他汀個(gè)體化檢測(cè)的臨床意義

1、精選文檔他汀個(gè)體化基因SLCO1B1和ApoE多態(tài)性診斷的介紹【項(xiàng)目背景】汀類藥物分為自然化合物(如洛伐他丁、辛伐他汀、普伐他汀、美伐他汀)和完全人工合成化合物(如氟伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、羅伐他汀、pitavastatin)是最為經(jīng)典和有效的降脂藥物，廣泛應(yīng)用于高脂血癥的治療。他汀類藥物(statins)是羥甲基戊二酰輔酶A（HMG-CoA）還原酶抑制劑，此類藥物通過競(jìng)爭(zhēng)性抑制內(nèi)源性膽固醇合成限速酶(HMG-CoA)還原酶，阻斷細(xì)胞內(nèi)羥甲戊酸代謝途徑，使細(xì)胞內(nèi)膽固醇合成削減，從而反饋性刺激細(xì)胞膜表面(主要為肝細(xì)胞)低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)

2、受體數(shù)量和活性增加、使血清膽固醇清除增加、水平降低。自1987年起，他汀開頭應(yīng)用于臨床，旨在防范心腦血管大事，處方量很大。因而，臨床對(duì)于他汀的平安性和預(yù)后始終存在顧慮，特殊是他汀與肌肉平安性的問題，嚴(yán)峻時(shí)可致命，雖然發(fā)生率很低，但卻直接影響患者的生存質(zhì)量及預(yù)后，且可影響患者是否應(yīng)當(dāng)長(zhǎng)期服用他汀的選擇。爭(zhēng)辯表明，肌肉平安性與他汀代謝中的關(guān)鍵酶SLCO1B1基因編碼的OATP1B1親密相關(guān)【1】，有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽（OATP1B1）參與多種藥物的轉(zhuǎn)運(yùn)，在他汀藥物代謝中負(fù)責(zé)將血液中的藥物轉(zhuǎn)移至肝臟直接發(fā)揮藥效或代謝轉(zhuǎn)化成為有活性的物質(zhì)。SLCO1B1定位于12號(hào)染色體，爭(zhēng)辯顯示SLCO1B1基因具有

3、遺傳多態(tài)性，其中388A>G、521T>C是兩種常見的單核苷酸多態(tài)性，可以形成4種單倍型SLCO1B1*1a（388A-521T）、SLCO1B1*1b（388G-521T）、SLCO1B1*5（388A-521C）和SLCO1B1*15（388G-521C）。突變型SLCO1B1基因會(huì)引起編碼的OATP1B1轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白活力減弱，表現(xiàn)為肝臟攝取藥物力量降低，引起他汀類藥物血藥濃度上升，增加橫紋肌溶解癥或肌病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。爭(zhēng)辯表明，他汀的療效及預(yù)后與載脂蛋白ApoE親密相關(guān)【2】，載脂蛋白E（ApoE）通過多種途徑參與機(jī)體的脂質(zhì)代謝調(diào)整，是影響機(jī)體血脂水平的重要內(nèi)在因素。ApoE多肽被認(rèn)

4、為是高脂蛋白血癥及動(dòng)脈粥樣硬化性血管病的易感候選基因，與冠心病【3】、老年癡呆【4】等疾病風(fēng)險(xiǎn)親密相關(guān)，人類ApoE基因定位于19號(hào)染色體上，主要有兩種單核苷酸多態(tài)性526C>T和388T>C，可以形成3種單倍型分別是ApoE3（388T-526C）、ApoE2（388T-526T）、ApoE4（388C-526C）。文獻(xiàn)報(bào)道，ApoE4攜帶者患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)要高40%，并且他汀類藥物對(duì)ApoE4攜帶者療效往往不佳或無療效【2】，而對(duì)ApoE2攜帶者的降脂作用最強(qiáng)?！痉椒ㄔ怼勘井a(chǎn)品使用的方法為多重?zé)晒舛縋CR技術(shù)，該技術(shù)基于熒光定量PCR平臺(tái)，首先針對(duì)SNP位點(diǎn)上下游設(shè)計(jì)特異性引

5、物，分別針對(duì)野生型及突變型位點(diǎn)設(shè)計(jì)不同熒光基團(tuán)標(biāo)記的特異性探針，然后對(duì)引物及探針進(jìn)行科學(xué)的配比組合，配置SNP位點(diǎn)檢測(cè)體系，通過熒光定量PCR儀對(duì)臨床樣本DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，同時(shí)收集擴(kuò)增信號(hào)，假如信號(hào)為野生型探針信號(hào)，那么樣本為純合野生型；假如信號(hào)為突變型探針信號(hào)，那么樣本為純合突變型；假如信號(hào)同時(shí)有野生型及突變型探針信號(hào)，那么樣本為雜合突變型。該方法及相關(guān)產(chǎn)品具有以下明顯優(yōu)勢(shì)：1.操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)時(shí)間短、結(jié)果易判讀；2.特異性及靈敏度更高，確保結(jié)果客觀精確；3.可實(shí)現(xiàn)一管檢測(cè)一個(gè)SNP位點(diǎn)，通量大；4.具有UNG防污染體系，可有效預(yù)防臨床氣溶膠污染，避開假陽性；5.具有獨(dú)特的內(nèi)標(biāo)系統(tǒng)，可監(jiān)控

