌與檢驗(yàn)(二)鏈球菌的檢驗(yàn)(jinyn)程序痰、膿、穿刺(chunc)液咽拭子等腦脊液血 液直接涂片直接涂片(t pin)染染色色測(cè)抗原測(cè)抗原分離培養(yǎng)增菌培養(yǎng)增菌培養(yǎng)(5%CO2(5%CO2葡萄糖肉湯葡萄糖肉湯) )血平板(血平板(5%CO25%CO2)可疑菌落可疑菌落鑒定試驗(yàn)鑒定試驗(yàn)初步報(bào)告初步報(bào)告血清學(xué)鑒定血清學(xué)鑒定(分群)(分群)桿菌肽試驗(yàn)桿菌肽試驗(yàn) optochin 膽汁溶菌試驗(yàn)?zāi)懼芫囼?yàn) 其他鑒定其他鑒定 敏感試驗(yàn)敏感試驗(yàn) 試驗(yàn)試驗(yàn)第四十頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(三)鏈球菌的檢驗(yàn)(jinyn)方法(1 1)直接)直接(zhji)(zhji)鏡檢:鏡檢:(痰、膿、穿
26、刺液、(痰、膿、穿刺液、 咽拭子等)咽拭子等) 初報(bào):發(fā)現(xiàn)初報(bào):發(fā)現(xiàn)G G+ +球菌,球菌, 呈鏈狀排列呈鏈狀排列第四十一頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn) (2 2)分離培養(yǎng))分離培養(yǎng)(piyng)(piyng): 血液、腦脊液血液、腦脊液 肉湯增菌肉湯增菌 膿液、咽拭子等膿液、咽拭子等 血平板分離血平板分離第四十二頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(3 3)鑒定鏈球菌的主要試驗(yàn):)鑒定鏈球菌的主要試驗(yàn): 根據(jù)形態(tài)、菌落、溶血情況進(jìn)行:根據(jù)形態(tài)、菌落、溶血情況進(jìn)行: 桿菌肽敏感試驗(yàn):桿菌肽敏感試驗(yàn):A A群群敏感敏感(d10mm)(d10mm) OptochinOptochin敏感試驗(yàn):敏感
27、試驗(yàn):肺炎肺炎(fiyn)(fiyn)鏈球菌鏈球菌d18mmd18mm, d15mmd400400為為+ + 第四十四頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn) 屬鏈球菌科,鏈球菌屬。屬鏈球菌科,鏈球菌屬。 廣泛分布于自然界,主要寄生于人類(lèi)廣泛分布于自然界,主要寄生于人類(lèi)(rnli)(rnli)上呼吸道,上呼吸道,多數(shù)不致病。多數(shù)不致病。第四十五頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(一)形態(tài)與染色(一)形態(tài)與染色(rns)(rns) G G+ +, 矛頭狀,成矛頭狀,成雙(或短鏈)排列,雙(或短鏈)排列,無(wú)鞭毛、無(wú)芽胞,有無(wú)鞭毛、無(wú)芽胞,有莢膜。莢膜。第四十六頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(二)培養(yǎng)
28、特性(二)培養(yǎng)特性條件條件:營(yíng)養(yǎng)要求較高,兼性厭氧菌,營(yíng)養(yǎng)要求較高,兼性厭氧菌, 5-10% C025-10% C02生長(zhǎng)最好。生長(zhǎng)最好。 產(chǎn)生自溶酶。產(chǎn)生自溶酶。液體液體:培養(yǎng)培養(yǎng)24h24h呈均勻呈均勻(jnyn)(jnyn)混濁,后期因產(chǎn)生自溶而變得澄混濁,后期因產(chǎn)生自溶而變得澄清。清。 普通瓊脂平板普通瓊脂平板:不生長(zhǎng)。不生長(zhǎng)。血液瓊脂平板血液瓊脂平板:灰白色,圓形,扁平,較小,周?chē)谢野咨?,圓形,扁平,較小,周?chē)胁莶菥G色溶血環(huán)綠色溶血環(huán)(溶血)溶血) 第四十七頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(三)生化反應(yīng)(三)生化反應(yīng)(fnyng)(fnyng)活潑活潑分解多種糖類(lèi)。分解多種糖類(lèi)
