復(fù)方首烏降脂通脈顆粒防治大鼠高脂血癥和脂肪肝的實驗研究

1、復(fù)方首烏降脂通脈顆粒防治大鼠高脂血癥和脂肪肝的實驗研究 08-12-23 10:40:00 作者：陳家英 編輯：studa20【摘要】 目的：研究復(fù)方首烏降脂通脈顆粒對大鼠高脂血癥和脂肪肝的防治作用。方法：大鼠在小劑量四氯化碳致肝損傷的基礎(chǔ)上，合并喂養(yǎng)高脂飼料復(fù)制大鼠脂肪肝模型。防治給藥組分別給予不同濃度的藥物，以血清總膽固醇(TC)、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶（SOD）含量為評價指標，觀察藥物的防治效果。結(jié)果：與大鼠脂肪肝模型組相比，復(fù)方首烏降脂通脈顆?？梢燥@著降低大

2、鼠血清TC、TG、LDL、MDA、ALT和AST含量，升高SOD活性。肝臟組織及病理形態(tài)學(xué)改變均有明顯的改善。結(jié)論：復(fù)方首烏降脂通脈顆粒能明顯降低高脂血癥大鼠的血脂水平，減輕脂肪肝形成的程度，對復(fù)合因素引起的脂肪肝有較好的防治作用。 【關(guān)鍵詞】 高脂血癥 脂肪肝 大鼠 高脂血癥是目前公認的導(dǎo)致脂肪肝的主要病因之一 12，同時也是動脈粥樣硬化(As)、冠心病等相關(guān)疾病的病理基礎(chǔ)，降低血脂是預(yù)防和控制相關(guān)疾病發(fā)生發(fā)展的基本手段之一。目前臨床上使用的多數(shù)降血脂藥物是促進血液中脂質(zhì)運輸至肝臟進行代謝排泄，降血脂藥若長期服用，則會伴有肝功能低下和肝脂質(zhì)代謝障礙，易導(dǎo)致肝臟病變與脂肪沉積加劇3。因此，研究

3、具有降血脂功能，同時不妨礙肝臟正常功能的理想藥物具有重要實用價值4。和化學(xué)藥物相比，在我國很多中藥具有資源廣泛、毒副作用小、調(diào)脂療效肯定等優(yōu)點，有很好的開發(fā)前景。降脂通脈膠囊是以首烏和茵陳為主藥的一種新的中藥復(fù)方制劑。我們的實驗初步研究了復(fù)方首烏降脂通脈顆粒對大鼠高脂血癥和脂肪肝的防治作用，發(fā)現(xiàn)其具有較顯著的降血脂、保護肝臟和減輕脂肪肝形成的作用，為更廣泛的臨床應(yīng)用提供了實驗依據(jù)。 1 材 料 11 實驗動物 清潔級SD大鼠，體重180 200 g，健康成年雄性，由南京醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號為 SCXK(蘇)20020031。飼養(yǎng)條件為空調(diào)房間，溫度18 24 ，相對濕度70%，1

4、2 h光照。 12 藥品與試劑 復(fù)方首烏降脂通脈顆粒由江蘇省藥物研究所植物化學(xué)研究室提供，10 g提取物/50 g生藥，批號030517；洛伐他汀由山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)，批號H37020089；膽固醇(生化試劑)由上海源聚生物科技有限公司提供，批號0400522；牛膽鹽(生化試劑)由上海中國惠興生化試劑有限公司提供，批號20040313；甲基硫氧嘧啶由常州康普藥業(yè)有限公司提供，批號0206221。 血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）采用酶法測定5，血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨

5、酶（AST）參照試劑盒說明書，均采用美國ACE全自動生化分析儀檢測其含量。上述指標測定由南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京第一醫(yī)院生化檢驗科完成。 高脂飼料由79.3%基礎(chǔ)飼料、1%膽固醇、0.5%膽鹽、0.2%甲基硫氧嘧啶、10%豬油、5%黃豆、1%雞蛋和魚粉、2%蛋黃粉組成，由南京安立默科技有限公司提供。 2 方 法 21 動物分組與用藥 SD大鼠60只，在實驗條件下喂飼基礎(chǔ)飼料7 d，然后取尾血分別測定血清TC、TG，觀察指標的正常值。根據(jù)血脂水平將大鼠分成正常對照組、脂肪肝模型對照組、防治給藥各劑量組（復(fù)方首烏降脂通脈顆粒，3.0、2.0、1.0 gkg-1）和陽性對照組(洛伐他汀5.0 mgkg-

