化學(xué)藥品檢驗(yàn)中應(yīng)注意的問題

1、化學(xué)藥品檢驗(yàn)中應(yīng)注意的問題化學(xué)藥品檢驗(yàn)中應(yīng)注意的問題安康市食品安康市食品藥品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心檢驗(yàn)檢測(cè)中心朱清麗朱清麗2014.32014.3實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備與操作中應(yīng)注意的問題溶出度實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意的問題高效液相色譜常見故障及解決方案滴定實(shí)驗(yàn)中的注意事項(xiàng)一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備與操作中應(yīng)注意的問題 1、玻璃儀器的清洗及干燥 清洗標(biāo)準(zhǔn)：內(nèi)壁上附著的水膜均勻，既不聚成水滴，也不成股流下。常用的燒杯、三角瓶、量筒等一般玻璃儀器洗滌時(shí)，先用自來水沖去灰塵，再用毛刷蘸取洗衣粉等洗滌劑直接刷洗內(nèi)外表面。最后用自來水沖洗干凈，用純化水淋洗三次。滴定管、比色管、容量瓶和移液管等量器不用毛刷刷洗，根據(jù)油污程度選擇適當(dāng)?shù)南礈靹┣逑?。新?gòu)

2、買的玻璃器皿可先用0.5%的去污劑洗刷，再用自來水洗凈，然后浸泡在1%2%鹽酸溶液中過夜（不可少于不可少于4小時(shí)小時(shí)），再用自來水沖洗，最后用純化水沖洗兩次。 干燥控干干燥法：又叫風(fēng)干，是最簡(jiǎn)單易行的干燥方法烘干干燥法：將儀器放入烘箱中，控制溫度在105左右烘干。（容量瓶等精密刻度玻璃儀器不適用）吹干干燥法：用電吹風(fēng)快速吹干玻璃器皿。烤干干燥法：用酒精燈或紅外燈加熱烤干玻璃器皿。有機(jī)溶劑干燥：對(duì)一些不能加熱的厚壁或有精密刻度的儀器，如試劑瓶、吸濾瓶、容量瓶、滴定管等，可加入少量易揮發(fā)且與水互溶的有機(jī)溶液（如無水乙醇、甲醇等），轉(zhuǎn)動(dòng)儀器使溶劑浸潤(rùn)內(nèi)壁后倒出。如此反復(fù)操作23次，便可借助殘余溶劑的

3、揮發(fā)將水分帶走。 2、取樣要求具有科學(xué)性、真實(shí)性與代表性取樣量：設(shè)樣品總件數(shù)為X 當(dāng)X3時(shí)，每件取樣； 當(dāng)3X300時(shí)，按 隨機(jī)取樣； 當(dāng)X300時(shí)，按 隨機(jī)取樣； 3、濾紙的選擇類型：定量分析濾紙、定性分析濾紙、層析定性分析濾紙定量分析濾紙：用于定量化學(xué)分析中重量法分析試驗(yàn)和相應(yīng)的分析試驗(yàn)。定性分析濾紙：用于定性化學(xué)分析和相應(yīng)的過濾分析。1X12/X 4、影響實(shí)驗(yàn)的各種因素儀器：比對(duì)、測(cè)試條件 操作：嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)要求規(guī)范 對(duì)照品：來源、純度、水分、換算、對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性樣品：貯存條件、均一性滴定液及試劑：重新標(biāo)化、更換試劑并重新配備eg.奧美拉唑腸溶膠囊釋放度問題用不同廠家試劑配制的0.23

4、5mol/L磷酸氫二鈉溶液實(shí)驗(yàn)結(jié)果：上海某一廠 20%國(guó)藥集團(tuán) 90%廣東金砂 90%谷維素片（含量應(yīng)為標(biāo)示量的95.0%105.0% )不同振搖時(shí)間對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響10min 93.4%30min 96.2%100min 97.0%阿司匹林片中游離水楊酸由于阿司匹林非常容易分解，所以時(shí)間控制很重要。必須是臨用新配。二、溶出度實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意的問題 1、溶出度（釋放度）的基本概念、溶出度（釋放度）的基本概念（1）溶出度：指活性藥物成分從片劑、膠囊劑或顆粒劑等制劑在規(guī)定條件下溶出的速率和程度。中國(guó)藥典2010年版（2）溶出度試驗(yàn)：是一種控制藥物制劑質(zhì)量的體外檢測(cè)方法，是以實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ)，以溶解為理論，并