29、。 菊糖(多數(shù)菊糖(多數(shù) + + ) 膽汁溶菌試驗(yàn)(膽汁溶菌試驗(yàn)(+ +) OptochinOptochin試驗(yàn)試驗(yàn)(+)(+)區(qū)別區(qū)別(qbi)(qbi)甲鏈與肺鏈甲鏈與肺鏈第四十八頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(四)抗原構(gòu)造(四)抗原構(gòu)造、莢膜多糖抗原莢膜多糖抗原: 據(jù)此將肺炎鏈球菌分據(jù)此將肺炎鏈球菌分8585型,對(duì)人致病的有型,對(duì)人致病的有2020多型。多型。 -型引起大葉性肺炎。型引起大葉性肺炎。、菌體多糖抗原:菌體多糖抗原: 可與可與CRPCRP反應(yīng),產(chǎn)生沉淀反應(yīng),產(chǎn)生沉淀(chndin)(chndin)。 3 3、M M蛋白抗原蛋白抗原: 型特異性。型特異性。第四十九頁(yè),共一百
30、二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn) (五)抵抗力 較弱,加熱56 ,20min即死亡(swng)。 對(duì)一般消毒劑敏感,對(duì)干燥抵抗力較強(qiáng)。w莢膜變異莢膜變異:有莢膜的光滑(:有莢膜的光滑(S S)型菌有毒力,失去)型菌有毒力,失去(shq)(shq)莢膜的粗糙(莢膜的粗糙(R R)型毒力減低或消失。)型毒力減低或消失。(六)變異性第五十頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(一)致病物質(zhì)(一)致病物質(zhì) 1 1、莢膜:、莢膜: 肺炎球菌的致病力,主要肺炎球菌的致病力,主要(zhyo)(zhyo)是莢膜的抗吞噬作用。是莢膜的抗吞噬作用。 2 2、蛋白粘附素、脂磷壁酸、肺炎鏈球菌溶素、蛋白粘附素、脂磷壁酸、肺炎鏈球
31、菌溶素O O等等 溶血毒素溶血毒素“O”O(jiān)”:自溶后釋放,能溶解人和動(dòng)物的紅自溶后釋放,能溶解人和動(dòng)物的紅細(xì)胞,高濃度對(duì)動(dòng)物有壞死及致死作用。細(xì)胞,高濃度對(duì)動(dòng)物有壞死及致死作用。第五十一頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(二)所致疾病 存在于正常人上呼吸道,為存在于正常人上呼吸道,為條件致病菌條件致病菌,僅在人體,僅在人體抵抗力下降時(shí)才引起疾病。抵抗力下降時(shí)才引起疾病。 可引起:可引起:大葉性肺炎大葉性肺炎,胸膜炎,膿胸,慢性,胸膜炎,膿胸,慢性(mn xng)(mn xng)支氣管炎,中耳炎,腦膜炎,敗血癥等。支氣管炎,中耳炎,腦膜炎,敗血癥等。第五十二頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(一
32、)標(biāo)本采集(一)標(biāo)本采集(cij)(cij) 痰液,膿液,血液,腦脊液等。痰液,膿液,血液,腦脊液等。(二)檢驗(yàn)程序(二)檢驗(yàn)程序(三)檢驗(yàn)方法(三)檢驗(yàn)方法第五十三頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)檢驗(yàn)檢驗(yàn)(jinyn)程序程序痰、膿痰、膿腦脊液腦脊液血液血液(xuy)直接涂片直接涂片(t pin)(t pin) 分離分離培養(yǎng)培養(yǎng)革蘭染色、美蘭染色革蘭染色、美蘭染色 莢膜腫脹試驗(yàn)莢膜腫脹試驗(yàn)增菌培養(yǎng)(葡萄糖肉湯、增菌培養(yǎng)(葡萄糖肉湯、硫酸鎂肉湯)硫酸鎂肉湯)(血平板)(血平板)挑選可疑菌落挑選可疑菌落純培養(yǎng)純培養(yǎng)初報(bào)初報(bào)兔血清肉湯兔血清肉湯小白鼠毒力試驗(yàn)小白鼠毒力試驗(yàn)涂片涂片 莢膜腫脹試驗(yàn)莢
33、膜腫脹試驗(yàn)?zāi)懼芫囼?yàn)?zāi)懼芫囼?yàn) 菊糖發(fā)酵菊糖發(fā)酵 OptochinOptochin試驗(yàn)試驗(yàn)藥敏試驗(yàn)藥敏試驗(yàn)報(bào)報(bào) 告告第五十四頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)檢驗(yàn)檢驗(yàn)(jinyn)方法方法1 1、直接、直接(zhji)(zhji)鏡檢鏡檢 適用于:痰、膿、腦脊液標(biāo)本。適用于:痰、膿、腦脊液標(biāo)本。 報(bào)告:報(bào)告:“找到肺炎鏈球菌找到肺炎鏈球菌”2 2、分離培養(yǎng)、分離培養(yǎng) 硫酸鎂肉湯硫酸鎂肉湯:均勻混濁生長(zhǎng),有綠色熒光。:均勻混濁生長(zhǎng),有綠色熒光。 血平板血平板:灰白色,圓形,扁平,較小,周?chē)胁荩夯野咨瑘A形,扁平,較小,周?chē)胁菥G色溶血環(huán)(綠色溶血環(huán)(溶血)溶血) 第五十五頁(yè),共一百二十頁(yè)。
