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文檔簡介
1、第一章 1、簡述孟德爾、摩爾根和沃森等人對分子生物學(xué)發(fā)展的主要貢獻(xiàn) 答:孟德爾的對分子生物學(xué)的發(fā)展的主要貢獻(xiàn)在于他通過豌豆實(shí)驗(yàn)、發(fā)現(xiàn)了遺傳規(guī)律、分離規(guī)律及自由組合規(guī)律;摩爾根的主要貢獻(xiàn)在于發(fā)現(xiàn)染色體的遺傳機(jī)制、創(chuàng)立染色體遺傳理論、成為現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)生物學(xué)奠基人;沃森和克里克在1953年提出DAN反向雙平行雙螺旋模型。 2、寫出DNA、RNA的英文全稱 答:脫氧核糖核酸(DNA, Deoxyribonucleic acid)、核糖核酸(RNA, Ribonucleic acid) 3、試述
2、“有其父必有其子”的生物學(xué)本質(zhì) 答:其生物學(xué)本質(zhì)是基因遺傳。子代的性質(zhì)由遺傳所得的基因決定、而基因由于遺傳的作用、其基因的一半來自于父方、一半來自于母方。 4、早期主要有哪些實(shí)驗(yàn)證實(shí)DNA是遺傳物質(zhì)?寫出這些實(shí)驗(yàn)的主要步驟 答:一、肺炎雙球菌感染實(shí)驗(yàn)、1、R型菌落粗糙、菌體無多糖莢膜、無毒、注入小鼠體內(nèi)后、小鼠不死亡。2、S型菌落光滑、菌體有多糖莢膜、有毒、注入到小鼠體內(nèi)可以使小鼠患病死亡。3、用加熱的方法殺死S型細(xì)菌后注入到小鼠體內(nèi)、小鼠不死亡; 二、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn):1、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)過程:吸附侵入復(fù)制組裝釋放。 2、
3、DNA中P的含量多、蛋白質(zhì)中P的含量少;蛋白質(zhì)中有S而DNA中沒有S、所以用放射性同位素35S標(biāo)記一部分噬菌體的蛋白質(zhì)、用放射性同位素32P標(biāo)記另一部分噬菌體的DNA。用35P標(biāo)記蛋白質(zhì)的噬菌體侵染后、細(xì)菌體內(nèi)無放射性、即表明噬菌體的蛋白質(zhì)沒有進(jìn)入細(xì)菌內(nèi)部;而用32P標(biāo)記DNA的噬菌體侵染細(xì)菌后、細(xì)菌體內(nèi)有放射性、即表明噬菌體的DNA進(jìn)入了細(xì)菌體內(nèi)。三、煙草TMV的重建實(shí)驗(yàn):1957年、Fraenkel-Conrat等人、將兩個不同的TMV株系(S株系和HR株系)的蛋白質(zhì)和RNA分別提取出來、然后相互對換、將S株系的蛋白質(zhì)和HR株系的RNA、或反過來將HR株系的蛋白質(zhì)和S株系的RNA放在一起、
4、重建形成兩種雜種病毒、去感染煙草葉片。 5、定義DNA重組技術(shù) 答:DNA重組技術(shù):目的是將不同的DNA片段(如某個基因或基因的一部分)按照人們的設(shè)計(jì)定向連接起來、然后在特定的受體細(xì)胞中與載體同時復(fù)制并得到表達(dá)、產(chǎn)生影響受體細(xì)胞的新的遺傳性狀。 6、寫出分子生物學(xué)的主要研究內(nèi)容。 答:1、DNA重組技術(shù);2、基因表達(dá)調(diào)控研究;3、生物大分子的結(jié)構(gòu)功能研究-結(jié)構(gòu)分子生物學(xué);4、基因組、功能基因組與生物信息學(xué)研究。 7、分子生物學(xué)的定義 答:廣義的分子生物學(xué):蛋白質(zhì)及核酸等生物大分子結(jié)構(gòu)和功能的研究都屬于分子生物學(xué)的范疇,即從分子水平闡明
