移植免疫及免疫學(xué)檢測(cè)

1、第第二十八二十八章章 移植免疫及其免疫檢測(cè)移植免疫及其免疫檢測(cè)移植（移植（transplantationtransplantation）: :將健康細(xì)胞、組織或器將健康細(xì)胞、組織或器官?gòu)钠湓课灰浦驳阶泽w或異體的一定部位、用以官?gòu)钠湓课灰浦驳阶泽w或異體的一定部位、用以替代或補(bǔ)償機(jī)體所喪失的結(jié)構(gòu)和（或）功能的現(xiàn)代替代或補(bǔ)償機(jī)體所喪失的結(jié)構(gòu)和（或）功能的現(xiàn)代醫(yī)療手段。醫(yī)療手段。 移植物（移植物（graftgraft） 供供 體（體（donordonor） 受受 體（體（recipientrecipient）或宿主（）或宿主（hosthost）概 述 自體移植自體移植根據(jù)移植物來(lái)源根據(jù)移植物來(lái)源

2、同系移植同系移植 同種異體移植同種異體移植 異種移植異種移植 原位移植原位移植根據(jù)移植部位根據(jù)移植部位 異位移植異位移植 器官移植器官移植移植物種類(lèi)移植物種類(lèi) 支架組織移植支架組織移植 細(xì)胞移植細(xì)胞移植移植的類(lèi)型移植的類(lèi)型組織器官移植種類(lèi)和命名 移植名稱(chēng)移植名稱(chēng) 供者、受者關(guān)系供者、受者關(guān)系 舉例舉例 自體移植自體移植 同一個(gè)體同一個(gè)體 自體斷肢再植，自體皮片移植自體斷肢再植，自體皮片移植 同系或同基因移植同系或同基因移植 同系或同基因同系或同基因 人的單卵雙生子間的器官移植人的單卵雙生子間的器官移植 的個(gè)體間的個(gè)體間 同品系小鼠的皮片移植同品系小鼠的皮片移植 同種同種異基因異基因移植移植 同

3、種不同基因同種不同基因 人與人之間的腎移植人與人之間的腎移植 的個(gè)體間的個(gè)體間 不同品系小鼠間的皮片移植不同品系小鼠間的皮片移植 異種移植異種移植 異種動(dòng)物間異種動(dòng)物間 狗的器官移植給猩猩狗的器官移植給猩猩 豬的器官移植給狗豬的器官移植給狗 第一節(jié) 引起排斥反應(yīng)的靶抗原1 1 主要組織相容性抗原主要組織相容性抗原人人 HLA HLA 鼠鼠 H-2 H-2遺傳特征：遺傳特征： 單倍型遺傳單倍型遺傳 高度多態(tài)性高度多態(tài)性2 2 次要組織相容性抗原次要組織相容性抗原 主要組織相容性抗原（MHC分子） 父父 母母 HLAHLA是人體多態(tài)性最豐富的是人體多態(tài)性最豐富的基因系統(tǒng)。據(jù)基因系統(tǒng)。據(jù)199919

4、99年的統(tǒng)計(jì)，年的統(tǒng)計(jì)，HLAHLA復(fù)合物等位基因總數(shù)已達(dá)復(fù)合物等位基因總數(shù)已達(dá)到到10311031個(gè)，其中個(gè)，其中HLA-BHLA-B等位基等位基因有因有301301個(gè)個(gè) A9Cw3B7A2Cw2B13A1Cw1B5A3Cw4B8HLAHLA的遺傳特征的遺傳特征第二節(jié) 排斥反應(yīng)的種類(lèi)及發(fā)生機(jī)制移植排斥反應(yīng)（transplantation rejection）針對(duì)移植抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答，從而導(dǎo)致移植物功能喪失針對(duì)移植抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答，從而導(dǎo)致移植物功能喪失或受者機(jī)體損害的過(guò)程?；蚴苷邫C(jī)體損害的過(guò)程。 分類(lèi)：分類(lèi)： 超急性排斥反應(yīng)超急性排斥反應(yīng) 急性排斥反應(yīng)急性排斥反應(yīng) 慢性排斥反應(yīng)慢性排斥反應(yīng)機(jī)

5、制：機(jī)制： 受者體內(nèi)存有抗供者移植物的受者體內(nèi)存有抗供者移植物的預(yù)存抗體預(yù)存抗體，與抗原結(jié)合，激，與抗原結(jié)合，激活補(bǔ)體和凝血系統(tǒng)活補(bǔ)體和凝血系統(tǒng), ,導(dǎo)致血管內(nèi)凝血。導(dǎo)致血管內(nèi)凝血。 預(yù)存抗體來(lái)源：預(yù)存抗體來(lái)源： 1 1、供受者之間、供受者之間ABO ABO 血型不合；血型不合； 2 2、受者反復(fù)多次輸血、妊娠或既往作過(guò)移植。、受者反復(fù)多次輸血、妊娠或既往作過(guò)移植。處理：重新移植處理：重新移植預(yù)防：預(yù)防：ABOABO血型配型、細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)血型配型、細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)1.1.超急性排斥反應(yīng)超急性排斥反應(yīng) 2. 2. 急性排斥反應(yīng)急性排斥反應(yīng) 體液性排斥體液性排斥 抗體激活補(bǔ)體，并有抗體激活補(bǔ)體，并有CD4

6、CD4+ +T T 細(xì)胞參與，導(dǎo)致急性血管炎細(xì)胞參與，導(dǎo)致急性血管炎 細(xì)胞性排斥細(xì)胞性排斥 CD8CD8+ +CTLCTL細(xì)胞的細(xì)胞毒作用、細(xì)胞的細(xì)胞毒作用、CD4CD4+ +T T和巨噬細(xì)胞的作用，導(dǎo)致和巨噬細(xì)胞的作用，導(dǎo)致急性間質(zhì)炎。急性間質(zhì)炎。 處理處理 使用免疫抑制劑使用免疫抑制劑在急性排斥反應(yīng)中的兩條抗原提呈途徑：在急性排斥反應(yīng)中的兩條抗原提呈途徑： 直接途徑（直接途徑（direct pathdirect path）: :殘留于殘留于供者移植物內(nèi)的抗原提呈供者移植物內(nèi)的抗原提呈細(xì)胞（過(guò)客細(xì)胞）細(xì)胞（過(guò)客細(xì)胞）對(duì)受者機(jī)體的免疫系統(tǒng)提供最初的抗原刺激。對(duì)受者機(jī)體的免疫系統(tǒng)提供最初的抗原刺

7、激。這種抗原性刺激，來(lái)自移植物中樹(shù)突狀細(xì)胞和單核細(xì)胞等表面富這種抗原性刺激，來(lái)自移植物中樹(shù)突狀細(xì)胞和單核細(xì)胞等表面富含的含的HLA-HLA-、-類(lèi)分子類(lèi)分子 間接途徑間接途徑 （indirect pathindirect path）: :通過(guò)通過(guò)受者體內(nèi)的抗原提呈細(xì)胞受者體內(nèi)的抗原提呈細(xì)胞對(duì)具有同種異基因?qū)哂型N異基因HLA-HLA-、-類(lèi)分子的移植物實(shí)質(zhì)細(xì)胞的識(shí)別。類(lèi)分子的移植物實(shí)質(zhì)細(xì)胞的識(shí)別。無(wú)論是供者還是受者，其抗原提呈細(xì)胞提供的無(wú)論是供者還是受者，其抗原提呈細(xì)胞提供的IL-1IL-1、IL-6IL-6等刺激等刺激信號(hào)，有助于觸發(fā)淋巴細(xì)胞的活化信號(hào)，有助于觸發(fā)淋巴細(xì)胞的活化 同種移植排

