中藥常規(guī)檢驗

1、中藥的檢驗化化 驗驗 室室20182018年年6 6月月中藥材及其炮制品的常用檢查一般檢查限量檢查雜質雜質水分水分總灰分總灰分酸不溶灰分酸不溶灰分 浸出物浸出物 二氧化硫二氧化硫 含量測定含量測定 黃曲霉素黃曲霉素雜質的來源一是由中藥材原料中帶入； 二是在生產制備過程中引入； 三是貯存過程中受外界條件的影響，制劑的理化性質改變而產生。 雜質藥材中混存的雜質系指下列各類物質： 一、來源與規(guī)定相同，但其性狀或部位與規(guī)定不符； 二、來源與規(guī)定不同的物質； 三、無機雜質，如砂石、泥塊、塵土等。 雜質檢查法(通則2301)檢查方法1. 取規(guī)定量的供試品，攤開，用肉眼或放大鏡（510倍）觀察，將雜質揀出；

2、如其中有可以篩分的雜質，則通過適當的篩，將雜質分出。 2. 將各類雜質分別稱重，計算其在供試品中的含量（%）。 【注意】1.藥材中混存的雜質如與正品相似，難以從外觀鑒別時，可稱取適量，進行顯微、化學或物理鑒別試驗，證明其為雜質后，計入雜質重量中。 2.個體大的藥材，必要時可破開，檢查有無蟲蛀、霉爛或變質情況。 3.雜質檢查所用的供試品量，除另有規(guī)定外，按藥材取樣法稱取。雜質檢查法(通則2301)水分測定法（通則0832）第一法（費休氏法）適用于多種有機和無機物中含水的測定。第二法(烘干法) 適用于不含或少含揮發(fā)性成分的藥品。第三法(減壓干燥法) 適用于含有揮發(fā)性成分的貴重藥品。第四法(甲苯法)

3、 適用于含揮發(fā)性成分的藥品。第五法（氣相色譜法） 適用于中藥制劑中微量水分的測定。甲苯法測定水分 A 為500mL的短頸圓底燒瓶， B 為水分測定管； C 為直形冷凝管，外管長40cm。 使用前，全部儀器應清潔，并置烘箱中烘干。甲苯法測定水分 取供試品適量（約相當于含水量14ml），精密稱定，置A瓶中,加甲苯約200ml，必要時加入干燥、潔凈的沸石或玻璃珠數粒，將儀器各部分連接，自冷凝管頂端加入甲苯，至充滿B管的狹細部分。將A瓶置電熱套中或用其他適宜方法緩緩加熱,待甲苯開始沸騰時，調節(jié)溫度，使每秒鐘餾出2滴。待水分完全餾出，即測定管刻度部分的水量不再增加時,將冷凝管內部先用甲苯沖洗, 再用飽蘸

4、甲苯的長刷或其他適宜的方法，將管壁上附著的甲苯推下，繼續(xù)蒸餾5分鐘，放冷至室溫，拆卸裝置，如有水黏附在B管的管壁上，可用蘸甲苯的銅絲推下，放置，使水分與甲苯完全分離（可加亞甲藍粉末少量，使水染成藍色，以便分離觀察）。檢讀水量，并計算供試品中的含水量（%）。 灰分測定法（通則02302）1.總灰分：中藥經粉碎后加熱，高溫熾灼至灰化，稱定重量計算結果。2.酸不溶性灰分：中藥經高溫熾灼得到的總灰分加稀鹽酸處理，得到不溶于稀鹽酸的灰分，稱為酸不溶性灰分。 總灰分測定法 稱取供試品23g（如需測定酸不溶性灰分，可取供試品35g），置熾灼至恒重的坩堝中，稱定重量（準確至0.01 g），緩緩熾熱，注意避免燃

5、燒，至完全炭化時，逐漸升高溫度至500600，使完全炭化并至恒重，根據殘渣重量，計算供試品中總灰分的含量（%）。酸不溶性灰分測定法 供試品先按總灰分測定的方法測定其總灰分，然后取所得的灰分，在坩堝中注意加入稀鹽酸約10ml，用表面皿覆蓋坩堝，置水浴上加熱10分鐘，表面皿用熱水5ml沖洗，洗液并入坩堝中，用無灰濾紙濾過，坩堝內的殘渣用水洗于濾紙上，并洗滌至洗液不顯氯化物反應為止。濾渣連同濾紙移至同一坩堝中，干燥，熾灼至恒重。根據殘渣重量，計算供試品中含酸不溶性灰分的含量（%）?；曳譁y定的注意事項1. 測定前先將供試品稱取適量粉碎，使其能通過2號篩，將粉末混合均勻后再取樣。2. 如供試品不易灰化，