5、生命現(xiàn)象和生物學(xué)規(guī)律狹義的分子生物學(xué):偏重于核酸(基因)的分子生物學(xué),主要研究基因或DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、表達(dá)和調(diào)控等過程,當(dāng)然也涉及與這些過程相關(guān)的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)與功能的研究 第二章 1、染色體具備哪些作為遺傳物質(zhì)的特性? 答:1、分子結(jié)構(gòu)相對穩(wěn)定;2、能夠自我復(fù)制、使得親子代之間保持連續(xù)性;3、能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成、從而控制整個生命活動的過程;4、能夠產(chǎn)生可遺傳的變異。 2、核小體結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。 答: 每個核小體單位包括200 bp左右的DNA鏈、一個組蛋白八聚體及一分子H1。 組蛋白八聚體構(gòu)成核小體的盤狀核心結(jié)構(gòu),由H2A、H2B
6、、H3、H4各兩分子形成。 146 bp的DNA分子超螺旋盤繞組蛋白八聚體1.75圈,組蛋白H1在核心顆粒外結(jié)合額外20 bpDNA,鎖住核小體DNA的進(jìn)出端,起穩(wěn)定核小體的作用。相鄰核心顆粒之間為一段連接DNA,連接DNA上有組蛋白H1和非組蛋白。 5、簡述DNA的一、二、三級結(jié)構(gòu)特征。 答:1、DNA的一級結(jié)構(gòu)、就是指4種核苷酸的連接及排列順序,表示了該DNA分子的化學(xué)成分;2、DNA的二級結(jié)構(gòu)是指兩條多核苷酸連反向平行盤繞所形成的雙螺旋結(jié)構(gòu);3、DNA的高級結(jié)構(gòu)是指DNA雙螺旋進(jìn)一步扭曲盤繞所形成的特定空間結(jié)構(gòu)。 6、原核生物DNA與真核生物有哪
7、些不同的特征? 答:(1)DNA雙螺旋是由兩條互相平行的脫氧核苷酸長鏈盤繞而成的,多核苷酸的方向由核苷酸間的磷酸二酯鍵的走向決定、一條是5-3、另一條是3-5。(2)DNA雙螺旋中脫氧核糖和磷酸交替連接、排在外側(cè)、構(gòu)成基本骨架、堿基排列在內(nèi)側(cè)(3)其兩條鏈上的堿基通過氫鍵相結(jié)合、形成堿基對 意義:該模型揭示了DNA作為遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性特征、最有價值的是確認(rèn)了堿基配對原則、這是DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和反轉(zhuǎn)錄的分子基礎(chǔ)、亦是遺傳信息傳遞和表達(dá)的分子基礎(chǔ)。該模型的提出是20世紀(jì)生命科學(xué)的重大突破之一、它奠定了生物化學(xué)和分子生物學(xué)乃至整個生命科學(xué)飛速發(fā)
8、展的基石 8、DNA復(fù)制通常采取哪些方式。 答:一、線性DNA雙鏈的復(fù)制:1、將線性復(fù)制子轉(zhuǎn)變?yōu)榄h(huán)裝或者多聚分子;2、在DNA末端形成發(fā)卡式結(jié)構(gòu)、使分子沒有游離末端;3、在某種蛋白質(zhì)的介入下(如末端蛋白、terminal protein)、在真正的末端上啟動復(fù)制。二、環(huán)狀DNA的復(fù)制:1、型;2、滾環(huán)形;3、D環(huán)形(D-loop)。 9、簡述原核生物的DNA復(fù)制特點(diǎn)。 答:1、與真核生物不同、原核生物的DNA復(fù)制只有一個復(fù)制起點(diǎn);2、真核生物的染色體全部完成復(fù)制之前、各個起始點(diǎn)上DNA的復(fù)制不能在開始、而在快速生長的原核生物中、復(fù)制
9、起始點(diǎn)上可以連續(xù)開始新的DNA的復(fù)制、變現(xiàn)為雖然只有一個復(fù)制單元、但可有多個復(fù)制叉; 13、細(xì)胞通過哪些修復(fù)系統(tǒng)對DNA損傷進(jìn)行修復(fù)? 答:1、錯配修復(fù)、恢復(fù)錯配;2、切除修復(fù)、切除突變的堿基和核苷酸序列;3、重組修復(fù)、復(fù)制后的修復(fù)、重新啟動停滯的復(fù)制叉;4、DNA的直接修復(fù)、修復(fù)嘧啶二聚體和甲基化的DNA;5、SOS系統(tǒng)、DNA的修復(fù)、導(dǎo)致突變。 14、什么是轉(zhuǎn)座子?可以分為哪些種類? 答:轉(zhuǎn)座子是存在于染色體DNA上可自主復(fù)制和移位的基本單位。轉(zhuǎn)座子可分為兩大類:插入序列和復(fù)合型轉(zhuǎn)座子。 第三章 1、什么是