5、用數(shù)學(xué)分析手段處理溶出度試驗(yàn)數(shù)據(jù)，是研究固體制劑以及半固體制劑所含主藥的晶型、粒度、處方組成、輔料品種和性質(zhì)、生產(chǎn)工藝等對(duì)制劑質(zhì)量統(tǒng)一性的方法。（3）溶出度測(cè)定法：是將某種固體制劑的一定量分別置于溶出度儀的轉(zhuǎn)籃（或溶出杯）中，在370.5恒溫下，在規(guī)定的轉(zhuǎn)速、溶出介質(zhì)中依法操作。中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范2010年版 2、影響溶出度的因素 影響溶出度的因素藥物性質(zhì)工 藝試驗(yàn)條件制 劑溶出試驗(yàn)條件的影響溫度的影響溶出介質(zhì)脫氣的影響投樣取樣操作的影響轉(zhuǎn)籃轉(zhuǎn)桿的影響轉(zhuǎn)速的影響藥片位置效應(yīng)的影響配置溶出介質(zhì)的試劑的影響（1）溫度的影響a、外圍水浴高度應(yīng)超過溶出杯里液面的高度，保證杯中溶出介 質(zhì)的溫度；b

6、、當(dāng)溶出介質(zhì)中有機(jī)相比例較大時(shí)，注意預(yù)熱和試驗(yàn)過程中介 質(zhì)揮發(fā)，需要使用密封性良好的溶出儀。從杯架板杯孔往水浴箱里注入蒸餾水，并使水位達(dá)到紅色標(biāo)線 （2）溶出介質(zhì)脫氣的影響 a、溶液中的氣泡在轉(zhuǎn)籃中聚集，會(huì)堵塞轉(zhuǎn)籃孔隙，改變 了篩網(wǎng)的孔隙率，從而影響了藥物的溶出。 b、氣泡與藥物相連降低了與溶劑接觸的表面，或改變了 比重而使崩解和解聚過程改變。 c、氣泡與聚集顆粒結(jié)合，使溶劑部顆粒的濃度及顆粒均 勻度隨意改變。 d、溶入的氣體有時(shí)會(huì)明顯改變有效成分的性質(zhì)。 e、溫度改變時(shí)小氣泡釋放出，對(duì)液體流型產(chǎn)生影響。 f、改變?nèi)艹鼋橘|(zhì)的pH值。 脫氣的方法： a、煮沸法：煮沸15分鐘 b、抽濾法：加熱至約

7、41，趁熱減壓0.45m過濾 c、超聲法：減壓超聲脫氣5分鐘以上 d、真空脫氣：取溶出介質(zhì)在緩慢攪拌加熱至41，并在 真空條件下不斷攪拌5分鐘以上(真空脫氣儀）（3）投樣與取樣操作的影響a、投樣 籃法：分別置于干燥轉(zhuǎn)籃中，同時(shí)投入六個(gè)杯中，自接觸 溶出介質(zhì)時(shí)開始計(jì)時(shí)。 漿法與小杯法：逐片投入溶出杯中，在30秒內(nèi)完成投樣自第一個(gè)樣品接觸溶出介質(zhì)開始啟動(dòng)攪拌并計(jì)時(shí)。b、取樣 在達(dá)到該品種規(guī)定的溶出時(shí)間時(shí)，應(yīng)在儀器開動(dòng)的情況下取樣。 自6杯中完成取樣，時(shí)間一般應(yīng)在1min內(nèi)。 取樣至濾過應(yīng)在30s內(nèi)完成。 c、濾膜吸附影響 過濾時(shí)濾膜與主成分間存在著一個(gè)吸附飽和過程，濾膜吸附一定量后達(dá)到飽和，不再吸