8、斥反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制同種移植排斥反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制 慢性排斥反應(yīng)的介導(dǎo)因素：慢性排斥反應(yīng)的介導(dǎo)因素：T T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等介導(dǎo)的遲發(fā)型超敏反應(yīng)等免疫損傷。細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等介導(dǎo)的遲發(fā)型超敏反應(yīng)等免疫損傷。B B細(xì)胞產(chǎn)生的抗體活化補(bǔ)體或通過(guò)細(xì)胞產(chǎn)生的抗體活化補(bǔ)體或通過(guò)ADCCADCC破壞血管內(nèi)皮細(xì)胞。破壞血管內(nèi)皮細(xì)胞。急性排斥反應(yīng)反復(fù)發(fā)作所導(dǎo)致的移植物組織退行性變，此與細(xì)胞急性排斥反應(yīng)反復(fù)發(fā)作所導(dǎo)致的移植物組織退行性變，此與細(xì)胞 和體液免疫均有關(guān)系。和體液免疫均有關(guān)系。非免疫相關(guān)因素，諸如局部缺血、再灌注損傷、微生物感染等。非免疫相關(guān)因素，諸如局部缺血、再灌注損傷、微生物感染等。受者患有高血壓或糖尿病也可

9、促使慢性排斥反應(yīng)的發(fā)生受者患有高血壓或糖尿病也可促使慢性排斥反應(yīng)的發(fā)生臨床特征：臨床特征：對(duì)免疫抑制療法不敏感對(duì)免疫抑制療法不敏感無(wú)特異性治療方法，無(wú)特異性治療方法，最終需要重新進(jìn)行器官移植最終需要重新進(jìn)行器官移植 3. 3. 慢性排斥反應(yīng)慢性排斥反應(yīng)定義：定義：在骨髓移植時(shí)，供者骨髓中的免疫細(xì)胞啟動(dòng)以受在骨髓移植時(shí)，供者骨髓中的免疫細(xì)胞啟動(dòng)以受者細(xì)胞為靶抗原的免疫應(yīng)答反應(yīng)，引起攻擊受者的移植物者細(xì)胞為靶抗原的免疫應(yīng)答反應(yīng)，引起攻擊受者的移植物抗宿主反應(yīng)?？顾拗鞣磻?yīng)。GVHDGVHD也可見(jiàn)于脾、胸腺和小腸移植。也可見(jiàn)于脾、胸腺和小腸移植。 發(fā)生機(jī)制：發(fā)生機(jī)制：T T細(xì)胞起主要作用細(xì)胞起主要作用

10、 IL-2IL-2、IL-6IL-6、TNF-TNF-、IFN-IFN-等等 ICAMICAM、VCAMVCAM、CD44CD44、ELAM-1ELAM-1等等4. 4. 移植物抗宿主反應(yīng)移植物抗宿主反應(yīng)第三節(jié) HLA分型方法血清學(xué)分型法應(yīng)用一系列已知抗應(yīng)用一系列已知抗HLAHLA的特異性標(biāo)準(zhǔn)分型血清與待測(cè)淋巴細(xì)胞混合，借的特異性標(biāo)準(zhǔn)分型血清與待測(cè)淋巴細(xì)胞混合，借助補(bǔ)體的生物學(xué)作用介導(dǎo)細(xì)胞裂解的細(xì)胞毒試驗(yàn)。助補(bǔ)體的生物學(xué)作用介導(dǎo)細(xì)胞裂解的細(xì)胞毒試驗(yàn)。 操作簡(jiǎn)便易行、操作簡(jiǎn)便易行、 節(jié)約試劑、結(jié)果可靠、重復(fù)性好節(jié)約試劑、結(jié)果可靠、重復(fù)性好 無(wú)需特殊設(shè)備無(wú)需特殊設(shè)備 耗時(shí)長(zhǎng)耗時(shí)長(zhǎng) 不同批號(hào)抗血清結(jié)

11、果常有不同不同批號(hào)抗血清結(jié)果常有不同用于用于HLAHLA分型的微量細(xì)胞毒試驗(yàn)分型的微量細(xì)胞毒試驗(yàn) 血清學(xué)分型法血清學(xué)分型法死（著染）細(xì)胞（死（著染）細(xì)胞（% %）記分記分結(jié)果判斷結(jié)果判斷0 010101 1陰性陰性111120202 2可疑陰性可疑陰性212150504 4弱陽(yáng)性弱陽(yáng)性515180806 6陽(yáng)性陽(yáng)性80808 8強(qiáng)陽(yáng)性強(qiáng)陽(yáng)性0 0未試驗(yàn)或不能讀數(shù)未試驗(yàn)或不能讀數(shù)細(xì)胞學(xué)分型法 以混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)以混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)（mixed lymphocyte culture,MLCmixed lymphocyte culture,MLC）或稱(chēng)混合或稱(chēng)混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)淋巴細(xì)胞反應(yīng)（mixed

12、lymphocyte reaction,MLRmixed lymphocyte reaction,MLR）為基本技術(shù)的為基本技術(shù)的HLAHLA分型法。能用本法測(cè)定的抗原稱(chēng)為分型法。能用本法測(cè)定的抗原稱(chēng)為L(zhǎng)DLD抗原抗原（lymphocyte defined lymphocyte defined antigenantigen）, ,包括包括HLA-DHLA-D、-DP-DP。1.1.單向單向MLCMLC原理：將已知原理：將已知HLAHLA型別的分型細(xì)胞用絲裂霉素型別的分型細(xì)胞用絲裂霉素C C或或X X線(xiàn)照射預(yù)處理，使其失去線(xiàn)照射預(yù)處理，使其失去增殖能力僅作為刺激細(xì)胞；而以具有增殖能力的受檢者外周

13、血單個(gè)核細(xì)胞為增殖能力僅作為刺激細(xì)胞；而以具有增殖能力的受檢者外周血單個(gè)核細(xì)胞為反應(yīng)細(xì)胞。兩者混合培養(yǎng)時(shí)，反應(yīng)細(xì)胞可對(duì)刺激細(xì)胞發(fā)生應(yīng)答而增殖，用反應(yīng)細(xì)胞。兩者混合培養(yǎng)時(shí)，反應(yīng)細(xì)胞可對(duì)刺激細(xì)胞發(fā)生應(yīng)答而增殖，用3H-TdR3H-TdR摻入法測(cè)定細(xì)胞增殖強(qiáng)度，從而判斷受檢細(xì)胞的摻入法測(cè)定細(xì)胞增殖強(qiáng)度，從而判斷受檢細(xì)胞的HLAHLA型別。型別。 根據(jù)選用的刺激細(xì)胞類(lèi)型分為：根據(jù)選用的刺激細(xì)胞類(lèi)型分為：1 1陰性分型法陰性分型法 2 2陽(yáng)性分型法陽(yáng)性分型法 遺傳型不同的兩個(gè)個(gè)體淋巴細(xì)胞在體外混合培養(yǎng)時(shí)，由于遺傳型不同的兩個(gè)個(gè)體淋巴細(xì)胞在體外混合培養(yǎng)時(shí)，由于兩者兩者HLAHLA不同，能相互刺激導(dǎo)致對(duì)方淋