10、編碼鏈?什么是模版鏈? 答:與mRNA序列相同的那條DNA鏈稱為編碼鏈(或有意義鏈);另一條根據(jù)堿基互補(bǔ)原則指導(dǎo)mRNA合成DNA鏈稱為模版鏈(或反義鏈)。 4、簡述RNA轉(zhuǎn)錄的概念及其基本過程。 答:RNA轉(zhuǎn)錄:以DNA中的一條單鏈為模板、游離堿基為原料、在DNA依賴的RNA聚合酶催化下合成RNA鏈的過程?;具^程:模版識別轉(zhuǎn)錄開始轉(zhuǎn)錄延伸轉(zhuǎn)錄終止。 6、大腸桿菌的RNA聚合酶有哪些組成成分?各個亞基的作用如何? 答:大腸桿菌的RNA聚合酶由2個亞基、一個亞基、一個亞基和一個亞基組成的核心酶、加
11、上一個亞基后則成為聚合酶全酶。亞基肯能與核心酶的組裝及啟動子的識別有關(guān)、并參與RNA聚合酶和部分調(diào)節(jié)因子的相互作用;亞基和亞基組成了聚合酶的催化中心、亞基能與模版 DNA、新生RNA鏈及核苷酸底物相結(jié)合。 7、什么是封閉復(fù)合物、開放復(fù)合物以及三元復(fù)合物? 答:模版的識別階段、聚合酶與啟動子可逆性結(jié)合形成封閉性復(fù)合物;封閉性復(fù)合物形成后、此時、DNA鏈仍然處于雙鏈狀態(tài)、伴隨著DNA構(gòu)象的重大變化、封閉性復(fù)合物轉(zhuǎn)化為開放復(fù)合物;開放復(fù)合物與最初的兩個NTP相結(jié)合并在這兩個核苷酸之間形成磷酸二脂鍵后即轉(zhuǎn)變成包括RNA聚合酶、DNA和新生RNA的三元復(fù)合物。&
12、#160; 8、簡述因子的作用。 答:1)因子的作用是負(fù)責(zé)模版鏈的選擇和轉(zhuǎn)錄的起始、它是酶的別構(gòu)效應(yīng)物、使酶專一性識別模版上的啟動子;2)因子可以極大的提高RNA聚合酶對啟動子區(qū)DNA序列的親和力;3)因子還能使RNA聚合酶與模版DNA上非特異性位點(diǎn)結(jié)合常數(shù)降低。 9、什么是 Pribnow box?它的保守序列是什么? 答:pribnow box是原核生物中中央大約位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游10bp處的TATA區(qū),所以又稱作-10區(qū)。它的保守序列是TATAAT。 10、什么是上升突變?什么是下降
13、突變? 答:上升突變:細(xì)菌中常見的啟動自突變之一、突變導(dǎo)致Pribnow區(qū)共同序列的同一性增加;下降突變:細(xì)菌中常見的啟動子突變之一、突變導(dǎo)致結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄水平大大降低、如Pribnow區(qū)從TATAAT變成AATAAT。 11、簡述原核生物和真核生物mRNA的區(qū)別。 答:1)原核生物mRNA常以多順反子的形式存在。真核生物mRNA一般以單順反子的形式存在;2)原核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄與翻譯一般是偶聯(lián)的、真核生物轉(zhuǎn)錄的mRNA前體則需經(jīng)轉(zhuǎn)錄后加工、加工為成熟的mRNA與蛋白質(zhì)結(jié)合生成 信息體后才開始工作;3)原核生物mRNA半壽期很短、一般為幾分
14、鐘、最長只有數(shù)小時。真核生物mRNA的半壽期較長、如胚胎中的mRNA可達(dá)數(shù)日;4)原核與真核生物mRNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)也不同、原核生物的mRNA的5端無帽子結(jié)構(gòu)、3端沒有或只有較短的polyA結(jié)構(gòu)。 13、大腸桿菌的終止子有哪兩大類?請分別介紹一下它們的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。 答:大腸桿菌的終止子可以分為不依賴于p因子和依賴于p因子兩大類。不依賴于p因子的終止子結(jié)構(gòu)特點(diǎn):1、位于位點(diǎn)上游一般存在一個富含GC堿基的二重對稱區(qū)、由這段DNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的RNA容易形成發(fā)卡式結(jié)構(gòu)。2、在終止位 點(diǎn)前面有一端由48個A組成的序列、所以轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的3端為寡聚U。依賴于p因
