氣相色譜基礎(chǔ)(GC-2010)

1、HPLC Business DeptShimadzu Corporation氣相色譜基礎(chǔ)知識(shí)GC-2010HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜起源石油醚碳酸鈣顆粒色素色譜色譜組分HPLC Business DeptShimadzu Corporation 色譜法：利用組分在兩相間分配系數(shù)不同 而進(jìn)行分離的技術(shù) 移動(dòng)相：攜帶樣品流過(guò)整個(gè)系統(tǒng)的流體 固定相：靜止不動(dòng)的一相，色譜柱定義HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜分類HPLC Business DeptShimadzu Corporation氣相色譜流程圖

2、載氣進(jìn)樣口柱溫箱檢測(cè)器數(shù)據(jù)處理流量控制器流量控制器 (AFC)HPLC Business DeptShimadzu Corporation載氣返回HPLC Business DeptShimadzu Corporation載氣控制方式的選擇填充柱分析采用恒流方式毛細(xì)柱分析采用恒壓方式6kg/cm2SPL/SplessINJ 1INJ2毛細(xì)柱毛細(xì)柱 填充柱填充柱1填充柱填充柱2返回HPLC Business DeptShimadzu Corporation進(jìn)樣口進(jìn)樣口類型進(jìn)樣口類型HPLC Business DeptShimadzu Corporation熱進(jìn)樣和冷進(jìn)樣NEXTHPLC Busi

3、ness DeptShimadzu Corporation歧視效應(yīng)的產(chǎn)生 進(jìn)針進(jìn)針 退針退針低沸點(diǎn)組分百分比偏高低沸點(diǎn)組分百分比偏高高沸點(diǎn)組分殘留高沸點(diǎn)組分殘留返回HPLC Business DeptShimadzu Corporation冷進(jìn)樣OCI柱頭進(jìn)樣 只適用于0.53內(nèi)徑的柱子 無(wú)分流流路，不能分析高濃度樣品（污染柱子）， 進(jìn)樣量一般小于2ulHPLC Business DeptShimadzu CorporationSPLESS、OCI及PTV-SPLESS比較N-甲基氨基甲酸酯農(nóng)藥的熱分解現(xiàn)象SplitlessCool-on-ColumnSpless-PTVHPLC Busine

4、ss DeptShimadzu Corporation進(jìn)樣技術(shù)的改進(jìn)溶劑溶劑 空氣空氣 樣品樣品 空氣空氣溶劑沖洗法溶劑沖洗法優(yōu)點(diǎn)：減少熱進(jìn)樣時(shí)的樣品歧視效應(yīng)HPLC Business DeptShimadzu Corporation進(jìn)樣體積上限(液體進(jìn)樣）HPLC Business DeptShimadzu CorporationWBI進(jìn)樣口示意圖進(jìn)樣口示意圖進(jìn)樣口(WBI)用于：寬孔徑毛細(xì)管柱填充柱HPLC Business DeptShimadzu Corporation進(jìn)樣口(SPL)分流分流/ /不分流進(jìn)樣口示意圖不分流進(jìn)樣口示意圖分流比：SPL.RF1:F2F1F2HPLC Bus

5、iness DeptShimadzu Corporation進(jìn)樣口(OCI/PTV)返回 載氣載氣 毛細(xì)柱毛細(xì)柱隔墊吹掃出口隔墊吹掃出口分流出口分流出口1.Column Sleeve/Guide (OCI-mode)2. 玻璃襯管玻璃襯管 （Glass Insert)(PTV-mode)HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱氣相色譜固定相氣相色譜固定相HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱類型柱材：熔融石英、鋁內(nèi)徑：0.2mm-0.53mm長(zhǎng)度：10-100m固定相種類：OV-1，PEG-20M，OV-17

6、等固定相膜厚：0.2-5m柱材：不銹鋼，玻璃內(nèi)徑：2.6-3mm長(zhǎng)度：0.5-6m填料：擔(dān)體和固定液的種類固定液的濃度 1-30%擔(dān)體有硅藻土、玻璃、石英塑料擔(dān)體（TPA）等。HPLC Business DeptShimadzu Corporation毛細(xì)管柱主要類型Porous Layer Open TubularWall Coated Open TubularPacked Capillary多孔層開(kāi)口柱多孔層開(kāi)口柱管壁涂漬開(kāi)口柱管壁涂漬開(kāi)口柱HPLC Business DeptShimadzu Corporation毛細(xì)管柱管材z熔融石英 合成高純石英y外表面涂覆聚酰亞胺y內(nèi)表面經(jīng)化學(xué)處理

7、z不銹鋼y用于高溫分析y最不易斷裂y內(nèi)表面經(jīng)特殊處理HPLC Business DeptShimadzu Corporation固定相z大多數(shù)固定相為聚合物zWCOT 毛細(xì)管柱:y聚甲基硅氧烷（Polysiloxanes, silicones）y聚乙二醇（Polyethylene glycols, PEG）HPLC Business DeptShimadzu Corporation固定相聚甲基硅氧烷CH3CH2CH2CH2CNCH2CH2CF3R =methylcyanopropyltrifluoropropylphenylsiloxanebackboneO Si O Si ORRRRHPLC

8、 Business DeptShimadzu Corporation固定相術(shù)語(yǔ)&結(jié)構(gòu)5% diphenyl 95% dimethyl polysiloxaneSiOSiCH3CH3O5%95%5% phenyl 95% methyl polysiloxaneHPLC Business DeptShimadzu Corporation固定相“ms” or low bleed versionz苯基基團(tuán)鍵合入硅氧烷聚合物主鏈DB-5msRtx-5msBPX-5e.g.Si O SiRRRRSi O SiRRRRHPLC Business DeptShimadzu Corporation固定液