34、病原性球菌與檢驗(yàn)3 3、鑒定試驗(yàn)、鑒定試驗(yàn)(1 1)莢膜腫脹)莢膜腫脹(zhngzhng)(zhngzhng)試驗(yàn)試驗(yàn)(2 2)膽汁溶菌試驗(yàn):)膽汁溶菌試驗(yàn):+ +(3 3)OptochinOptochin試驗(yàn):試驗(yàn):+ +(4 4)菊糖發(fā)酵試驗(yàn):)菊糖發(fā)酵試驗(yàn):+ +(5 5)小鼠毒力試驗(yàn):)小鼠毒力試驗(yàn): 有毒力的菌株,接種后12-36h,死亡。第五十六頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)w膽汁溶菌試驗(yàn)?zāi)懼芫囼?yàn)(shyn)(shyn)陽(yáng)性陽(yáng)性: 加入膽汁(dnzh)或10%去氧膽酸鈉,37,5-10min,激活本菌的自溶酶,出現(xiàn)溶菌現(xiàn)象。第五十七頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)wOpt
35、ochinOptochin敏感試驗(yàn)敏感試驗(yàn)(shyn)(shyn)陽(yáng)陽(yáng)性:性:w 取肉湯培養(yǎng)液均勻涂于血取肉湯培養(yǎng)液均勻涂于血平板上用平板上用optochinoptochin紙片貼于接紙片貼于接種區(qū)中央(或分區(qū)劃線法,紙種區(qū)中央(或分區(qū)劃線法,紙片貼于片貼于1-21-2區(qū)),區(qū)),3535需氧培養(yǎng)需氧培養(yǎng)過(guò)夜,抑菌圈過(guò)夜,抑菌圈 18mm18mm。第五十八頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)Optochintest第五十九頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)肺炎鏈球菌的主要鑒定(jindng)依據(jù) 1 1、鏡下形態(tài)、鏡下形態(tài):革蘭陽(yáng)性球菌,矛頭狀成雙排列,:革蘭陽(yáng)性球菌,矛頭狀成雙排列,平端相對(duì),
36、尖端向外;平端相對(duì),尖端向外; 2 2、血平板、血平板(pngbn)(pngbn)菌落特點(diǎn)菌落特點(diǎn):直徑:直徑0.5-1.5mm0.5-1.5mm,灰白,灰白色,半透明,光滑(有些菌株為粘液狀),扁平,周色,半透明,光滑(有些菌株為粘液狀),扁平,周?chē)胁菥G色溶血環(huán)。圍有草綠色溶血環(huán)。 培養(yǎng)或放置培養(yǎng)或放置24h24h以上,菌落中央可塌陷,呈臍窩狀。以上,菌落中央可塌陷,呈臍窩狀。 3 3、生化鑒定、生化鑒定: OptochinOptochin試驗(yàn)試驗(yàn)+ +,膽汁溶菌試驗(yàn),膽汁溶菌試驗(yàn)+ +。第六十頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)肺炎(fiyn)鏈球菌與甲型溶血性鏈球菌的鑒別 形態(tài)形態(tài)(xn
37、gti) 菌落菌落 血清血清 膽汁膽汁 菊糖菊糖 Opto- 小鼠小鼠 肉湯肉湯 溶菌溶菌 chin 毒力試驗(yàn)毒力試驗(yàn)肺鏈肺鏈甲鏈甲鏈矛頭狀,矛頭狀, 稍大,濕潤(rùn)稍大,濕潤(rùn)(shrn) 渾濁渾濁 + + + +成雙,成雙, 扁平,扁平,有莢膜有莢膜 臍窩狀臍窩狀圓形,圓形, 較小,稍干,較小,稍干, 沉淀沉淀 無(wú)莢膜無(wú)莢膜 圓,凸起圓,凸起第六十一頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(四)結(jié)果評(píng)價(jià)(pngji)和報(bào)告 乙型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌乙型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌為毒力強(qiáng)的致病菌,無(wú)論從任何臨床標(biāo)本中分離出均應(yīng)報(bào)告臨床。 及時(shí)鑒定(jindng)和報(bào)告咽部標(biāo)本中分離出的化膿性鏈球菌,有
