從江牛帶絳蟲感染家豬后血清IL-4和IL-10含量的動(dòng)態(tài)變

1、從江牛帶絳蟲感染家豬后血清IL-4和IL-10含量的 動(dòng)態(tài)變【摘要】 方針：不雅觀察家豬感染從江牛帶絳蟲后血清細(xì)胞因子 IL-4 和 IL-10 含量的 轉(zhuǎn)變，從細(xì)胞因子角度探討抗從江牛帶絳蟲感染免疫應(yīng)答的機(jī)制。體例： 用從江牛帶絳蟲蟲卵直接灌胃 20 d 齡健康乳豬 5 頭，并以健康乳豬 5 頭作對(duì)比，于感染后第 7、 15、 45 和 60 天,定期抽取家豬耳緣靜脈血，通例渙散血清。用ELISA 試劑盒檢測血清細(xì)胞因子 IL-4 和IL-10 含量。功效：正常組血清 IL-4 和 IL-10 含量在感染分歧時(shí)代根柢處于安定水平 ;實(shí)施組 血清 IL-4和 IL-10 含量在感染第 7 天起

2、頭上升，第 15 天最高，第 45 天含量與正常組相等， 第 60 天再次上升 ;與正常組對(duì)比，實(shí)施組血清 IL-4 和 IL-10 含量在第 7、 15 、和 60 天時(shí)較 著升高 (P0.01) 。結(jié)論：家豬感染從江牛帶絳蟲分歧時(shí)代血清IL-4 和 IL-10 含量轉(zhuǎn)變較年夜。第 7 和第 15 天血清出現(xiàn)高水平 IL-4 和 IL-10 ，提醒體液免疫在抗從江牛帶絳蟲早期感染中 發(fā)揮著嚴(yán)重浸染 ;第 45 天， IL-4 和 IL-10 含量與正常組對(duì)比，提醒從江牛帶絳蟲感染家豬中 期體液免疫應(yīng)答轉(zhuǎn)變不年夜 ;第 60 天，高含量的 IL-4 和 IL-10 ，概略是囊尾蚴誘導(dǎo)肝纖維化

3、形成的嚴(yán)重身分。Examination of the serum IL-4 and IL-10 in domesticpigs infecteted with taenia saginata asiaticaLIU Yuan-zhong,YANG Peng,XIE Hong-shu(Qiannan Medical College, Duyun 558003,China)【 Abstract 】Objective ：To detect chanism of immune response of domestic pigs against TaeniaSaginata asiatica infec

4、tion through oberserving change of serum IL-4 and IL-10 in domestic pigsexperientially infected with Taenai Saginata asiatica. Methods ： Five healthy pigs were fed with eggsof Taenai Saginata asiatica,and reared isolately in animal center,to establish Taenai Saginata asiaticainfection model ,and nor

5、mal controls.Vein blood of pigs were adopted at day 7,15, 45and 60 afterinfection and collected serum.Serum IL-4 and IL-10 were detected by ELISA Results ： The level ofserum IL-4 and IL-10 of normal group maintained relatively be stable through out the experiment.Theserum IL-4 and IL-10 level of inf

6、ection group began to rise at day 7 , the highest at day 15, andincreasing again.Compared with the normal group ,infected group IL-4 and IL-10 showed a greatincrease at day 7 and day 60. Conclusion： Serum IL-4 and IL-10 level showedbiphasic difference among difference infection stage. High level of

7、Sera IL-4 and IL-10 at early infectedstage suggested that immune response was very important role against Taenia Saginata asiatica atearly infected stage.Constant level of IL-4and IL-10 at day suggested that immune response-associatedantigen deceased.IL-4 and IL-10 might be one important factor in i

