苦參堿的提取

1、苦參堿的提取苦參堿的提取2022-4-91XXX1440XX班1440XXXX2022-4-92苦參堿來(lái)源理化性質(zhì)藥理用途分離方法苦參堿是由豆科植物苦參的干燥根、植株、果實(shí)經(jīng)苦參堿是由豆科植物苦參的干燥根、植株、果實(shí)經(jīng)乙醇等有機(jī)溶劑提取制成的，乙醇等有機(jī)溶劑提取制成的， 是生物堿。一般為苦是生物堿。一般為苦參總堿，其主要成分有苦參堿、槐果堿、氧化槐果參總堿，其主要成分有苦參堿、槐果堿、氧化槐果堿、槐定堿等多種生物堿，以苦參堿、氧化苦參堿堿、槐定堿等多種生物堿，以苦參堿、氧化苦參堿含量最高。其他來(lái)源為山豆根及山豆根地上部分，含量最高。其他來(lái)源為山豆根及山豆根地上部分，純品外觀為白色粉末。純品外觀

2、為白色粉末。2022-4-93苦參堿來(lái)源理化性質(zhì)2022-4-94物理性質(zhì)物理性質(zhì)顏色：純品外觀為白色粉末。久置露空氣顏色：純品外觀為白色粉末。久置露空氣中，有引濕性，并變?yōu)榈S色。中，有引濕性，并變?yōu)榈S色。氣味：無(wú)臭，味苦。氣味：無(wú)臭，味苦。性狀：多為晶型，在苦參堿的性狀：多為晶型，在苦參堿的、四種類型中分別有不同的性狀：四種類型中分別有不同的性狀：型，針狀型，針狀或棱柱狀結(jié)晶；或棱柱狀結(jié)晶；型，正斜方形棱柱狀結(jié)晶；型，正斜方形棱柱狀結(jié)晶；型，液體；型，液體；型，棱柱狀結(jié)晶。型，棱柱狀結(jié)晶。 熔沸點(diǎn)：熔沸點(diǎn)：型，熔點(diǎn)型，熔點(diǎn)76，型，熔點(diǎn)型，熔點(diǎn)87；型，液體，沸點(diǎn)型，液體，沸點(diǎn)223(8

3、00Pa)；型，熔點(diǎn)型，熔點(diǎn)84。溶解性：苦參堿既可溶于水，又能溶于氯溶解性：苦參堿既可溶于水，又能溶于氯仿、乙醚、苯、甲苯、二硫化碳等親脂性溶仿、乙醚、苯、甲苯、二硫化碳等親脂性溶劑。氧化苦參堿親水性更強(qiáng)，易溶于水，可劑。氧化苦參堿親水性更強(qiáng)，易溶于水，可溶于氯仿，難溶于乙醚?？鄥⒅猩飰A的極溶于氯仿，難溶于乙醚。苦參中生物堿的極性順序是：氧化苦參堿羥基苦參堿苦參性順序是：氧化苦參堿羥基苦參堿苦參堿。堿。2022-4-9藥理用途 （1）在醫(yī)學(xué)方面的應(yīng)用：）在醫(yī)學(xué)方面的應(yīng)用： 苦參堿對(duì)中樞神經(jīng)具有解熱、鎮(zhèn)痛、抗驚厥、穩(wěn)定神經(jīng)等作用苦參堿對(duì)中樞神經(jīng)具有解熱、鎮(zhèn)痛、抗驚厥、穩(wěn)定神經(jīng)等作用; 對(duì)心血

4、管系統(tǒng)具有明顯的負(fù)性頻率和正性肌力作用、能防治動(dòng)脈粥樣硬對(duì)心血管系統(tǒng)具有明顯的負(fù)性頻率和正性肌力作用、能防治動(dòng)脈粥樣硬化、減輕心肌損傷等作用化、減輕心肌損傷等作用;對(duì)消化系統(tǒng)具有杭肝損傷、抗纖維化、升高對(duì)消化系統(tǒng)具有杭肝損傷、抗纖維化、升高白細(xì)胞等作用白細(xì)胞等作用; 還具有抗腫瘤、抗肝癌等作用。還具有抗腫瘤、抗肝癌等作用。 （2）臨床應(yīng)用：）臨床應(yīng)用： 苦參素的制劑臨床主要用于慢性活動(dòng)性肝炎和慢性遷延性肝炎，對(duì)急性苦參素的制劑臨床主要用于慢性活動(dòng)性肝炎和慢性遷延性肝炎，對(duì)急性黃疸型肝炎也有作用；也用于慢性宮頸炎，老年性、滴蟲性、霉菌性陰黃疸型肝炎也有作用；也用于慢性宮頸炎，老年性、滴蟲性、霉菌