38、利于早期治療,以減少并發(fā)癥(如風(fēng)濕熱,腎小球腎炎)的產(chǎn)生。 草綠色鏈球菌草綠色鏈球菌在重癥感染時(shí),應(yīng)鑒定到種。第六十二頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)第三節(jié)第三節(jié) 腸球菌腸球菌(qijn)(qijn)屬屬 是腸道中的正常菌群是腸道中的正常菌群 導(dǎo)致醫(yī)院內(nèi)感染:如導(dǎo)致醫(yī)院內(nèi)感染:如、腹部、腹部(f b)(f b)和和盆腔感染、敗血癥、腦膜炎。盆腔感染、敗血癥、腦膜炎。第六十三頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)一、生物學(xué)特性一、生物學(xué)特性(txng)(txng)(一)形態(tài)染色(一)形態(tài)染色 G G+ +球菌,球菌,單個(gè)、成雙或短鏈狀單個(gè)、成雙或短鏈狀排列排列(pili)(pili)。無(wú)莢膜、。無(wú)
39、莢膜、芽胞,部分菌株有鞭毛。芽胞,部分菌株有鞭毛。第六十四頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn) 營(yíng)養(yǎng)要求較高。能在營(yíng)養(yǎng)要求較高。能在高鹽高鹽(6.5%NaCl6.5%NaCl)、)、高高堿堿(PH9.6PH9.6)、)、高膽汁高膽汁(dnzh)(dnzh)(40%40%)、)、10451045生長(zhǎng)。生長(zhǎng)。 菌落菌落:圓形、中等大小、灰白色、不透明、:圓形、中等大小、灰白色、不透明、S S型,有型,有或或溶血。溶血。(二)培養(yǎng)(二)培養(yǎng)(piyng)(piyng)特性特性第六十五頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)?zāi)芊纸饽芊纸?fnji)(fnji)多種糖類(lèi)多種糖類(lèi)觸酶(觸酶(- -)PYRPYR(
40、吡咯烷酮(吡咯烷酮-萘基酰胺)試驗(yàn)(萘基酰胺)試驗(yàn)(+ +)(三)生化(三)生化(shn hu)(shn hu)反應(yīng)反應(yīng)第六十六頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn) 目前目前(mqin)(mqin)分分1818種。引起醫(yī)院內(nèi)感染常見(jiàn)種。引起醫(yī)院內(nèi)感染常見(jiàn)的是糞腸球菌和屎腸球菌。的是糞腸球菌和屎腸球菌。 常用的分型方法:常用的分型方法:rRNArRNA基因探針?lè)中头ā;蛱结樂(lè)中头?。(四)分型(四)分型(五)抵抗力(五)抵抗?對(duì)理化對(duì)理化(lhu)(lhu)因素抵抗力弱。因素抵抗力弱。 但對(duì)大多數(shù)抗生素天然耐藥。但對(duì)大多數(shù)抗生素天然耐藥。第六十七頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)二、微生物學(xué)二、
41、微生物學(xué)(wi shn w xu)(wi shn w xu)檢驗(yàn)檢驗(yàn) (一)標(biāo)本(一)標(biāo)本(biobn)(biobn)采集采集 尿液、血液、腦脊液、膿汁分泌物等。尿液、血液、腦脊液、膿汁分泌物等。第六十八頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(二)檢驗(yàn)(二)檢驗(yàn)(jinyn)程序程序尿液、膿汁、穿尿液、膿汁、穿刺刺(chunc)液液血血 液液涂片染色涂片染色 分離分離(fnl)(fnl)培養(yǎng)(血平板、培養(yǎng)(血平板、5%CO25%CO2)初初 報(bào)報(bào)挑選可疑菌落挑選可疑菌落增菌培養(yǎng)(葡萄糖肉增菌培養(yǎng)(葡萄糖肉湯、湯、5%CO25%CO2)PYR試驗(yàn)試驗(yàn)?zāi)懼呷~膽汁七葉苷試驗(yàn)苷試驗(yàn)6.5%NaCl生長(zhǎng)試
42、驗(yàn)生長(zhǎng)試驗(yàn)血清學(xué)血清學(xué)試驗(yàn)試驗(yàn)其他鑒定試其他鑒定試驗(yàn)驗(yàn)報(bào)報(bào) 告告第六十九頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(三)檢驗(yàn)(三)檢驗(yàn)(jinyn)方法方法1 1、直接鏡檢、直接鏡檢 適用于:痰、膿、腦脊液、穿刺適用于:痰、膿、腦脊液、穿刺(chunc)(chunc)液標(biāo)本。液標(biāo)本。2 2、分離培養(yǎng)、分離培養(yǎng) 血平板血平板:灰白色,圓形,中等大小,不透明,:灰白色,圓形,中等大小,不透明,S S型菌落,周?chē)行途洌車(chē)腥苎蛉苎蛉苎?。溶血?選擇培養(yǎng)基:疊氮膽汁七葉苷瓊脂平板。選擇培養(yǎng)基:疊氮膽汁七葉苷瓊脂平板。第七十頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)3 3、鑒定試驗(yàn)、鑒定試驗(yàn)(1 1)菌屬鑒定