8、nduced liver fibrous in late infectionstage.關(guān)頭詞】從江牛帶絳蟲 ;細(xì)胞因子 ;執(zhí)行動(dòng)物感染 ;家豬【 Kek words 】 Taenia saginata asiatica;cvtokine;expermental animal infection; domestic pigs現(xiàn)在對(duì)牛帶絳蟲的研究僅規(guī)模于形態(tài)學(xué)、 生物學(xué)等方面， 有關(guān)宿主抗牛帶絳蟲感染的研 究報(bào)道少見。 本研究擬用從江牛帶絳蟲實(shí)施感染乳豬， 動(dòng)態(tài)不雅觀察感染從江牛帶絳蟲的家 豬血清 IL-4 和IL-10 含量轉(zhuǎn)變，從細(xì)胞因子角度探討家豬抗從江牛帶絳蟲感染免疫應(yīng)答機(jī) 制，現(xiàn)將功效

9、報(bào)道如下。1 質(zhì)料與體例1.1 質(zhì)料1.1.1 實(shí)施蟲體的泉源用檳榔、南瓜子對(duì)貴州省從江縣絳蟲病流行區(qū)的 2 例已確診的絳 蟲病患者進(jìn)行驅(qū)蟲，獲得兩條完整蟲體經(jīng)形態(tài)學(xué)剖斷為從江牛帶絳蟲。1.1.2 蟲卵懸液制備 將上述驅(qū)出的絳蟲用兩套細(xì)小針頭剖開孕節(jié)子宮，離心收集蟲卵，3 000 r/min 15min,專心理鹽水離心洗滌 4 次，調(diào)劑蟲卵濃度至15 萬/ml。1.1.3 執(zhí)行動(dòng)物 20 d 齡三元雜交豬 10 頭，牝牡并用，由貴陽市種豬滋生場供給。經(jīng)糞 檢、驅(qū)蟲和間接血凝實(shí)施證實(shí)無在囊尾蚴感染。1.1.4 試劑 IL-4 和 IL-10 的試劑盒，由浙年夜生物基因工程有限公司（系美國 Rap

10、idBioLab. 公司進(jìn)口分裝 ）供給。1.2 體例1.2.1 分組及處置 將 20 d 齡三元雜交豬隨機(jī)分為實(shí)施組和正常組各 5 頭。實(shí)施組每頭 灌胃 1 ml（15 萬/ml），斗勁組不感染。兩組乳豬均操縱專用膨化顆粒飼養(yǎng)，隔離圈養(yǎng)，提防自然感染。1.2.2 血清細(xì)胞因子含量測定 實(shí)施組及正常組分袂于感染后第7、 15、45 和 75 天分別抽取 5 ml 靜脈血，離心取血清，置-20C冰箱保留，用 ELISA 法測定血清 IL-4 和 IL-10 的含 量。1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處置 數(shù)據(jù)用 SPSS13.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處置，數(shù)據(jù)用xs 浮現(xiàn)，兩組均數(shù)的斗勁接納方差剖析。2 功效2.1

11、家豬感染從江牛帶絳蟲后血清 IL-4 含量的動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)變用 ELISA 法檢測家豬血清 IL-4 含量水平，正常組血清 IL-4 含量根柢處于安定水平。實(shí)施組血清 IL-4 含量在感染第 7 天升 高，第 15 天達(dá)岑嶺，第 45 天與正常水平相等，第 60 天再次升高。與正常組對(duì)比，實(shí)施組 血清 IL-4 含量在感染第 7、15和 60 天時(shí)較著升高（P0.01），見表 1。表 1 家豬感染從江牛 帶絳蟲后血清 IL-4 含量注： *與斗勁組斗勁， P0.01。2.2 家豬感染從江牛帶絳蟲后血清 IL-10 含量的動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)變 ILESA 法檢測家豬血清 IL-10 含量水平，正常組血清 IL-10

12、 含量，根柢處于安定水平。實(shí)施組血清 IL-10 含量在感染第 7 天升高，之后火速下降略高于或低于正常組，第 75 天時(shí)再度升高。與正常組對(duì)比，實(shí)施組 血清 IL-10 含量在感染第 7 和 15和 75 天時(shí)較著升高（P0.01），見表 2。表 2 家豬感染從江 牛帶絳蟲后血清 IL-10 含量注： *與斗勁組斗勁， P0.01。3 談判在寄生蟲感染免疫中，細(xì)胞因子作為介質(zhì)，既介入體液免疫應(yīng)答也介入細(xì)胞免疫應(yīng)答， 宿主的免疫提防病理損害都受到細(xì)胞因子調(diào)控。 良多研究功效 1-2浮現(xiàn)宿主免疫力在從江牛 帶絳蟲六鉤蚴感染中發(fā)揮著嚴(yán)重浸染。 本研究經(jīng)由過程不雅觀察感染從江牛帶絳蟲的家豬血 清 I