6、可將坩堝放冷，加熱水或10%硝酸銨溶液2ml；使殘渣濕潤，然后置水浴上蒸干，得到的殘渣再按上面所說的方法熾灼至坩堝內容物完全灰化。浸出物測定法（通則2201） 浸出物分為水溶性、醇溶性、揮發(fā)性醚三種方法；同時水溶性和醇溶性又分為冷浸法和熱浸法兩種。其方法相同，不同的是使用的溶劑；水溶性使用的是水；醇溶性除另有規(guī)定外，以各品種項下規(guī)定濃度的乙醇代替水溶劑。 1. 冷浸法 樣品加水100ml，靜置24小時后，取續(xù)濾液20ml，水浴蒸干，干燥3小時，放冷，稱定重量。 2. 熱浸法 樣品加溶劑50ml，稱定重量，靜置1小時后，連接冷凝管，加熱回流1小時。放冷，補足重量，取續(xù)濾液25ml，水浴蒸干，干燥

7、3小時，放冷，稱定重量。二氧化硫殘留量測定法（通則2331）T為什么要測定？T方法T硫磺具有漂白、增艷、防蟲等作用，某些中藥材在加工過程中有用硫磺熏蒸的習慣，殘留的S02可能影響人體健康。T從2005版藥典開始規(guī)定，中藥材不再允許使用硫磺熏蒸，并要求對其進行檢測。二氧化硫殘留量測定法（2015）A 為1000ml兩頸圓底燒瓶；B 為豎式回流冷凝管；C 為（帶刻度）分液漏斗；D 為連接氮氣流入口；E 為二氧化硫氣體導出口。另準備電熱套及高濃度氮。 取藥材或飲片細粉約10g，精密稱定，置兩頸圓底燒瓶中，加水300-400ml，連接回流冷凝管以及刻度分液漏斗，并給水。在冷凝管的上端E口處連接導氣管，

8、將導氣管插入100ml錐形瓶底部。錐形瓶內加3%過氧化氫溶液50ml作為吸收液，使用前，加3滴甲基紅乙醇溶液指示劑，并用0.01mol/L氫氧化鈉滴定液滴定至黃色 。開通氮氣，打開分液漏斗活塞，加入6mol/L鹽酸溶液10ml，立即加熱兩頸圓底燒瓶內的溶液至沸，并保持微沸；1.5小時后，停止加熱。放冷后，用氫氧化鈉滴定液滴定，至黃色持續(xù)20秒鐘不褪，并將滴定的結果用空白試驗校正。 A為供試品消耗氫氧化鈉滴定液的體積，ml；B為空白消耗氫氧化鈉滴定液的體積，ml；C為氫氧化鈉滴定液濃度，mol/L； 0.032為每1ml氫氧化鈉滴定液（1mol/L）相當的二氧化硫的質量，g。 W為供試品的重量，

9、g；供試品中二氧化硫殘留量（mg/g）=WCBA10032. 0)(6含量（高效液相）測定法（通則0512）T為什么要測定？為什么要測定？T方法簡述方法簡述T注意事項注意事項中藥組成復雜，產生療效的不是某單一成分，檢測任何一種活性成分均不能反映中藥的整體療效。但是借鑒化藥質量控制模式，測定某一味藥味的有效成分、活性成分、指標性成分的含量的方法，對于控制中藥質量起著不可替代的重要作用。通過測定中藥中有效成分、毒性成分或某些指標性成分的含量來衡量其生產工藝的穩(wěn)定性和中藥材的質量優(yōu)劣，以保證中藥的質量，達到臨床用藥安全、有效的目的。 檢查含量的必要性 本法是將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶

10、劑、 緩沖劑等作為流動相, 用泵將流動相壓入裝有填充劑的色譜柱, 注入供試品, 經流動相帶入柱內, 用記錄儀記錄色譜圖, 從而達到定性及定量的目的。本法應用范圍比氣相色譜廣, 只要樣品能制成溶液, 就可進行分析, 尤其是中藥的含量測定, 更為適用。 高效液相測定法的原理1、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 根據中國藥典項下對各品種的規(guī)定，選擇色譜柱、流動相、檢測波長；并核對檢測后的理論板數。2、對照品溶液的制備 根據中國藥典項下對各品種的規(guī)定，按其要求完成對照品的稱重、配制。3、供試品溶液的制備 根據中國藥典項下對各品種的規(guī)定， 按其要求完成樣品的粉碎、稱重、提取、制備。4 測定法 分別將對照品與供試

11、品溶液按中國藥典要求注入色譜儀，通過所得數據用外標法進行計算，得出結果并打印保存圖譜。高效液相測定法方法簡介高效液相測定法注意事項1、貯液器：盡可能使用HPLC的溶劑和試劑。含有緩沖鹽和非HPLC的流動相一定要通過0.5um的過濾器。改變流動相時應防止交叉污染，陳舊的流動相和用久了的試劑瓶應定期廢棄，防止生長微生物和組分改變。貯器內壁定期清洗，里面的附件要經常更換。2、泵： 密封墊圈是最易磨損的部件。密封墊圈的損壞可引起系統(tǒng)的許多故障。最好3個月?lián)Q一次墊圈。要注意防止因泵堵塞造成的壓力過高而損壞柱塞桿或燒壞電機。延長墊圈壽命的措施（1）每次把泵的緩沖液洗干凈，防止鹽沉積，泵要浸在無緩沖液的溶液

