生化實(shí)驗(yàn)基本操作

1、2012年秋季學(xué)期 生化實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)生化實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心2012年秋季學(xué)期生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心玻璃器皿的洗滌玻璃器皿的洗滌溶液的混溶液的混勻勻技技術(shù)術(shù)吸量管、加吸量管、加樣樣器和容量器和容量瓶瓶的使用的使用123基本操作基本操作技術(shù)技術(shù)內(nèi)容內(nèi)容2012年秋季學(xué)期生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心常用玻璃器皿的洗滌方法常用玻璃器皿的洗滌方法u使用過(guò)的玻璃器皿洗滌（常規(guī)洗滌方法）使用過(guò)的玻璃器皿洗滌（常規(guī)洗滌方法） 倒掉內(nèi)容物倒掉內(nèi)容物自來(lái)水沖洗自來(lái)水沖洗溫肥皂水沖洗溫肥皂水沖洗自來(lái)水沖洗自來(lái)水沖洗蒸餾蒸餾水沖洗三次水沖

2、洗三次u新購(gòu)置的玻璃器皿洗滌新購(gòu)置的玻璃器皿洗滌 2%2%鹽酸浸泡數(shù)小時(shí)鹽酸浸泡數(shù)小時(shí)自來(lái)水沖洗自來(lái)水沖洗常規(guī)洗滌常規(guī)洗滌u血清堵塞刻度吸管洗滌血清堵塞刻度吸管洗滌 7.5mol/L7.5mol/L尿素清洗尿素清洗常規(guī)洗滌常規(guī)洗滌u油污燒杯試管洗滌油污燒杯試管洗滌 去油脂去油脂常規(guī)洗滌常規(guī)洗滌 （去油脂方法：將量器倒放于具有強(qiáng)吸水力的幾層厚紙上，（去油脂方法：將量器倒放于具有強(qiáng)吸水力的幾層厚紙上，置置100100烤箱中烘烤半小時(shí)，使油脂溶化由厚紙吸收，再置堿性烤箱中烘烤半小時(shí)，使油脂溶化由厚紙吸收，再置堿性溶液中煮沸趁熱洗刷，即可除去油脂）。溶液中煮沸趁熱洗刷，即可除去油脂）。2012年秋季學(xué)

3、期生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心u 污染玻璃器皿洗滌污染玻璃器皿洗滌 浸泡在殺菌劑（浸泡在殺菌劑（5%5%煤酚皂液）中過(guò)液煤酚皂液）中過(guò)液常規(guī)洗滌常規(guī)洗滌u 染料污染玻璃器皿洗滌染料污染玻璃器皿洗滌 清水清洗清水清洗3%3%鹽酸乙醇溶液清洗鹽酸乙醇溶液清洗常規(guī)洗滌常規(guī)洗滌u 微量元素測(cè)定用玻璃器皿洗滌微量元素測(cè)定用玻璃器皿洗滌 單獨(dú)清洗單獨(dú)清洗稀鹽酸浸泡稀鹽酸浸泡去離子水沖洗去離子水沖洗常規(guī)洗滌常規(guī)洗滌u 量器類玻璃器皿洗滌量器類玻璃器皿洗滌 立即清洗立即清洗晾干晾干鉻酸洗液浸泡鉻酸洗液浸泡4 46h6h自來(lái)水沖洗自來(lái)水沖洗蒸餾水沖洗蒸餾水沖洗u 比色杯洗滌比色杯洗滌 自來(lái)水沖洗自來(lái)水沖洗蒸

4、餾水沖洗蒸餾水沖洗 （洗不凈可用（洗不凈可用3.5mol/L HNO3.5mol/L HNO3 3溶液或（溶液或（0.30.30.60.6）mol/L HClmol/L HCl沖洗，禁沖洗，禁用毛刷或強(qiáng)氧化劑或超聲波洗滌）用毛刷或強(qiáng)氧化劑或超聲波洗滌）u 干燥干燥自然干燥、烘烤干燥自然干燥、烘烤干燥 量器自然涼干，容器烘干備用。量器自然涼干，容器烘干備用。常用玻璃器皿的洗滌方法常用玻璃器皿的洗滌方法2012年秋季學(xué)期生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心洗滌、干燥原則與判斷方法洗滌、干燥原則與判斷方法n 玻璃器皿洗滌原則：玻璃器皿洗滌原則： 對(duì)不同玻璃器皿，采用不同的洗滌方法。根據(jù)器皿對(duì)不同玻璃器皿

