分析方法驗證及確認(rèn)管理規(guī)程

1、LM/GM收件文件編碼：LM/原編號：文件名稱：分析方法驗證及確認(rèn)管理規(guī)程文件類型：SMP編制人：編制日期：年 月日審核人：審核日期：年 月日批準(zhǔn)人：批準(zhǔn)日期：年 月日生效日期：年 月日發(fā)文：質(zhì)里邪編制單位：質(zhì)量部分發(fā)：質(zhì)量部、化驗室本規(guī)程根據(jù)藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范2010年版、中國藥典2010年版建立及USP 1226藥典方法確認(rèn)建立1目的明確分析方法的驗證和確認(rèn)的管理制度，確保檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠。2適用范圍適用于本公司化驗室對化學(xué)藥品的無聊，中間產(chǎn)品，中間過程控制 和產(chǎn)品的理化分析方法的驗證和確認(rèn)；清潔驗證方法的驗證。3責(zé)任者質(zhì)量管理部檢驗人員、QA人員、化驗中心主任、質(zhì)量管理部負(fù)責(zé)人,

2、4內(nèi)容4.1 分析方法驗證及確認(rèn)工作職責(zé)分工化驗中心負(fù)責(zé)驗證或確認(rèn)方案的起草、驗證或確認(rèn)工作具體實施以 及報告的填寫?；炛行闹魅位蚱渲付ㄈ藛T負(fù)責(zé)驗證或確認(rèn)方案、報告 的審核，組織驗證或確認(rèn)工作的實施，對驗證或確認(rèn)工作中出現(xiàn)的問題及 時糾正。QA負(fù)責(zé)驗證或確認(rèn)方案、報告的審核，監(jiān)督確認(rèn)工作實施，對確認(rèn) 工作中出現(xiàn)的問題提出改進(jìn)意見并監(jiān)督落實。確保分析方法驗證或確認(rèn)程 序達(dá)到符合性要求，程序被遵照執(zhí)行，并且方法的預(yù)定用途被有效的且 以文件記錄的數(shù)據(jù)所支持。質(zhì)量管理部負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)驗證或確認(rèn)方案及報告的審核批準(zhǔn)。4.2 分析方法驗證藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證的目的是證明采用的方法適合于相應(yīng)檢 測要求。符

3、合下列情形之一的，應(yīng)當(dāng)對檢驗方法進(jìn)行驗證：采用新的檢驗方法；檢驗方法需變更的；采用中華人民共和國藥典及其他法定標(biāo)準(zhǔn)未收載的檢驗方法； 法規(guī)規(guī)定的其他需要驗證的檢驗方法。需驗證的分析項目有：鑒別試驗、雜質(zhì)定量檢查或限度檢查、原料 藥或制劑中有效成分含量測定，以及制劑中其他成分 （如防腐劑等）的測 定，藥品溶出度、釋放度等檢查中的溶出量、含量均勻度。除此之外還 有一些物理項目的檢測如粒徑分布、旋光度、熔點和硬度，其要求與其 它檢驗項目有所不同，通常進(jìn)行分析方法驗證應(yīng)有不同要求。外觀、崩解時限、密度、重量、pH、硫酸鹽、灰分、裝量不需要 進(jìn)行方法驗證。不同的檢驗項目需要的驗證不同，見下表:項目內(nèi)容鑒

4、別雜質(zhì)測定含量測定及溶出量測定士JiiLAh坦限度準(zhǔn)確度-+-+精密度重復(fù)性-+-+中間精密度-理-十專屬性+檢測限（LOD-+-定設(shè)限（LOQ）-+-線性-+-+范圍-+-+耐用性+ 已有重現(xiàn)性驗證，不需要驗證中間精密度；如一種方法不夠?qū)伲捎闷渌治龇椒ㄓ枰匝a充; 視具體情況予以驗證。4.2.1 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度系指用該方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度，一 般用回收率（ ）表示。準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測試。A.含量測定方法的準(zhǔn)確度原料藥可用已知純度的對照品或供試品進(jìn)行測定，或用本法所得結(jié) 果與已知準(zhǔn)確度的另一個方法測定的結(jié)果進(jìn)行比較。制劑可用含巳知量被測物的各組分混合物進(jìn)行測定。如不