5、性陰道炎，附件炎，盆腔炎等，對(duì)子宮肌瘤及宮頸癌亦有較好的預(yù)防和治療道炎，附件炎，盆腔炎等，對(duì)子宮肌瘤及宮頸癌亦有較好的預(yù)防和治療作用；適用于腫瘤放、化療引起的白細(xì)胞低下及其它原因引起的白細(xì)胞作用；適用于腫瘤放、化療引起的白細(xì)胞低下及其它原因引起的白細(xì)胞減少癥；在心血管疾病中用于心率失常、心率衰竭、心肌炎、冠心病等；減少癥；在心血管疾病中用于心率失常、心率衰竭、心肌炎、冠心病等；還可用于濕疹等?？鄥A添加到視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞培養(yǎng)導(dǎo)致降低腫瘤還可用于濕疹等?？鄥A添加到視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞培養(yǎng)導(dǎo)致降低腫瘤細(xì)胞的有絲分裂增殖速率下降，并加快腫瘤細(xì)胞細(xì)胞凋亡，同時(shí)，調(diào)節(jié)細(xì)胞的有絲分裂增殖速率下降，并加快

6、腫瘤細(xì)胞細(xì)胞凋亡，同時(shí)，調(diào)節(jié)蛋白細(xì)胞或使凋亡周期發(fā)生相應(yīng)的變化蛋白細(xì)胞或使凋亡周期發(fā)生相應(yīng)的變化2022-4-9分離方法1 酸水提取法酸水提取法 苦參以稀酸水滲漉，酸水提取液通過(guò)強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹脂提取總生物堿。苦參以稀酸水滲漉，酸水提取液通過(guò)強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹脂提取總生物堿?？鄥A和氧化苦參堿的分離，利用二者在乙醚中的溶解度不同進(jìn)行。氧化苦參堿和氧化苦參堿的分離，利用二者在乙醚中的溶解度不同進(jìn)行。氧化苦參堿的苦參堿的NO半極性配位鍵，極性大，在水中溶解度較大，在乙醚中溶半極性配位鍵，極性大，在水中溶解度較大，在乙醚中溶解度較小。將總生物堿溶于氯仿，加入解度較小。將總生物堿溶于氯仿，加入10倍

7、量乙醚，氧化苦參堿沉淀析出倍量乙醚，氧化苦參堿沉淀析出. 具體操作流程實(shí)例：具體操作流程實(shí)例：1.1取粉碎的苦參樣品取粉碎的苦參樣品,用用80%的酸性乙醇的酸性乙醇(pH=24)滲漏提取至無(wú)生物堿反應(yīng)滲漏提取至無(wú)生物堿反應(yīng),提取液減壓濃縮后用適量的自來(lái)水溶解提取液減壓濃縮后用適量的自來(lái)水溶解,濾除不濾除不溶物溶物,上清液用氯仿反復(fù)萃取至無(wú)生物堿反應(yīng)上清液用氯仿反復(fù)萃取至無(wú)生物堿反應(yīng),回收氯仿后得到苦參總生物回收氯仿后得到苦參總生物堿。堿。1.2苦參總生物堿用硅膠柱層析分離苦參總生物堿用硅膠柱層析分離,溶劑溶劑:氯仿、甲醇、氨水氯仿、甲醇、氨水(9:1:0.3),在此在此溶劑下溶劑下,氧化苦參堿