43、試驗(yàn):)菌屬鑒定試驗(yàn): PYRPYR試驗(yàn):腸球菌、試驗(yàn):腸球菌、A A群鏈球菌、某些群鏈球菌、某些(mu xi)(mu xi)凝固凝固酶陰性葡萄球菌為(酶陰性葡萄球菌為(+ +) 膽汁七葉苷試驗(yàn):膽汁七葉苷試驗(yàn):+ + 鹽耐受試驗(yàn):鹽耐受試驗(yàn):+ +(4 4)種間鑒定試驗(yàn):)種間鑒定試驗(yàn):P175P175表表17-317-3第七十一頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)w 特點(diǎn)(tdin):為一群G-雙球菌,無(wú)鞭毛,無(wú)芽胞,有菌毛,需氧,氧化酶及觸酶 +。w 種類(lèi):共九種,主要致病菌是w 腦膜炎奈瑟菌腦膜炎奈瑟菌(merningococcus)w 淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌(gonorrhoeae)第七
44、十二頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)一、腦膜炎奈瑟菌 (N.meningitidis)即腦膜炎球菌(qijn),是流行性腦脊髓膜炎的病原體第七十三頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(一)生物學(xué)性狀(xngzhung)n1形態(tài)結(jié)構(gòu)n2培養(yǎng)特性n3生化反應(yīng)n4. 抗原(kngyun)結(jié)構(gòu)n5. 抵抗力特點(diǎn)第七十四頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn) (一)形態(tài)(xngti)結(jié)構(gòu)nG-,腎形成雙排列n在患者(hunzh)腦脊液標(biāo)本中位于中性粒細(xì)胞內(nèi)n無(wú)芽胞、無(wú)鞭毛,具有莢膜、菌毛。第七十五頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)2培養(yǎng)(piyng)特性n營(yíng)養(yǎng)要求高營(yíng)養(yǎng)要求高,必須在含有血清或多種氨基酸、無(wú)
45、機(jī)鹽的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好。n血平板血平板:半透明,灰褐色,圓形,濕潤(rùn)(shrn)光滑露滴樣菌落。n易自溶易自溶。第七十六頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)n巧克力平板巧克力平板:圓形,扁平,藍(lán)灰色,半透明,光滑:圓形,扁平,藍(lán)灰色,半透明,光滑(gung (gung hu)hu)濕潤(rùn)的菌落。濕潤(rùn)的菌落。n卵黃雙抗(卵黃雙抗(EPVEPV)平板)平板:較大,無(wú)色,光滑濕潤(rùn),扁:較大,無(wú)色,光滑濕潤(rùn),扁平,邊緣整齊的菌落。平,邊緣整齊的菌落。n血清肉湯血清肉湯:呈微混濁。:呈微混濁。第七十七頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)3.生化(shn hu)反應(yīng)n分解葡萄糖、麥芽糖:+n硝酸鹽還原試驗(yàn)陰性,不
46、分解尿素(nio s)n氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性第七十八頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)4.抗原(kngyun)結(jié)構(gòu)n可分9個(gè)血清(xuqng)群,對(duì)人致病的主要是A群5抵抗力特點(diǎn)(tdin)n對(duì)寒冷、光、熱力,干燥等十分敏感。室溫對(duì)寒冷、光、熱力,干燥等十分敏感。室溫3h3h,60 60 5min5min死亡。死亡。n采集標(biāo)本:注意保溫迅速送檢。采集標(biāo)本:注意保溫迅速送檢。n對(duì)磺胺類(lèi)、青霉素、鏈霉素均敏感。對(duì)磺胺類(lèi)、青霉素、鏈霉素均敏感。 第七十九頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(二)致病性與免疫性n1 1致病物質(zhì)致病物質(zhì):菌毛、莢膜、內(nèi)毒素:菌毛、莢膜、內(nèi)毒素2 2所致疾?。核录膊。簜魅驹?、傳