6、操作過程；6.具有弱陽性對(duì)比及空白對(duì)比，可監(jiān)控試劑及環(huán)境質(zhì)量。原理示意圖【適應(yīng)癥】心內(nèi)科（服用他汀患者的個(gè)體化基因診斷，用于風(fēng)險(xiǎn)猜測(cè)、療效及預(yù)后）體檢科、老年科（用于冠心病、老年癡呆等發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)猜測(cè)，供應(yīng)健康管理方案）【臨床意義】SLCO1B1基因檢測(cè)的位點(diǎn)為388A>C、521T>C，其可形成4種單倍型*1a、*1b、*5、*15，SLCO1B1基因編碼的蛋白主要參與藥物的轉(zhuǎn)運(yùn)，負(fù)責(zé)將血液中的藥物轉(zhuǎn)移至肝臟中直接發(fā)揮藥效或代謝轉(zhuǎn)化為有活性的物質(zhì)。突變型SLCO1B1基因引起自身轉(zhuǎn)運(yùn)活力減弱，表現(xiàn)為肝臟攝取藥物力量降低，引起他汀藥物血藥濃度上升，增加橫紋肌溶解癥或肌病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。臨床

7、指導(dǎo)基因 基因型 臨床意義 SLCO1B1 *1a/*1a,*1a/*1b, *1b/*1b 正常肌病風(fēng)險(xiǎn)，他汀耐受劑量較高 *1a/*5, *1a/*15, *1b/*15 中度肌病風(fēng)險(xiǎn)，他汀耐受劑量中等 *5/*5, *5/*15, *15/*15 高度肌病風(fēng)險(xiǎn)，他汀耐受劑量較低 ApoE基因檢測(cè)的位點(diǎn)為526C>T、388T>C，其可形成3種單倍型ApoE2、ApoE3、ApoE4，ApoE基因編碼的蛋白是影響機(jī)體血脂水平的重要內(nèi)在因素，文獻(xiàn)報(bào)道，ApoE4的攜帶者服用他汀療效往往不佳或無效，ApoE2攜帶者服用他汀效果最佳。 臨床指導(dǎo)基因型建議飲食預(yù)防疾病提示用藥提示E2/

8、E2魚油降脂效果最好適量飲酒風(fēng)險(xiǎn)明顯降低留意黃斑變性、類高脂血癥；老年癡呆、腦梗塞有愛護(hù)因子，冠心病風(fēng)險(xiǎn)低他汀療效較好E2/E3E2/E4魚油降脂效果最好適量飲酒風(fēng)險(xiǎn)明顯降低正?；蛐?，老年癡呆、腦梗塞、冠心病正常他汀治療療效正常E3/E3E3/E4魚油降脂風(fēng)險(xiǎn)加大適量飲酒風(fēng)險(xiǎn)明顯大增增加冠心病、心梗、腦梗、老年癡呆風(fēng)險(xiǎn)，宜低脂低鹽低糖，忌煙酒魚肉他汀療效較差【參考文獻(xiàn)】1Mikko Niemi, Marja K. Pasanen, and Pertti J. Neuvonen . Organic Anion Transporting Polypeptide 1B1:a Genetically

9、 Polymorphic Transporter of MajorImportance for Hepatic Drug Uptake.Pharmacol Rev 63:157181, 20112. John F. Thompson, PhD; Craig L. Hyde, PhD; Linda S. Wood, MS;Sara A. Paciga, MA; David A. Hinds, PhD; David R. Cox, MD, PhD;G. Kees Hovingh, MD, PhD; John J.P. Kastelein, MD, PhD. Comprehensive Whole-

10、Genome and Candidate GeneAnalysis for Response to Statin Therapy in the Treating toNew Targets (TNT) Cohort. Circ Cardiovasc Genet. 2009;2:173-181.3 Raphaël Chouinard-Watkins and Mélanie Plourde Fatty Acid Metabolism in Carriers of Apolipoprotein E Epsilon 4 Allele: Is It Contributing to Higher Risk of Cognitive Decline and Coronary Heart Disease? Nutrients 2014, 6, 4452-4471; doi:10.3390/nu61044524 Ping Wu1,2Hong-Lei Li1Zhi-Jun Liu1Qing-Qing Tao1Miao Xu1Qi-Hao Guo1Zhen Hong1Yi-Min S