8、氧化苦參堿Rf=0.28(與標(biāo)準(zhǔn)樣對(duì)照與標(biāo)準(zhǔn)樣對(duì)照),將相同組分合并將相同組分合并,濃縮至適量后濃縮至適量后按按1:1加入乙醚加入乙醚,濾除沉淀物濾除沉淀物,上清液繼續(xù)加入乙醚至氧化苦參堿全部沉淀上清液繼續(xù)加入乙醚至氧化苦參堿全部沉淀,次日過(guò)濾次日過(guò)濾,用丙酮重結(jié)晶得到氧化苦參堿單體用丙酮重結(jié)晶得到氧化苦參堿單體,120烘干烘干3h,mp.206.5,與與標(biāo)準(zhǔn)品混合后測(cè)熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品混合后測(cè)熔點(diǎn),熔點(diǎn)相同。熔點(diǎn)相同。2022-4-9分離方法2 浸泡超聲提取法生產(chǎn)工藝步驟浸泡超聲提取法生產(chǎn)工藝步驟2.1 將苦參根干燥粉碎，粒度將苦參根干燥粉碎，粒度60目，目，1：61：10的重量比例的重量比例與與6

9、0%乙醇溶液混合，乙醇溶液混合，25C攪拌過(guò)夜。攪拌過(guò)夜。2.2 以以19200kHz頻率超聲振蕩頻率超聲振蕩30min；過(guò)濾除去不溶物，提；過(guò)濾除去不溶物，提取液于取液于80C蒸干。蒸干。2.3 取上述干粉約取上述干粉約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入氯仿入氯仿25mL，濃氨試液，濃氨試液0.3mL，稱定重量，搖勻，室溫放置，稱定重量，搖勻，室溫放置過(guò)夜（過(guò)夜（16h以上），再稱定重量，補(bǔ)足損失的溶劑量，振搖后以上），再稱定重量，補(bǔ)足損失的溶劑量，振搖后放置，用濾紙濾過(guò)。精密量取濾液放置，用濾紙濾過(guò)。精密量取濾液10mL，置水浴蒸干，殘?jiān)?，置水?/p>

10、蒸干，殘?jiān)右颐鸭右颐?mL放置。精密加硫酸滴定液（放置。精密加硫酸滴定液（0.01moll-1）10 mL，搖勻，置水浴上加熱使殘?jiān)耆芙獠⒊M乙醚，放冷。加新?lián)u勻，置水浴上加熱使殘?jiān)耆芙獠⒊M乙醚，放冷。加新沸后放冷的蒸餾水沸后放冷的蒸餾水15mL與甲基紅指示液與甲基紅指示液2滴，用氫氧化鈉滴定滴，用氫氧化鈉滴定液（液（0.02moll-1） 滴定至黃色，即得。每滴定至黃色，即得。每1mL的硫酸滴定液的硫酸滴定液（0.01moll-1） 相當(dāng)于相當(dāng)于4.967mg的苦參堿。的苦參堿。2022-4-9分離方法3 高溫浸泡提取法生產(chǎn)工藝步驟高溫浸泡提取法生產(chǎn)工藝步驟3.1 將苦參根干燥粉

11、碎，粒度將苦參根干燥粉碎，粒度60目，目，1：61：10的重量比例的重量比例與與60%乙醇溶液混合，乙醇溶液混合，80C攪拌過(guò)夜。攪拌過(guò)夜。3.2 過(guò)濾除去不溶物，提取液于過(guò)濾除去不溶物，提取液于80C蒸干。蒸干。3.3 取上述干粉約取上述干粉約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入氯仿入氯仿25mL，濃氨試液，濃氨試液0.3mL，稱定重量，搖勻，室溫放置，稱定重量，搖勻，室溫放置過(guò)夜（過(guò)夜（16h以上），再稱定重量，補(bǔ)足損失的溶劑量，振搖后以上），再稱定重量，補(bǔ)足損失的溶劑量，振搖后放置，用濾紙濾過(guò)。精密量取濾液放置，用濾紙濾過(guò)。精密量取濾液10mL，

