ELISA技術(shù)方法原理

1、酶聯(lián)免疫吸附法(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)ELISA的發(fā)展50年代的免疫熒光（IFA）和60年代的放射性免疫（RIA）分析技術(shù)之后，70年代初又建立了用酶來標(biāo)記抗原或抗體的分析技術(shù)01971年此項技術(shù)由瑞典學(xué)者Engvall和Perlmann,荷蘭學(xué)者VanWeeman和Schuurs分別報道，將免疫技術(shù)發(fā)展為檢測體液中微量物質(zhì)的固相免疫測定方法，稱為酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA）ELISA邱頻使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性結(jié)合在固

2、相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)在ELISA方法中有三個必要的式劑：(1)固相的抗原或抗體，即“免疫吸附劑”(immunosorbent)(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體，稱為“結(jié)合物”(conjugate)(3)酶反應(yīng)的底物用于臨床檢驗的ELISA主要有以下幾種類型（雙抗體夾心法測抗原（常用）夾心法雙抗原夾心法測抗體（幾乎不用）間接法測抗體（常用）競爭法測抗原兄爭法一競爭法測抗體0捕獲包被法測抗體親和素-生物素ELISA法（放大信號作用）包被特異性抗體（已固定）雙抗體夾心法原加入待測樣品孵育加酶標(biāo)特異孵

3、育洗滌底物顯任基本工是：利用連接于固相載體上的抗體和酶頻酶聯(lián)免疫專去酶標(biāo)儀450nm例波長450/630nm-OD值加終液50337育溫15分鐘加底物液Affi底物液B各503根據(jù)校準(zhǔn)品濃度對應(yīng)的OD值，使用雙對數(shù)線擬合方式log （x） -log（Y）計算結(jié)果=concentration （濃度）x樣品稀釋倍數(shù)=樣品最終濃度洗板5次,37。（2育溫（）空|酶工作液50ul 高特異性高敏感性鼠人抗（）單克郵體作為體體分別與樣品中被檢測抗原分子上兩個抗原決定簇結(jié)合，形成固相抗體抗原酶標(biāo)抗體免疫復(fù)合物。復(fù)合物的形成,與待測抗原的含成正比。測定復(fù)合物中的酶作用于加入的底物后生成的有色物質(zhì)（OD值），

4、即可確定待測抗原含=。CRP、ALB、BTAA雙抗夾去適用范待測抗原須有兩個可以與抗體結(jié)合的部位，其一端與包被于固相載體上的抗體結(jié)合，另一端與酶標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合。此法適用于檢驗各種二價或二價以上的大分子抗原，如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG、CRP、ALB、BTAA等。不能用于分子量小于5000D的半抗原或小分子單價抗原的測定。反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進行包被和制備酶結(jié)合物，以檢測相應(yīng)的抗體。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋，可直接用于測定。乙肝標(biāo)志物中HBsAb的檢測常采用本法。關(guān)鍵在于根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同制備酶標(biāo)抗原。酬撅髓蚌m（1）將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原

5、，洗滌。（2）加稀釋的受檢樣本，其中的特異抗體與固相抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物，蜉育洗滌。（3）加酶標(biāo)抗體:與固相復(fù)合物中的抗體結(jié)合，從而使該抗體間接地標(biāo)記上酶，蜉育洗滌。（4）加底物顯色：顏色深度代表標(biāo)本中受檢抗體的量。雙抗原夾心法目前產(chǎn)品應(yīng)用不多。測抗體應(yīng)用間接法比較多固原抗體酶標(biāo)抗原免疫復(fù)間接法是檢測抗體最常用的方法。原理：利用酶標(biāo)記的抗體檢測已與相結(jié)合的間接法測定抗體示意圖受檢抗體，故稱為間接法。檢抗體+c。川相抗原本法主要用于對病原體抗體的檢測而進行傳顆的診斷。間接法的優(yōu)點是只要蝴包被抗原就可利用同一酶頻體檢測相應(yīng)抗體。間接法成功的關(guān)鍵在于抗原的純度。特別應(yīng)注意除去能與T健康人