9、流失021868101214164202224100 C270 C300 C300 C for 12 minBleedHPLC Business DeptShimadzu Corporation固定相聚乙二醇HO CH2CH2O Hnz“WAX” or “FFAP” 類固定液ye.g. DB-WAX, DB-FFAPz溫度穩(wěn)定性比聚硅氧烷類差，最高使用溫度低于聚硅氧烷類固定液HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱22/)(54.5hRWtnhh/2Wh/2開(kāi)始tRHPL

10、C Business DeptShimadzu Corporation色譜柱載氣流速與柱效關(guān)系HETPVan Deemter方程HETP=A+B/u+Cuu cm/suoptHminHPLC Business DeptShimadzu Corporation載氣種類對(duì)柱效的影響載氣種類對(duì)柱效的影響HETPHETP曲線曲線 （Rtx-1Rtx-1，30m30m，0.25mmi.d.0.25mmi.d.，0.25m0.25m）線線速度（速度（cm/seccm/sec） ）柱箱 130，樣品 n-C15H320.00.0200.0200.0400.0400.0600.0600.0800.0800.0

11、1000.01000.01200.01200.01400.01400.00 01010202030304040505060607070HETP (m)HETP (m)HeHeN N2 2H H2 2柱箱柱箱 130 130，樣品，樣品 n-C n-C1515H H32 32 ，k =7.6k =7.6HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱影響柱效的因素影響柱效的因素NEXTHPLC Business DeptShimadzu CorporationTemperatureFlow Rate恒壓方式恒壓方式HPLC Business DeptShimad

12、zu Corporation程序升壓方式程序升壓方式TemperaturePressureFlow RateHPLC Business DeptShimadzu Corporation1 : 2,3-Butanediol2 : n-Decane3 : n-Undecane4 : 1-Octanol5 : 2,6-Dimethylphenol6 : Methyl nonanate7 : 2,6-Dimethylaniline8 : Methylcaprate9 : Dicyclohexylamine10: Methyl laurate12345678109(A) Constant pressur

13、e(B) Rising pressure 18Kpa to 143Kpa 5Kpa/min程序升壓方式程序升壓方式返回HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱分離度（分離度（R）：）：柱將兩個(gè)相鄰峰彼此分離的程度。1212)(2WWttRRRHPLC Business DeptShimadzu Corporation分離度R = 1.25R = 1.0R = 0.8HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱選擇HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱各公司常用色譜柱牌號(hào)對(duì)

14、照表各公司常用色譜柱牌號(hào)對(duì)照表固定液 名稱 Restex J&W HP Supelco 100%聚甲基硅氧烷 OV-1 OV-101 Rtx-1 DB1 HP1 SPB-1 95甲基5苯基 SE-54 Rtx-5 DB5 HP5 SPB-5 50甲基50苯基 OV-17 Rtx-50 DB17 HP17 SPB-50 聚乙二醇 PEG20M Stabilwax DBWAX HPWAX SUPELCO-WAX HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱色譜柱的老化色譜柱的老化HPLC Business DeptShimadzu Corporatio

15、n進(jìn)樣口、色譜柱、檢測(cè)器的溫度設(shè)定進(jìn)樣口溫度考慮樣品中各組分的沸點(diǎn)，設(shè)定溫度使樣品瞬間汽化。色譜柱溫度考慮樣品中各組分的沸點(diǎn)，及希望的分析周期，寬沸程樣品應(yīng)使用程序升溫。檢測(cè)器溫度防止檢測(cè)器污染，一般比色譜柱溫度高20-30。DET.TINJ.TCOL.T+20DET.TINJ.TCOL.T+20HPLC Business DeptShimadzu Corporation返回恒溫&程序升溫分析比較恒溫分析程序升溫分析 沸程窄時(shí)采用恒溫分析 恒溫分析時(shí)，保留時(shí)間和 碳數(shù)呈指數(shù)關(guān)系 沸程寬時(shí)采用升溫分析 升溫分析時(shí)，保留時(shí)間和 碳數(shù)呈正比關(guān)系 基線易漂移C8 C9C10C11C8C9C10

16、 C11HPLC Business DeptShimadzu Corporation檢測(cè)器氣相色譜常用檢測(cè)器氣相色譜常用檢測(cè)器HPLC Business DeptShimadzu Corporation檢測(cè)器FID（氫火焰離子化檢測(cè)器）（氫火焰離子化檢測(cè)器）HPLC Business DeptShimadzu Corporation檢測(cè)器FID操作流量設(shè)定操作流量設(shè)定氣體種類 流量范圍，mL/min 推薦流量，mL/min 載氣（填充柱） 3060 載氣（毛細(xì)管柱） 15 氫氣 4060 47 空氣 400600 400 柱流量尾吹氣 3060 30 HPLC Business DeptShimadzu Corporation檢測(cè)器TCD（熱導(dǎo)檢測(cè)器熱導(dǎo)檢測(cè)器）HPLC Business DeptShimadzu Corporation檢測(cè)器TCD操作參數(shù)設(shè)定操作參數(shù)設(shè)定HPLC Business DeptShimadzu Corporation檢測(cè)器影響影響TCD檢測(cè)靈敏度的因素檢測(cè)靈敏度的因素HPLC Business DeptShimadzu Corporation檢測(cè)器ECD檢測(cè)器檢測(cè)器HPLC