12、置水浴蒸干，殘?jiān)?，置水浴蒸干，殘?jiān)右颐鸭右颐? mL放置。精密加硫酸滴定液（放置。精密加硫酸滴定液（0.01moll-1） 10mL，搖勻，置水浴上加熱使殘?jiān)耆芙獠⒊M乙醚，放冷。加新?lián)u勻，置水浴上加熱使殘?jiān)耆芙獠⒊M乙醚，放冷。加新沸后放冷的蒸餾水沸后放冷的蒸餾水15mL與甲基紅指示液與甲基紅指示液2滴，用氫氧化鈉滴定滴，用氫氧化鈉滴定液（液（0.02moll-1）滴定至黃色，即得。每）滴定至黃色，即得。每1mL的硫酸滴定液的硫酸滴定液（0.01moll-1）相當(dāng)于）相當(dāng)于4.967mg的苦參堿。的苦參堿。2022-4-9分離方法4 堿性醇提取法工藝步驟堿性醇提取法工藝步驟4.1

13、將苦參根干燥粉碎，粒度將苦參根干燥粉碎，粒度60目，目，1：61：10的重量比例的重量比例與與60%乙醇溶液（含有乙醇溶液（含有0.02%氨水）混合，氨水）混合，80C攪拌過(guò)夜。攪拌過(guò)夜。4.2 過(guò)濾除去不溶物，提取液于過(guò)濾除去不溶物，提取液于80C蒸干。蒸干。4.3取上述干粉取上述干粉0.5g，精密稱定，置于錐形瓶中，加入氯仿，精密稱定，置于錐形瓶中，加入氯仿25ml濃氨試劑濃氨試劑0.3ml，稱定重量，搖勻，室溫放置過(guò)夜，再稱，稱定重量，搖勻，室溫放置過(guò)夜，再稱定重量，補(bǔ)足損失的溶劑，搖勻。過(guò)濾。精密量取定重量，補(bǔ)足損失的溶劑，搖勻。過(guò)濾。精密量取10ml，置，置水浴蒸干，殘?jiān)铀≌舾桑?/p>

14、殘?jiān)?ml乙醚。置水浴上加熱至完全溶解并除盡乙醚。置水浴上加熱至完全溶解并除盡乙醚。加蒸餾水乙醚。加蒸餾水15ml，甲基紅指示液，甲基紅指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液滴，用氫氧化鈉滴定液（0.02molL）滴定至黃色，即得。每毫升硫酸滴定液相當(dāng)于）滴定至黃色，即得。每毫升硫酸滴定液相當(dāng)于4.967mg的苦參堿。的苦參堿。2022-4-9檢測(cè)中的分離方法高效液相色譜法高效液相色譜法(HPLC)：以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，：以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相

15、的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。其用于液液分離時(shí)，流動(dòng)相和固定相檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。其用于液液分離時(shí)，流動(dòng)相和固定相都是液體。流動(dòng)相與固定相之間應(yīng)互不相溶（極性不同，避免固定液都是液體。流動(dòng)相與固定相之間應(yīng)互不相溶（極性不同，避免固定液流失），有一個(gè)明顯的分界面。當(dāng)試樣進(jìn)入色譜柱，溶質(zhì)在兩相間進(jìn)流失），有一個(gè)明顯的分界面。當(dāng)試樣進(jìn)入色譜柱，溶質(zhì)在兩相間進(jìn)行分配。達(dá)到平衡時(shí)，服從于高效液相色譜計(jì)算公式：行分配。達(dá)到平衡時(shí)，服從于高效液相色譜計(jì)算公式：K=Cs/Cm=kVm/Vs.式中式中,Cs溶質(zhì)在固定相中濃度；溶質(zhì)在固定相中濃度；Cm-溶質(zhì)在流動(dòng)相中的濃度；溶質(zhì)在流動(dòng)相中的濃度； Vs固定相固定相的體積；的體積；Vm流動(dòng)相的體積。流動(dòng)相的體積。LLPC與與GPC有相似之處，即分離的順有相似之處，即分離的順序取決于序取決于K,K大的組分保留值大；但也有不同之處大的組分保留值大；但也有不同之處,GPC中，流動(dòng)相對(duì)中，流動(dòng)相對(duì)K影響不大影響不大,LLPC流動(dòng)相對(duì)流動(dòng)相對(duì)K影響較大