13、L-4 和 IL-10 含量的轉(zhuǎn)變，發(fā)現(xiàn)從江牛帶絳蟲感染家豬第7 天和 15 天，IL-4 和 IL-10 含量遠(yuǎn)高于正常組，高含量的IL-4 和 IL-10 可以促進(jìn) Th0 向 Th2 轉(zhuǎn)化，Th2 細(xì)胞標(biāo)的目的于滲出 IL-4、 IL-5 和 IL-10 等，與 B 細(xì)胞的增殖、成熟和促進(jìn)抗體生成有關(guān) 3。由此可見， 在家豬感染從江牛帶絳蟲早期， 以 Th2 細(xì)胞應(yīng)答優(yōu)勢(shì)為主。 Th2 細(xì)胞應(yīng)答優(yōu)勢(shì)主要浮現(xiàn)血清 抗體含量增添，特異性體液免疫應(yīng)答增強(qiáng)。家豬感染從江牛帶絳蟲第 45 天，從江牛帶絳蟲六鉤蚴在肝臟已發(fā)育成熟，因?yàn)槟暌沽?新抗原的出現(xiàn)，宿主應(yīng)處于較高免疫應(yīng)答。本研究浮現(xiàn)，此時(shí)血清

14、 IL-4 和 IL-10 含量與正 常組區(qū)別不年夜， 提醒特異性體液免疫應(yīng)答處于正常水平。 其緣故原由概略是從江牛帶絳蟲 六鉤蚴在形成囊尾蚴的歷程中釋放一種可溶性卵白誘導(dǎo)宿主發(fā)生免疫耐受有關(guān)。 徐宏秀等 4 在腦囊尾蚴病患者 Th2 型細(xì)胞因子的研究發(fā)現(xiàn)，腦囊尾蚴病患者血清 IL-4 和 IL-10 含量較 著升高。 因?yàn)槟X囊尾蚴病患者體內(nèi)蟲體以囊尾蚴形式存在， 從理論上說應(yīng)該與從江牛帶絳蟲 感染家豬中期的實(shí)施功效齊截， 但實(shí)施功效差別較年夜，這種差別是否為帶絳蟲寄生的中心 宿主分歧所造成 ?還有待于進(jìn)一步研究。在研究從江牛帶絳蟲感染家豬病理學(xué)不雅觀察中發(fā)現(xiàn)，家豬感染從江牛帶絳蟲第 75 天

15、后，囊尾蚴已經(jīng)周全鈣化，肝機(jī)關(guān)以肉芽腫和肝纖維化損害為特征。此時(shí)，血清 IL-4 和 IL-10 細(xì)胞因子含量再次很是增高，高表達(dá) IL-4 和 IL-10 ，真相有何意義 ?它的存在是否與肝 纖維化形成有關(guān) ?Cheerer 等6在感染日本血吸蟲小鼠體外實(shí)施研究中發(fā)現(xiàn)，IL-4 與纖維化形成慎密親密相關(guān)。朱華斌等 7在 Th2 細(xì)胞因子在日本血吸蟲小鼠肝臟中的轉(zhuǎn)變及其與纖 維化的斗勁中發(fā)現(xiàn)，IL-4 和 IL-10 在血吸蟲肝臟肉芽腫及纖維化形成中起嚴(yán)重浸染。由此我 們猜測，高表達(dá)的 IL-4和 IL-10 概略在誘導(dǎo)肝機(jī)關(guān)形成肉芽腫和肝纖維化歷程中發(fā)揮著嚴(yán) 重浸染。但也有報(bào)道浮現(xiàn)，腦囊尾蚴病變機(jī)關(guān)的壞棄世和炎癥反映以完整棄世蟲組最較著， 伴有纖維機(jī)關(guān)增生時(shí)， 病變機(jī)關(guān)的壞棄世和炎癥反映更為