15、子的終止子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn): 14、真核生物的原始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物必須經(jīng)過哪些加工才能成為成熟的mRNA、以用作蛋白質(zhì)合成的模版。 答:加工包括:(1)5端連接“帽子”結(jié)構(gòu);(2)3端添加polyA “尾巴”;(3)hnRNA被剪接、把內(nèi)含子(DNA上非編碼序列)轉(zhuǎn)錄序列剪掉、把外顯子(DNA上的編碼序列)轉(zhuǎn)錄序列拼接上(真核生物一般為不連續(xù)基因)。(4)分子內(nèi)部的核苷酸甲基化修飾 15、簡述、類內(nèi)含子的剪接特點(diǎn)。 答:類內(nèi)含子的剪接主要是轉(zhuǎn)酯反應(yīng)、即剪接反應(yīng)實(shí)際上是發(fā)生了兩次磷酸二脂鍵的轉(zhuǎn)移。I類內(nèi)含子的切除體系中、在第一個轉(zhuǎn)酯反應(yīng)由一個游離
16、的鳥苷或者鳥苷酸介導(dǎo)、鳥苷或鳥苷酸的3OH作為親核基團(tuán)攻擊內(nèi)含子5端的磷酸二脂鍵、從上游切開RNA鏈。在第二個轉(zhuǎn)酯反應(yīng)中、上游外顯子的自由3OH作為親核基團(tuán)攻擊內(nèi)含子3位核苷酸上的磷酸二脂鍵、使內(nèi)含子被完全切開、上下游兩個外顯子通過新的磷酸二脂鍵相連。 類內(nèi)含子主要存在于真核生物的線粒體和葉綠體rRNA基因中、在類內(nèi)含子切除體系中、轉(zhuǎn)酯反應(yīng)無需游離鳥苷或鳥苷酸、而是由內(nèi)含子本身的靠近3端的腺苷酸2OH作為親核基團(tuán)攻擊內(nèi)含子5端的磷酸二脂鍵、從上游切開RNA鏈后形成套索結(jié)構(gòu)。再由上游外顯子的自由3OH 作為親核基團(tuán)攻擊內(nèi)含子3位核苷酸上的磷酸二脂鍵、使得內(nèi)含子被完全切開、上下
17、游兩個內(nèi)含子通過新的磷酸二脂鍵相連。 17、什么是RNA編輯?其生物學(xué)意義是什么? 答:RNA 編輯是指某些RNA特別是mRNA前體經(jīng)過插入、刪除或取代一些核苷酸殘疾等操作、導(dǎo)致DNA所編碼的遺傳信息的改變、使得經(jīng)過RNA編輯的mRNA序列發(fā)生了不同于模版的DNA的變化。生物學(xué)意義:1、校正作用,有些基因在突變的途中丟失的遺傳信息可能通過RNA的編輯得以恢復(fù);2、調(diào)控翻譯,通過編輯可以構(gòu)建或去除其實(shí)密碼子和終止密碼子、是基因表達(dá)調(diào)控的一種方式;擴(kuò)充遺傳信息,3、能使基因產(chǎn)物獲得心得結(jié)構(gòu)核功能、有利于生物的進(jìn)化。 18、核酶具有哪些
18、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)?其生物學(xué)意義是什么? 答:核酶的結(jié)構(gòu)特點(diǎn):核酶的錘頭結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是:三個莖區(qū)形成局部的雙鏈結(jié)構(gòu);其中含13個保守的核苷酸、N代表任何核苷酸; 生物學(xué)意義:1、核酶是繼反轉(zhuǎn)錄現(xiàn)象之后對中心法則的有一個重要的修正、說明RNA既是遺傳物質(zhì)又是酶;2、核酶的發(fā)現(xiàn)為生命起源的研究提供了新思路-也許曾(經(jīng)存在以RNA為基礎(chǔ)的原始生命. 第四章 2、遺傳密碼有哪些特征? 答:1、密碼的連續(xù)性、密碼之間無間斷也沒有重疊;2、密碼的簡并性、許多氨基酸都有多個密碼子;3、密碼的通用性和特殊性、遺傳密碼無論在體內(nèi)還是在體外、無論是對病毒
19、、細(xì)菌、動物還是植物而言都是通用的、但是也有少數(shù)例外;4、密碼子和反密碼子的相互作用。 3、有幾種終止密碼子?它們的序列和別名分別是什么? 答:3種、UAA、UAG和UGA、別名是無意義密碼。 4、tRNA在組成和結(jié)構(gòu)上有哪些特點(diǎn) 答:1.tRNA中含有稀有堿基,除ACGU 外還含有雙氫尿嘧啶、假尿嘧啶等;2.tRNA分子形成莖環(huán)節(jié)構(gòu);3.tRNA分子末端有氨基酸接納莖;4.tRNA分子序列中很有反密碼子。 5、簡述擺動學(xué)說。 答:1966年、Crick根據(jù)立體化學(xué)原理提出擺動