6、血清發(fā)生反應(yīng)的雜質(zhì)。若抗原中含有無關(guān)蛋白，也會因竟?fàn)幬蕉吧伟恍Ч?。加ij&物顯色相抗體【相抗體mi .力n底物顯色、竟合法賴q定可、笠 ,于抗原示意圖如受檢標(biāo)本中無抗原，則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合。如受檢標(biāo)本中含有抗原，則與酶標(biāo)抗原以同樣的機會與固相抗體結(jié)合，競爭性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體結(jié)合 的機會，使酶標(biāo)抗原與固相載體的結(jié)合量減少。參考管中只加酶標(biāo)抗原，孵育后，酶標(biāo)抗原與固相抗體的結(jié)合最充分。參考管中由于結(jié)合的酶標(biāo)抗原最多，故顏色最深。待測管顏色越淡，表示標(biāo)本中抗原含量越多。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差，代表受檢標(biāo)本抗原的量。一競爭法測o待檢抗原。e8臉標(biāo)記,的抗體+競

7、爭法測P當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去，或不易得到足夠的純化抗原時, 可用此法檢測特異性抗體。P標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競爭與相抗原結(jié)合。標(biāo)本中抗體量越多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少，因此陽性反應(yīng)呈色淺于陰性反應(yīng)。捕獲包被法測p樣品中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時存在，后者會干擾IgM抗體的測定。因此測定IgM抗本多用捕獲法。p先將所有樣品IgM（包括特異性IgM和非特異性IgM）固定在固相上，在去除IgG后再測定特異性IgM。乍步驟如下：(1)將抗IgM抗體連接在固相載體上，形成固相抗IgM,洗滌。(2)加入稀釋的待測標(biāo)本：孵育后樣品中的IgM抗體被固相抗體捕獲，洗滌。

8、(3)加入特異性抗原試劑：其僅與固相上的特異性IgM結(jié)合，洗滌。(4)加入針對抗原的酶標(biāo)抗體：使之與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)結(jié)口/7u/zto(5)加底物顯色：如有顏色顯示，則表示標(biāo)本中存在特異性IgM抗體，是為陽性反應(yīng)。標(biāo)本（含MM）A上抗原與將再抗牛結(jié)合區(qū)院居林抗體物/底親和素生物素ELISA法親和素是一種糖蛋白，可由蛋清中提取。每個分子由4個亞基組成，可以和4個生物素分子親密結(jié)合。生物素(biotin)又稱維生素H,存在于蛋黃中。可與蛋白質(zhì)、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產(chǎn)物。親和素與生物素的結(jié)合，雖不屬免疫反應(yīng)，但特異性強，親和力大，形成一種極為穩(wěn)定的復(fù)合體。把親和素和生物素

9、與ELISA偶聯(lián)起來，就可大大提高ELISA的敏感度。高特異性高敏感性人（稀釋后的血清樣本加終止液稀釋后的辣根過氧化物酶標(biāo)記鏈騫親和素稀釋后的生物素標(biāo)記抗體）單克隆抗體作為包蛔體方法適用于優(yōu)點注意雙抗體夾心法測抗原雙抗原夾心法測是檢測抗原最常用的方法,適用于檢驗各種蛋白質(zhì)等乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢測常采用本法特異性高不能檢測W分子抗原及的原間接法測抗體是檢測抗體最常用的方法,本法主要用于對病原體抗體的檢測而進行傳染病的診斷受需稀釋，可糜用于測定，因此其敏感度相對高于間接法礴包蜘嬴可利用同一酶楓？i抗檢測相應(yīng)抗體法測抗原分子抗原如激素和藥物等ELBA測定多用此法?？?只有一次保溫洗競爭法測抗體當(dāng)

10、抗原材料中的物質(zhì)不易除去，或不易得到足夠的純化抗原時，可用此檢驗特異性抗體快，只有一次保溫洗滌i通捕獲包被法骯體主要用于血清中飄抗體3mg分（如igM）蹣定可以除去igG的干擾ABS-ELISAMELISAABS-ELISA法多用了兩種試劑，增加了操作步驟，在I臨床檢驗中ABSELISA應(yīng)用不多。放大信”用，敏感度大大提高關(guān)鍵在于酶頻原的制備，應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同，尋找合適的標(biāo)記方法。關(guān)鍵抗原的純度另一種干擾因素為正常血清中所含的度的特異性抗體需麒多的酶標(biāo)城原競爭抗體的特異性和親和力大小的影響;競爭用抗體均為香型抗原免疫動物所得，與集體感染病毒后所產(chǎn)生的抗議有所差異。目前HBeAb和HBcAb