14、巴細(xì)胞增殖，故稱(chēng)雙向不同，能相互刺激導(dǎo)致對(duì)方淋巴細(xì)胞增殖，故稱(chēng)雙向MLCMLC。在此試驗(yàn)中，各自的淋巴細(xì)胞既是刺激細(xì)胞，又是反應(yīng)。在此試驗(yàn)中，各自的淋巴細(xì)胞既是刺激細(xì)胞，又是反應(yīng)細(xì)胞，反應(yīng)后形態(tài)上呈現(xiàn)的細(xì)胞轉(zhuǎn)化和分裂現(xiàn)象，可通過(guò)形細(xì)胞，反應(yīng)后形態(tài)上呈現(xiàn)的細(xì)胞轉(zhuǎn)化和分裂現(xiàn)象，可通過(guò)形態(tài)法計(jì)數(shù)轉(zhuǎn)化細(xì)胞態(tài)法計(jì)數(shù)轉(zhuǎn)化細(xì)胞 。2.2.雙向雙向MLCMLC分子生物學(xué)分型法限制性片斷長(zhǎng)度多態(tài)性限制性片斷長(zhǎng)度多態(tài)性（restriction fragment length polymorphism, restriction fragment length polymorphism, RFLPRFLP）分析：分析

15、：最早建立的研究最早建立的研究HLAHLA多態(tài)性的多態(tài)性的DNADNA分型技術(shù)分型技術(shù) PCR-RFLPPCR-RFLP分型法：分型法：對(duì)對(duì)DNADNA片段進(jìn)行體外擴(kuò)增，然后再用限制性?xún)?nèi)切酶進(jìn)行酶片段進(jìn)行體外擴(kuò)增，然后再用限制性?xún)?nèi)切酶進(jìn)行酶切分析，可使限制性長(zhǎng)度分析的敏感度大大增加切分析，可使限制性長(zhǎng)度分析的敏感度大大增加1. RFLP1. RFLP與與PCR-RFLPPCR-RFLP分型法分型法 序列特異性寡核苷酸序列特異性寡核苷酸- -聚合酶鏈反應(yīng)聚合酶鏈反應(yīng)（PCR-sequence specific oligonucleotidePCR-sequence specific oligon

16、ucleotide, PCR-SSO, PCR-SSO）是以是以PCRPCR為基礎(chǔ)，將凝膠上擴(kuò)增的為基礎(chǔ)，將凝膠上擴(kuò)增的HLAHLA基因基因DNADNA轉(zhuǎn)移至硝酸纖維膜或尼龍膜，進(jìn)轉(zhuǎn)移至硝酸纖維膜或尼龍膜，進(jìn)而用放射性核素或酶、地高辛等非放射性物質(zhì)標(biāo)記的寡核苷酸探針與之進(jìn)行而用放射性核素或酶、地高辛等非放射性物質(zhì)標(biāo)記的寡核苷酸探針與之進(jìn)行雜交，從而對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物作出雜交，從而對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物作出HLAHLA型別判斷。型別判斷。 分類(lèi)：分類(lèi)：斑點(diǎn)或印漬法：斑點(diǎn)或印漬法：用擴(kuò)增的待測(cè)用擴(kuò)增的待測(cè)DNADNA印漬或點(diǎn)至固相支持物，再與探針行雜交，印漬或點(diǎn)至固相支持物，再與探針行雜交，利于大量標(biāo)本分型利于大量標(biāo)

17、本分型反向斑點(diǎn)或印漬法：反向斑點(diǎn)或印漬法：將已知將已知DNADNA印漬或點(diǎn)至固相支持物，然后與擴(kuò)增的待測(cè)印漬或點(diǎn)至固相支持物，然后與擴(kuò)增的待測(cè)DNADNA（預(yù)先標(biāo)記）雜交，用于少量標(biāo)本分型（預(yù)先標(biāo)記）雜交，用于少量標(biāo)本分型 PCR-SSOPCR-SSO是是類(lèi)類(lèi)HLAHLA分型應(yīng)用最廣泛的方法，分型應(yīng)用最廣泛的方法， 能夠鑒定所有已知序列的能夠鑒定所有已知序列的HLA-DRHLA-DR、DQDQ、DPDP等位基因等位基因 2. PCR-SSO2. PCR-SSO分型法分型法 基因芯片基因芯片(gene chip)(gene chip)是近年發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新技術(shù)是近年發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新技術(shù), ,將其

18、與將其與PCR-SSOPCR-SSO結(jié)結(jié)合應(yīng)用于合應(yīng)用于HLAHLA分型，可使分型趨于規(guī)模化和自動(dòng)化，尤其在分型，可使分型趨于規(guī)模化和自動(dòng)化，尤其在HLAHLA多態(tài)性多態(tài)性和疾病遺傳背景分析等方面更具優(yōu)勢(shì)。和疾病遺傳背景分析等方面更具優(yōu)勢(shì)。HLAHLA的基因芯片分型法，實(shí)際上的基因芯片分型法，實(shí)際上是是PCR-SSOPCR-SSO反向斑點(diǎn)或印漬法的微型化。目前，基因芯片在反向斑點(diǎn)或印漬法的微型化。目前，基因芯片在HLAHLA分型領(lǐng)分型領(lǐng)域的應(yīng)用尚屬起步階段。域的應(yīng)用尚屬起步階段。2. PCR-SSO2. PCR-SSO分型法分型法 原理：原理：應(yīng)用設(shè)計(jì)的一套應(yīng)用設(shè)計(jì)的一套HLAHLA等位基因的

19、等位基因的序列特異性引物（序列特異性引物（sequence specific sequence specific primer,SSPprimer,SSP）, ,對(duì)待測(cè)對(duì)待測(cè)DNADNA進(jìn)行進(jìn)行PCRPCR擴(kuò)增，從而獲得擴(kuò)增，從而獲得HLAHLA型別特異性的擴(kuò)增產(chǎn)物型別特異性的擴(kuò)增產(chǎn)物HLAHLA基因擴(kuò)增的特異性包括：基因擴(kuò)增的特異性包括：座位特異性（座位特異性（locus-specificlocus-specific），如，如HLA-AHLA-A、B B、-DRB1-DRB1等；等；組特異性（組特異性（group-specificgroup-specific），如，如DRB1-01DRB1-

20、01、DRB1-02DRB1-02等；等；等位基因特異性（等位基因特異性（allele-specificallele-specific），如，如DRB1DRB1* *04010401、DRB1DRB1* *04020402等。等。3. PCR-SSP3. PCR-SSP分型法分型法 單鏈構(gòu)象特異性聚合酶鏈反應(yīng)單鏈構(gòu)象特異性聚合酶鏈反應(yīng)（PCR-single strand conformation PCR-single strand conformation polymorphism,PCRpolymorphism,PCR-SSCP-SSCP）是以對(duì)待測(cè)基因是以對(duì)待測(cè)基因PCRPCR擴(kuò)增為基礎(chǔ)，

