分析方法驗(yàn)證及確認(rèn)管理規(guī)程

1、LM/GM收件文件編碼：LM/原編號(hào)：文件名稱：分析方法驗(yàn)證及確認(rèn)管理規(guī)程文件類型：SMP編制人：編制日期：年 月日審核人：審核日期：年 月日批準(zhǔn)人：批準(zhǔn)日期：年 月日生效日期：年 月日發(fā)文：質(zhì)里邪編制單位：質(zhì)量部分發(fā)：質(zhì)量部、化驗(yàn)室本規(guī)程根據(jù)藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范2010年版、中國(guó)藥典2010年版建立及USP 1226藥典方法確認(rèn)建立1目的明確分析方法的驗(yàn)證和確認(rèn)的管理制度，確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠。2適用范圍適用于本公司化驗(yàn)室對(duì)化學(xué)藥品的無(wú)聊，中間產(chǎn)品，中間過程控制 和產(chǎn)品的理化分析方法的驗(yàn)證和確認(rèn)；清潔驗(yàn)證方法的驗(yàn)證。3責(zé)任者質(zhì)量管理部檢驗(yàn)人員、QA人員、化驗(yàn)中心主任、質(zhì)量管理部負(fù)責(zé)人,

2、4內(nèi)容4.1 分析方法驗(yàn)證及確認(rèn)工作職責(zé)分工化驗(yàn)中心負(fù)責(zé)驗(yàn)證或確認(rèn)方案的起草、驗(yàn)證或確認(rèn)工作具體實(shí)施以 及報(bào)告的填寫?；?yàn)中心主任或其指定人員負(fù)責(zé)驗(yàn)證或確認(rèn)方案、報(bào)告 的審核，組織驗(yàn)證或確認(rèn)工作的實(shí)施，對(duì)驗(yàn)證或確認(rèn)工作中出現(xiàn)的問題及 時(shí)糾正。QA負(fù)責(zé)驗(yàn)證或確認(rèn)方案、報(bào)告的審核，監(jiān)督確認(rèn)工作實(shí)施，對(duì)確認(rèn) 工作中出現(xiàn)的問題提出改進(jìn)意見并監(jiān)督落實(shí)。確保分析方法驗(yàn)證或確認(rèn)程 序達(dá)到符合性要求，程序被遵照?qǐng)?zhí)行，并且方法的預(yù)定用途被有效的且 以文件記錄的數(shù)據(jù)所支持。質(zhì)量管理部負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)驗(yàn)證或確認(rèn)方案及報(bào)告的審核批準(zhǔn)。4.2 分析方法驗(yàn)證藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證的目的是證明采用的方法適合于相應(yīng)檢 測(cè)要求。符

3、合下列情形之一的，應(yīng)當(dāng)對(duì)檢驗(yàn)方法進(jìn)行驗(yàn)證：采用新的檢驗(yàn)方法；檢驗(yàn)方法需變更的；采用中華人民共和國(guó)藥典及其他法定標(biāo)準(zhǔn)未收載的檢驗(yàn)方法； 法規(guī)規(guī)定的其他需要驗(yàn)證的檢驗(yàn)方法。需驗(yàn)證的分析項(xiàng)目有：鑒別試驗(yàn)、雜質(zhì)定量檢查或限度檢查、原料 藥或制劑中有效成分含量測(cè)定，以及制劑中其他成分 （如防腐劑等）的測(cè) 定，藥品溶出度、釋放度等檢查中的溶出量、含量均勻度。除此之外還 有一些物理項(xiàng)目的檢測(cè)如粒徑分布、旋光度、熔點(diǎn)和硬度，其要求與其 它檢驗(yàn)項(xiàng)目有所不同，通常進(jìn)行分析方法驗(yàn)證應(yīng)有不同要求。外觀、崩解時(shí)限、密度、重量、pH、硫酸鹽、灰分、裝量不需要 進(jìn)行方法驗(yàn)證。不同的檢驗(yàn)項(xiàng)目需要的驗(yàn)證不同，見下表:項(xiàng)目?jī)?nèi)容鑒

4、別雜質(zhì)測(cè)定含量測(cè)定及溶出量測(cè)定士JiiLAh坦限度準(zhǔn)確度-+-+精密度重復(fù)性-+-+中間精密度-理-十專屬性+檢測(cè)限（LOD-+-定設(shè)限（LOQ）-+-線性-+-+范圍-+-+耐用性+ 已有重現(xiàn)性驗(yàn)證，不需要驗(yàn)證中間精密度；如一種方法不夠?qū)?，可用其他分析方法予以補(bǔ)充; 視具體情況予以驗(yàn)證。4.2.1 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度系指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一 般用回收率（ ）表示。準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測(cè)試。A.含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度原料藥可用已知純度的對(duì)照品或供試品進(jìn)行測(cè)定，或用本法所得結(jié) 果與已知準(zhǔn)確度的另一個(gè)方法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)行比較。制劑可用含巳知量被測(cè)物的各組分混合物進(jìn)行測(cè)定。如不