11、的臨床檢測中，暢游難以解釋的測定結(jié)果出現(xiàn)類風(fēng)濕因子（RF）同樣能干擾捕獲包被法測定igM抗體，導(dǎo)致假陽性反應(yīng)中和IgG的間接法已收到青睞多用了2個試劑，步驟增加，進行親和素和生物素稀釋時，需在使用前幾分鐘,操作變題化學(xué)發(fā)光免疫分析(chemiluminescenceimmunoassay,CLIA)入直接化學(xué)發(fā)光免疫分析、化學(xué)發(fā)光酶免疫分析三、電化學(xué)發(fā)光免疫分析一、直接化學(xué)發(fā)光免疫分析:用口丫咤酯直接標(biāo)記抗體（抗原），與待測標(biāo)本中相應(yīng)的抗原（抗體）發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體-待測抗原-口丫咤酯標(biāo)記抗體復(fù)合物，這時只需加入氧化劑（此。2）和NaOH使成堿性環(huán)境，口丫咤酯在不需要催化劑的情況

12、下分解、發(fā)光O由集光器和光電倍增管接收、記錄單位時間內(nèi)所產(chǎn)生的光子能，這部分光的積分與待測抗原的量成正比，可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計算出待測抗原的含量。直接化學(xué)發(fā)光的機理磁微?？贵w夾心法+被測抗原帶Y喔酯標(biāo)記物抗體發(fā)光(1) 加入電。2 (pH10)磁微粒技術(shù)磁微粒模式圖特點抗原和抗體結(jié)合與未結(jié)合部二、化學(xué)發(fā)光酶免疫分析化學(xué)發(fā)光酶免疫分析（chemiluminescenceenzymeimmunoassay,CLEIA）是用參與催化某一化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的酶如辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（ALP）來標(biāo)記抗原或抗體,在與待測標(biāo)本中相應(yīng)的抗原（抗體）發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體-待測抗原-酶標(biāo)記抗體復(fù)

13、合物，經(jīng)洗滌后，加入底物（發(fā)光劑），酶催化和分解底物發(fā)光，由光量子閱讀系統(tǒng)接收，光電倍增管將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柌⒓右苑糯?，再把它們傳送至計算機數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，計算出測定物的濃度。該分析系統(tǒng)采用辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記抗體（或抗原）,在與反應(yīng)體系中的待測標(biāo)本和固相載體發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體-待測抗原-酶（HRP）標(biāo)記抗體復(fù)合物，這時加入魯米諾發(fā)光劑、H2O2和化學(xué)發(fā)光增強劑使產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光。普恩光德辣根過氧化物酶標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光免疫分析半自動微孔板化學(xué)發(fā)光儀一加混合的放光液A和B一洗板酶工作液37t育溫（）分鐘-血清樣本RLU數(shù)值根據(jù)校準(zhǔn)品濃度對應(yīng)的光子數(shù)，使用雙對數(shù)線擬合方式log（x

14、）-log（Y）計算結(jié)果=concentration（濃度）x樣品稀釋倍數(shù)=樣品最終濃度高特異性高敏感性人（）單克隆抗體作為包被抗體CRP、ALB、BTAA雙抗體夾心復(fù)合物洗滌清除片國抗體包被抗原固相載體HRP標(biāo)記抗體雙抗體夾心復(fù)合物贈強劑魯米諾魯米諾發(fā)光堿性磷酸酶標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光免疫分析/該分析系統(tǒng)以堿性磷酸酶標(biāo)記抗體（或抗原）,在與反應(yīng)體系中的待測標(biāo)本和固相載體發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體待測抗原酶標(biāo)記抗體復(fù)合物，這時加入AMPPD發(fā)光劑,堿性磷酸酶使AMPPD脫去磷酸根基團而發(fā)光。抗原抗體包被的磁珠Jr14標(biāo)記抗管雙抗體夾心復(fù)合物洗滌清除片回雙抗體夾心復(fù)合物AMPD發(fā)光AMPPD三、電

