活螨檢查法標(biāo)準

1、營口宏升藥業(yè)有限公司操作標(biāo)準-檢驗標(biāo)準文件名稱活螨檢查法標(biāo)準操作規(guī)程編 號SOP-JY-164-01頁 數(shù)7-1實施日期制 訂 人審 核 人批 準 人制訂日期審核日期批準日期制訂部門質(zhì)管部分發(fā)部門化驗室目 的：規(guī)范活螨檢查法標(biāo)準操作規(guī)程。適用范圍：活螨檢查法檢驗。責(zé) 任：化驗員實施本操作規(guī)程，化驗室主任負責(zé)監(jiān)督本規(guī)程正確執(zhí)行。標(biāo)準依據(jù)：中華人民共和國藥典2005年版二部程 序：活螨檢查法1. 簡述螨，屬于節(jié)肢動物門，蛛形綱，蜱螨目。種類多，分布廣。根據(jù)其生活習(xí)性，分為自由生活和寄生生活兩種類型。在土壤、池沼、江河和湖海里，動、植物體上，貯藏食品和藥品中，都可能存在。藥品可因其原料、生產(chǎn)過程或包

2、裝、運輸、貯存、銷售等條件不良，受到螨的污染。螨可蛀蝕損壞藥品，使藥品變質(zhì)失效。螨可引起皮炎及消化、泌尿、呼吸系統(tǒng)的疾病。直接危害人體健康或傳播疾病。因此，藥品特別是中成藥，必須進行活螨檢查。2. 儀器及用具2.1 顯微鏡2.2 放大鏡（510倍）、實體顯微鏡2.3 解剖針、發(fā)絲針、小毛筆解剖針（或用一段長約10cm、直徑為0.1cm金屬棒，將其一端磨尖：其尖端宜尖細且粗糙，否則不易挑取體表光滑的螨體。營口宏升藥業(yè)有限公司操作標(biāo)準-檢驗標(biāo)準文件名稱活螨檢查法標(biāo)準操作規(guī)程編 號SOP-JY-164-01頁 數(shù)7-2發(fā)絲針：由一根長約10cm的小金屬棒，將其一端磨成細尖，另取長約1.5cm的頭發(fā)一

3、根，以其長度的一半緊貼在金屬棒的尖端上，用細線將其纏緊，然后黏上加拿大樹膠或油漆即得。適用于挑取行走緩慢且體表剛毛較多的螨體。小毛筆，即繪圖毛筆。適用于挑取活動快的螨類，筆鋒宜尖細，以免螨體夾在毛筆中不易挑出。2.4 載玻片、蓋玻片2.5 酒精燈2.6 培養(yǎng)皿或小搪瓷盤（內(nèi)襯黑色紙片）2.7 扁形稱量瓶（高3cm、寬6cm）2.8 30%甘油溶液（簡稱甘油溶液）2.9 飽和食鹽水：市售食鹽（或氯化鈉），配成約36%的水溶液，煮沸，過濾，備用2.10 封固液3.活螨的檢查方法3.1 螨的形態(tài)特征3.1.1 螨的體形微小，多在1mm以下。一般呈卵形或橢圓形，無頭、胸、腹界限。幼螨足三對，若螨足四對

4、，成螨足多數(shù)為四對。足通常由六節(jié)組成?？谄飨蚯岸送怀?，螯肢常呈螯鉗狀，有齒，由23節(jié)組成。須肢節(jié)數(shù)因種類而異，由12節(jié)到5節(jié)組成。有些種類在軀體前端或兩側(cè)有12對眼。軀體兩側(cè)對稱，表面被有堅硬的幾丁質(zhì)的板。體表有剛毛，它的形狀、數(shù)目及彼此間長短比例和排列位置因種類而異。3.1.2 螨與蜘蛛、昆蟲主要形態(tài)的鑒別螨類與蜘蛛、昆蟲（如書虱）相比，其外形比較近似，因此，必須注意它們之間的主要區(qū)別（見下表）。營口宏升藥業(yè)有限公司操作標(biāo)準-檢驗標(biāo)準文件名稱活螨檢查法標(biāo)準操作規(guī)程編 號SOP-JY-164-01頁 數(shù)7-3螨與蜘蛛、昆蟲主要形態(tài)鑒別形態(tài) 分類足觸 角體形成螨（如腐食酪螨）蜘蛛昆蟲（如書虱）