5、能得到制劑的 全部組分，可向制劑中加人已知量的被測物進(jìn)行測定，或用本法所得結(jié) 果與已知準(zhǔn)確度的另一個方法測定結(jié)果進(jìn)行比較。如該分析方法已經(jīng)測試并求出了精密度、線性和專屬性，在準(zhǔn)確度 也可推算出來的情況下，這一項可不必再做。B.雜質(zhì)定量測定的準(zhǔn)確度可向原料藥或制劑中加人已知量雜質(zhì)進(jìn)行測定。如不能得到雜質(zhì)或 降解產(chǎn)物，可用本法測定結(jié)果與另一成熟的方法進(jìn)行比較，如藥典標(biāo)準(zhǔn) 方法或經(jīng)過驗證的方法。在不能測得雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的響應(yīng)因子或不能 測得對原料藥的相對響應(yīng)因子的情況下，可用原料藥的響應(yīng)因子。應(yīng)明 確表明單個雜質(zhì)和雜質(zhì)總量相當(dāng)于主成分的重量比（ ）或面積比（%）。C.數(shù)據(jù)要求在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9個

6、測定結(jié)果進(jìn)行評價。例如，設(shè)計3個不同 濃度，每個濃度各分別制備3份供試品溶液，進(jìn)行測定。應(yīng)報告已知加人 量的回收率（ ）,或測定結(jié)果平均值與真實值之差及其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差或 可信限。4.2.2 精密度精密度系指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻供試品，經(jīng)多次取樣 測定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對標(biāo) 準(zhǔn)偏差表示。在相同條件下，由同一個分析人員測定所得結(jié)果的精密度稱為重復(fù) 性；在同一個實驗室， 不同時間由不同分析人員用不同設(shè)備測定結(jié)果之間的精密度， 稱為中間精密度； 在不同實驗室由不同分析人員測定 結(jié)果之間的精密度，稱為重現(xiàn)性。含量測定和雜質(zhì)的定量測定應(yīng)考慮方法的精密度。A.重

7、復(fù)性在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9個測定結(jié)果進(jìn)行評價。例如，設(shè)計3個不同 濃度，每個濃度各分別制備3份供試品溶液，進(jìn)行測定，或?qū)⑾喈?dāng)于100% 濃度水平的供試品溶液，用至少測定6次的結(jié)果進(jìn)行評價。B.中間精密度為考察隨機變動因素對精密度的影響，應(yīng)設(shè)計方案進(jìn)行中間精密度 試驗。變動因素為不同日期、不同分析人員、不同設(shè)備。C.重現(xiàn)性法定標(biāo)準(zhǔn)采用的分析方法，應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗。例如，建立藥典分 析方法時，通過協(xié)同檢驗得出重現(xiàn)性結(jié)果。協(xié)同檢驗的目的、過程和重 現(xiàn)性結(jié)果均應(yīng)記載在起草說明中。應(yīng)注意重現(xiàn)性試驗用的樣品本身的質(zhì) 量均勻性和貯存運輸中的環(huán)境影響因素，以免影響重現(xiàn)性結(jié)果。D.數(shù)據(jù)要求均應(yīng)報告標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對

