氣相色譜基礎(GC-2010)

1、HPLC Business DeptShimadzu Corporation氣相色譜基礎知識GC-2010HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜起源石油醚碳酸鈣顆粒色素色譜色譜組分HPLC Business DeptShimadzu Corporation 色譜法：利用組分在兩相間分配系數(shù)不同 而進行分離的技術(shù) 移動相：攜帶樣品流過整個系統(tǒng)的流體 固定相：靜止不動的一相，色譜柱定義HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜分類HPLC Business DeptShimadzu Corporation氣相色譜流程圖

2、載氣進樣口柱溫箱檢測器數(shù)據(jù)處理流量控制器流量控制器 (AFC)HPLC Business DeptShimadzu Corporation載氣返回HPLC Business DeptShimadzu Corporation載氣控制方式的選擇填充柱分析采用恒流方式毛細柱分析采用恒壓方式6kg/cm2SPL/SplessINJ 1INJ2毛細柱毛細柱 填充柱填充柱1填充柱填充柱2返回HPLC Business DeptShimadzu Corporation進樣口進樣口類型進樣口類型HPLC Business DeptShimadzu Corporation熱進樣和冷進樣NEXTHPLC Busi

3、ness DeptShimadzu Corporation歧視效應的產(chǎn)生 進針進針 退針退針低沸點組分百分比偏高低沸點組分百分比偏高高沸點組分殘留高沸點組分殘留返回HPLC Business DeptShimadzu Corporation冷進樣OCI柱頭進樣 只適用于0.53內(nèi)徑的柱子 無分流流路，不能分析高濃度樣品（污染柱子）， 進樣量一般小于2ulHPLC Business DeptShimadzu CorporationSPLESS、OCI及PTV-SPLESS比較N-甲基氨基甲酸酯農(nóng)藥的熱分解現(xiàn)象SplitlessCool-on-ColumnSpless-PTVHPLC Busine

4、ss DeptShimadzu Corporation進樣技術(shù)的改進溶劑溶劑 空氣空氣 樣品樣品 空氣空氣溶劑沖洗法溶劑沖洗法優(yōu)點：減少熱進樣時的樣品歧視效應HPLC Business DeptShimadzu Corporation進樣體積上限(液體進樣）HPLC Business DeptShimadzu CorporationWBI進樣口示意圖進樣口示意圖進樣口(WBI)用于：寬孔徑毛細管柱填充柱HPLC Business DeptShimadzu Corporation進樣口(SPL)分流分流/ /不分流進樣口示意圖不分流進樣口示意圖分流比：SPL.RF1:F2F1F2HPLC Bus

5、iness DeptShimadzu Corporation進樣口(OCI/PTV)返回 載氣載氣 毛細柱毛細柱隔墊吹掃出口隔墊吹掃出口分流出口分流出口1.Column Sleeve/Guide (OCI-mode)2. 玻璃襯管玻璃襯管 （Glass Insert)(PTV-mode)HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱氣相色譜固定相氣相色譜固定相HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱類型柱材：熔融石英、鋁內(nèi)徑：0.2mm-0.53mm長度：10-100m固定相種類：OV-1，PEG-20M，OV-17

6、等固定相膜厚：0.2-5m柱材：不銹鋼，玻璃內(nèi)徑：2.6-3mm長度：0.5-6m填料：擔體和固定液的種類固定液的濃度 1-30%擔體有硅藻土、玻璃、石英塑料擔體（TPA）等。HPLC Business DeptShimadzu Corporation毛細管柱主要類型Porous Layer Open TubularWall Coated Open TubularPacked Capillary多孔層開口柱多孔層開口柱管壁涂漬開口柱管壁涂漬開口柱HPLC Business DeptShimadzu Corporation毛細管柱管材z熔融石英 合成高純石英y外表面涂覆聚酰亞胺y內(nèi)表面經(jīng)化學處理

7、z不銹鋼y用于高溫分析y最不易斷裂y內(nèi)表面經(jīng)特殊處理HPLC Business DeptShimadzu Corporation固定相z大多數(shù)固定相為聚合物zWCOT 毛細管柱:y聚甲基硅氧烷（Polysiloxanes, silicones）y聚乙二醇（Polyethylene glycols, PEG）HPLC Business DeptShimadzu Corporation固定相聚甲基硅氧烷CH3CH2CH2CH2CNCH2CH2CF3R =methylcyanopropyltrifluoropropylphenylsiloxanebackboneO Si O Si ORRRRHPLC

8、 Business DeptShimadzu Corporation固定相術(shù)語&結(jié)構(gòu)5% diphenyl 95% dimethyl polysiloxaneSiOSiCH3CH3O5%95%5% phenyl 95% methyl polysiloxaneHPLC Business DeptShimadzu Corporation固定相“ms” or low bleed versionz苯基基團鍵合入硅氧烷聚合物主鏈DB-5msRtx-5msBPX-5e.g.Si O SiRRRRSi O SiRRRRHPLC Business DeptShimadzu Corporation固定液

