附錄ⅧP殘留溶劑測(cè)定法

1、附錄 P 殘留溶劑測(cè)定法藥物中的殘留溶劑系指在原料藥或輔料的生產(chǎn)中，以及在制劑制備過程中使用的，但在工藝過程中未能完全去除的有機(jī)溶劑。藥物中常見的殘留溶劑及限度見附表1，除另有規(guī)定外，第一、第二、第三類溶劑的殘留量應(yīng)符合表中的規(guī)定；對(duì)其他溶劑，應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)工藝的特點(diǎn)，制定相應(yīng)的限度，使其符合產(chǎn)品規(guī)范、GMP或其他基本的質(zhì)量要求。本法照氣相色譜法（附錄 E）測(cè)定。色譜柱1毛細(xì)管柱 除另有規(guī)定外，極性相近的同類色譜柱之間可以互代使用。（1）非極性色譜柱 固定液為100的二甲基聚硅氧烷的毛細(xì)管柱。（2）極性色譜柱 固定液為聚乙二醇（PEG-20M）的毛細(xì)管柱。（3）中極性色譜柱 固定液為（35%）二苯

2、基-（65%）甲基聚硅氧烷，（50%）二苯基-（50%）二甲基聚硅氧烷，（35%）二苯基-（65%）二甲基亞芳基聚硅氧烷，（14%）氰丙基苯基-（86%）二甲基聚硅氧烷，（6%）氰丙基苯基-（94%）二甲基聚硅氧烷的毛細(xì)管柱。（4）弱極性色譜柱 固定液為（5%）苯基-（95%）甲基聚硅氧烷，（5%）二苯基-（95%）二甲基亞芳基硅氧烷共聚物的毛細(xì)管柱。2填充柱 以直徑為0.250.18mm的乙二烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他適宜的填料作為固定相。系統(tǒng)適用性試驗(yàn)（1）用待測(cè)物的色譜峰計(jì)算，毛細(xì)管色譜柱的理論板數(shù)均應(yīng)大于5000；填充柱法的理論板數(shù)應(yīng)大于1000。（2）色譜圖中，待測(cè)物色譜

3、峰與其相鄰的色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5；（3）以內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，所得待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）應(yīng)不大于5；若以外標(biāo)法測(cè)定，所得待測(cè)物峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）應(yīng)不大于10。供試品溶液的制備1頂空進(jìn)樣 除另有規(guī)定外，精密稱取供試品0.11g；通常以水為溶劑；對(duì)于非水溶性藥物，可采用N，N二甲基甲酰胺、二甲基亞砜或其他適宜溶劑；根據(jù)供試品和待測(cè)溶劑的溶解度，選擇適宜的溶劑且應(yīng)不干擾待測(cè)溶劑的測(cè)定。根據(jù)品種正文中殘留溶劑的限度規(guī)定配制供試品溶液，濃度滿足系統(tǒng)定量測(cè)定的需要。2溶液直接進(jìn)樣 精密稱取供試品適量，用水或合適的有機(jī)溶劑使溶解；根據(jù)品種正文中殘

4、留溶劑的限度規(guī)定配制供試品溶液，其濃度滿足系統(tǒng)定量測(cè)定的需要。對(duì)照品溶液的制備精密稱取各品種項(xiàng)下規(guī)定檢查的有機(jī)溶劑適量，采用與制備供試品溶液相同的方法和溶劑制備對(duì)照品溶液。若為限度實(shí)驗(yàn)，根據(jù)殘留溶劑的限度規(guī)定確定對(duì)照品溶液的濃度；若為定量測(cè)定，為保證定量結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)根據(jù)供試品中殘留溶劑的實(shí)際殘留量確定對(duì)照品溶液的濃度；通常對(duì)照品溶液的色譜峰面積與供試品溶液中對(duì)應(yīng)的殘留溶劑的色譜峰面積以不超過2倍為宜。必要時(shí)，應(yīng)重新調(diào)整供試品溶液和對(duì)照品溶液的濃度。測(cè)定法第一法 毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣等溫法當(dāng)需要檢查的有機(jī)溶劑數(shù)量不多，并極性差異較小時(shí)，可采用此法。色譜條件 柱溫一般為40100；常以氮?dú)鉃檩d氣，