8、附。（濾膜用蒸餾水浸泡） 吸附量2%以下時(shí)可忽略不計(jì)；如果濾膜的吸附較大，可以將濾膜在水中煮沸1h以上，如果吸附仍很大，應(yīng)改用其他濾膜或?yàn)V材。必要時(shí)可將微孔濾膜濾過改為離心操作，取上清液測(cè)定。 （4）轉(zhuǎn)籃與轉(zhuǎn)桿的影響 a、轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)桿是否在溶出杯的正中央。 b、轉(zhuǎn)籃潔凈程度：轉(zhuǎn)籃孔隙如有堵塞可用水或其他溶劑超聲處理、洗凈。 c、漿板厚度：一般規(guī)定漿板的厚度均為4.01.0mm，漿板越厚產(chǎn)生的物理機(jī)械力就越大。 （5）轉(zhuǎn)速的影響 低轉(zhuǎn)速有時(shí)差異明顯 （6）藥片位置效應(yīng)的影響 a、投放過程中要避免與槳桿或槳葉發(fā)生碰撞。 b、樣品在溶出杯中位置應(yīng)處于底部中心位置，如有差異距底部中心距離1cm （7）配制

9、溶出介質(zhì)的試劑和試液 a、無機(jī)鹽或有機(jī)溶劑，一般因不會(huì)廠商不同而產(chǎn)生顯著性差異。 b、水，有時(shí)會(huì)由于來源各異，pH值有所不同，從而導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果的差異。 c、表面活性劑SDS（十二烷基磺酸鈉 ）、吐溫80等會(huì)因生產(chǎn)廠商的不同測(cè)定結(jié)果有差異。 d、緩沖液調(diào)節(jié)pH值至規(guī)定pH值0.05之內(nèi)。三、高效液相色譜常見故障及解決方案數(shù)據(jù)結(jié)果色譜圖壓力 （一）壓力 1、無壓力現(xiàn)現(xiàn) 象象判判 斷斷故故 障障 排排 除除面版燈不亮電源不通檢查電源接頭松脫擰緊接頭泵頭漏液接口太松擰緊泵頭螺絲泵密封墊磨損更換密封墊泵不送溶劑泵頭有氣泡排氣泡，溶劑需脫氣使用的溶劑黏性太高換低黏性溶劑溶劑貯液器中過濾器臟清洗貯液瓶、過濾

10、器排空閥打開關(guān)閉排空閥控制器設(shè)定不正確設(shè)置正確流動(dòng)相不夠補(bǔ)足流動(dòng)相 2、壓力高現(xiàn)現(xiàn) 象象判判 斷斷故故 障障 排排 除除壓力值高泵流速設(shè)定太高設(shè)定正確的流速流動(dòng)相使用不恰當(dāng)使用恰當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相緩沖結(jié)晶鹽沉淀沖洗樣品與流動(dòng)相不互溶稀釋或改變流動(dòng)相柱溫太低升高溫度色譜柱性能下降換柱溶劑貯液器中過濾器臟清洗鏈接管路阻塞沖洗，必要時(shí)更換進(jìn)樣閥阻塞沖洗進(jìn)樣器 3、壓力低現(xiàn)現(xiàn) 象象判判 斷斷故故 障障 排排 除除壓力值低泵流速設(shè)定太低設(shè)定正確的流速色譜柱選擇不恰當(dāng)更換恰當(dāng)?shù)纳V柱柱溫過高降低柱溫系統(tǒng)漏液檢查漏液位置并維修流動(dòng)相使用不當(dāng)改變流動(dòng)相 4、壓力不穩(wěn)定現(xiàn)現(xiàn) 象象判判 斷斷故故 障障 排排 除除壓力變化