12、或有機溶劑中（2）用HPLC級試劑3、進樣器：停機后要用溶劑沖洗干凈進樣器內的殘留的樣品和緩沖鹽，防止無機鹽沉積和樣品微粒造成閥轉子面磨損或阻塞。嚴禁用尖針頭進樣。4、柱：防止柱性能下降的措施：（1）溶劑的化學腐蝕性不能太強；（2）避免微粒在柱頭沉降；（3）泵上要裝壓力限制器，防止壓力過高沖擊過大；（4）流動相ph7時用大粒度同種填料作預柱（5）柱頭加燒結不銹鋼濾片，需要時加保護柱。采用正確的制備樣品方法和經常清洗柱也能延長壽命。 柱在不用時要保存好，要洗去緩沖液防止生長微生物。應加入大于10的有機溶劑，將柱兩端用蓋擰緊，保持柱填料濕潤不造成裂縫。5、檢測器：保持清潔，用后連同柱一起沖洗。提倡

13、不定期用強溶劑反向沖洗檢測池（拆開柱）用脫氣流動相，以防空氣泡卡在池內。不用時不開燈。高效液相注意事項由色譜柱引起的故障及解決辦法故故 障障現(xiàn)現(xiàn) 象象解決辦法解決辦法過濾片阻塞壓力增高 N下降 峰形差倒柱沖洗或換過濾片柱頭塌陷峰分叉 N下降修補柱頭可恢復80%以上樣品阻塞高壓用能溶解樣品的溶劑沖洗柱強吸附的樣品N下降 保留減小強溶劑反沖黃曲霉毒素測定法（通則2351）1.為什么要測定？2.方法3.注意事項檢查黃曲霉素的必要性 中藥材采集后干燥或貯存不當，或在制備和加工過程中處理不善，可能污染在自然界普遍存在的黃曲霉而產生黃曲霉毒素，黃曲霉毒素具有極強的毒性和致癌性，故需對中藥材及中藥制劑中黃曲

14、霉毒素含量進行控制。黃曲霉的基本結構 黃曲霉毒素是一類結構相似的化合物，其基本結構都有二呋喃和香豆素。黃曲霉毒素在紫外線照射下，都能了出熒光，根據熒光顏色、Rf值及結構等不同，分別命名為B1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、Q等。 B B1 1 B B2 2 G G1 1黃曲霉毒素測定法（2015） 本法系用高效液相色譜法（通則0512）測定藥材、飲片及制劑中的黃曲霉毒素（以黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2總量計），除另有規(guī)定外，按下列方法測定。規(guī)定：B15g/kg，G2+G1+B2+B1的總量 10g/kg。黃曲霉毒素品種決明子柏子仁地龍胖大海肉豆蔻蓮子遠志蜈蚣陳皮檳榔桃仁酸棗仁麥芽僵蠶

15、大棗薏苡仁黃曲霉毒素測定法（2015）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-水（40：18：42）為流動相，流速每分鐘0.8ml；采用柱后衍生法檢測，衍生溶液為0.05%的碘溶液（取碘0.5g，加入甲醇100ml使溶解，用水稀釋至1000ml制成），衍生化泵流速每分鐘0.3ml，衍生化溫度70；以熒光檢測器檢測，激發(fā)波長ex=360nm（或365nm），發(fā)射波長em=450nm。兩個相鄰色譜峰的分離度應大于1.5。黃曲霉毒素測定法（2015）混合對照品溶液的制備 精密量取黃曲霉毒素混合標準品（黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2標示濃度分別為1.0g/ml、0.3

16、g/ml、1.0g/ml、0.3g/ml）0.5ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，作為儲備液。精密量取儲備液1ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，即得。黃曲霉毒素測定法（2015）供試品溶液的制備 取供試品粉末約15g（過二號篩），精密稱定，加入氯化鈉3g，置于均質瓶中，精密加入70%甲醇溶液75ml，高速攪拌2分鐘（攪拌速度大于11000轉/分鐘），離心5分鐘（離心速度2500轉/分鐘），精密量取上清液15ml，置50ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45m）濾過，量取續(xù)濾液20.0ml，通過免疫親合柱（AflaT-estP）,流速每分鐘3ml，用水20ml洗脫，洗脫液棄去，使空氣進入柱子，將水擠出柱子，再用適量甲醇洗脫，收集洗脫液，置2ml量瓶中，并用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。黃曲霉毒素測定法（2015）測定法 分別精密吸取上述混合對照品溶液5l、10l、