5、流速為每分鐘1.02.0ml；頂空瓶加熱溫度為7085，頂空瓶加熱時(shí)間3060分鐘；進(jìn)樣口溫度為200；如采用FID檢測(cè)器，溫度為250。測(cè)定法 取對(duì)照品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣不少于2次，測(cè)定待測(cè)峰的峰面積。第二法 毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣系統(tǒng)程序升溫法當(dāng)需要檢查的有機(jī)溶劑數(shù)量較多并極性差異較大時(shí)，可采用此法。色譜條件 如為非極性色譜系統(tǒng)，柱溫一般先在30維持7分鐘，再以8/min的速度升至120，維持15分鐘；如為極性色譜系統(tǒng)，柱溫一般先在60維持6分鐘；再以8/min的升溫速率升至100，維持20 分鐘；以氮?dú)鉃檩d氣，流速為2.0ml/min；頂空瓶溫度7085，頂空時(shí)間3060分鐘；進(jìn)樣

6、口溫度為200；如采用FID檢測(cè)器，溫度為250。具體到單個(gè)藥品的殘留溶劑檢查時(shí)，可根據(jù)該品種項(xiàng)下的殘留溶劑組成調(diào)整程序升溫速率。測(cè)定法 取對(duì)照品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣不少于2次，測(cè)定待測(cè)峰的峰面積。第三法 溶液直接進(jìn)樣法 可采用填充柱，亦可采用適宜極性的毛細(xì)管柱。測(cè)定法 取對(duì)照品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣不少于3次，每次2l，測(cè)定待測(cè)峰的峰面積。計(jì)算法（1）限度實(shí)驗(yàn)：以內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，計(jì)算單位重量樣品中的色譜峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積之比；供試品溶液所得的峰面積比的平均值不得大于由對(duì)照品溶液所得的峰面積比的平均值。以外標(biāo)法測(cè)定時(shí)，供試品溶液所得的單位重量中樣品待測(cè)物峰的平均面積不得大于由標(biāo)

7、準(zhǔn)溶液所得的待測(cè)物峰的平均峰面積。（2）定量測(cè)定：按內(nèi)標(biāo)法或外標(biāo)法計(jì)算各殘留溶劑的量。【附注】（1）除另有規(guī)定外，頂空條件的選擇A應(yīng)根據(jù)供試品中殘留溶劑的沸點(diǎn)選擇頂空溫度。對(duì)沸點(diǎn)較高的殘留溶劑，通常選擇較高的頂空溫度；但此時(shí)應(yīng)兼顧供試品的熱分解特性，盡量避免供試品產(chǎn)生的揮發(fā)性熱分解產(chǎn)物對(duì)測(cè)定的干擾。B頂空時(shí)間一般為3045分鐘，以保證供試品溶液的氣-液兩相有足夠的時(shí)間達(dá)到平衡。頂空時(shí)間通常不宜過長(zhǎng)，如超過60分鐘，可能引起頂空瓶的氣密性變差，導(dǎo)致定量準(zhǔn)確性的降低。C對(duì)照品溶液與供試品溶液必須使用相同的頂空條件。（2）定量方法的驗(yàn)證 當(dāng)采用頂空色譜系統(tǒng)測(cè)定時(shí)，供試品與對(duì)照品處于不完全相同的基質(zhì)中

8、，故應(yīng)考慮氣液平衡過程中的基質(zhì)效應(yīng)。由于標(biāo)準(zhǔn)加入法可以消除供試品溶液基質(zhì)與對(duì)照品溶液基質(zhì)不同所致的基質(zhì)效應(yīng)的影響，故通常采用標(biāo)準(zhǔn)加入法驗(yàn)證定量方法的準(zhǔn)確性。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)加入法與其他定量方法的結(jié)果不一致時(shí)，應(yīng)以標(biāo)準(zhǔn)加入法的結(jié)果為準(zhǔn)。（3）干擾峰的排除 供試品中的未知雜質(zhì)或其揮發(fā)性熱降解物易對(duì)殘留溶劑的測(cè)定產(chǎn)生干擾。干擾作用包括在測(cè)定的色譜系統(tǒng)中未知雜質(zhì)或其揮發(fā)性熱降解物與待測(cè)物的保留值相同（共出峰）；或熱降解產(chǎn)物與待測(cè)物的結(jié)構(gòu)相同（如甲氧基熱裂解產(chǎn)生甲醇）。當(dāng)測(cè)定的有機(jī)溶劑殘留量超出限度，但未能確定供試品中是否有未知雜質(zhì)或其揮發(fā)性熱降解物對(duì)測(cè)定有干擾作用時(shí)，應(yīng)通過試驗(yàn)排除干擾作用的存在。對(duì)第一類干擾作