11、重現(xiàn)性好采用的方法是梯度所引起的壓力變化是正常的泵內(nèi)有氣泡溶劑脫氣不適當(dāng)排氣泡，溶劑需脫氣壓力波動(dòng)泵密封墊損壞更換密封墊 溶劑混合器故障清洗或更換混合器漏 液連接口太松擰緊接口管路損壞更換 （二）從色譜圖的異常情況推測(cè) 1、峰前延現(xiàn) 象判 斷故 障 排 除峰前延柱性能下降更換色譜柱保護(hù)柱失效換柱芯進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高降低進(jìn)樣體積或降低樣品濃度 2、峰拖尾現(xiàn) 象判 斷故 障 排 除峰拖尾柱性能下降更換色譜柱保護(hù)柱失效換柱芯色譜柱或保護(hù)柱被污染清洗柱或保護(hù)柱，必要時(shí)更換色譜柱選擇不當(dāng)選擇恰當(dāng)?shù)纳V柱流動(dòng)相選擇不當(dāng)選擇恰當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相 3、峰變寬現(xiàn) 象判 斷故 障 排 除峰變寬柱性能下降更換色譜柱

12、保護(hù)柱失效換柱芯色譜柱或保護(hù)柱被污染清洗柱或保護(hù)柱，必要時(shí)更換色譜柱選擇不當(dāng)選擇恰當(dāng)?shù)纳V柱流動(dòng)相選擇不當(dāng)選擇恰當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相流動(dòng)相流速太低調(diào)節(jié)流速緩沖液濃度太低增加濃度系統(tǒng)沒到達(dá)平衡使系統(tǒng)到達(dá)平衡進(jìn)樣器問題檢查進(jìn)樣器環(huán)境溫度變化使用柱溫箱漏夜檢查漏夜的位置并維修出現(xiàn)兩個(gè)或多個(gè)未被完全分離的物質(zhì)的峰選擇其它色譜條件以改善分離效果檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)太大使用較小的時(shí)間常數(shù) 4、峰分叉現(xiàn) 象判斷故障排除峰分叉柱性能下降更換色普柱保護(hù)柱失效換柱芯色譜柱或保護(hù)柱被污染清洗柱或保護(hù)柱，必要時(shí)更換進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高降低進(jìn)樣體積或降低樣品濃度樣品溶劑不溶流動(dòng)相改變?nèi)軇┗虿捎昧鲃?dòng)相溶解樣品 5、無峰現(xiàn) 象判 斷

13、故 障 排 除無峰檢測(cè)器參數(shù)設(shè)置錯(cuò)誤設(shè)置正確的檢測(cè)器參數(shù)樣品降解檢查樣品配制過程，更換樣品自動(dòng)進(jìn)樣器故障檢查進(jìn)樣器無樣品加樣品檢測(cè)器與數(shù)據(jù)處理裝置鏈接故障檢查并正確鏈接 6、負(fù)峰現(xiàn)象判斷故障排除出現(xiàn)所有負(fù)峰連接數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)信號(hào)線接反正確連接記錄儀或檢測(cè)器信號(hào)極性相反改變極性設(shè)置出現(xiàn)一個(gè)或幾個(gè)負(fù)峰離子對(duì)分離體系對(duì)峰的影響在流動(dòng)相中溶解樣品使用的流動(dòng)相吸收高使用流動(dòng)相稀釋樣品自動(dòng)進(jìn)樣器注射進(jìn)空氣清洗自動(dòng)進(jìn)樣器 7、鬼峰現(xiàn) 象判 斷故 障 排 除色譜圖出現(xiàn)鬼峰樣品前處理時(shí)產(chǎn)生降解或混入雜質(zhì)用標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照、檢查樣品處理過程，換新樣品前一次進(jìn)樣的洗脫物增加分析時(shí)間或梯度洗脫、提高流速、如問題仍存在，兩次進(jìn)

