復方首烏降脂通脈顆粒防治大鼠高脂血癥和脂肪肝的實驗研究

1、復方首烏降脂通脈顆粒防治大鼠高脂血癥和脂肪肝的實驗研究 08-12-23 10:40:00 作者：陳家英 編輯：studa20【摘要】 目的：研究復方首烏降脂通脈顆粒對大鼠高脂血癥和脂肪肝的防治作用。方法：大鼠在小劑量四氯化碳致肝損傷的基礎上，合并喂養(yǎng)高脂飼料復制大鼠脂肪肝模型。防治給藥組分別給予不同濃度的藥物，以血清總膽固醇(TC)、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶（SOD）含量為評價指標，觀察藥物的防治效果。結(jié)果：與大鼠脂肪肝模型組相比，復方首烏降脂通脈顆?？梢燥@著降低大

2、鼠血清TC、TG、LDL、MDA、ALT和AST含量，升高SOD活性。肝臟組織及病理形態(tài)學改變均有明顯的改善。結(jié)論：復方首烏降脂通脈顆粒能明顯降低高脂血癥大鼠的血脂水平，減輕脂肪肝形成的程度，對復合因素引起的脂肪肝有較好的防治作用。 【關鍵詞】 高脂血癥 脂肪肝 大鼠 高脂血癥是目前公認的導致脂肪肝的主要病因之一 12，同時也是動脈粥樣硬化(As)、冠心病等相關疾病的病理基礎，降低血脂是預防和控制相關疾病發(fā)生發(fā)展的基本手段之一。目前臨床上使用的多數(shù)降血脂藥物是促進血液中脂質(zhì)運輸至肝臟進行代謝排泄，降血脂藥若長期服用，則會伴有肝功能低下和肝脂質(zhì)代謝障礙，易導致肝臟病變與脂肪沉積加劇3。因此，研究

3、具有降血脂功能，同時不妨礙肝臟正常功能的理想藥物具有重要實用價值4。和化學藥物相比，在我國很多中藥具有資源廣泛、毒副作用小、調(diào)脂療效肯定等優(yōu)點，有很好的開發(fā)前景。降脂通脈膠囊是以首烏和茵陳為主藥的一種新的中藥復方制劑。我們的實驗初步研究了復方首烏降脂通脈顆粒對大鼠高脂血癥和脂肪肝的防治作用，發(fā)現(xiàn)其具有較顯著的降血脂、保護肝臟和減輕脂肪肝形成的作用，為更廣泛的臨床應用提供了實驗依據(jù)。 1 材 料 11 實驗動物 清潔級SD大鼠，體重180 200 g，健康成年雄性，由南京醫(yī)科大學實驗動物中心提供，合格證號為 SCXK(蘇)20020031。飼養(yǎng)條件為空調(diào)房間，溫度18 24 ，相對濕度70%，1

4、2 h光照。 12 藥品與試劑 復方首烏降脂通脈顆粒由江蘇省藥物研究所植物化學研究室提供，10 g提取物/50 g生藥，批號030517；洛伐他汀由山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)，批號H37020089；膽固醇(生化試劑)由上海源聚生物科技有限公司提供，批號0400522；牛膽鹽(生化試劑)由上海中國惠興生化試劑有限公司提供，批號20040313；甲基硫氧嘧啶由常州康普藥業(yè)有限公司提供，批號0206221。 血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）采用酶法測定5，血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨

5、酶（AST）參照試劑盒說明書，均采用美國ACE全自動生化分析儀檢測其含量。上述指標測定由南京醫(yī)科大學附屬南京第一醫(yī)院生化檢驗科完成。 高脂飼料由79.3%基礎飼料、1%膽固醇、0.5%膽鹽、0.2%甲基硫氧嘧啶、10%豬油、5%黃豆、1%雞蛋和魚粉、2%蛋黃粉組成，由南京安立默科技有限公司提供。 2 方 法 21 動物分組與用藥 SD大鼠60只，在實驗條件下喂飼基礎飼料7 d，然后取尾血分別測定血清TC、TG，觀察指標的正常值。根據(jù)血脂水平將大鼠分成正常對照組、脂肪肝模型對照組、防治給藥各劑量組（復方首烏降脂通脈顆粒，3.0、2.0、1.0 gkg-1）和陽性對照組(洛伐他汀5.0 mgkg-