9、用，通常采用在另一種極性相反的色譜柱系統(tǒng)中對(duì)相同樣品再進(jìn)行測(cè)定，比較不同色譜系統(tǒng)中測(cè)定結(jié)果的方法。如二者結(jié)果一致，則可以排除測(cè)定中有共出峰的干擾；如二者結(jié)果不一致，則表明測(cè)定中有共出峰的干擾。對(duì)第二類干擾作用，通常要通過測(cè)定已知不含該溶劑的對(duì)照樣品來加以判斷。（4）含氮堿性化合物的測(cè)定 普通氣相色譜的不銹鋼管路、進(jìn)樣器的襯管等對(duì)有機(jī)胺等含氮堿性化合物具有較強(qiáng)的吸附作用，致使其檢出靈敏度降低。當(dāng)采用頂空進(jìn)行系統(tǒng)測(cè)定此類化合物時(shí)，應(yīng)采用惰性的硅鋼材料或鎳鋼材料管路；或采用溶液直接進(jìn)樣法測(cè)定。供試品溶液應(yīng)不呈酸性，以免待測(cè)物與酸反應(yīng)后不易汽化。通常采用弱極性的色譜柱或經(jīng)堿處理過的色譜柱分析含氮堿性化

10、合物，如果采用胺分析專用柱進(jìn)行分析，效果更好。對(duì)不宜采用氣相色譜法測(cè)定含氮堿性化合物，如N-甲基吡咯烷酮等可采用其他方法如離子色譜法等測(cè)定。（5）檢測(cè)器的選擇 對(duì)含鹵素元素的殘留溶劑如氯仿等，采用ECD檢測(cè)器，易得到高的靈敏度。（6）由于不同的實(shí)驗(yàn)室在測(cè)定同一藥品時(shí)可能采用了不同的實(shí)驗(yàn)方法，當(dāng)測(cè)定結(jié)果處于合格不合格邊緣時(shí)，以采用內(nèi)標(biāo)及標(biāo)準(zhǔn)加入法為準(zhǔn)。（7）甲酰胺、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、乙二醇、N-甲基吡咯烷酮等不宜用頂空進(jìn)樣方式測(cè)定。附表1 藥品中常見的殘留溶劑及限度溶 劑 名 稱限 度/%溶 劑 名 稱限 度/%第一類溶劑（應(yīng)該避免使用）苯四氯化碳1, 2-二氯乙烷1, 1-二氯乙

11、烯1, 1, 1-三氯乙烷第二類溶劑（應(yīng)該限制使用）乙腈氯苯氯仿環(huán)己烷1, 2-二氯乙烯二氯甲烷1, 2-二甲氧基乙烷N, N-二甲基乙酰胺N, N-二甲基甲酰胺1, 4-二氧六環(huán)2-乙氧基乙醇乙二醇甲酰胺正己烷甲醇2-甲氧基乙醇甲基丁基酮甲基環(huán)己烷N-甲基吡咯烷酮硝基甲烷吡啶四氫噻吩四氫化萘四氫呋喃甲苯1, 1, 2-三氯乙烯二甲苯0.00020.00040.00050.00080.150.0410.0360.0060.3880.1870.060.010.1090.0880.0380.0160.00620.0220.0290.30.0050.0050.1180.4840.0050.020.0

12、160.010.0720.0890.0080.217第三類溶劑（GMP或其他質(zhì)量要求限制使用）醋酸丙酮甲氧基苯正丁醇仲丁醇醋酸丁酯叔丁基甲基醚異丙基苯二甲亞砜乙醇醋酸乙酯乙醚甲酸乙酯甲酸正庚烷醋酸異丁酯醋酸異丙酯醋酸甲酯3-甲基-1-丁醇丁酮甲基異丁基酮異丁醇正戊烷正戊醇正丙醇異丙醇醋酸丙酯第四類溶劑（尚無足夠毒理學(xué)資料）1, 1-二乙氧基丙烷1, 1-二甲氧基甲烷2, 2-二甲氧基丙烷異辛烷異丙醚甲基異丙基酮甲基四氫呋喃石油醚三氯醋酸三氟醋酸0.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50

13、.50.5 通常含有60%間二甲苯，14%對(duì)二甲苯，9%鄰二甲苯和17%乙苯。 藥品生產(chǎn)企業(yè)在使用時(shí)應(yīng)提供該類溶劑在制劑中殘留水平的合理性論證報(bào)告。附表2 常見有機(jī)溶劑在等溫法測(cè)定的與丁酮的相對(duì)保留時(shí)間（RTR）非 極 性 色 譜 柱極 性 色 譜 柱溶劑名稱RTR溶劑名稱RTR柱溫40甲醇乙醇乙腈丙酮異丙醇乙醚甲酸乙酯正戊烷1, 1-二氯乙烯醋酸甲酯二氯甲烷硝基甲烷正丙醇叔丁基甲基醚丁酮仲丁醇異丙醚正己烷醋酸乙酯氯仿四氫呋喃異丁醇1, 1, 1-三氯乙烷甲基異丙基酮1, 2-二甲氧基乙烷醋酸異丙酯正丁醇苯甲基四氫呋喃四氯化碳環(huán)己烷異辛烷三氯乙烯醋酸丙酯正庚烷甲基環(huán)己烷甲基異丁基酮3-甲基-1