21、對(duì)擴(kuò)增的單鏈擴(kuò)增為基礎(chǔ)，對(duì)擴(kuò)增的單鏈DNADNA（ssDNAssDNA）的）的HLAHLA分型方法。分型方法。原理：原理：對(duì)對(duì)ssDNAssDNA進(jìn)行無(wú)變性劑的聚丙烯酰凝膠電泳時(shí)，因其序列的差異可形成進(jìn)行無(wú)變性劑的聚丙烯酰凝膠電泳時(shí)，因其序列的差異可形成不同的空間構(gòu)象而導(dǎo)致電泳遷移率的差異，如此可分辨出單一堿基的差異和不同的空間構(gòu)象而導(dǎo)致電泳遷移率的差異，如此可分辨出單一堿基的差異和檢測(cè)出檢測(cè)出DNADNA多態(tài)性或點(diǎn)突變，有助于新的多態(tài)性或點(diǎn)突變，有助于新的HLAHLA等位基因或突變體的發(fā)現(xiàn)。等位基因或突變體的發(fā)現(xiàn)。特點(diǎn)：特點(diǎn)：PCR-SSCPPCR-SSCP作為作為PCR-SSOPCR-SS

22、O的補(bǔ)充，在區(qū)分純合子和雜合子基因方面有其獨(dú)的補(bǔ)充，在區(qū)分純合子和雜合子基因方面有其獨(dú)到之處，有利于排除到之處，有利于排除SSOSSO雜交的假性。雜交的假性。4. PCR-SSCP4. PCR-SSCP分型法分型法 基于序列的基于序列的HLAHLA分型法分型法（sequence-based HLA typing,SBTsequence-based HLA typing,SBT），通過(guò)對(duì)擴(kuò)增后，通過(guò)對(duì)擴(kuò)增后的的HLAHLA基因片段通過(guò)核酸序列測(cè)定來(lái)判斷基因片段通過(guò)核酸序列測(cè)定來(lái)判斷HLAHLA型別。型別?；具^(guò)程：基本過(guò)程：分離待測(cè)細(xì)胞的分離待測(cè)細(xì)胞的DNADNA，應(yīng)用座位、組或等位基因特異性引

23、物進(jìn)行，應(yīng)用座位、組或等位基因特異性引物進(jìn)行PCRPCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物的純化和測(cè)序，測(cè)出的基因序列與擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物的純化和測(cè)序，測(cè)出的基因序列與HLAHLA基因庫(kù)的基因庫(kù)的DNADNA已知序已知序列比較，判斷待測(cè)的列比較，判斷待測(cè)的HLAHLA型別。型別。 5. SBT5. SBT分型法分型法 第四節(jié) 常見(jiàn)的組織或器官移植腎臟移植腎臟移植，創(chuàng)始于腎臟移植，創(chuàng)始于19501950年，是臨床開(kāi)展最早、應(yīng)用最多和效果最佳的一種器官移植。年，是臨床開(kāi)展最早、應(yīng)用最多和效果最佳的一種器官移植。 1.1.組織配型在腎臟移植中的應(yīng)用組織配型在腎臟移植中的應(yīng)用 組織配型組織配型是腎臟移植前選擇供者的重要手段是

24、腎臟移植前選擇供者的重要手段 ABOABO血型配型、血型配型、 HLAHLA配型和配型和 交叉配型交叉配型腎源選擇的原則腎源選擇的原則 以以ABOABO血型完全相同者為好，至少能夠相容血型完全相同者為好，至少能夠相容 選擇最佳選擇最佳HLAHLA配型的供者器官配型的供者器官2.2.腎移植受者的療效檢測(cè)腎移植受者的療效檢測(cè) 療效監(jiān)測(cè)：療效監(jiān)測(cè)：受者免疫狀態(tài)檢測(cè)受者免疫狀態(tài)檢測(cè)臨床觀(guān)測(cè)項(xiàng)目臨床觀(guān)測(cè)項(xiàng)目: : T T細(xì)胞總數(shù)、細(xì)胞總數(shù)、CD4/CD8CD4/CD8比值和比值和IL-2IL-2及其受體的檢測(cè)，判斷排斥反及其受體的檢測(cè)，判斷排斥反 應(yīng)的發(fā)生和評(píng)估免疫抑制劑治療效果應(yīng)的發(fā)生和評(píng)估免疫抑制劑

25、治療效果 腎組織活檢，預(yù)測(cè)排斥反應(yīng)的發(fā)生腎組織活檢，預(yù)測(cè)排斥反應(yīng)的發(fā)生 CsACsA血藥濃度檢測(cè)，指導(dǎo)合理用藥，減少腎毒性血藥濃度檢測(cè)，指導(dǎo)合理用藥，減少腎毒性 肝臟移植特點(diǎn)：特點(diǎn)： HLAHLA是否匹配與肝臟移植效果無(wú)顯著差異是否匹配與肝臟移植效果無(wú)顯著差異機(jī)制：機(jī)制：肝臟移植時(shí)，因肝臟移植時(shí)，因HLAHLA不配僅發(fā)生較弱的排斥反應(yīng)，而免疫抑制劑不配僅發(fā)生較弱的排斥反應(yīng)，而免疫抑制劑 的應(yīng)用有效控制了排斥反應(yīng)的發(fā)生的應(yīng)用有效控制了排斥反應(yīng)的發(fā)生肝臟移植時(shí)仍應(yīng)盡可能進(jìn)行肝臟移植時(shí)仍應(yīng)盡可能進(jìn)行HLAHLA配型配型1.1.組織配型在肝臟移植中的應(yīng)用組織配型在肝臟移植中的應(yīng)用 組織病理學(xué)特點(diǎn)：組織

26、病理學(xué)特點(diǎn)：肝移植術(shù)后第肝移植術(shù)后第2 2天，匯管區(qū)出現(xiàn)明顯的白細(xì)胞浸潤(rùn)，天，匯管區(qū)出現(xiàn)明顯的白細(xì)胞浸潤(rùn)，匯管區(qū)和肝竇的白細(xì)胞浸潤(rùn)第匯管區(qū)和肝竇的白細(xì)胞浸潤(rùn)第7 7天達(dá)高峰，涉及到天達(dá)高峰，涉及到T T細(xì)胞、細(xì)胞、B B細(xì)胞、巨噬細(xì)細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、嗜酸性和中性粒細(xì)胞。在浸潤(rùn)的胞、嗜酸性和中性粒細(xì)胞。在浸潤(rùn)的T T細(xì)胞中細(xì)胞中CD8+CD8+細(xì)胞高于細(xì)胞高于CD4+CD4+細(xì)胞，也細(xì)胞，也見(jiàn)有見(jiàn)有IL-2RIL-2R和和CD25+CD25+的活化的活化T T細(xì)胞。細(xì)胞。排斥反應(yīng)發(fā)生幾率：排斥反應(yīng)發(fā)生幾率：約約2/32/3的肝移植患者出現(xiàn)過(guò)排斥反應(yīng)的病理學(xué)改變，的肝移植患者出現(xiàn)過(guò)排斥反應(yīng)的病理學(xué)改