15、化學(xué)發(fā)光免疫分析電化學(xué)發(fā)光免疫分析(electrochemiluminescenceimmunoassay,ECLIA)是以電化學(xué)發(fā)光劑三聯(lián)戲咤釘標(biāo)記抗體(抗原)，以三丙胺(TPA)為電子供體，在電場中因電子轉(zhuǎn)移而發(fā)生特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，它包括電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個過程。在電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)中，磁性微粒為固相載體包被抗體（抗原），用三聯(lián)此咤釘標(biāo)記抗體（抗原），在反應(yīng)體系內(nèi)待測標(biāo)本與相應(yīng)的抗原（抗體）發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成磁性微粒包被抗體.待測抗原-三聯(lián)無咤好標(biāo)記抗體復(fù)合物，這時將上述復(fù)合物吸入流動室，同時引入TPA緩沖液。當(dāng)磁性微粒流經(jīng)電極表面時，被安裝在電極下面的電磁鐵吸引住，而未結(jié)合的標(biāo)記

16、抗體和標(biāo)本被緩沖液沖走。與此同時電極加壓，啟動電化學(xué)發(fā)光反應(yīng),使三聯(lián)口比咤釘和TPA在電極表面進行電子轉(zhuǎn)移，產(chǎn)生電化學(xué)發(fā)光，光的強度與待測抗原的濃度成正比。電化學(xué)發(fā)光免疫分析示意圖電化學(xué)發(fā)光免疫測發(fā)光是指分子或原子中的電子吸收能量后，由基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)，然后再返回到基態(tài)，并釋放光子的過程?；瘜W(xué)發(fā)光是吸收了化學(xué)反應(yīng)過程中所產(chǎn)生的化學(xué)能使分子激發(fā)而發(fā)光?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析是將化學(xué)發(fā)光與免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于檢測微量抗原或抗體的標(biāo)記免疫分析技術(shù)，分為直接化學(xué)發(fā)光免疫分析，化學(xué)發(fā)光酶免疫分析和電化學(xué)發(fā)光免疫分析。標(biāo)記免疫學(xué)發(fā)展歷程 放射免疫（精度：10-12mol/L） 酶聯(lián)免疫（精度；IOmol/L）

17、化學(xué)發(fā)光（精度：UP5moi兒）-電化學(xué)發(fā)光（精度：107moi/L）時間分辨熒光（精度；10-i8mol/L）生物芯片（未知）幾種標(biāo)記免疫技術(shù)比較:靈:敏g仙龍L)放免猊光對臨床診斷起了革命性的貢獻,是一項較為成熟的診斷技術(shù)Q夾心法、競爭法的標(biāo)記 原理為以后的檢測技術(shù) 的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。放射性免疫分析法（RIA）e-應(yīng)用缺點學(xué)放免H60年代問世以來放射性（D,對環(huán)境的污染及對身體的危害，已經(jīng)為重視環(huán)保的國家逐步取消。（如整個歐洲僅尚存兒個放免試驗室）?1251的半衰期短而導(dǎo)致其試劑有效期短.標(biāo)記物”51的穩(wěn)定性差，導(dǎo)致試劑盒批間、批內(nèi)的變異較大；標(biāo)準(zhǔn)曲線有效期短，必須每次定標(biāo)，造成浪費。等操

18、作繁瑣，出報告時間長.無法保存?zhèn)溆肣應(yīng)用酶免疫分析法（ELISA）缺點酶免的最大優(yōu)勢.在于避免了對環(huán)境和人體危害。翁試劑有效期較長。等衍生技術(shù)：熒光酶免疫分析增強化學(xué)發(fā)光酶免疫技術(shù) 翁曾經(jīng)一度被認(rèn)為是取代放 免的檢測手段。靈敏度、重復(fù)性不及放免，易造成 漏檢和假陽性口因酶的純度和反應(yīng)過程容易受環(huán)境因素影響，導(dǎo)致穩(wěn)定性不好。化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）應(yīng)用 單個樣本檢測速度快，適合做 急診。 靈敏度較高。 自動化程度高。名儀器種類： 拜耳一ACS180系列 雅培一AXSYM 貝克曼ACCESS 德普一IMMULITE缺點樣品不能重復(fù)檢測；出現(xiàn)故障則整 批試劑及血樣報廢Q 本底較高，易受環(huán)境物質(zhì)

