多糖的提取和純化

1、多糖的提取和純化 多糖的提取和純化多糖的提取和純化摘 要 本文較詳細地介紹了 多糖的提取和純化方法， 為多糖的研究和生產(chǎn)提供參考依據(jù)。 關(guān)鍵詞 多 糖；提??；純化；活性炭多糖（polysacharides ,PS ,又稱多聚糖，是 由 10 個以上的單糖通過苷鍵連接而成的，具有廣泛生物活性的天然大分 子化合物。它廣泛分布于自然界高等植物、藻類、微生物（細菌和真菌）與動物體內(nèi)。 20 世紀 60 年代以來，人們逐漸發(fā)現(xiàn)多糖具有復雜的、多方 面的生物活性和功能 1 ：（1） 多糖可作為廣譜免疫促進劑，具有免疫調(diào)節(jié) 功能，能治療風濕病、慢性病毒性肝炎、癌癥等免疫系統(tǒng)疾病，甚至能抗 AIDS 病毒2。

2、如甘草多糖具有明顯的抗病毒和抗腫瘤作用10，黑木耳多糖、銀杏外種皮多糖和蘆薈多糖可抗腫瘤和增強人體免疫功能 3-5 。 （2） 多糖具有抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂、促進核酸與蛋 白質(zhì)的生物合成作用。如柴胡多糖具有抗輻射，增強免疫功能等生物學作 用 6 ，麥冬多糖具有降血糖及免疫增強作用 7-8 ，動物黏多糖具有抗凝 血、降血脂等功能 9 。 （3）多糖能控制細胞分裂和分化，調(diào)節(jié)細胞的生長 與衰老。如爬山虎多糖具有抗病毒和抗衰老作用T粉碎T脫脂T粗提（2-3 次）T吸濾或離心T沉淀T洗滌T干燥首先除去表面脂肪。原料經(jīng)粉 碎后加入甲醇、乙醚、乙醇、丙酮或 1 ：1 的乙醇乙醚混合液，水

3、浴加熱 攪拌或回流 1-3 小時，脫脂后過濾得到的殘渣一般用水作溶劑（也有用 氫氧化鉀堿性水液、 氯化鈉水液、1%醋酸和 1 %苯酚或 0.1 - 1M 氫氧化鈉 作為提取溶劑）提取多糖。溫度控制在90100C,攪拌 4-6 小時，反復提取 2- 3 次。得到的多糖提取液大多較粘稠，可進行吸濾。也可用離心 法將不溶性雜質(zhì)除去，將濾液或上清液混合（得到的多糖若為堿性則需要 中和）。然后濃縮，再加入 2- 5 倍低級醇（甲醇或乙醇）沉淀多糖；也可 加入費林氏溶液或硫酸銨或溴化十六烷基三甲基銨等，與多糖物質(zhì)結(jié)合生 成不溶性絡合物或鹽類沉淀。然后依次用乙醇、丙酮和乙醚洗滌。將洗干 后疏松的多糖迅速轉(zhuǎn)入

4、裝有五氧化二磷和氫氧化鈉的真空干燥器中減壓 干燥（若沉淀的多糖為膠狀或具粘著性時，可直接冷凍干燥） 。干燥后可 得粉末狀的粗多糖。 1.2 微波輔助提取法：其原理為利用不同極性的介質(zhì) 對微波能的不同吸收程度，使基體物質(zhì)中的某些區(qū)域和萃取體系中的某些 組分被選擇性加熱，從而使萃取物質(zhì)從基體或體系中分離出來，進入到介 電常數(shù)小， 微波吸收能力較差的萃取劑中 14 。 由于微波能極大加速細胞 壁的破裂，因而應用于中草藥中有效成分的提取能極大加快提取速度，增 加提取產(chǎn)率。而且由于其選擇性好，提取后基體能保持良好的性狀，提取 液也較一般的提取方法澄清 15 。聶金源等在柴胡多糖和黃酮化合物的提 取 18

5、 中對微波輔助提取法、超聲輔助法和索氏提取法進行比較，發(fā)現(xiàn)微 波輔助提取法所需時間最短（10min）,多糖的提取率最高（28.46 %）。1.3 超聲輔助法：其原理是利用超聲波的空化作用加速植物有效成分的浸出提 取，另外超聲波的次級效應，如機械振動、乳化、擴散、擊碎、化學效應 等也能加速欲提取成分的擴散釋放并充分與溶劑混合，利于提取 16 。超 聲波輔助法與常規(guī)提取法相比，具有提取時間短、產(chǎn)率高、無需加熱等優(yōu) 點17 。 1.4 索氏提取法：將植物粉末置于索氏提取器中，加入石油醚， 60C-90C條件下提取至無色（一般為 6 小時）。過濾，濾渣揮發(fā)干燥完溶 媒后加入 80%乙醇，再提取 6 小

6、時， 過濾， 濾渣乙醇揮發(fā)干燥后加蒸餾水?；亓魈崛?2 次，趁熱過濾，濾液減壓濃縮，再除蛋白，醇沉，除色素。60C干燥，稱重。 1.5 醇提法：先后將 90%和 50%乙醇加入植物粉末中，振蕩充分再抽濾。濾液中加入足量無水乙醇，至于 4C冰箱中過夜。減壓抽濾，再除去色素，得多糖粗品，在60CCCI加入費林氏溶液或硫酸鞍或漠化十六烷基三甲基鞍等，與多糖物質(zhì)結(jié)合生 成不溶性絡合物或鹽類沉淀。然后依次用乙醇、丙酮和乙!洗滌。將洗干 后疏松的多糖迅速轉(zhuǎn)入裝有五氧化二磷和氫氧化鈉的真空干燥器中減壓 干燥（若沉淀的多糖為膠狀或具粘著性時，可直接冷凍干燥）。干燥后可得粉末狀的粗多糖。1.2 微波輔助提取法：

7、其原理為利用不同極性的介質(zhì) 對微波能的不同吸收程度，使基體物質(zhì)中的某些區(qū)域和萃取體系中的某些 組分被選擇性加熱，從而使萃取物質(zhì)從基體或體系中分離出來，進入到介 電常數(shù)小，微波吸收能力較差的萃取劑中14 o 由于微波能極大加速細胞壁的破裂，因而應用于中草藥中有效成分的提取能極大加快提取速度，增 加提取產(chǎn)率。而且由于其選擇性好，提取后基體能保持良好的性狀，提取 液也較一般的提取方法澄清15 o 聶金源等在柴胡多糖和黃酮化合物的提 取口 8中對微波輔助提取法、超聲輔助法和索氏提取法進行比較，發(fā)現(xiàn)微 波輔助提取法所需時間最短（10min）,多糖的提取率最高（28.46 %）o1.3 超聲輔助法：其原理是利用超聲波的空化作用加速植物有效成分的浸出提 取，另外超聲波的次級效應，如機械振動、乳化、擴散、擊碎、化學效應 等也能加速欲提取成分的擴散釋放并充分與溶劑混合，利于提取16 o 超聲波輔助法與常規(guī)提取法相比，具有提取時間短、產(chǎn)率高、無需加熱等優(yōu) 點口 7 o1.4 索氏提取法：將植物粉末置于索氏提取器中，加入石油 60 C -90 C 條件下提取至無色（一般為 6 小時）。過濾，濾渣揮發(fā)干燥完溶 媒后加入 80 尤醇，再提取 6 小時，過濾，濾渣乙醇揮發(fā)干燥后加蒸徭水?；亓魈崛?2 次，趁熱過濾，