5、蛛形綱、蜱螨目蛛形綱、蜘蛛目昆蟲綱4對4對3對無無1對頭、胸、腹無界限分頭胸部和腹部分頭、胸、腹三部分3.2 活螨的一般檢查方法3.2.1 直檢法：取供試品先用肉眼觀察，有無疑似活螨的白點或其他顏色的點狀物，再用510倍放大鏡或?qū)嶓w顯微鏡檢視。有螨者，用解剖針或發(fā)絲針或小毛筆挑取活螨放在滴有一滴甘油溶液的載玻片上，置顯微鏡下觀察。3.2.2 漂浮法：取供試品放在盛有飽和食鹽水的扁形稱量瓶或適宜的容器內(nèi)，加飽和食鹽水至容器的三分之二處，攪拌均勻，置10倍放大鏡或?qū)嶓w顯微鏡下檢查，或繼續(xù)加飽和食鹽水至瓶口處（為防止鹽水和樣品溢出污染桌面，宜將上述容器放在裝有適量甘油溶液的培養(yǎng)皿中），用潔凈的載玻片

6、蓋在瓶口，使玻片與液面接觸，沾取液面上的漂浮物，迅即反轉(zhuǎn)玻片，置顯微鏡下檢查。3.2.3 分離法：也稱烤螨法。取供試品放在附有孔徑大小適宜的篩網(wǎng)的普通玻璃漏斗里，利用活螨避光、怕熱的習(xí)性，在漏斗的廣口上面放一個60100W的燈泡，距離藥品約6cm處，照射12h?；铗裳又┒穬?nèi)的底部細徑內(nèi)壁向下爬，用小燒杯裝半杯甘油溶液，放在漏斗的下口處，收集爬出的活螨。在上述三種方法中，以前兩種方法操作簡便、效果好、檢出率高，故多采用。3.3 各劑型藥品的活螨檢查方法供試品取樣量，一般供試品每批抽檢兩瓶。以單劑量、一日劑量包裝的樣品，每批抽取兩盒（每盒檢查34最小包裝單位）；貴重或微量包裝的供試品，取樣量營

7、口宏升藥業(yè)有限公司操作標(biāo)準-檢驗標(biāo)準文件名稱活螨檢查法標(biāo)準操作規(guī)程編 號SOP-JY-164-01頁 數(shù)7-4可酌減。必要時，可再次抽樣，或選取有疑問的樣品進行檢查。3.3.1 大蜜丸：將藥丸外殼（蠟殼或紙蠟殼等）置酒精燈小火焰上轉(zhuǎn)動，適當(dāng)燒灼（殺滅外殼可能污染的活螨）后，小心打開。3.3.1.1 表面完好的藥丸，可用消毒的或在火焰上燒灼后放冷的解剖針刺入藥丸，取樣后手持解剖針，在放大鏡或?qū)嶓w顯微鏡下檢查。同時注意檢查丸殼的內(nèi)壁或包丸的襯紙有無活螨。3.3.1.2 有蟲粉現(xiàn)象的藥丸，可用放大鏡或?qū)嶓w顯微鏡直接檢查，也可用漂浮法檢查。3.3.2 小蜜丸、水丸3.3.2.1 表面完好的藥丸，可將其

8、放在預(yù)先襯有潔凈黑紙片的培養(yǎng)皿或小搪瓷盤中，用直檢法檢查，未檢出螨時，如必要，可再用漂浮法或烤螨法檢查。3.3.2.2 有蟲粉現(xiàn)象的丸、片，可用直檢法或漂浮法檢查。同時注意檢查藥瓶口內(nèi)壁與內(nèi)蓋有無活螨。3.3.3 散劑、沖劑和膠囊劑等 直接檢查藥瓶口壁、內(nèi)蓋及塑料薄膜袋的內(nèi)側(cè)有無活螨。然后將藥品放在襯有潔凈黑紙的培養(yǎng)皿或搪瓷盤里，使成薄層，直接檢查。必要時可再用漂浮法檢查。3.3.4 塊狀沖劑 直接檢查供試品的包裝蠟紙、玻璃紙或塑料薄膜及藥塊表面有無活螨。有蟲粉現(xiàn)象者，除用直檢法檢查外，可再用漂浮法檢查。3.3.5 液體制劑及半固體制劑 先用75%乙醇將藥瓶的外蓋螺口周圍消毒后，小心旋開外蓋，