20、學(xué)說、解釋了反密碼子中某些稀有成分的配對。擺動學(xué)說認(rèn)為、在密碼子與反密碼子的配對中、前兩對嚴(yán)格遵守堿基配對原則、第三對堿基有一定的自由度、可以“擺動”、因而使某些tRNA可以識別1個以上的密碼子。認(rèn)為除A-U、G-C配對外、還有非標(biāo)準(zhǔn)配對、I-A、I-C、I-U、并強(qiáng)調(diào)密碼子的5端第1、2個堿基嚴(yán)格遵循標(biāo)準(zhǔn)配對、而第3個堿基可以非標(biāo)準(zhǔn)配對、具有一定程度的擺動靈活性。7、比較原核與真核的核糖體組成。 答:1、真核細(xì)胞中的核糖體數(shù)量多余原核;2、真核細(xì)胞中核糖體RNA占細(xì)胞中總RNA的量少于原核;3、原核生物的核糖體通過與mRNA的相互作用、被固定在核基因組上、真核生物的核糖體則直接或間
21、接的與細(xì)胞骨架有關(guān)聯(lián)或者與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)相連;4、原核生物核糖體由約RNA占2/3及1/3的蛋白組成、真核生物核糖體中RNA占3/5、蛋白質(zhì)占2/5。 8、什么是SD序列?其功能是什么? 答:SD序列是指信使核糖核酸(mRNA)翻譯起點(diǎn)上游與原核16S 核糖體RNA或真核18SrRNA 3端富含嘧啶的7核苷酸序列互補(bǔ)的富含嘌呤的37個核苷酸序列(AGGAGG)、是核糖體小亞基與mRNA結(jié)合并形成正確的前起始復(fù)合體的一段序列。功能:SD序列對mRNA的翻譯起重要作用。 9、核糖體有哪些活性中心? 答:核
22、糖體包括多個活性中心、即mRNA結(jié)合部位、結(jié)合或接受AA-tRNA部位、結(jié)合或接受肽酰-tRNA部位、肽基轉(zhuǎn)移部位及形成肽鍵的部位、此外還有負(fù)責(zé)肽鏈延伸的各種延伸因子的結(jié)合位點(diǎn)。 10、真核生物與原核生物在翻譯起始過程中有哪些區(qū)別? 答:原核生物的起始tRNA是fMet-tRNA、真核生物是Met-tRNAMet。原核生物中30S小亞基首先與mRNA模版相結(jié)合、再與fMet-tRNA結(jié)合、最后與50S大亞基結(jié)合。而在真核生物中、40S小亞基首先與Met-tRNAMet相結(jié)合、再與模版mRNA結(jié)合、最后與60S大亞基結(jié)合生成80S.mRNA.Met-tRNAMet起始復(fù)合物。
23、 11、鏈霉素為什么能夠抑制蛋白質(zhì)的合成? 答:鏈霉素是是一種氨基葡萄糖型抗生素、分子式C21H39N7O12、可以多種方式抑制原核生物核糖體、能干擾fMet-tRNA與核糖體的結(jié)合、從而阻止蛋白質(zhì)合成的正確起始、也會導(dǎo)致mRNA的錯讀。 14、什么是信號肽?它在序列組成上有什么特點(diǎn)?有什么功能? 答:絕大部分被運(yùn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔的蛋白質(zhì)都帶有一個信號肽、該序列常常位于蛋白質(zhì)的氨基端、長度一般都在13-16個殘基、有如下三個特征:1、一般帶有10-15個疏水殘基;2、在靠近該序列N端常常帶有一個或者數(shù)個帶正電荷的氨基酸;3、在其C端靠近
24、蛋白酶切割位點(diǎn)處常常帶有數(shù)個極性氨基酸。功能:完整的信號肽是保證蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的必要條件。 15、簡述葉綠體蛋白質(zhì)的跨膜運(yùn)輸機(jī)制。 答:1、活性蛋白水解酶位于葉綠體基質(zhì)內(nèi);2、葉綠體膜能夠特異性的與葉綠體蛋白的前體結(jié)合;3、葉綠體蛋白質(zhì)前體內(nèi)可降解序列因植物和蛋白質(zhì)種類不同而表現(xiàn)出明顯的差異; 16、蛋白質(zhì)有哪些翻譯后的加工修飾? 答:1、氨基端和羧基端的修飾;2.共價修飾:磷酸化、糖基化、羥基化、二硫鍵的形成;3.亞基的聚合;4.水解斷鏈、切除新生肽中非功能片段。 18、什么是核定位序列?其主要功能