27、變，也有也有8 8的病例術(shù)后發(fā)生急、慢性排斥反應(yīng)，占肝移植致死原因的的病例術(shù)后發(fā)生急、慢性排斥反應(yīng)，占肝移植致死原因的10%10%。2.2.肝移植受者的療效檢測(cè)肝移植受者的療效檢測(cè) 心臟移植與心肺聯(lián)合移植ABOABO血型匹配：血型匹配：避免急性排斥反應(yīng)的首要條件避免急性排斥反應(yīng)的首要條件HLA IHLA I、類(lèi)分子匹配：類(lèi)分子匹配：移植器官長(zhǎng)期存活的重要因素。移植器官長(zhǎng)期存活的重要因素。 淋巴細(xì)胞毒交叉配合和群體反應(yīng)性抗體檢測(cè)淋巴細(xì)胞毒交叉配合和群體反應(yīng)性抗體檢測(cè)1.1.組織配型在心臟和心肺聯(lián)合移植中的應(yīng)用組織配型在心臟和心肺聯(lián)合移植中的應(yīng)用 免疫監(jiān)測(cè)指標(biāo)：免疫監(jiān)測(cè)指標(biāo)： 外周血淋巴細(xì)胞總數(shù)外

28、周血淋巴細(xì)胞總數(shù) T T、B B細(xì)胞的轉(zhuǎn)化能力細(xì)胞的轉(zhuǎn)化能力 T T細(xì)胞亞類(lèi)百分?jǐn)?shù)及比值細(xì)胞亞類(lèi)百分?jǐn)?shù)及比值 CTLCTL細(xì)胞毒作用細(xì)胞毒作用 細(xì)胞因子及其受體表達(dá)或轉(zhuǎn)錄水平細(xì)胞因子及其受體表達(dá)或轉(zhuǎn)錄水平 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 NKNK細(xì)胞數(shù)及其介導(dǎo)的自然殺傷或細(xì)胞數(shù)及其介導(dǎo)的自然殺傷或ADCCADCC效應(yīng)效應(yīng) 粘附分子及其配體在各類(lèi)細(xì)胞表達(dá)情況粘附分子及其配體在各類(lèi)細(xì)胞表達(dá)情況2.2.心臟及心肺聯(lián)合移植受者的療效檢測(cè)心臟及心肺聯(lián)合移植受者的療效檢測(cè) 骨髓與其他來(lái)源的干細(xì)胞移植特點(diǎn)：特點(diǎn)：可同時(shí)發(fā)生可同時(shí)發(fā)生HVGRHVGR和和GVHRGVHR 分類(lèi)：分類(lèi)： 自體骨髓移植、自體骨髓移植、

29、同基因骨髓移植同基因骨髓移植 同種異基因骨髓移植同種異基因骨髓移植（多見(jiàn)）（多見(jiàn)） 1.1.骨髓移植骨髓移植 病例較少病例較少成功率高成功率高 骨髓移植實(shí)際上是造血干細(xì)胞移植，骨髓移植實(shí)際上是造血干細(xì)胞移植，因此，骨髓中造血干細(xì)胞的質(zhì)和量對(duì)移植的成敗致關(guān)重要。因此，骨髓中造血干細(xì)胞的質(zhì)和量對(duì)移植的成敗致關(guān)重要。 2.2.外周血和臍血干細(xì)胞移植外周血和臍血干細(xì)胞移植 方法：方法：使用藥物動(dòng)員劑促使造血干細(xì)胞從骨髓釋放到外周血，從中使用藥物動(dòng)員劑促使造血干細(xì)胞從骨髓釋放到外周血，從中獲取足量的干細(xì)胞用于移植，可獲得與骨髓移植同樣的治療目的獲取足量的干細(xì)胞用于移植，可獲得與骨髓移植同樣的治療目的特點(diǎn)

30、：特點(diǎn)：與骨髓移植相比，具有采集方便、供者不需麻醉、移植后造與骨髓移植相比，具有采集方便、供者不需麻醉、移植后造血恢復(fù)快，血恢復(fù)快，GVHRGVHR發(fā)生率和嚴(yán)重程度不高等優(yōu)點(diǎn)。發(fā)生率和嚴(yán)重程度不高等優(yōu)點(diǎn)。 移植前檢測(cè)：移植前檢測(cè)：HLAHLA和和ABOABO血型配型、血常規(guī)與骨髓檢驗(yàn)、性染色體測(cè)血型配型、血常規(guī)與骨髓檢驗(yàn)、性染色體測(cè)定、造血干細(xì)胞鑒定和定、造血干細(xì)胞鑒定和GVHRGVHR征象追蹤等征象追蹤等腫瘤干細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)，提示人們?cè)谶M(jìn)行干細(xì)胞應(yīng)用時(shí)應(yīng)該注意生物安全性。腫瘤干細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)，提示人們?cè)谶M(jìn)行干細(xì)胞應(yīng)用時(shí)應(yīng)該注意生物安全性。l適應(yīng)于同種異型或異基因骨髓移植的疾病包括：適應(yīng)于同種異型或異

31、基因骨髓移植的疾病包括：再生障礙性貧血、慢性髓樣白再生障礙性貧血、慢性髓樣白血病等血液系統(tǒng)疾病，以及脊髓發(fā)育不良、嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷病、血病等血液系統(tǒng)疾病，以及脊髓發(fā)育不良、嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷病、WiskottWiskott- -AldrichAldrich綜合征、慢性肉芽腫、綜合征、慢性肉芽腫、X-X-性聯(lián)高性聯(lián)高IgMIgM綜合征（綜合征（CD40LCD40L缺陷）、骨骼石化癥缺陷）、骨骼石化癥等免疫缺陷性疾病。等免疫缺陷性疾病。l乳腺、卵巢、睪丸以及肺部等實(shí)體瘤乳腺、卵巢、睪丸以及肺部等實(shí)體瘤，不宜行骨髓移植，多應(yīng)用自體末稍血干，不宜行骨髓移植，多應(yīng)用自體末稍血干細(xì)胞移植治療，而自體末稍血干

32、細(xì)胞移植對(duì)再生障礙性貧血、慢性髓樣白血病和細(xì)胞移植治療，而自體末稍血干細(xì)胞移植對(duì)再生障礙性貧血、慢性髓樣白血病和免疫缺陷病無(wú)效。免疫缺陷病無(wú)效。l急性髓樣白血病、急性淋巴母細(xì)胞性白血病、多發(fā)性骨髓瘤、非何杰金淋巴瘤急性髓樣白血病、急性淋巴母細(xì)胞性白血病、多發(fā)性骨髓瘤、非何杰金淋巴瘤和何杰金病等和何杰金病等，則既是同種異型或異基因骨髓移植的適應(yīng)癥，也可用自體末稍血，則既是同種異型或異基因骨髓移植的適應(yīng)癥，也可用自體末稍血干細(xì)胞移植進(jìn)行治療。干細(xì)胞移植進(jìn)行治療。 3.3.適于骨髓或末稍血干細(xì)胞移植的常見(jiàn)疾病適于骨髓或末稍血干細(xì)胞移植的常見(jiàn)疾病 第五節(jié) 排斥反應(yīng)的預(yù)防與治療組織配型HLAHLA是引起