5、能得到制劑的 全部組分，可向制劑中加人已知量的被測(cè)物進(jìn)行測(cè)定，或用本法所得結(jié) 果與已知準(zhǔn)確度的另一個(gè)方法測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較。如該分析方法已經(jīng)測(cè)試并求出了精密度、線性和專屬性，在準(zhǔn)確度 也可推算出來(lái)的情況下，這一項(xiàng)可不必再做。B.雜質(zhì)定量測(cè)定的準(zhǔn)確度可向原料藥或制劑中加人已知量雜質(zhì)進(jìn)行測(cè)定。如不能得到雜質(zhì)或 降解產(chǎn)物，可用本法測(cè)定結(jié)果與另一成熟的方法進(jìn)行比較，如藥典標(biāo)準(zhǔn) 方法或經(jīng)過驗(yàn)證的方法。在不能測(cè)得雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的響應(yīng)因子或不能 測(cè)得對(duì)原料藥的相對(duì)響應(yīng)因子的情況下，可用原料藥的響應(yīng)因子。應(yīng)明 確表明單個(gè)雜質(zhì)和雜質(zhì)總量相當(dāng)于主成分的重量比（ ）或面積比（%）。C.數(shù)據(jù)要求在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9個(gè)

6、測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。例如，設(shè)計(jì)3個(gè)不同 濃度，每個(gè)濃度各分別制備3份供試品溶液，進(jìn)行測(cè)定。應(yīng)報(bào)告已知加人 量的回收率（ ）,或測(cè)定結(jié)果平均值與真實(shí)值之差及其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差或 可信限。4.2.2 精密度精密度系指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻供試品，經(jīng)多次取樣 測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo) 準(zhǔn)偏差表示。在相同條件下，由同一個(gè)分析人員測(cè)定所得結(jié)果的精密度稱為重復(fù) 性；在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室， 不同時(shí)間由不同分析人員用不同設(shè)備測(cè)定結(jié)果之間的精密度， 稱為中間精密度； 在不同實(shí)驗(yàn)室由不同分析人員測(cè)定 結(jié)果之間的精密度，稱為重現(xiàn)性。含量測(cè)定和雜質(zhì)的定量測(cè)定應(yīng)考慮方法的精密度。A.重

7、復(fù)性在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。例如，設(shè)計(jì)3個(gè)不同 濃度，每個(gè)濃度各分別制備3份供試品溶液，進(jìn)行測(cè)定，或?qū)⑾喈?dāng)于100% 濃度水平的供試品溶液，用至少測(cè)定6次的結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。B.中間精密度為考察隨機(jī)變動(dòng)因素對(duì)精密度的影響，應(yīng)設(shè)計(jì)方案進(jìn)行中間精密度 試驗(yàn)。變動(dòng)因素為不同日期、不同分析人員、不同設(shè)備。C.重現(xiàn)性法定標(biāo)準(zhǔn)采用的分析方法，應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)。例如，建立藥典分 析方法時(shí)，通過協(xié)同檢驗(yàn)得出重現(xiàn)性結(jié)果。協(xié)同檢驗(yàn)的目的、過程和重 現(xiàn)性結(jié)果均應(yīng)記載在起草說(shuō)明中。應(yīng)注意重現(xiàn)性試驗(yàn)用的樣品本身的質(zhì) 量均勻性和貯存運(yùn)輸中的環(huán)境影響因素，以免影響重現(xiàn)性結(jié)果。D.數(shù)據(jù)要求均應(yīng)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)

8、標(biāo)準(zhǔn)偏差和可信限。4.2.3 專屬性專屬性系指在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）可能存在下， 采用的方法能正確測(cè)定出被測(cè)物的特性。鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢查和含量測(cè) 定方法，均應(yīng)考察其專屬性。如方法不夠?qū)?，?yīng)采用多個(gè)方法予以補(bǔ) 充。A.鑒別反應(yīng)應(yīng)能與可能共存的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)相似化合物區(qū)分。不含被測(cè)成分的供 試品，以及結(jié)構(gòu)相似或組分中的有關(guān)化合物，應(yīng)均呈負(fù)反應(yīng)。B.含量測(cè)定和雜質(zhì)測(cè)定色譜法和其他分離方法，應(yīng)附代表性圖譜，以說(shuō)明方法的專屬性， 并應(yīng)標(biāo)明諸成分在圖中的位置，色譜法中的分離度應(yīng)符合要求。在雜質(zhì)可獲得的情況下，對(duì)于含量測(cè)定，試樣中可加人雜質(zhì)或輔料， 考察測(cè)定結(jié)果是否受干擾，并可與未加雜質(zhì)或輔料