5、，采用不同的洗滌方法。根據(jù)器皿污染源的不同選擇合適的洗滌液。污染源的不同選擇合適的洗滌液。n 玻璃器皿干燥原則：玻璃器皿干燥原則： 量器自然涼干，容器烘干備用。量器自然涼干，容器烘干備用。n 器皿清潔的判斷方法：器皿清潔的判斷方法： 洗滌后倒置容器，其內(nèi)壁無(wú)掛珠；干燥后器壁內(nèi)外洗滌后倒置容器，其內(nèi)壁無(wú)掛珠；干燥后器壁內(nèi)外干凈、無(wú)污物痕跡。干凈、無(wú)污物痕跡。2012年秋季學(xué)期生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心溶液的混勻技術(shù)溶液的混勻技術(shù) 甩動(dòng)混勻甩動(dòng)混勻適用于試管內(nèi)液量不多的溶液混勻。適用于試管內(nèi)液量不多的溶液混勻。 彈打混勻彈打混勻適用于錐形離心管、小試管和小塑料離心管等內(nèi)容物的混勻。適用于錐形

6、離心管、小試管和小塑料離心管等內(nèi)容物的混勻。 旋轉(zhuǎn)混勻旋轉(zhuǎn)混勻適用于未盛滿溶液的錐形瓶、試管和小口容器等內(nèi)容物的混勻。適用于未盛滿溶液的錐形瓶、試管和小口容器等內(nèi)容物的混勻。 倒轉(zhuǎn)混勻倒轉(zhuǎn)混勻適用于具塞容器，如容量瓶、具塞量筒和具塞離心管等內(nèi)容物的混勻。適用于具塞容器，如容量瓶、具塞量筒和具塞離心管等內(nèi)容物的混勻。 玻棒攪拌混勻玻棒攪拌混勻適用于燒杯內(nèi)容物的混勻。適用于燒杯內(nèi)容物的混勻。 吸管混勻吸管混勻適用于樣品不同濃度等級(jí)稀釋的混勻。適用于樣品不同濃度等級(jí)稀釋的混勻。 旋渦振蕩器混勻旋渦振蕩器混勻適用于錐形離心管、小試管和小塑料離心管等內(nèi)容物混勻。適用于錐形離心管、小試管和小塑料離心管等內(nèi)

7、容物混勻。 電磁攪拌混勻電磁攪拌混勻適用于酸堿自動(dòng)滴定、適用于酸堿自動(dòng)滴定、pHpH梯度滴定等。梯度滴定等。2012年秋季學(xué)期生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心刻度吸管的使用刻度吸管的使用選管（大小合適）選管（大小合適）總?cè)萘康扔诨蛏源笥谌∫毫靠側(cè)萘康扔诨蛏源笥谌∫毫繄?zhí)管（左球右管）執(zhí)管（左球右管）取液（一下一上）取液（一下一上） 插入液面下插入液面下0.5cm0.5cm，吸至最高刻度上方，吸至最高刻度上方1 12cm2cm調(diào)準(zhǔn)刻度（三點(diǎn)一線）調(diào)準(zhǔn)刻度（三點(diǎn)一線） 溶液彎月面、視線和刻度線在同一水平上溶液彎月面、視線和刻度線在同一水平上放液（貼壁放液）放液（貼壁放液） 需要吹的則吹出，如要求不吹

8、的則讓吸量管尖需要吹的則吹出，如要求不吹的則讓吸量管尖端?？?jī)?nèi)壁約端?？?jī)?nèi)壁約15s15s，同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)吸管，重復(fù)一次。，同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)吸管，重復(fù)一次。放置（放回吸管架）放置（放回吸管架） 禁止平放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)面上！禁止平放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)面上！洗滌（操作結(jié)束后）洗滌（操作結(jié)束后）吸量管操作執(zhí)管姿勢(shì)吸量管操作執(zhí)管姿勢(shì) 放液示意圖放液示意圖2012年秋季學(xué)期生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心可調(diào)式微量加樣器的使用可調(diào)式微量加樣器的使用選擇（大小合適）選擇（大小合適）設(shè)置量程設(shè)置量程( (動(dòng)作輕緩）動(dòng)作輕緩） 先確定調(diào)節(jié)輪的方向，再調(diào)至大于或小于所需值一格，最后先確定調(diào)節(jié)輪的方向，再調(diào)至大于或小于所需值一格，最后調(diào)回所需