14、樣間用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱注射器臟清洗注射器、沖洗進(jìn)樣口流動(dòng)相被污染清洗溶劑貯液瓶、清洗溶劑入口過濾器、使用HPLC級(jí)試劑柱被污染清洗柱或更換柱六通閥污染清洗六通閥檢測(cè)器污染清晰檢測(cè)器管路污染沖洗流動(dòng)相中含有穩(wěn)定劑或穩(wěn)定劑變化使用無防腐溶劑 8、保留時(shí)間變化現(xiàn) 象判 斷故 障 排 除保留時(shí)間不重復(fù)系統(tǒng)不穩(wěn)或未達(dá)到平衡分析之前應(yīng)有足夠的時(shí)間使系統(tǒng)平衡室溫波動(dòng)大使用柱溫箱、將系統(tǒng)置于恒溫、空氣對(duì)流小的環(huán)境柱被污染沖洗柱或更換柱溶劑配比不合適調(diào)節(jié)溶劑配比進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高減小進(jìn)樣體積現(xiàn) 象判 斷故 障 排 除保留時(shí)間不變化流速變化重新設(shè)定流速,檢查泵 是否正常工作系統(tǒng)沒有達(dá)到平衡分析之前應(yīng)有足夠

15、的時(shí)間使系統(tǒng)平衡柱被污染沖洗柱或更換柱流動(dòng)相被污染清洗溶劑貯液瓶、清洗溶劑入口過濾器、使用HPLC級(jí)試劑系統(tǒng)泄漏檢查并進(jìn)行維修流動(dòng)相脫氣不夠充分清洗溶劑貯液瓶、清洗溶劑入口過濾器、使用HPLC級(jí)試劑 室溫變化使用柱溫箱、將系統(tǒng)置于恒溫、空氣對(duì)流小的環(huán)境柱恒溫箱設(shè)置有誤設(shè)置正確的溫度 9、基線漂移現(xiàn) 象判 斷故 障 排 除基線漂移系統(tǒng)不穩(wěn)或沒有達(dá)到平衡分析之前應(yīng)有足夠的時(shí)間使系統(tǒng)平衡室溫不穩(wěn)使用柱溫箱、將系統(tǒng)置于恒溫、空氣對(duì)流小的環(huán)境流動(dòng)相污染或分解清洗溶劑貯液瓶、清洗溶劑入口過濾器、使用HPLC級(jí)試劑流動(dòng)相脫氣不充分脫氣重新平衡系統(tǒng)流動(dòng)相配比不當(dāng)或流速變化更改配比或流速柱被污染沖洗柱或更換柱現(xiàn)

16、 象判 斷故 障 排 除基線漂移固定相流失為說明問題存在，用一段連接管路代替色譜柱，通流動(dòng)相檢測(cè)基線檢測(cè)池被污染或有氣體用甲醇或其他強(qiáng)極性的溶劑沖洗流通池測(cè)定的波長(zhǎng)選擇有誤使用分光光度計(jì)說明背景吸收，如背景值高，說明流動(dòng)相含有紫外吸收化合物導(dǎo)致基線漂移。使用的流動(dòng)相應(yīng)在紫外截止波長(zhǎng)以外，或更換溶劑系統(tǒng)泄漏檢查并進(jìn)行維修樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)用強(qiáng)度合適的溶劑清洗色譜柱 10、無規(guī)則基線噪音現(xiàn) 象判 斷故 障 排 除無規(guī)則基線噪音系統(tǒng)不穩(wěn)或沒有達(dá)到平衡分析之前應(yīng)有足夠的時(shí)間使系統(tǒng)平衡系統(tǒng)泄漏檢查并進(jìn)行維修流動(dòng)相污染或分解清洗溶劑貯液瓶、清洗溶劑入口過濾器、使用HPLC級(jí)試劑柱被污染沖洗柱或更換柱色譜

17、柱填料流失或阻塞更換色譜柱現(xiàn) 象判 斷故 障 排 除無規(guī)則基線噪音流動(dòng)相混合不均或混合器工作不正常維修或更換混合器檢測(cè)池被污染或用甲醇或其他強(qiáng)極性的溶劑沖洗流通池系統(tǒng)內(nèi)有氣泡用強(qiáng)極性的溶劑清洗系統(tǒng)檢測(cè)器內(nèi)有氣泡清洗檢測(cè)器，在檢測(cè)器后面安裝背景壓力調(diào)節(jié)器檢測(cè)器燈能量不足更換燈11、規(guī)則基線噪音現(xiàn) 象判 斷故 障 排 除規(guī)則基線噪音流動(dòng)相、檢測(cè)器或泵內(nèi)有氣泡流動(dòng)相脫氣，沖洗系統(tǒng)除去檢測(cè)器或泵內(nèi)的空氣室溫不穩(wěn)穩(wěn)定環(huán)境溫度。使用柱溫箱、將系統(tǒng)置于恒溫、空氣對(duì)流小的環(huán)境流動(dòng)相回收使用除非特殊需要不使用回收溶劑流動(dòng)相混合不完全使流動(dòng)相混合均勻或使用低黏度的溶劑泵振動(dòng)在系統(tǒng)中假如脈沖阻尼器泵入口管路松或阻塞