8、標(biāo)準(zhǔn)偏差和可信限。4.2.3 專屬性專屬性系指在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）可能存在下， 采用的方法能正確測定出被測物的特性。鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢查和含量測 定方法，均應(yīng)考察其專屬性。如方法不夠?qū)?，?yīng)采用多個方法予以補 充。A.鑒別反應(yīng)應(yīng)能與可能共存的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)相似化合物區(qū)分。不含被測成分的供 試品，以及結(jié)構(gòu)相似或組分中的有關(guān)化合物，應(yīng)均呈負(fù)反應(yīng)。B.含量測定和雜質(zhì)測定色譜法和其他分離方法，應(yīng)附代表性圖譜，以說明方法的專屬性， 并應(yīng)標(biāo)明諸成分在圖中的位置，色譜法中的分離度應(yīng)符合要求。在雜質(zhì)可獲得的情況下，對于含量測定，試樣中可加人雜質(zhì)或輔料， 考察測定結(jié)果是否受干擾，并可與未加雜質(zhì)或輔料

9、的試樣比較測定結(jié)果。 對于雜質(zhì)測定，也可向試樣中加人一定量的雜質(zhì)，考察雜質(zhì)之間能否得 到分離。在雜質(zhì)或降解產(chǎn)物不能獲得的情況下，可將含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的 試樣進(jìn)行測定，與另一個經(jīng)驗證了的方法或藥典方法比較結(jié)果。用強光 照射、高溫、高濕、酸（堿）水解或氧化的方法進(jìn)行加速破壞，以研究 可能的降解產(chǎn)物和降解途徑。含量測定方法應(yīng)比對二法的結(jié)果，雜質(zhì)檢 查應(yīng)比對檢出的雜質(zhì)個數(shù)，必要時可采用光二極管陣列檢測和質(zhì)譜檢測， 進(jìn)行峰純度檢查。4.2.4 檢測限檢測限系指試樣中被測物能被檢測出的最低量。藥品的鑒別試驗和 雜質(zhì)檢查方法，均應(yīng)通過測試確定方法的檢測限。常用的方法如下。 A.非儀器分析目視法用已知濃度的

10、被測物，試驗出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。B.信噪比法用于能顯示基線噪聲的分析方法，即把已知低濃度試樣測出的信號 與空白樣品測出的信號進(jìn)行比較，算出能被可靠地檢測出的最低濃度或 量。一般以信噪比為3 : 1或2 : 1時相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測限。 C.數(shù)據(jù)要求應(yīng)附測試圖譜，說明測試過程和檢測限結(jié)果。4.2.5 定量限定量限系指試樣中被測物能被定量測定的最低量，其測定結(jié)果應(yīng)具 一定準(zhǔn)確度和精密度。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物用定量測定方法研究時，應(yīng)確定 方法的定量限。常用信噪比法確定定量限。一般以信噪比為10 : 1時相應(yīng)濃度或注 人儀器的量確定定量限。4.2.6 線性線性系指在設(shè)計的范圍內(nèi)，測試

11、結(jié)果與試樣中被測物濃度直接呈正 比關(guān)系的程度。應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測定線性關(guān)系。可用一貯備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系列供試樣品的方法進(jìn)行測定，至少制備5份供試樣品。以測得的響應(yīng)信號作為被測物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性， 再用最小二乘法進(jìn)行線性回歸。必要時，響應(yīng)信號可經(jīng)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換，再進(jìn)行線性回歸計算。數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖。4.2.7 范圍范圍系指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測試方法適用的高低第7頁共10頁LM/限濃度或量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果和要 求確定。原料藥和制劑含量測定，范圍應(yīng)為測試濃度的 80%120%;制劑 含

12、量均勻度檢查，范圍應(yīng)為測試濃度的70%130%,根據(jù)劑型特點，如 氣霧劑和噴霧劑，范圍可適當(dāng)放寬；溶出度或釋放度中的溶出量測定， 范圍應(yīng)為限度的士 20 %，如規(guī)定了限度范圍， 則應(yīng)為下限的-20%至上限 的+20%;雜質(zhì)測定，范圍應(yīng)根據(jù)初步實測，擬訂為規(guī)定限度的士20 %。如果含量測定與雜質(zhì)檢查同時進(jìn)行，用百分歸一化法，則線性范圍應(yīng)為 雜質(zhì)規(guī)定限度的-20%至含量限度（或上限）的+20%。4.2.8 耐用性耐用性系指在測定條件有小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程 度，為使方法可用于常規(guī)檢驗提供依據(jù)。開始研究分析方法時，就應(yīng)考 慮其耐用性。如果測試條件要求苛刻，則應(yīng)在方法中寫明。典型的變動