9、值。調(diào)回所需值。裝吸嘴（套牢，避免間隙）裝吸嘴（套牢，避免間隙）取液（按至第一停點(diǎn)，緩慢吸液）取液（按至第一停點(diǎn)，緩慢吸液）放液（貼壁放液）放液（貼壁放液）先按至第一停點(diǎn)，再按至第二停點(diǎn)。先按至第一停點(diǎn)，再按至第二停點(diǎn)。卸吸嘴（廢物缸）卸吸嘴（廢物缸）將數(shù)輪調(diào)回最大值將數(shù)輪調(diào)回最大值放置（放在固定支架上，嚴(yán)禁平放或倒置）放置（放在固定支架上，嚴(yán)禁平放或倒置）2012年秋季學(xué)期生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心圖圖A A：把按鈕壓至第一停點(diǎn)，：把按鈕壓至第一停點(diǎn)，圖圖B B：垂直握持加樣器，使吸頭浸入液面下：垂直握持加樣器，使吸頭浸入液面下3-53-5毫米處，然后緩慢毫米處，然后緩慢 平穩(wěn)地松開按

10、鈕，吸入液體。平穩(wěn)地松開按鈕，吸入液體。圖圖C C：將吸頭口貼到容器內(nèi)壁底部并保持傾斜，平穩(wěn)地把按鈕壓到：將吸頭口貼到容器內(nèi)壁底部并保持傾斜，平穩(wěn)地把按鈕壓到 第一停點(diǎn)第一停點(diǎn) 。圖圖D D：壓住按鈕，同時(shí)提起加樣器，使吸頭貼容器壁擦過(guò)。：壓住按鈕，同時(shí)提起加樣器，使吸頭貼容器壁擦過(guò)。圖圖E E：松開按鈕，按吸頭彈射器除去吸頭。：松開按鈕，按吸頭彈射器除去吸頭。2012年秋季學(xué)期生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心容量瓶的使用容量瓶的使用 檢漏檢漏 如不漏水，即可使用如不漏水，即可使用 洗滌洗滌 若有需要，可先用洗液浸洗，再用自來(lái)水、純水洗凈。若有需要，可先用洗液浸洗，再用自來(lái)水、純水洗凈。 轉(zhuǎn)移

11、轉(zhuǎn)移 玻璃棒引流、重復(fù)吹洗玻璃棒和燒杯內(nèi)壁玻璃棒引流、重復(fù)吹洗玻璃棒和燒杯內(nèi)壁3次以上。次以上。 稀釋稀釋 加水至容積的加水至容積的3/4左右，先混勻，再繼續(xù)加水至距離標(biāo)線下左右，先混勻，再繼續(xù)加水至距離標(biāo)線下1cm處，等處，等12min，再用滴管加水至標(biāo)線。，再用滴管加水至標(biāo)線。 搖勻搖勻 蓋上瓶塞，左手按住塞子，其余手指拿住瓶頸標(biāo)線以上部蓋上瓶塞，左手按住塞子，其余手指拿住瓶頸標(biāo)線以上部分，用右手托住瓶底邊緣，將瓶倒轉(zhuǎn)，使氣泡上升頂，振分，用右手托住瓶底邊緣，將瓶倒轉(zhuǎn)，使氣泡上升頂，振蕩、混勻，再將瓶直立過(guò)來(lái)，反復(fù)蕩、混勻，再將瓶直立過(guò)來(lái)，反復(fù)10次左右。次左右。2012年秋季學(xué)期生物化學(xué)

12、與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心容量瓶使用的注意事項(xiàng)容量瓶使用的注意事項(xiàng) 1.1.不要將其磨口玻璃塞隨便取下放在桌面上，以免不要將其磨口玻璃塞隨便取下放在桌面上，以免玷污或再次蓋上時(shí)配錯(cuò)容量瓶，可用橡皮筋或細(xì)繩玷污或再次蓋上時(shí)配錯(cuò)容量瓶，可用橡皮筋或細(xì)繩將瓶塞系在瓶頸上。將瓶塞系在瓶頸上。 2.2.不宜長(zhǎng)期保存試劑溶液，尤其是堿性溶液，會(huì)侵不宜長(zhǎng)期保存試劑溶液，尤其是堿性溶液，會(huì)侵蝕瓶塞使其無(wú)法打開。配好的溶液需作保存時(shí)，應(yīng)蝕瓶塞使其無(wú)法打開。配好的溶液需作保存時(shí)，應(yīng)轉(zhuǎn)移至清潔干燥的試劑瓶中。轉(zhuǎn)移至清潔干燥的試劑瓶中。 3.3.使用完畢應(yīng)立即用水沖洗干凈，如長(zhǎng)期不用，磨使用完畢應(yīng)立即用水沖洗干凈，如長(zhǎng)期不用，磨口處應(yīng)洗凈擦干，并用紙片將磨口隔開。口處應(yīng)洗凈擦干，并用紙片將