19、干擾。-I 儀器故障率較高。 標(biāo)準(zhǔn)曲線穩(wěn)定性較差，需多次定標(biāo)。 檢測精度不高，在超微量分析及早 期診斷方面能力不足。 非開放性試劑;試劑價格高。電化學(xué)發(fā)光免疫分析(ECL)ey胃卜尸二一.十十.應(yīng)用缺點 80年代末期問世的新型化學(xué) 發(fā)光免疫分析方法口,基本原理：根據(jù)三聯(lián)吐鹿釘 RMbpy%和三丙胺在電場觸 發(fā)下產(chǎn)生發(fā)光的化學(xué)發(fā)光反 應(yīng)口本底較小，靈敏度較高、線 性范圍較寬。儀器檢測速度慢(羅氏公司) ECL101060測試/小時 ECL2010 90測試/小時 非開放性試劑系統(tǒng)、不能做 科研。試劑價格過高.總結(jié)方法優(yōu)點缺點放射免疫試劑成本低，靈敏度較高操作繁瑣費時，放射性污染，有效期短酶聯(lián)免疫

20、避免了對環(huán)境和人體的危害，試劑成本低，操作簡單靈敏度低/不穩(wěn)XE化學(xué)發(fā)光操作簡單,成本較低,靈敏度較高，試劑較穩(wěn)定工作曲線隨時間漂移，僅能一次發(fā)光，易受環(huán)境干擾時間分辨靈敏度較高，試劑較穩(wěn)定操作復(fù)雜，發(fā)光時間短，試劑成本高，儀器維護費用較高電化學(xué)發(fā)光靈敏度較高，試劑較穩(wěn)定操作復(fù)雜，試劑成本高，儀器維護費用較高，有本底干擾免疫比濁法相較膠體金，免疫層析，免疫擴散，火箭電泳，凝膠乳集更靈敏抗原或抗體量大大過剩,出現(xiàn)可溶性復(fù)合物造成誤差；應(yīng)維持反映管中抗體蛋白過剩，易收到血脂影響；靈敏度低POCTPOCT是poin-of-caretesting的縮寫，目前國內(nèi)尚無統(tǒng)一中文譯名，籠統(tǒng)而言是指在病人旁邊

21、分析病人標(biāo)本的一種檢驗技術(shù)，它能在床旁、護理部、病房或任何其它在中心實驗室之外的地方進行，因此被稱為靠近病人的測試、輔助性測試、床旁測試、另處檢驗、分散化檢驗等等。總之，如果測試不在中心實驗室做,并且它是一個可移動的系統(tǒng),就可以稱為POCT,其主要特點是操作簡單、結(jié)果快速。應(yīng)用POCT檢傳染性疾病診斷發(fā)熱病人的0舉 規(guī)檢碘U對鑒別 細百病存感染比 單一則更特異性N肝五項-HCV、梅等、H I Vc優(yōu)生優(yōu)肯的I g M五項，決速檢鐘卡第疫分析蛋白芯片的i可世。HD L C比色法安港法）檜蛤、電解質(zhì)檢照、潛血試驗等的編除裝化的法.曲惻血楣血液婢固試縫 吟則術(shù)后雁血.血栓診斷.評估加溯藥物治果檢斗則

22、尿胃呈白蛋白斤爭優(yōu)生優(yōu)育提供 技術(shù)支招和保 證血幻在白及血沃試蛤代替中游室的不使和等翎U定:曲皓中的忌、膽固酉室含量血液氣體監(jiān)喇血F分析技術(shù)要求樣本在采出后的最初時間內(nèi)伸到測定.以保證獲得的I數(shù)批具有高的可信庭心臟標(biāo)志物檢跪快速床邊檢測腕病病人心、肌打死的數(shù)J更指標(biāo)，育苣近法、變:交手地評他心肌楝死病人的死亡危險性一、POCT的優(yōu)點1、儀器或試劑體積小、攜帶方便、容易使用和出結(jié)果快速POCT最主要特點是強調(diào)出結(jié)果快速，大大縮短了實蛉結(jié)果周轉(zhuǎn)時間。對于急診治療和搶救的病人，這些病人往往情況危急且病因不明，而傳統(tǒng)的臨床檢驗室測量時間一般要15分鐘以上，POCT一般在5分鐘以內(nèi)即可完成測試，醫(yī)生根據(jù)