25、是什么? 答:核定位序列:蛋白質(zhì)的一個結(jié)構(gòu)域、通常為一短的氨基酸序列、它能與入核載體相互作用、使蛋白能被運(yùn)進(jìn)細(xì)胞核。在絕大多數(shù)多細(xì)胞真核生物中、每當(dāng)細(xì)胞發(fā)生分裂時、核膜被破壞、等到細(xì)胞分類完成后、核膜被重新建成、分散在細(xì)胞內(nèi)的核蛋白必須被重新運(yùn)入核內(nèi)、為了核蛋白的重復(fù)定位、這些蛋白質(zhì)中的信號肽-被稱為核定位序列。第七章 基因的表達(dá)與調(diào)控 1.簡述代謝物對基因表達(dá)調(diào)控的兩種方式。 答: 轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)控 轉(zhuǎn)錄后水平上的調(diào)控,包括mRNA加工成熟水平上的調(diào)控)和翻譯水平上的調(diào)控 3.簡述乳糖操縱子的調(diào)控模型。 答:A、乳糖操縱子的組成:大腸桿菌乳糖操縱子含 Z、Y、A 三個結(jié)
26、構(gòu)基因,分別編碼半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶,此外還有一個操縱序列O,一個啟動子P和一個調(diào)節(jié)基因I。 B、阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié):沒有乳糖存在時,I 基因編碼的阻遏蛋白結(jié)合于操縱序列 O 處,乳糖操縱子處于阻遏狀態(tài),不能合成分解乳糖的三種酶;有乳糖存在時,乳糖作為誘導(dǎo)物誘導(dǎo)阻遏蛋白變構(gòu),不能結(jié)合于操縱序列,乳糖操縱子被誘導(dǎo)開放合成分解乳糖的三種酶。所以,乳糖操縱子的這種調(diào)控機(jī)制為可誘導(dǎo)的負(fù)調(diào)控。 C、CAP的正性調(diào)節(jié):在啟動子上游有CAP 結(jié)合位點(diǎn),當(dāng)大腸桿菌從以葡萄糖為碳源的環(huán)境轉(zhuǎn)變?yōu)橐匀樘菫樘荚吹沫h(huán)境時,cAMP濃度升高,與CAP結(jié)合,使CAP發(fā)生變構(gòu),CAP結(jié)合于乳糖操縱子啟動序列附
27、近的 CAP 結(jié)合位點(diǎn),激活 RNA 聚合酶活性,促進(jìn)結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄,調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合于操縱子后促進(jìn)結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄,對乳糖操縱子實(shí)行正調(diào)控,加速合成分解乳糖的三種酶。D、協(xié)調(diào)調(diào)節(jié):乳糖操縱子中的 I 基因編碼的阻遏蛋白的負(fù)調(diào)控與CAP的正調(diào)控兩種機(jī)制,互相協(xié)調(diào)、互相制約。 5.什么是弱化作用? 答:1.當(dāng)培養(yǎng)基中色氨酸的濃度很低時,負(fù)載有色氨酸的tRNATrp也就少,這樣翻譯通過兩個相鄰色氨酸密碼子的速度就會很慢,當(dāng)4區(qū)被轉(zhuǎn)錄完成時,核糖體才進(jìn)行到1區(qū)(或停留在兩個相鄰的trp密碼子處),這時的前導(dǎo)區(qū)結(jié)構(gòu)是2-3配對,不形成3-4配對的終止結(jié)構(gòu),所以轉(zhuǎn)錄可繼續(xù)進(jìn)行,直到將trp操縱子中的結(jié)構(gòu)基因全部
28、轉(zhuǎn)錄。 2.當(dāng)培養(yǎng)基中色氨酸濃度較高時,核糖體可順利通過兩個相鄰的色氨酸密碼子,在4區(qū)被轉(zhuǎn)錄之前就到達(dá)2區(qū),使2-3區(qū)不能配對,3-4區(qū)自由配對形成基一環(huán)終止子結(jié)構(gòu),轉(zhuǎn)錄被終止,trp操縱子被關(guān)閉。 第八章1.基因家族的分類及其主要表達(dá)調(diào)控模式 答:(1)簡單多基因家族,真核生物首先是pre rRNA經(jīng)過特異性甲基化,然后是經(jīng)RNA酶的切割便可產(chǎn)生成熟rRNA分子。原核生物則還要經(jīng)過核酸酶降解才能產(chǎn)生成熟rRNA分子。(2)復(fù)雜多基因家族,一般由幾個相關(guān)基因家族構(gòu)成,基因家族之間由間隔序列隔開,并作為獨(dú)立的轉(zhuǎn)錄單位,可能存在具有不同專一性的組蛋白亞類和發(fā)育調(diào)控機(jī)制。(3)發(fā)育調(diào)控的復(fù)雜多基因家