33、同種異型移植排斥反應(yīng)的主要抗原是引起同種異型移植排斥反應(yīng)的主要抗原供者與受者的供者與受者的HLAHLA等位基因匹配程度決定了移植排斥反應(yīng)的強(qiáng)弱程度等位基因匹配程度決定了移植排斥反應(yīng)的強(qiáng)弱程度通過(guò)通過(guò)HLAHLA組織配型組織配型(tissue typing)(tissue typing)，選擇合適的供者，減輕排斥反應(yīng)，選擇合適的供者，減輕排斥反應(yīng) 1.HLA1.HLA配型配型移植物存活與移植物存活與HLAHLA配型的關(guān)系是：配型的關(guān)系是：供、受者供、受者HLA-AHLA-A和和HLA-BHLA-B相配的位點(diǎn)數(shù)越多，移植物存活機(jī)率越高；相配的位點(diǎn)數(shù)越多，移植物存活機(jī)率越高；供、受者供、受者HLA-

34、DRHLA-DR位點(diǎn)相配更重要，因?yàn)槲稽c(diǎn)相配更重要，因?yàn)镠LA-DRHLA-DR和和DQDQ基因有很強(qiáng)的連鎖不平基因有很強(qiáng)的連鎖不平 衡，衡，DRDR位點(diǎn)相配的個(gè)體，通常位點(diǎn)相配的個(gè)體，通常DQDQ位點(diǎn)也相配；位點(diǎn)也相配；不同地區(qū)不同地區(qū)HLAHLA匹配程度與移植結(jié)果的關(guān)系有著不同的預(yù)測(cè)價(jià)值，在歐洲匹配程度與移植結(jié)果的關(guān)系有著不同的預(yù)測(cè)價(jià)值，在歐洲HLAHLA 匹配的程度對(duì)移植結(jié)果的預(yù)測(cè)性比美國(guó)高，因?yàn)闅W洲人群的近交程度較高匹配的程度對(duì)移植結(jié)果的預(yù)測(cè)性比美國(guó)高，因?yàn)闅W洲人群的近交程度較高 ，導(dǎo)致，導(dǎo)致HLAHLA位點(diǎn)連鎖不平衡性削弱。位點(diǎn)連鎖不平衡性削弱。 交叉配型采用補(bǔ)體依賴(lài)的細(xì)胞毒試驗(yàn)交叉

35、配型采用補(bǔ)體依賴(lài)的細(xì)胞毒試驗(yàn) 陽(yáng)性對(duì)照陽(yáng)性對(duì)照: :陽(yáng)性對(duì)照血清可用淋巴細(xì)胞免疫家兔獲得陽(yáng)性對(duì)照血清可用淋巴細(xì)胞免疫家兔獲得 陰性對(duì)照陰性對(duì)照: :陰性血清可采用無(wú)受血史的陰性血清可采用無(wú)受血史的ABAB血型男性血清血型男性血清根據(jù)反應(yīng)時(shí)參與的細(xì)胞成分分類(lèi)：根據(jù)反應(yīng)時(shí)參與的細(xì)胞成分分類(lèi)： 淋巴細(xì)胞交叉配型淋巴細(xì)胞交叉配型 T T細(xì)胞淋巴細(xì)胞毒性交叉配型細(xì)胞淋巴細(xì)胞毒性交叉配型 B B細(xì)胞淋巴細(xì)胞毒性交叉配型細(xì)胞淋巴細(xì)胞毒性交叉配型 流式細(xì)胞法交叉配型流式細(xì)胞法交叉配型 自身交叉配型自身交叉配型 結(jié)果判度結(jié)果判度: : 交叉配型陽(yáng)性交叉配型陽(yáng)性: :表明受者預(yù)存有抗供體的抗體表明受者預(yù)存有抗供體

36、的抗體臨床意義臨床意義: : 交叉配型陽(yáng)性交叉配型陽(yáng)性: :即使組織配型好，也不宜進(jìn)行移植，易發(fā)生超急性排斥反應(yīng)。即使組織配型好，也不宜進(jìn)行移植，易發(fā)生超急性排斥反應(yīng)。 在做受體選擇時(shí)，組織配型差，但交叉配型為陰性，仍可實(shí)施移植。在做受體選擇時(shí)，組織配型差，但交叉配型為陰性，仍可實(shí)施移植。 交叉配型常用于腎臟移植交叉配型常用于腎臟移植2.HLA2.HLA交叉配型與預(yù)存抗體的檢測(cè)交叉配型與預(yù)存抗體的檢測(cè)方法方法方法類(lèi)型與參與成分方法類(lèi)型與參與成分需時(shí)需時(shí)應(yīng)用應(yīng)用組織配型組織配型補(bǔ)體依賴(lài)的淋巴毒試驗(yàn)補(bǔ)體依賴(lài)的淋巴毒試驗(yàn)血清學(xué)法（血清學(xué)法（HLAHLA抗血清、補(bǔ)體、待測(cè)細(xì)胞）抗血清、補(bǔ)體、待測(cè)細(xì)胞）

37、3h3hHLAHLA、類(lèi)抗原鑒定類(lèi)抗原鑒定交叉配型交叉配型PBLPBL交叉配型交叉配型血清學(xué)法血清學(xué)法（受著血清、供者細(xì)胞、補(bǔ)體、有（受著血清、供者細(xì)胞、補(bǔ)體、有/ /無(wú)無(wú)AHGAHG）3h3h檢測(cè)受者血清中已存在的抗供者檢測(cè)受者血清中已存在的抗供者抗體抗體TBTB交叉配型交叉配型血清學(xué)法（純化的供者血清學(xué)法（純化的供者T/BT/B細(xì)胞、受者血清、細(xì)胞、受者血清、AHGAHG）3-6h3-6hT T細(xì)胞：細(xì)胞： 檢測(cè)抗檢測(cè)抗HLA IHLA I類(lèi)抗體；類(lèi)抗體；B B細(xì)胞：檢測(cè)細(xì)胞：檢測(cè)HLA IHLA I、IIII類(lèi)抗體類(lèi)抗體MLCMLC試驗(yàn)試驗(yàn)細(xì)胞學(xué)法（供、受者細(xì)胞培養(yǎng)）細(xì)胞學(xué)法（供、受者細(xì)

38、胞培養(yǎng)）6d6dHLA IIHLA II類(lèi)抗原相容性類(lèi)抗原相容性CMLCML試驗(yàn)試驗(yàn)細(xì)胞學(xué)法（受者細(xì)胞、供者刺激細(xì)胞作為靶細(xì)胞）細(xì)胞學(xué)法（受者細(xì)胞、供者刺激細(xì)胞作為靶細(xì)胞）4h4h抗供者抗供者CTLCTL檢測(cè)檢測(cè)FCCFCC血清學(xué)法（受者血清、供者細(xì)胞、熒光抗人血清學(xué)法（受者血清、供者細(xì)胞、熒光抗人IgIg）3-4h3-4h檢測(cè)非常弱的和無(wú)細(xì)胞毒性的抗檢測(cè)非常弱的和無(wú)細(xì)胞毒性的抗供者抗體供者抗體自身交叉配型自身交叉配型血清學(xué)法（受者血清學(xué)法（受者PBLPBL、T T和和B B細(xì)胞以及血清）和細(xì)胞以及血清）和FCCFCC3-4h3-4h檢測(cè)非特異的淋巴細(xì)胞抗體（自檢測(cè)非特異的淋巴細(xì)胞抗體（自身抗