6、1)6組，每組10只。參照Chojkier等6方法復制脂肪肝動物模型，除正常對照組大鼠給予基礎飼料外，實驗第1天給各實驗組大鼠后肢一次性皮下注射四氯化碳植物油混合液（60%植物油和40%四氯化碳）3 mlkg-1,同時用高脂飼料喂養(yǎng)造模，并從實驗第1天開始，各防治給藥組、陽性對照組分別給予相應劑量(10 m1kg-1d-1)的對應藥物灌胃，正常對照組和模型對照組以等量的0.5%CMCNa溶液灌胃，1次d-1，連續(xù)6周。于每次灌胃前后觀察大鼠皮毛、活動和食量等情況，每周稱重1次，6周后全部動物麻醉下頸動脈取血，處死后取肝臟檢測。 22 檢測指標 221 體重、肝指數(shù)（肝濕重/體重100%） 實驗

7、期間每日稱取剩余飼料量，比較各組大鼠平均進食量、活動和毛發(fā)等情況。每周測量大鼠體重1次，比較各組大鼠體重變化情況。實驗結(jié)束后稱取肝重、體重，計算肝指數(shù)。 222 血脂、血清SOD、MDA、ALT和AST 所有大鼠在實驗第48天停喂高脂飼料，禁食12 h，于實驗第49天經(jīng)0.6%戊巴比妥鈉35 40 mgkg-1腹腔注射麻醉后頸動脈取血，無菌狀態(tài)分離血清，測定生化指標血清TC、TG、LDA、HDL、SOD、MDA、ALT和AST。觀察各給藥組的血脂指標、SOD、MDA、ALT和AST，并與正常對照組、模型對照組比較。 223 肝組織標本處理 采血后迅速剖取肝臟，在固定位置取組織塊置于10%福爾馬

8、林中固定，石蠟包埋切片，常規(guī)HE染色，光學顯微鏡下觀察肝臟組織形態(tài)、肝小葉結(jié)構(gòu)、脂肪變程度、肝細胞變性和壞死、炎癥細胞浸潤以及纖維增生等情況。 23 統(tǒng)計學處理 利用Microsoft Exel統(tǒng)計學軟件對各組結(jié)果進行處理。數(shù)據(jù)以x-s表示，與正常對照組、模型對照組比較采用兩組間均數(shù)t檢驗，P0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。 3 結(jié) 果 31 大鼠體重及肝指數(shù)的測定 各實驗組大鼠體重與正常對照組大鼠體重無明顯差異，模型對照組大鼠在喂養(yǎng)2周后食欲有所下降，體重增長不明顯，至6周時，模型組大鼠體重略低于正常組，但各組間無顯著性差異。模型組肝指數(shù)明顯升高，與正常對照組比較有顯著性差異（P0.01）。見

9、表1。 32 大鼠血脂測定結(jié)果 模型對照組大鼠血清TC、TG、LDL含量均顯著高于正常對照組（P0.001）；與模型對照組比較，各實驗組大鼠血清TC、TG、LDL含量均有不同程度降低，且差異顯著（P0.05或P0.01），防治給藥小劑量組大鼠血清TC、TG含量有降低，但差異不顯著。其中防治給藥大劑量組降低幅度最大，但與陽性對照組相比，差異不顯著（P0.05）。各實驗組對HDL無影響。見表2。表1 復方首烏降脂通脈顆粒對大鼠體重及肝指數(shù)的影響 1）與正常對照組比較，P0.01表2 復方首烏降脂通脈顆粒對大鼠血清TC、TG、HDL和LDL的影響 3.3 大鼠血清ALT、AST變化情況 模型對照組大

10、鼠血清ALT、AST顯著高于正常對照組（P0.01），防治給藥中劑量、大劑量組與模型對照組比較，大鼠血清ALT、AST均有顯著降低（P0.05或P0.01）。防治給藥小劑量組與模型對照組比較，大鼠血清ALT、AST沒有顯著降低（P0.05），陽性對照組與模型對照組比較，大鼠血清ALT、AST沒有顯著降低（P0.05）。見表3。表3 復方首烏降脂通脈顆粒對大鼠血清ALT和 AST的影響3.4 大鼠血清SOD和MDA變化情況 模型對照組與正常對照組比較，大鼠血清MDA顯著升高（P0.01），SOD顯著降低（P0.01），防治給藥各劑量組與模型對照組比較，大鼠血清MDA均有降低，且差異顯著（P0.01），以防治給藥大劑量組降低幅度最大。防治給藥各劑量組與模型對照組比較，大鼠血清SOD均升高，