23、POC雁俱的信息，對病人及時作出初步診斷并擬定救治方案，必將減少住院時間，降低發(fā)病率廄亡率，產(chǎn)生很大的社會效益和經(jīng)濟效益。同時對于一些需要長期監(jiān)控的慢性病,如糖，尿病的病人可以方便地按照醫(yī)生的要求由病人自己或家屬進行血糖和，尿糖的監(jiān)控。2、個性化服務(wù)的最佳體現(xiàn)醫(yī)生根據(jù)癥狀開化險單，門診病人尤其是對于急診科的病人，絕大多數(shù)的癥狀都是原始的，沒有經(jīng)過藥物或手術(shù)處理，醫(yī)生此時開的化驗項目都是針對當(dāng)時的癥狀的，這時的化臉結(jié)果更能反應(yīng)病人的真實情況,對醫(yī)生的正確診治將提供非常有益的幫助。檢險人員可即時報告給果利于和病人當(dāng)面交流,體現(xiàn)了快速滿意的人性化服務(wù)。3.PDQT與臨床試蛉室的比較幅床試較室與FOC

24、T的主要項目不同點比較臨洋線駛室EOCT周轉(zhuǎn)時間慢快標(biāo)本鑒定復(fù)雜詢單標(biāo)本處理通常者要不需要血標(biāo)本而渚，rinM定全而校正頻繁而且煩瑣不頻整并且尚單試制需要酉己制隨時口用消耗品相對少相對經(jīng)檢測儀復(fù)雜詢單又寸操作者的要求叁1k人員普通人亦可以指個試驗花費1氐高實蛉結(jié)果旗里C=Bnsn一般二、POCT的缺點人質(zhì)量控制體系不完善目前雖有不少報道證明了FOCT的優(yōu)越性.但缺乏嚴(yán)密的對照其蛉，因而很難說明問題,所以加強這方面的研究對明確如何合理應(yīng)用PQCT是至關(guān)重要的，應(yīng)該對其地位和用途適當(dāng)把握。否則任何濫用將把事物推向錯誤的維端。而且目前尚未形成嚴(yán)格的質(zhì)量保證體系和管理去見范3所以實險結(jié)果質(zhì)量不易保證。

25、文駿室結(jié)果質(zhì)量必須有助于優(yōu)質(zhì)的醫(yī)療服務(wù),不準(zhǔn)確和不可靠的結(jié)果甚至比不作測試更糟。對于POC1結(jié)果可靠性的諸多爭議s廠商和使用者都應(yīng)予以重視。質(zhì)量控制的難點在于不同于以往的均質(zhì)的,液相試劑,一批試劑可作成千上萬個標(biāo)本，質(zhì)量是一致的，而現(xiàn)在FOCTW一個測試單元都是獨立的，怎么保證每一批產(chǎn)品，每個測試單元質(zhì)量都是一樣的？為了改迸此問題，一種對患者測試數(shù)據(jù)具有儲存、回放、分析、現(xiàn)察和制作質(zhì)控圖表的儀器的產(chǎn)生是必要的，金工E等人已經(jīng)嘗試了一種數(shù)據(jù)管理軟件用于解決此問題。2、檢驗成本偏高FQCT所采用的方法都是凝聚著物理、化學(xué)、弟疫、分子生物學(xué)、計算機科學(xué)等的尖端科技，同時PQCT一股都是單個實險測試單個項目為主，這和我們傳統(tǒng)的檢險科(或中心實瞼室)集中處理、組合處理病人樣本相比，成本會高出許多。然而衛(wèi)生經(jīng)濟學(xué)的宗旨是投資有限的資源，以期達到最大的健康利益。因此欲以用高成本的FOC儂瞼獲取高利潤的做法是不可取的,更不能以此來取得較可觀的利益。3,操作者的技術(shù)水平參差不齊POCT的操作者應(yīng)是經(jīng)過培訓(xùn)合格的專業(yè)或非專業(yè)檢瞼人員或非檢蛉醫(yī)務(wù)人員,他們必須理解有關(guān)的檢測厚理并能熟練操作，還應(yīng)具備標(biāo)本采集、質(zhì)量控制、結(jié)果記錄和判斷、儀器保養(yǎng)、試劑保存等彖方面的知識和技能。然而，目前仍然有很終P