9、用直檢法，檢查藥瓶外蓋的內(nèi)側(cè)及瓶口內(nèi)外的周圍與內(nèi)蓋有無活螨。3.3.6 除上述以外的其他制劑 可視具體情況參照上述有關(guān)方法檢查。4. 結(jié)果判斷凡供試品按上述有關(guān)劑型項下規(guī)定檢查，發(fā)現(xiàn)活螨者，作檢出活螨報告。營口宏升藥業(yè)有限公司操作標(biāo)準-檢驗標(biāo)準文件名稱活螨檢查法標(biāo)準操作規(guī)程編 號SOP-JY-164-01頁 數(shù)7-55. 注意事項5.1 螨在春夏和秋冬相交季節(jié)，繁殖旺盛，爬行活躍，易于檢出，在寒冬時則活動微弱甚至不動，鑒別時，可在燈光下檢查，光和熱的刺激促使其活動，有利于檢查。5.2 活螨多為略帶白色，晶亮的囊狀小體，以暗色背景相襯，十分明顯，故檢查時一定要注意與背景的反差，白色的背景常常不利

10、于螨的發(fā)現(xiàn)。5.3 漂浮法檢螨用的稱量瓶，以高3cm，口徑6cm為宜，由于液面較寬，便于直接用放大鏡或?qū)嶓w顯微鏡檢查，用載玻片沾取檢樣時，接觸面積大，檢出率高。亦可用其他適當(dāng)容器代替。5.4 每次檢查后的供試品、器皿和用具，特別是陽性供試品，應(yīng)即時用焚燒、加熱等法處理，殺滅活螨、以免污染操作環(huán)境及人體。5.5 為保留陽性結(jié)果備查，可將檢出的活螨制成臨時觀察標(biāo)本和長期保存標(biāo)本。5.5.1 臨時觀察標(biāo)本：挑取檢出的活螨，放在預(yù)先滴有1滴75%乳酸溶液的載玻片上，加蓋玻片，置于酒精燈小火焰上，來回移動，緩緩加熱片刻，使其適當(dāng)透化，即可鏡檢。鑒定后的螨體，亦可放入50%70%的乙醇溶液中保存，或作適當(dāng)

11、處理。5.5.2 長期保存標(biāo)本5.5.2.1 用具先將載玻片、蓋玻片洗凈擦干備用。對于過大的蓋玻片，亦可用小砂輪分割成四個小方塊使用。5.5.2.2 由于螨體上的許多剛毛和突出物，往往黏附著一些微粒狀雜物。在制片時，宜用解剖針或發(fā)絲針或小毛筆，挑取螨體放在滴有一滴清水的載玻片上，輕輕攪動，洗去螨體上附著的雜物。營口宏升藥業(yè)有限公司操作標(biāo)準-檢驗標(biāo)準文件名稱活螨檢查法標(biāo)準操作規(guī)程編 號SOP-JY-164-01頁 數(shù)7-65.5.2.3 螨體封存 取12滴螨類封固液放在載玻片中央偏右的位置，挑取洗去雜物的螨體12只，放在螨類封固液中，在低倍顯微鏡下用發(fā)絲針調(diào)正螨體的姿態(tài)、位置（背面、腹面）后，如

12、封固液中出現(xiàn)氣泡，可用燒熱的解剖針插入氣泡，即可消除，然后加上蓋玻片。將載玻片置酒精燈的小火焰上來回移動，緩緩加熱，促使螨體附肢伸展，切勿沸騰，以免產(chǎn)生氣泡，甚至螨體爆裂。撤離火焰后，用紅色的玻璃鉛筆在載玻片的背面圈出螨體的位置，便于鏡檢時尋找。然后在載玻片的左端貼上標(biāo)簽。5.5.2.4 干燥制成的玻片標(biāo)本必須干燥，一般將玻片標(biāo)本放在5060的溫箱內(nèi)干燥約一周或放在玻璃干燥器中使之失水干燥。也可在室溫下放置一個月左右，使其自然干燥。5.5.2.5 封固標(biāo)本干燥后，在蓋玻片周圍用指甲油或加拿大樹膠或油漆封固，以便長期保存。附：螨類封固液常用配方配方（1）水合氯醛70g阿拉伯膠粉.8g冰醋酸3ml甘油5ml麝香草酚.1g蒸餾水 10ml制法 先將阿拉伯膠粉、水合氯醛及蒸餾水置乳缽中，充分研磨，使完全溶解。然后加入冰醋酸、甘油和麝香草酚，再充分混合。后用雙層紗布過濾，靜置一周后，取其上層澄清液于棕色滴瓶內(nèi)備用