39、體）身抗體）HLAHLA抗體篩選抗體篩選HLA IHLA I類(lèi)抗體的篩選類(lèi)抗體的篩選血清學(xué)法（受者血清、相應(yīng)的血清學(xué)法（受者血清、相應(yīng)的HLAHLA類(lèi)型類(lèi)型T T細(xì)胞或細(xì)胞或PBLPBL）3h3h6060細(xì)胞細(xì)胞HLA IHLA I類(lèi)抗體檢測(cè)，抗體特異性鑒定類(lèi)抗體檢測(cè)，抗體特異性鑒定HLA IIHLA II類(lèi)抗體的篩選類(lèi)抗體的篩選血清學(xué)法血清學(xué)法（吸附過(guò)的受者血清、用作（吸附過(guò)的受者血清、用作HLA-DR/DQHLA-DR/DQ分型的分型的B B細(xì)細(xì)胞）胞）4h4h6060細(xì)胞數(shù)加吸附時(shí)細(xì)胞數(shù)加吸附時(shí)間間HLA IIHLA II類(lèi)抗體檢測(cè)，抗體特異性鑒定類(lèi)抗體檢測(cè)，抗體特異性鑒定CMLCML：

40、細(xì)胞介導(dǎo)的淋巴細(xì)胞溶解試驗(yàn)：細(xì)胞介導(dǎo)的淋巴細(xì)胞溶解試驗(yàn)群體反應(yīng)性抗體（群體反應(yīng)性抗體（panel reactive antibody,PRApanel reactive antibody,PRA）：指用指用40-6040-60人含人含已知已知HLAHLA的的T T細(xì)胞或細(xì)胞或T T、B B混合細(xì)胞，檢測(cè)待移植受者血清所得到的抗體陽(yáng)混合細(xì)胞，檢測(cè)待移植受者血清所得到的抗體陽(yáng)性百分?jǐn)?shù)。性百分?jǐn)?shù)。檢測(cè)意義檢測(cè)意義: : 用于判斷器官移植時(shí)受體的敏感程度用于判斷器官移植時(shí)受體的敏感程度 高高PRAPRA血清血清: :可針對(duì)多個(gè)可針對(duì)多個(gè)HLAHLA抗原發(fā)生反應(yīng)，受體對(duì)所接受的移植器抗原發(fā)生反應(yīng)，受體對(duì)

41、所接受的移植器 官或組織威脅大官或組織威脅大注意注意: :應(yīng)考慮在不同應(yīng)考慮在不同HLAHLA上可能出現(xiàn)的上可能出現(xiàn)的共同表位或稱(chēng)共同表位或稱(chēng)公共抗原（公共抗原（public public antigensantigens）與受體血清發(fā)生的交叉反應(yīng)與受體血清發(fā)生的交叉反應(yīng)3.3.群體反應(yīng)性抗體的檢測(cè)群體反應(yīng)性抗體的檢測(cè)1.1.移植物的預(yù)處理移植物的預(yù)處理不同的組織器官的移植，其移植物的處理不盡相同不同的組織器官的移植，其移植物的處理不盡相同首先是從移植術(shù)的角度對(duì)離體組織器官進(jìn)行外科修整，然后根據(jù)不同器首先是從移植術(shù)的角度對(duì)離體組織器官進(jìn)行外科修整，然后根據(jù)不同器官的要求采取相應(yīng)的預(yù)處理官的要求

42、采取相應(yīng)的預(yù)處理移植物與受體的預(yù)處理組織配型或交叉配型組織配型或交叉配型移植前應(yīng)用一定劑量的免疫抑制劑，其用量視組織配型的結(jié)果而定移植前應(yīng)用一定劑量的免疫抑制劑，其用量視組織配型的結(jié)果而定術(shù)前輸血術(shù)前輸血, ,視患者的需要進(jìn)行視患者的需要進(jìn)行 受體的準(zhǔn)備受體的準(zhǔn)備 人工調(diào)節(jié)受者機(jī)體的免疫狀態(tài)人工調(diào)節(jié)受者機(jī)體的免疫狀態(tài)是控制移植術(shù)后排斥反應(yīng)發(fā)生的主要途徑是控制移植術(shù)后排斥反應(yīng)發(fā)生的主要途徑采取的措施有：采取的措施有： 使用免疫抑制劑使用免疫抑制劑:以此控制受者的免疫應(yīng)答，降低對(duì)移植物的排斥能力以此控制受者的免疫應(yīng)答，降低對(duì)移植物的排斥能力 誘導(dǎo)免疫耐受誘導(dǎo)免疫耐受:誘導(dǎo)受者對(duì)移植抗原的特異性免疫

43、耐受誘導(dǎo)受者對(duì)移植抗原的特異性免疫耐受免疫抑制措施免疫抑制措施參與移植排斥反應(yīng)的免疫細(xì)胞以參與移植排斥反應(yīng)的免疫細(xì)胞以T T細(xì)胞為主，細(xì)胞為主，T T細(xì)胞功能抑制分類(lèi)：細(xì)胞功能抑制分類(lèi)： 1.1.免疫抑制劑的應(yīng)用免疫抑制劑的應(yīng)用1 1、化學(xué)性免疫抑制劑、化學(xué)性免疫抑制劑 3 3、生物性免疫抑制劑、生物性免疫抑制劑 2 2、某些中草藥、某些中草藥 環(huán)孢菌素環(huán)孢菌素A(cyclosporineA(cyclosporine A A，CsACsA) )糖皮質(zhì)激素，糖皮質(zhì)激素，硫唑嘌呤，硫唑嘌呤，環(huán)磷酰胺，環(huán)磷酰胺，F(xiàn)K506FK506又名又名他克莫司他克莫司(tacrolimus(tacrolimus

44、) )，霉酚酸酯霉酚酸酯(mycophendate mofetil(mycophendate mofetil, MMF, MMF) )抗淋巴細(xì)胞球蛋白抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)(ALG)或或抗胸腺細(xì)胞球蛋白抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)(ATG), , 細(xì)胞性單克隆抗體，細(xì)胞性單克隆抗體，某些融合蛋白某些融合蛋白, , 反義寡核苷酸反義寡核苷酸(antisence oligonucleotide(antisence oligonucleotide) ), , 常見(jiàn)免疫抑制劑作用位點(diǎn)常見(jiàn)免疫抑制劑作用位點(diǎn) 新的研究思路：新的研究思路：誘導(dǎo)同種抗原的特異性免疫耐受誘導(dǎo)同種抗原的特異性免疫耐受: :通過(guò)

45、將同種抗原置入子宮或注射給新生兒而誘導(dǎo)通過(guò)將同種抗原置入子宮或注射給新生兒而誘導(dǎo)誘導(dǎo)免疫耐受誘導(dǎo)免疫耐受: :應(yīng)用大劑量天然可溶性或人工合成的供者應(yīng)用大劑量天然可溶性或人工合成的供者HLAHLA分子，封閉同種抗原特分子，封閉同種抗原特異性異性T T細(xì)胞的細(xì)胞的TCRTCR，以誘導(dǎo)受者特異性，以誘導(dǎo)受者特異性T T細(xì)胞凋亡，產(chǎn)生免疫耐受細(xì)胞凋亡，產(chǎn)生免疫耐受誘導(dǎo)誘導(dǎo)T T細(xì)胞無(wú)能：細(xì)胞無(wú)能：使用可溶性使用可溶性CTLA-4CTLA-4以阻斷移植物細(xì)胞的以阻斷移植物細(xì)胞的B7B7與受者與受者T T細(xì)胞表面細(xì)胞表面CD28CD28的的結(jié)合，干擾共刺激信號(hào)的形成。結(jié)合，干擾共刺激信號(hào)的形成。CTLA-