9、的試樣比較測(cè)定結(jié)果。 對(duì)于雜質(zhì)測(cè)定，也可向試樣中加人一定量的雜質(zhì)，考察雜質(zhì)之間能否得 到分離。在雜質(zhì)或降解產(chǎn)物不能獲得的情況下，可將含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的 試樣進(jìn)行測(cè)定，與另一個(gè)經(jīng)驗(yàn)證了的方法或藥典方法比較結(jié)果。用強(qiáng)光 照射、高溫、高濕、酸（堿）水解或氧化的方法進(jìn)行加速破壞，以研究 可能的降解產(chǎn)物和降解途徑。含量測(cè)定方法應(yīng)比對(duì)二法的結(jié)果，雜質(zhì)檢 查應(yīng)比對(duì)檢出的雜質(zhì)個(gè)數(shù)，必要時(shí)可采用光二極管陣列檢測(cè)和質(zhì)譜檢測(cè)， 進(jìn)行峰純度檢查。4.2.4 檢測(cè)限檢測(cè)限系指試樣中被測(cè)物能被檢測(cè)出的最低量。藥品的鑒別試驗(yàn)和 雜質(zhì)檢查方法，均應(yīng)通過測(cè)試確定方法的檢測(cè)限。常用的方法如下。 A.非儀器分析目視法用已知濃度的

10、被測(cè)物，試驗(yàn)出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量。B.信噪比法用于能顯示基線噪聲的分析方法，即把已知低濃度試樣測(cè)出的信號(hào) 與空白樣品測(cè)出的信號(hào)進(jìn)行比較，算出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或 量。一般以信噪比為3 : 1或2 : 1時(shí)相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測(cè)限。 C.數(shù)據(jù)要求應(yīng)附測(cè)試圖譜，說(shuō)明測(cè)試過程和檢測(cè)限結(jié)果。4.2.5 定量限定量限系指試樣中被測(cè)物能被定量測(cè)定的最低量，其測(cè)定結(jié)果應(yīng)具 一定準(zhǔn)確度和精密度。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物用定量測(cè)定方法研究時(shí)，應(yīng)確定 方法的定量限。常用信噪比法確定定量限。一般以信噪比為10 : 1時(shí)相應(yīng)濃度或注 人儀器的量確定定量限。4.2.6 線性線性系指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試

11、結(jié)果與試樣中被測(cè)物濃度直接呈正 比關(guān)系的程度。應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測(cè)定線性關(guān)系。可用一貯備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系列供試樣品的方法進(jìn)行測(cè)定，至少制備5份供試樣品。以測(cè)得的響應(yīng)信號(hào)作為被測(cè)物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性， 再用最小二乘法進(jìn)行線性回歸。必要時(shí)，響應(yīng)信號(hào)可經(jīng)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換，再進(jìn)行線性回歸計(jì)算。數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖。4.2.7 范圍范圍系指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測(cè)試方法適用的高低第7頁(yè)共10頁(yè)LM/限濃度或量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果和要 求確定。原料藥和制劑含量測(cè)定，范圍應(yīng)為測(cè)試濃度的 80%120%;制劑 含

12、量均勻度檢查，范圍應(yīng)為測(cè)試濃度的70%130%,根據(jù)劑型特點(diǎn)，如 氣霧劑和噴霧劑，范圍可適當(dāng)放寬；溶出度或釋放度中的溶出量測(cè)定， 范圍應(yīng)為限度的士 20 %，如規(guī)定了限度范圍， 則應(yīng)為下限的-20%至上限 的+20%;雜質(zhì)測(cè)定，范圍應(yīng)根據(jù)初步實(shí)測(cè)，擬訂為規(guī)定限度的士20 %。如果含量測(cè)定與雜質(zhì)檢查同時(shí)進(jìn)行，用百分歸一化法，則線性范圍應(yīng)為 雜質(zhì)規(guī)定限度的-20%至含量限度（或上限）的+20%。4.2.8 耐用性耐用性系指在測(cè)定條件有小的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程 度，為使方法可用于常規(guī)檢驗(yàn)提供依據(jù)。開始研究分析方法時(shí)，就應(yīng)考 慮其耐用性。如果測(cè)試條件要求苛刻，則應(yīng)在方法中寫明。典型的變動(dòng)