47、播途徑傳染源、傳播途徑寄生寄生(jshng)(jshng)在正常人鼻咽部,存在易患人群,與患在正常人鼻咽部,存在易患人群,與患者補(bǔ)體介導(dǎo)的殺菌活性缺陷有關(guān)。約者補(bǔ)體介導(dǎo)的殺菌活性缺陷有關(guān)。約2%-3%2%-3%的人表現(xiàn)為的人表現(xiàn)為流腦癥狀。流腦癥狀。3. 3. 免疫性免疫性 病原可產(chǎn)生病原可產(chǎn)生(chnshng)(chnshng)群特異性抗體,但不持久。群特異性抗體,但不持久。第八十頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)(三) 微生物學(xué)(wi shn w xu)檢驗(yàn) 1 1標(biāo)本采集標(biāo)本采集(cij)(cij) n 菌血癥期病人采集血液菌血癥期病人采集血液n 有出血點(diǎn)或瘀斑者,可取瘀斑滲出液有出血點(diǎn)
48、或瘀斑者,可取瘀斑滲出液n 有腦膜刺激癥狀,抽取腦脊液有腦膜刺激癥狀,抽取腦脊液n帶菌者:咽拭子帶菌者:咽拭子 第八十一頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)注意事項(xiàng):注意事項(xiàng):立即送檢立即送檢(sn jin)(sn jin) 注意保溫(勿放冰箱)注意保溫(勿放冰箱) 防干燥防干燥 防紫外線防紫外線第八十二頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)、腦膜炎球菌、腦膜炎球菌(qijn)的檢驗(yàn)程序的檢驗(yàn)程序 血血 液液增菌培養(yǎng)增菌培養(yǎng)(piyng)(葡糖肉湯)(葡糖肉湯)分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)(piyng)(巧克力、血平板)(巧克力、血平板)鑒定試驗(yàn)鑒定試驗(yàn)涂染檢涂染檢 氧化酶氧化酶 葡、麥糖葡、麥糖 多價(jià)血清多價(jià)
49、血清 藥敏試驗(yàn)藥敏試驗(yàn) 結(jié)果報(bào)告結(jié)果報(bào)告 鼻咽拭子鼻咽拭子 卵黃雙抗平板卵黃雙抗平板510%co237 1824h37 1824h37 1824h腦脊液 瘀血點(diǎn)離心離心上沉上沉清淀清淀液物液物510%2涂片涂片染色染色初步初步報(bào)告報(bào)告直接凝集直接凝集第八十三頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)?zāi)X膜炎球菌的鑒定(jindng)依據(jù)菌落特征符合菌落特征符合形態(tài)染色形態(tài)染色(rns)符合符合分解葡、麥糖產(chǎn)酸分解葡、麥糖產(chǎn)酸氧化酶、觸酶陽(yáng)性氧化酶、觸酶陽(yáng)性血清凝集試驗(yàn)陽(yáng)性血清凝集試驗(yàn)陽(yáng)性第八十四頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)二、淋病(ln bng)奈瑟菌(N.gonorrhoeae)即淋球菌為淋病的
50、病原體,人是唯一天然(tinrn)宿主和傳染源第八十五頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)n1 1形態(tài)結(jié)構(gòu)形態(tài)結(jié)構(gòu)n2 2培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性(txng)(txng)n3. 3. 生化反應(yīng)生化反應(yīng)n4 4抵抗力特點(diǎn)抵抗力特點(diǎn)第八十六頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)1 1形態(tài)形態(tài)(xngti)(xngti)結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)nG G- -,球形或腎形,成對(duì)排列,球形或腎形,成對(duì)排列(pili)(pili)n有莢膜,無(wú)芽胞和鞭毛有莢膜,無(wú)芽胞和鞭毛第八十七頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)n營(yíng)養(yǎng)要求高,營(yíng)養(yǎng)要求高,30-3730-37 生長(zhǎng),須在含有血液或血清生長(zhǎng),須在含有血液或血清的培養(yǎng)基上培養(yǎng),常用血液、巧
