高效液相色譜測(cè)定丹參滴注液中丹酚酸B含量

1、高效液相色譜測(cè)定丹參滴注液中丹酚酸B含量作者：稅丕先莊元春何兵朱悻【摘要】目的成立一種用高效液相色譜(HPLC)法測(cè)定丹參滴注液中丹酚酸B的含量的方式。方式色譜柱DikmaKromasilC18(5um,10()A250mmXmm)；流動(dòng)相為甲醇-乙睛-甲酸-水(3()：10：1：59)；流量為ml-min-1;檢測(cè)波長(zhǎng)286nm；柱溫30；進(jìn)樣量20川。結(jié)果丹酚酸B的加樣提取平均回收率為%,RSD為,重復(fù)性實(shí)驗(yàn)的RSD為%。結(jié)論該方式簡(jiǎn)即靠得住，結(jié)果穩(wěn)固，重復(fù)性好，該方式可用于測(cè)定丹參滴注液中丹酚酸B的含量?！娟P(guān)鍵詞】丹酚酸B含量測(cè)定高效液相色譜法丹參滴注液丹參滴注液收載于國(guó)家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編

2、內(nèi)科心系分冊(cè)，由丹參中提取的水溶性化合物總丹酚酸制得?？偟し铀峋哂锌垢卫w維化、抗動(dòng)脈粥樣硬化和改善記憶功能障礙等作用L13,由丹參素、丹酚酸A、B、E,原兒茶醛等各類(lèi)芳香酚酸類(lèi)化合物組成。丹參滴注液標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)丹參素鈉、原兒茶醛進(jìn)行了高效液相色譜含量測(cè)定，對(duì)其中含量高、活性強(qiáng)的丹酚酸B未進(jìn)行含量測(cè)定。咱們參照有關(guān)文獻(xiàn)2,3,用高效液相色譜柱測(cè)定丹參滴注液中丹酚酸B的含量，取得滿(mǎn)意效果。1器材儀器與試藥戴安高效液相色譜儀（P680A四元泵,PDA-100二極管陣列檢測(cè)器，TCC-10。柱溫箱，Chromcluon色譜工作站）。丹酚酸B對(duì)比品（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。批號(hào)：），丹參滴注液（安徽華源

3、生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。規(guī)格:250ml,16go批號(hào)：061112,061115,061118,061120,061201）0甲醇、乙睛為色譜純（天津四友公司），水為重蒸儲(chǔ)水，甲酸為分析純。色譜條件DikmaKromasilCl8（5p.m,100A25（）mmXmm）；流動(dòng)相:甲醇-乙睛-甲酸-水（30：1（）：1：59）;流量：ml-min-1;檢測(cè)波長(zhǎng)286nm；進(jìn)樣量2（）ulo2方式與結(jié)果溶液的配制對(duì)比品溶液的配制取丹酚酸B對(duì)比品約5mg,精密稱(chēng)定,置50ml量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml,置50ml量瓶中,加水至刻度，搖勻，得10mg3的對(duì)比品溶液。供試品溶液的

4、配制精密量取丹參滴注液(批號(hào)061112)10ml,置5()ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得。陰性樣品溶液的制備按丹參滴注液制備方式和“項(xiàng)制得不含丹參的陰性對(duì)比品溶液，備用。測(cè)定方式精密吸取上述供試品溶液與對(duì)比品溶液各20r1,別離注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算樣品的含量。方式學(xué)驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密稱(chēng)取丹酚酸B對(duì)比品適量，配成1gL-l的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)蓄液；別離吸取10,20,40,8(),100川別離置于5個(gè)1ml量瓶中，以水稀釋至刻度，混勻后別離進(jìn)樣20記錄色譜圖見(jiàn)圖1。以色譜峰面積(A)對(duì)成份濃度(C)作回歸統(tǒng)計(jì)，回歸方程為:A=-9+13,r=6,線性范圍mg-L-l

5、o穩(wěn)固性考察與精密度實(shí)驗(yàn)取濃度為mg-L-1的供試品溶液別離在0,2,4,6,8h進(jìn)樣,測(cè)得丹酚酸B供試品的峰面積RSD為,表明供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)固。取某一濃度mg-L1)供試品溶液，持續(xù)進(jìn)樣5次，測(cè)得進(jìn)樣精密度心口為。重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同一批號(hào)的丹參滴注液6份，按上述方式操作，測(cè)定丹參滴注液中丹酚酸B的含量，RSD為%。結(jié)果表明重復(fù)性良好。a²對(duì)比品b²空白c²丹參滴注液1.丹酚酸B圖1HPLC圖（略）加樣回收率實(shí)驗(yàn)取同一批號(hào)丹參滴注液（含量為mg-L-l）6份，每份約10ml,精密量取，別離加入丹酚酸B對(duì)比品適量，精密稱(chēng)定，按含量測(cè)定方式測(cè)定，計(jì)算回收率（見(jiàn)表1）

6、?？梢?jiàn)，丹酚酸B的平均回收率為%（於0=%）,符合分析方式的要求。表1加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果（略）樣品含量測(cè)定取批號(hào)別離為061112,061115,061118,061120,061201的丹參滴注液適量,按“2.2”項(xiàng)下操作，測(cè)得丹酚酸B的含量見(jiàn)表2O表2樣品含量測(cè)定（略）3討論溶劑的選擇本實(shí)驗(yàn)比較了丹酚酸B在5()%甲醇與水中的穩(wěn)固性，結(jié)果均在8h內(nèi)穩(wěn)固，而因水價(jià)廉易患，故選用水為溶劑。色譜條件的選擇中國(guó)藥典2005版，丹參片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供的色譜條件中，色譜柱選用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑。按照單位實(shí)際情形，采用不同比例的甲醇-水、甲醇-水-甲酸、乙睛-水-甲酸為流動(dòng)相進(jìn)行測(cè)試，發(fā)覺(jué)乙睛的洗脫效果優(yōu)于甲醇，流動(dòng)相中存有甲酸時(shí)的柱峰形明顯優(yōu)于流動(dòng)相中存有乙酸時(shí)的峰形，故選擇甲醇-乙脯甲酸-水(30：10：1：59)為流動(dòng)相。【參考文獻(xiàn)】1戈升榮，俞一心，謝更新.丹酚酸的藥理作用研究進(jìn)展口，中藥材,2002,25(9):683.2曹楓，馬長(zhǎng)華,喬延江.HPLC法