46、4CTLA-4與與IgFcIgFc段的融合蛋白也具有相似的作用段的融合蛋白也具有相似的作用阻礙阻礙T T細(xì)胞活化：細(xì)胞活化：阻斷阻斷CD40-CD40LCD40-CD40L、CD2-LFA3CD2-LFA3等膜分子的相互作用等膜分子的相互作用誘導(dǎo)特異性耐受：誘導(dǎo)特異性耐受：借助基因工程技術(shù)，制備基因修飾的免疫細(xì)胞借助基因工程技術(shù)，制備基因修飾的免疫細(xì)胞T T細(xì)胞疫苗（細(xì)胞疫苗（T cell vaccine,TCVT cell vaccine,TCV）：誘導(dǎo)抗獨(dú)特型抗體的產(chǎn)生，破壞針對(duì)移植物的誘導(dǎo)抗獨(dú)特型抗體的產(chǎn)生，破壞針對(duì)移植物的特異性特異性T T細(xì)胞，誘導(dǎo)免疫耐受。細(xì)胞，誘導(dǎo)免疫耐受。 2.

47、2.對(duì)移植抗原特異性免疫耐受誘導(dǎo)對(duì)移植抗原特異性免疫耐受誘導(dǎo)第六節(jié) 排斥反應(yīng)的免疫監(jiān)測(cè)體液免疫與細(xì)胞免疫水平檢測(cè)的臨床意義 特異性抗體水平的檢測(cè)特異性抗體水平的檢測(cè) 相關(guān)免疫指標(biāo)：相關(guān)免疫指標(biāo)： ABOABO等血型和等血型和HLAHLA抗體抗體 抗供者組織細(xì)胞抗體抗供者組織細(xì)胞抗體 血管內(nèi)皮細(xì)胞抗體血管內(nèi)皮細(xì)胞抗體 冷凝集素冷凝集素 測(cè)定方法測(cè)定方法: : 交叉配型、補(bǔ)體依賴(lài)的細(xì)胞毒性試驗(yàn)交叉配型、補(bǔ)體依賴(lài)的細(xì)胞毒性試驗(yàn) 血清血清PRAPRA水平水平: :判斷器官移植時(shí)受體對(duì)移植物的敏感程度，判斷器官移植時(shí)受體對(duì)移植物的敏感程度， 基于細(xì)胞毒性試驗(yàn)的基于細(xì)胞毒性試驗(yàn)的PRAPRA測(cè)定，被作為心

48、臟移植前的常規(guī)項(xiàng)目，測(cè)定，被作為心臟移植前的常規(guī)項(xiàng)目， 若若PRAPRA超過(guò)超過(guò)5 5，則應(yīng)進(jìn)行供者淋巴細(xì)胞與受者血清的交叉配型，則應(yīng)進(jìn)行供者淋巴細(xì)胞與受者血清的交叉配型，1.1.體液免疫水平檢測(cè)的臨床意義體液免疫水平檢測(cè)的臨床意義補(bǔ)體水平的檢測(cè)補(bǔ)體水平的檢測(cè)補(bǔ)體活性與急性移植排斥反應(yīng)的發(fā)生有關(guān)補(bǔ)體活性與急性移植排斥反應(yīng)的發(fā)生有關(guān)當(dāng)移植物遭受排斥時(shí)，補(bǔ)體成分的消耗增加當(dāng)移植物遭受排斥時(shí)，補(bǔ)體成分的消耗增加可采用溶血法或比濁法進(jìn)行檢測(cè)?？刹捎萌苎ɑ虮葷岱ㄟM(jìn)行檢測(cè)。補(bǔ)體活性的檢測(cè)補(bǔ)體活性的檢測(cè)補(bǔ)體的裂解產(chǎn)物，如補(bǔ)體的裂解產(chǎn)物，如C3aC3a、C3bC3b、C3dC3d等的測(cè)定等的測(cè)定常用的檢測(cè)方

49、法有免疫電泳、免疫標(biāo)記技術(shù)常用的檢測(cè)方法有免疫電泳、免疫標(biāo)記技術(shù) 2.2.細(xì)胞免疫水平檢測(cè)的臨床意義細(xì)胞免疫水平檢測(cè)的臨床意義 外周血外周血T T細(xì)胞及其亞類(lèi)的計(jì)數(shù)細(xì)胞及其亞類(lèi)的計(jì)數(shù) 免疫熒光法或流式細(xì)胞儀測(cè)定免疫熒光法或流式細(xì)胞儀測(cè)定T T細(xì)胞及其亞群，細(xì)胞及其亞群， 在急性排斥反應(yīng)臨床癥狀出現(xiàn)前在急性排斥反應(yīng)臨床癥狀出現(xiàn)前1 15 5天，天，T T細(xì)胞總數(shù)和細(xì)胞總數(shù)和CD4/CD8CD4/CD8比值升高，巨細(xì)胞比值升高，巨細(xì)胞病毒感染時(shí)此比值降低。病毒感染時(shí)此比值降低。 CD4/CD8CD4/CD8比值大于比值大于1.201.20時(shí)時(shí): :預(yù)示急性排斥即將發(fā)生，預(yù)示急性排斥即將發(fā)生， CD

50、4/CD8CD4/CD8比值小于比值小于1.081.08時(shí)時(shí): :發(fā)生感染的可能性很大。發(fā)生感染的可能性很大。 若進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，對(duì)急性排斥反應(yīng)和感染具有鑒別診斷的意義若進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，對(duì)急性排斥反應(yīng)和感染具有鑒別診斷的意義 NKNK細(xì)胞活性測(cè)定細(xì)胞活性測(cè)定 免疫抑制劑免疫抑制劑抑制了受者機(jī)體殺傷細(xì)胞的活性，但在急性排斥時(shí)明顯升高抑制了受者機(jī)體殺傷細(xì)胞的活性，但在急性排斥時(shí)明顯升高 混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)混合淋巴細(xì)胞反應(yīng): : 刺激細(xì)胞刺激細(xì)胞: :滅活的供者的淋巴細(xì)胞滅活的供者的淋巴細(xì)胞 反應(yīng)細(xì)胞反應(yīng)細(xì)胞: :受者淋巴細(xì)胞受者淋巴細(xì)胞 結(jié)果顯示的是結(jié)果顯示的是CTLCTL和和NKNK細(xì)胞共同作用的結(jié)果。細(xì)胞共同作用的結(jié)果。 動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)NKNK細(xì)胞活性則意義更大細(xì)胞活性則意義更大 血清細(xì)胞細(xì)胞因子測(cè)定血清細(xì)胞細(xì)胞因子測(cè)定 IL-1IL-1、IL-2IL-2、IL-4IL-4、IL-6IL-6、IFN-IFN-等細(xì)胞因子的水平均可升高等細(xì)胞因