18、檢查泵入口管路在同一水平上有其他設(shè)備關(guān)掉儀器，檢查干擾是否來自于外部 （三）從數(shù)據(jù)結(jié)果中分析 1、定量結(jié)果現(xiàn) 象判 斷故 障 排 除精密度降低樣品預(yù)處理時(shí)樣品降解或混入雜質(zhì)用標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照、檢查樣品處理過程，換新樣品保留時(shí)間改變，峰形不正常見“峰形不正?！钡墓收吓懦椒z測(cè)器響應(yīng)故障檢查檢測(cè)器峰積分不正確重新設(shè)置參數(shù)現(xiàn) 象判 斷故 障 排 除精密度降低進(jìn)樣問題（對(duì)外標(biāo)法）隨手動(dòng)進(jìn)樣器的類型不同而異，有下列情況：（1）如使用全部定量環(huán)的手動(dòng)進(jìn)樣器，在進(jìn)樣前需在“取樣”狀態(tài)下清洗三次；（2）如使用部分定量環(huán)的手動(dòng)進(jìn)樣器，進(jìn)樣量需少于定量喚體積的50%（3）如使用注射器的手動(dòng)進(jìn)樣器，需確保進(jìn)樣操作重復(fù)；

19、（4）如使用自動(dòng)進(jìn)樣器需確保正確的進(jìn)樣體積，注射器不含空氣，樣品瓶有足夠的樣品，系統(tǒng)不泄漏（5）如手動(dòng)進(jìn)樣器、自動(dòng)進(jìn)樣器都使用，應(yīng)確保系統(tǒng)的平衡現(xiàn) 象判 斷故 障 排 除準(zhǔn)確度降低峰積分不正確見“精密度降低”的故障排除方法進(jìn)樣問題見“精密度降低”的故障排除方法樣品預(yù)處理時(shí)樣品降解或混入雜質(zhì)用標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照、檢查樣品處理過程，換新樣品樣品蒸發(fā)樣品密封保存在適當(dāng)?shù)臏囟认聵悠非疤幚聿划?dāng)檢查樣品的處理過程內(nèi)標(biāo)物配置不當(dāng)配置新的內(nèi)標(biāo)物 2、定性結(jié)果現(xiàn) 象判 斷故 障 排 除峰不能分辨改變保留時(shí)間見“保留時(shí)間改變”的故障排除數(shù)據(jù)處理裝置的參數(shù)不正確適當(dāng)輸入?yún)?shù)，進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)樣，提高準(zhǔn)確度無 峰改變保留時(shí)間故障排除方法數(shù)據(jù)處理裝置的參數(shù)不正確重新適當(dāng)輸入?yún)?shù)，進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)樣，提高準(zhǔn)確度鬼 峰見“鬼峰”可能的原因見“鬼峰”的故障排除方法四、滴定實(shí)驗(yàn)中的注意事項(xiàng) 1、儀器的檢漏涂凡士林的方法：取下滴定管的活旋塞，用濾紙仔細(xì)擦干旋塞和旋塞套里的水，蘸取少許凡士林，輕涂于旋塞小孔兩側(cè)，平行將旋塞塞入夾套之后，向一個(gè)方向旋動(dòng)旋塞，直至磨口塞變得透明即可。（凡士林不應(yīng)涂太多，否則會(huì)堵塞小孔；旋動(dòng)旋塞時(shí)應(yīng)有一定的向旋塞小頭部分方向擠的力，以免來回移動(dòng)旋