13、因素有：被測溶液的穩(wěn)定性、樣品的提取次數(shù)、時間等。液相色譜法中 典型的變動因素有：流動相的組成和pH值、不同廠牌或不同批號的同類 型色譜柱、柱溫、流速等。氣相色譜法變動因素有：不同廠牌或批號的 色譜柱、固定相、不同類型的擔(dān)體、柱溫、進(jìn)樣口和檢測器溫度等。 經(jīng)試驗，應(yīng)說明小的變動能否通過設(shè)計的系統(tǒng)適用性試驗，以確保方法 有效4.3 分析方法確認(rèn)藥典方法和其它法定標(biāo)準(zhǔn)為驗證過的分析方法，不需要驗證，但需 要通過方法確認(rèn)來證明方法在本公司化驗室條件下的適應(yīng)性。第8頁共10頁LM/4.3.1 第一類方法系指藥品的主要成分或者成品藥物的活性成分（包括 防腐劑）的定量分析，此類方法需要評估專屬性和精密度4

14、.3.2 第二類方法系指確定多數(shù)藥品雜質(zhì)或者成品藥物的降解化合物的 分析，此類方法需要評估精密度、專屬性與定量限4.3.3 第三類方法系指確定特征性能的分析步驟（如溶出、藥品釋放） 此類方法需評估專屬性與精密度。4.3.4 第四類方法系指鑒別檢查，此類方法需要評估專屬性。4.3.5 第五類的方法系指法定標(biāo)準(zhǔn)項下規(guī)定的檢驗方法的確認(rèn)，如高效 液相（氣相）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，此類方法在每次試驗時都應(yīng) 做方法的確認(rèn)。pH實驗室日常測試操作步驟不需要進(jìn)行方法確認(rèn)，如（包括但不限于） 干燥失重，炙灼殘渣，各種濕法化學(xué)步驟如酸值和簡單的儀器方法如 值，除非有特殊要求。應(yīng)對滴定分析、色譜分析（有關(guān)物質(zhì)

15、，含量分析, 限度實驗），分光光度分析（如紫外吸收系數(shù)法測定含量）等進(jìn)行方法 確認(rèn)。4.4 驗證及確認(rèn)方案在驗證或確認(rèn)實施之前，應(yīng)由驗證或確認(rèn)負(fù)責(zé)人（一般為檢驗組長） 編寫方案。方案要對驗證或確認(rèn)各個測試方法和要求進(jìn)行規(guī)定。驗證或 確認(rèn)方案一般要包括以下內(nèi)容：驗證或確認(rèn)方案審批驗證或確認(rèn)概述、目的及范圍驗證或確認(rèn)組織及成員職責(zé)驗證或確認(rèn)前提及相關(guān)要求（相關(guān)文件資料、驗證人員培訓(xùn)、所 需儀器、試劑確認(rèn)、其他相關(guān)要求）驗證或確認(rèn)計劃驗證或確認(rèn)試驗內(nèi)容和接受標(biāo)準(zhǔn)4.5 驗證或確認(rèn)報告所有測試項目完成后，應(yīng)由驗證或確認(rèn)人員根據(jù)驗證或確認(rèn)記錄起草驗證或確認(rèn)報告，用來總結(jié)驗證或確認(rèn)活動，并確認(rèn)方案中的所有 項目是否完成，評估測試結(jié)果，明確驗證或確認(rèn)結(jié)論。驗證或確認(rèn)報告 至少應(yīng)包括如下內(nèi)容：對確認(rèn)結(jié)果的總結(jié)概述。驗證或確認(rèn)試驗的結(jié)果和記錄。驗證或確認(rèn)支持性文件，如標(biāo)