51、克力等培養(yǎng)基的培養(yǎng)基上培養(yǎng),常用血液、巧克力等培養(yǎng)基n初次分離初次分離(fnl)(fnl),須,須5-10%CO5-10%CO2 2才能生長(zhǎng)發(fā)育才能生長(zhǎng)發(fā)育n菌落:凸起,光滑、圓形,灰褐色,半透明菌落:凸起,光滑、圓形,灰褐色,半透明 第八十八頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)n氧化酶試驗(yàn)氧化酶試驗(yàn)(shyn)(shyn):(:(+ +)n觸酶觸酶: (+ +)n葡萄糖(葡萄糖(+ +) ,麥芽糖(,麥芽糖(- -)n易自溶易自溶第八十九頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)抵抗力弱,抵抗力弱,在干燥在干燥(gnzo)(gnzo)環(huán)境中僅能存活環(huán)境中僅能存活1-2h1-2h,濕熱,濕熱55 55
52、5min,100 5min,100 立即死亡。室溫下存活立即死亡。室溫下存活1-2d1-2d。對(duì)消毒劑極敏感對(duì)消毒劑極敏感第九十頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)、致病物質(zhì)、致病物質(zhì):菌毛、外膜蛋白、等:菌毛、外膜蛋白、等、所致疾?。骸⑺录膊。呵址溉祟?lèi)泌尿生殖系統(tǒng)引起淋病侵犯人類(lèi)泌尿生殖系統(tǒng)引起淋病(ln (ln bng)bng)( (首位性病首位性病) ) 新生兒眼炎新生兒眼炎第九十一頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)標(biāo)本:標(biāo)本:男性:尿道分泌物男性:尿道分泌物 女性:陰道女性:陰道(yndo)(yndo)分泌物分泌物 全身性淋病:血液、泌尿、生殖道的各種分全身性淋?。貉?、泌尿、生殖道的
53、各種分泌物、尿液泌物、尿液 立即送檢立即送檢 第九十二頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)?zāi)撝⒎置谖锬撝?、分泌物直接涂片直接涂?t pin)(t pin)染染色色 分分 離離 培培 養(yǎng)養(yǎng)血、巧克力、血、巧克力、TMTM平板平板(pngbn)(pngbn)5 510%co210%co23518351824h24h鑒定鑒定(jindng)(jindng)試驗(yàn)試驗(yàn)涂染檢涂染檢 氧化酶氧化酶 糖發(fā)酵糖發(fā)酵 藥敏試驗(yàn)藥敏試驗(yàn)報(bào)報(bào) 告告 初步報(bào)告初步報(bào)告35 1835 1824h24h第九十三頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)()直接(zhji)涂片鏡檢n急性急性(jxng)(jxng)淋病:淋?。菏戎?/p>
54、性粒細(xì)胞內(nèi)大量嗜中性粒細(xì)胞內(nèi)大量G G- -,腎形雙球菌,腎形雙球菌具具有診斷意義有診斷意義n慢性淋?。虹R檢較困難慢性淋?。虹R檢較困難 第九十四頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)()分離()分離(fnl)培養(yǎng)培養(yǎng) 即采集即培養(yǎng),常用含有兩種以即采集即培養(yǎng),常用含有兩種以上上(yshng)(yshng)抗生素(萬(wàn)古霉素、粘菌素、抗生素(萬(wàn)古霉素、粘菌素、磺胺類(lèi)等)的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)(如磺胺類(lèi)等)的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)(如MLML、TMTM) 5-10%CO25-10%CO2n培養(yǎng)基先預(yù)溫。培養(yǎng)基先預(yù)溫。第九十五頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)氧化酶試驗(yàn)氧化酶試驗(yàn): (+ +)觸酶:觸酶: (+ +