29、族,每個基因家族中,基因排列的順序就是他們在發(fā)育階段的表達(dá)順序。 2.何為外顯子和內(nèi)含子及其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和可變調(diào)控 答:大多數(shù)真核基因都是由蛋白質(zhì)編碼序列和非蛋白質(zhì)編碼序列組成的,編碼序列稱為外顯子(exon),非編碼序列稱為內(nèi)含子(intron)。結(jié)構(gòu)特點(diǎn):一個結(jié)構(gòu)基因中編碼某一蛋白質(zhì)不同區(qū)域的各個外顯子并不連續(xù)排列在一起,而是常常被長度不等的內(nèi)含子所隔離,形成鑲嵌排列的斷裂方式??勺冋{(diào)控:不少真核基因的原始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可通過不同剪接方式,產(chǎn)生不同的mRNA,并翻譯成不同的蛋白質(zhì)。另外,一些核基因由于轉(zhuǎn)錄是選擇了不同的啟動子或者在轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物上選擇了不同的PolyA位點(diǎn)而使轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物產(chǎn)生不同的二級結(jié)構(gòu),因
30、而影響剪接過程,最終產(chǎn)生不同的mRNA分子。 3.DNA甲基化對基因表達(dá)的的調(diào)控機(jī)制 答:大量研究表明,DNA甲基化能關(guān)閉某些基因達(dá)的活性,去甲基化則誘導(dǎo)了基因的重新活化和表達(dá)。三種調(diào)控機(jī)制:一是DNA甲基化導(dǎo)致了某些區(qū)域DNA構(gòu)象變化,從而影響了蛋白質(zhì)和DNA的相互作用,抑制了轉(zhuǎn)錄因子與啟動區(qū)DNA的結(jié)合效率。二是促進(jìn)阻遏蛋白的阻遏作用。三是DNA的甲基化還提高了該位點(diǎn)的突變頻率。 4真核生物轉(zhuǎn)錄元件組成及其分類 答:啟動子,轉(zhuǎn)錄模版,RAN聚合酶基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄所需的蛋白質(zhì)因子(TF),RNA聚合酶,增強(qiáng)子,反式作用因子 5.增強(qiáng)子的作用機(jī)制。 答:增強(qiáng)子是指能使與它連鎖的基因轉(zhuǎn)錄頻率明顯增加的DNA序列??赡苡?中作用機(jī)制:(1)影響模版附近的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu),導(dǎo)致DNA雙螺旋彎折或在反式因子的參與下,以蛋白質(zhì)之間的相互作用為媒介形成增強(qiáng)子魚啟動子之間“成環(huán)”連接,活化基因轉(zhuǎn)錄。(2) 將模版固定在細(xì)胞核內(nèi)特定位置,如連接在核基質(zhì)上,有利于DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶改變DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的張力,促進(jìn)RNA聚合酶在DNA鏈上的結(jié)合和滑動。(3) 增強(qiáng)子區(qū)可以作為反式作用因子或RNA聚合酶進(jìn)入染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的“入口”。 6.反式作用因子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及其對
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