13、因素有：被測(cè)溶液的穩(wěn)定性、樣品的提取次數(shù)、時(shí)間等。液相色譜法中 典型的變動(dòng)因素有：流動(dòng)相的組成和pH值、不同廠牌或不同批號(hào)的同類 型色譜柱、柱溫、流速等。氣相色譜法變動(dòng)因素有：不同廠牌或批號(hào)的 色譜柱、固定相、不同類型的擔(dān)體、柱溫、進(jìn)樣口和檢測(cè)器溫度等。 經(jīng)試驗(yàn)，應(yīng)說(shuō)明小的變動(dòng)能否通過設(shè)計(jì)的系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以確保方法 有效4.3 分析方法確認(rèn)藥典方法和其它法定標(biāo)準(zhǔn)為驗(yàn)證過的分析方法，不需要驗(yàn)證，但需 要通過方法確認(rèn)來(lái)證明方法在本公司化驗(yàn)室條件下的適應(yīng)性。第8頁(yè)共10頁(yè)LM/4.3.1 第一類方法系指藥品的主要成分或者成品藥物的活性成分（包括 防腐劑）的定量分析，此類方法需要評(píng)估專屬性和精密度4

14、.3.2 第二類方法系指確定多數(shù)藥品雜質(zhì)或者成品藥物的降解化合物的 分析，此類方法需要評(píng)估精密度、專屬性與定量限4.3.3 第三類方法系指確定特征性能的分析步驟（如溶出、藥品釋放） 此類方法需評(píng)估專屬性與精密度。4.3.4 第四類方法系指鑒別檢查，此類方法需要評(píng)估專屬性。4.3.5 第五類的方法系指法定標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下規(guī)定的檢驗(yàn)方法的確認(rèn)，如高效 液相（氣相）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，此類方法在每次試驗(yàn)時(shí)都應(yīng) 做方法的確認(rèn)。pH實(shí)驗(yàn)室日常測(cè)試操作步驟不需要進(jìn)行方法確認(rèn)，如（包括但不限于） 干燥失重，炙灼殘?jiān)鞣N濕法化學(xué)步驟如酸值和簡(jiǎn)單的儀器方法如 值，除非有特殊要求。應(yīng)對(duì)滴定分析、色譜分析（有關(guān)物質(zhì)

15、，含量分析, 限度實(shí)驗(yàn)），分光光度分析（如紫外吸收系數(shù)法測(cè)定含量）等進(jìn)行方法 確認(rèn)。4.4 驗(yàn)證及確認(rèn)方案在驗(yàn)證或確認(rèn)實(shí)施之前，應(yīng)由驗(yàn)證或確認(rèn)負(fù)責(zé)人（一般為檢驗(yàn)組長(zhǎng)） 編寫方案。方案要對(duì)驗(yàn)證或確認(rèn)各個(gè)測(cè)試方法和要求進(jìn)行規(guī)定。驗(yàn)證或 確認(rèn)方案一般要包括以下內(nèi)容：驗(yàn)證或確認(rèn)方案審批驗(yàn)證或確認(rèn)概述、目的及范圍驗(yàn)證或確認(rèn)組織及成員職責(zé)驗(yàn)證或確認(rèn)前提及相關(guān)要求（相關(guān)文件資料、驗(yàn)證人員培訓(xùn)、所 需儀器、試劑確認(rèn)、其他相關(guān)要求）驗(yàn)證或確認(rèn)計(jì)劃驗(yàn)證或確認(rèn)試驗(yàn)內(nèi)容和接受標(biāo)準(zhǔn)4.5 驗(yàn)證或確認(rèn)報(bào)告所有測(cè)試項(xiàng)目完成后，應(yīng)由驗(yàn)證或確認(rèn)人員根據(jù)驗(yàn)證或確認(rèn)記錄起草驗(yàn)證或確認(rèn)報(bào)告，用來(lái)總結(jié)驗(yàn)證或確認(rèn)活動(dòng)，并確認(rèn)方案中的所有 項(xiàng)目是否完成，評(píng)估測(cè)試結(jié)果，明確驗(yàn)證或確認(rèn)結(jié)論。驗(yàn)證或確認(rèn)報(bào)告 至少應(yīng)包括如下內(nèi)容：對(duì)確認(rèn)結(jié)果的總結(jié)概述。驗(yàn)證或確認(rèn)試驗(yàn)的結(jié)果和記錄。驗(yàn)證或確認(rèn)支持性文件，如標(biāo)