14、-丁醇甲苯正戊醇柱溫70醋酸丁酯甲基丁基酮醋酸異丁酯氯苯異丙基苯柱溫901, 2-二氯乙烷二氧六環(huán)吡啶3280甲氧基苯6柱溫100四氫萘0.5400.6150.6400.6680.6910.7270.7360.7390.7490.7800.7850.8190.8690.9421.0001.0651.1271.1301.1311.1631.2321.2361.4311.4361.4641.5221.5331.5601.6061.6101.6151.9751.9892.1272.1342.4612.4872.5173.2473.307柱溫60正戊烷正己烷乙醚異丙醚叔丁基甲基醚1, 1-二氯乙烯環(huán)己

15、烷異辛烷正庚烷甲基環(huán)己烷二甲氧基甲烷丙酮醋酸甲酯甲酸乙酯1, 1, 1-三氯乙烷甲醇四氫呋喃甲基四氫呋喃四氯化碳醋酸乙酯醋酸異丙酯丁酮異丙醇1, 2-二甲氧基乙烷二氯甲烷乙醇氯仿甲基異丙基酮苯醋酸丙酯三氯乙烯甲基異丁基酮醋酸異丁酯乙腈仲丁醇正丙醇甲苯醋酸丁酯二氧六環(huán)1, 2-二氯乙烷柱溫60異丙基苯吡啶柱溫80硝基甲烷異丁醇正丁醇正戊醇氯苯3-甲基-1-丁醇柱溫90甲氧基苯柱溫100四氫萘0.5620.5810.5890.6050.6170.6470.6470.6570.6730.6870.7110.7630.7640.8210.8680.8970.9100.9160.9330.9480.97

16、31.0001.0491.0621.0731.0741.0841.0941.1401.2571.3421.4501.4521.4781.4871.5991.6601.6681.8591.8682.9683.327注： 表中數(shù)據(jù)為非極性的SPB-1柱（30m0.32mm1.0m）和極性的HP-FFAP柱（25m0.32mm0.52m）測(cè)定的結(jié)果。 本表所列數(shù)據(jù)僅作參考。附表3 常見有機(jī)溶劑在程序升溫法測(cè)定的相對(duì)保留值非極性色譜柱極性色譜柱順序溶劑名稱RTR順序溶劑名稱RTR12345678910111213141516171819202122232425262728293031323334353

17、637383940414243444546474849甲醇乙醇乙腈丙酮異丙醇正戊烷乙醚甲酸乙酯二甲氧基甲烷醋酸甲酯二氯甲烷硝基甲烷正丙醇叔丁基甲基醚丁酮仲丁醇異丙醚正己烷氯仿醋酸乙酯四氫呋喃異丁醇1, 2-二氯乙烷1, 2-二甲氧基乙烷甲基異丙基酮苯醋酸異丙酯正丁醇四氯化碳環(huán)己烷甲基四氫呋喃三氯乙烯二氧六環(huán)異辛烷正庚烷醋酸丙酯吡啶甲基環(huán)己烷甲基異丁基酮3-甲基-1-丁醇甲苯正戊醇甲基丁基酮醋酸異丁酯醋酸丁酯氯苯甲氧基苯異丙基苯四氫萘0.4530.5390.5650.5950.6280.6670.6690.6830.7000.7200.7230.7800.8490.9311.0001.0951.

18、1691.1711.1781.1791.2831.3241.4131.5611.5661.6581.6791.6961.7111.7361.7402.0282.0302.0542.1632.1642.3202.3342.3522.3702.6172.6352.6682.7312.9533.1523.5613.6535.13212345678910111213141516171819202122232425262728293031323334353637383940414243444546474849正戊烷正己烷乙醚異辛烷異丙醚叔丁基甲基醚正庚烷環(huán)己烷二甲氧基甲烷甲基環(huán)己烷丙酮甲酸甲酯醋酸甲酯四氫呋喃甲基四氫呋喃四氯化碳醋酸乙酯醋酸異丙酯甲醇丁酮異丙醇1, 2-二甲氧基乙烷二氯甲烷氯仿乙醇甲基異丙基酮苯醋酸丙酯三氯乙烯仲丁醇甲基異丁基酮醋酸異丁酯乙腈正丙醇甲苯1, 2-二氯乙烷二氧六環(huán)醋酸丁酯甲基丁基酮異丁醇正丁