9、流失021868101214164202224100 C270 C300 C300 C for 12 minBleedHPLC Business DeptShimadzu Corporation固定相聚乙二醇HO CH2CH2O Hnz“WAX” or “FFAP” 類固定液ye.g. DB-WAX, DB-FFAPz溫度穩(wěn)定性比聚硅氧烷類差，最高使用溫度低于聚硅氧烷類固定液HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱22/)(54.5hRWtnhh/2Wh/2開始tRHPL

10、C Business DeptShimadzu Corporation色譜柱載氣流速與柱效關(guān)系HETPVan Deemter方程HETP=A+B/u+Cuu cm/suoptHminHPLC Business DeptShimadzu Corporation載氣種類對柱效的影響載氣種類對柱效的影響HETPHETP曲線曲線 （Rtx-1Rtx-1，30m30m，0.25mmi.d.0.25mmi.d.，0.25m0.25m）線線速度（速度（cm/seccm/sec） ）柱箱 130，樣品 n-C15H320.00.0200.0200.0400.0400.0600.0600.0800.0800.0

11、1000.01000.01200.01200.01400.01400.00 01010202030304040505060607070HETP (m)HETP (m)HeHeN N2 2H H2 2柱箱柱箱 130 130，樣品，樣品 n-C n-C1515H H32 32 ，k =7.6k =7.6HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱影響柱效的因素影響柱效的因素NEXTHPLC Business DeptShimadzu CorporationTemperatureFlow Rate恒壓方式恒壓方式HPLC Business DeptShimad

12、zu Corporation程序升壓方式程序升壓方式TemperaturePressureFlow RateHPLC Business DeptShimadzu Corporation1 : 2,3-Butanediol2 : n-Decane3 : n-Undecane4 : 1-Octanol5 : 2,6-Dimethylphenol6 : Methyl nonanate7 : 2,6-Dimethylaniline8 : Methylcaprate9 : Dicyclohexylamine10: Methyl laurate12345678109(A) Constant pressur

13、e(B) Rising pressure 18Kpa to 143Kpa 5Kpa/min程序升壓方式程序升壓方式返回HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱分離度（分離度（R）：）：柱將兩個相鄰峰彼此分離的程度。1212)(2WWttRRRHPLC Business DeptShimadzu Corporation分離度R = 1.25R = 1.0R = 0.8HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱選擇HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱各公司常用色譜柱牌號對

14、照表各公司常用色譜柱牌號對照表固定液 名稱 Restex J&W HP Supelco 100%聚甲基硅氧烷 OV-1 OV-101 Rtx-1 DB1 HP1 SPB-1 95甲基5苯基 SE-54 Rtx-5 DB5 HP5 SPB-5 50甲基50苯基 OV-17 Rtx-50 DB17 HP17 SPB-50 聚乙二醇 PEG20M Stabilwax DBWAX HPWAX SUPELCO-WAX HPLC Business DeptShimadzu Corporation色譜柱色譜柱的老化色譜柱的老化HPLC Business DeptShimadzu Corporatio

15、n進樣口、色譜柱、檢測器的溫度設定進樣口溫度考慮樣品中各組分的沸點，設定溫度使樣品瞬間汽化。色譜柱溫度考慮樣品中各組分的沸點，及希望的分析周期，寬沸程樣品應使用程序升溫。檢測器溫度防止檢測器污染，一般比色譜柱溫度高20-30。DET.TINJ.TCOL.T+20DET.TINJ.TCOL.T+20HPLC Business DeptShimadzu Corporation返回恒溫&程序升溫分析比較恒溫分析程序升溫分析 沸程窄時采用恒溫分析 恒溫分析時，保留時間和 碳數(shù)呈指數(shù)關(guān)系 沸程寬時采用升溫分析 升溫分析時，保留時間和 碳數(shù)呈正比關(guān)系 基線易漂移C8 C9C10C11C8C9C10

16、 C11HPLC Business DeptShimadzu Corporation檢測器氣相色譜常用檢測器氣相色譜常用檢測器HPLC Business DeptShimadzu Corporation檢測器FID（氫火焰離子化檢測器）（氫火焰離子化檢測器）HPLC Business DeptShimadzu Corporation檢測器FID操作流量設定操作流量設定氣體種類 流量范圍，mL/min 推薦流量，mL/min 載氣（填充柱） 3060 載氣（毛細管柱） 15 氫氣 4060 47 空氣 400600 400 柱流量尾吹氣 3060 30 HPLC Business DeptShimadzu Corporation檢測器TCD（熱導檢測器熱導檢測器）HPLC Business DeptShimadzu Corporation檢測器TCD操作參數(shù)設定操作參數(shù)設定HPLC Business DeptShimadzu Corporation檢測器影響影響TCD檢測靈敏度的因素檢測靈敏度的因素HPLC Business DeptShimadzu Corporation檢測器ECD檢測器檢測器HPLC