6、1)6組，每組10只。參照Chojkier等6方法復(fù)制脂肪肝動物模型，除正常對照組大鼠給予基礎(chǔ)飼料外，實驗第1天給各實驗組大鼠后肢一次性皮下注射四氯化碳植物油混合液（60%植物油和40%四氯化碳）3 mlkg-1,同時用高脂飼料喂養(yǎng)造模，并從實驗第1天開始，各防治給藥組、陽性對照組分別給予相應(yīng)劑量(10 m1kg-1d-1)的對應(yīng)藥物灌胃，正常對照組和模型對照組以等量的0.5%CMCNa溶液灌胃，1次d-1，連續(xù)6周。于每次灌胃前后觀察大鼠皮毛、活動和食量等情況，每周稱重1次，6周后全部動物麻醉下頸動脈取血，處死后取肝臟檢測。 22 檢測指標 221 體重、肝指數(shù)（肝濕重/體重100%） 實驗

7、期間每日稱取剩余飼料量，比較各組大鼠平均進食量、活動和毛發(fā)等情況。每周測量大鼠體重1次，比較各組大鼠體重變化情況。實驗結(jié)束后稱取肝重、體重，計算肝指數(shù)。 222 血脂、血清SOD、MDA、ALT和AST 所有大鼠在實驗第48天停喂高脂飼料，禁食12 h，于實驗第49天經(jīng)0.6%戊巴比妥鈉35 40 mgkg-1腹腔注射麻醉后頸動脈取血，無菌狀態(tài)分離血清，測定生化指標血清TC、TG、LDA、HDL、SOD、MDA、ALT和AST。觀察各給藥組的血脂指標、SOD、MDA、ALT和AST，并與正常對照組、模型對照組比較。 223 肝組織標本處理 采血后迅速剖取肝臟，在固定位置取組織塊置于10%福爾馬

8、林中固定，石蠟包埋切片，常規(guī)HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察肝臟組織形態(tài)、肝小葉結(jié)構(gòu)、脂肪變程度、肝細胞變性和壞死、炎癥細胞浸潤以及纖維增生等情況。 23 統(tǒng)計學(xué)處理 利用Microsoft Exel統(tǒng)計學(xué)軟件對各組結(jié)果進行處理。數(shù)據(jù)以x-s表示，與正常對照組、模型對照組比較采用兩組間均數(shù)t檢驗，P0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 3 結(jié) 果 31 大鼠體重及肝指數(shù)的測定 各實驗組大鼠體重與正常對照組大鼠體重?zé)o明顯差異，模型對照組大鼠在喂養(yǎng)2周后食欲有所下降，體重增長不明顯，至6周時，模型組大鼠體重略低于正常組，但各組間無顯著性差異。模型組肝指數(shù)明顯升高，與正常對照組比較有顯著性差異（P0.01）。見

9、表1。 32 大鼠血脂測定結(jié)果 模型對照組大鼠血清TC、TG、LDL含量均顯著高于正常對照組（P0.001）；與模型對照組比較，各實驗組大鼠血清TC、TG、LDL含量均有不同程度降低，且差異顯著（P0.05或P0.01），防治給藥小劑量組大鼠血清TC、TG含量有降低，但差異不顯著。其中防治給藥大劑量組降低幅度最大，但與陽性對照組相比，差異不顯著（P0.05）。各實驗組對HDL無影響。見表2。表1 復(fù)方首烏降脂通脈顆粒對大鼠體重及肝指數(shù)的影響 1）與正常對照組比較，P0.01表2 復(fù)方首烏降脂通脈顆粒對大鼠血清TC、TG、HDL和LDL的影響 3.3 大鼠血清ALT、AST變化情況 模型對照組大

10、鼠血清ALT、AST顯著高于正常對照組（P0.01），防治給藥中劑量、大劑量組與模型對照組比較，大鼠血清ALT、AST均有顯著降低（P0.05或P0.01）。防治給藥小劑量組與模型對照組比較，大鼠血清ALT、AST沒有顯著降低（P0.05），陽性對照組與模型對照組比較，大鼠血清ALT、AST沒有顯著降低（P0.05）。見表3。表3 復(fù)方首烏降脂通脈顆粒對大鼠血清ALT和 AST的影響3.4 大鼠血清SOD和MDA變化情況 模型對照組與正常對照組比較，大鼠血清MDA顯著升高（P0.01），SOD顯著降低（P0.01），防治給藥各劑量組與模型對照組比較，大鼠血清MDA均有降低，且差異顯著（P0.01），以防治給藥大劑量組降低幅度最大。防治給藥各劑量組與模型對照組比較，大鼠血清SOD均升高，