55、)(多數(shù)奈瑟菌為陰性)(多數(shù)奈瑟菌為陰性)葡萄糖(葡萄糖(+ +),麥芽糖(),麥芽糖(- -) PCRPCR:靈敏靈敏(ln mn)(ln mn),特異,標(biāo)本不受限制,特異,標(biāo)本不受限制( (不需活不需活菌菌) )()鑒定()鑒定(jindng)第九十六頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn) 1.1.名詞解釋?zhuān)好~解釋?zhuān)?血漿凝固血漿凝固(nngg)(nngg)酶、酶、SPASPA、抗鏈、抗鏈“o o”試驗(yàn)、試驗(yàn)、OptochinOptochin試驗(yàn)。試驗(yàn)。 2.2.根據(jù)色素和生化反應(yīng)將葡萄球菌分成哪幾種?根據(jù)色素和生化反應(yīng)將葡萄球菌分成哪幾種? 3.3.金黃色葡萄球菌的鑒定依據(jù)有哪些?金黃色葡
56、萄球菌的鑒定依據(jù)有哪些? 4.4.根據(jù)鏈球菌在血平板上的溶血現(xiàn)象,將其分成哪些類(lèi)型?甲根據(jù)鏈球菌在血平板上的溶血現(xiàn)象,將其分成哪些類(lèi)型?甲鏈和乙鏈有何區(qū)別?鏈和乙鏈有何區(qū)別? 5. 5. 簡(jiǎn)述鏈球菌的檢驗(yàn)程序和檢驗(yàn)方法。簡(jiǎn)述鏈球菌的檢驗(yàn)程序和檢驗(yàn)方法。 6. 6. 腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌有哪些異同點(diǎn)?腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌有哪些異同點(diǎn)? 7.7.采集腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌的標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌檢驗(yàn)應(yīng)采集腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌的標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌檢驗(yàn)應(yīng)該注意哪些問(wèn)題?為什么?該注意哪些問(wèn)題?為什么? 復(fù)習(xí)(fx)思考題第九十七頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)中等中等(zhngdng)(zhngdng
57、)大,突起,大,突起,有色素,有色素,S S型菌落。型菌落。葡萄球菌葡萄球菌(p to qi jn)菌菌落形態(tài)落形態(tài)(普通瓊脂平板)(普通瓊脂平板)第九十八頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)金黃色葡萄球菌(p to qi jn)表皮(biop)葡萄球菌第九十九頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)金黃色葡萄球菌有透明(tumng)溶血環(huán)。表皮(biop)葡萄球菌無(wú)溶血環(huán)。第一百頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)葡萄球菌葡萄球菌A A蛋白(蛋白(SPASPA)的意義:的意義:(1 1)降低抗體的調(diào)理作用,抗吞噬)降低抗體的調(diào)理作用,抗吞噬(2 2)協(xié)同)協(xié)同(xitng)(xitng)凝集試驗(yàn)?zāi)囼?yàn): :輔助診斷疾病。輔助診斷疾病。第一百零一頁(yè),共一百二十頁(yè)。病原性球菌與檢驗(yàn)血漿凝固(nngg)酶試驗(yàn)原理原理致病性葡萄球菌能產(chǎn)生種血漿凝固酶: 一種為結(jié)合型凝固酶(凝聚因子):細(xì)菌表面的纖維蛋白原受體與血漿中的纖維蛋白原結(jié)合,導(dǎo)致細(xì)菌凝集。另一種為游離(yul)型凝固酶,可被人或兔血漿中的協(xié)同因子激活,成為凝血酶樣物質(zhì),使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白,從而使血漿凝固。檢測(cè)方法檢測(cè)方法結(jié)合型凝固結(jié)合型凝固(nngg)酶:玻片法酶:
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