免疫學(xué)期末考試重點(diǎn)

1、免疫學(xué)重點(diǎn)：1.免疫學(xué)：免疫是機(jī)體識(shí)別和排除抗原性異物的生理或病理性應(yīng)答過(guò)程。2.半抗原：又稱為不完全抗原，有些物質(zhì)具有抗原性但不具有免疫原性的小分子稱為半抗原。3.共同抗原：含共同的抗原表位的不同抗原為交叉抗原。4.異嗜性抗原：指存在于人體.動(dòng)物及微生物等不同種屬之間的共同抗原5.抗原決定簇;抗原分子中決定抗原特異性的特殊化學(xué)基團(tuán)。 T細(xì)胞表位：蛋白質(zhì)分子中能夠被MHC分子遞呈并被TCR識(shí)別的部位。 B細(xì)胞表位：抗原分子中能夠被BCR和抗體識(shí)別的部位。6.淋巴細(xì)胞再循環(huán)：是指定居在外周免疫器官的淋巴細(xì)胞，由輸出淋巴管經(jīng)淋巴干，胸導(dǎo)管或右淋巴導(dǎo)管進(jìn)入血液循環(huán)，經(jīng)過(guò)血液循環(huán)到達(dá)外周免疫器官后，穿

2、越HEV,重新分布于全身淋巴器官或組織的過(guò)程。（參與的細(xì)胞主要是T細(xì)胞）7.佐劑：指預(yù)先或與抗原同時(shí)注入體內(nèi)，可增強(qiáng)機(jī)體對(duì)抗原的免疫應(yīng)答或改變免疫 應(yīng)答類(lèi)型的非特異性免疫增強(qiáng)性物質(zhì)。8.超抗原：是一類(lèi)可直接結(jié)合抗原受體，激活大量T細(xì)胞或B細(xì)胞克隆并誘導(dǎo)強(qiáng)烈免疫應(yīng)答的物質(zhì)。9.MCAb：由一個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的、針對(duì)某一特定抗原決定簇的高度特異性抗體10.CK:即細(xì)胞因子 是有免疫細(xì)胞及組織細(xì)胞分泌的在細(xì)胞間發(fā)揮相互調(diào)控作用的一類(lèi)小分子可溶性多肽蛋白，通過(guò)結(jié)合相應(yīng)受體調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)和效應(yīng)，調(diào)控免疫應(yīng)答。11.CD:即分化群 將來(lái)自不同實(shí)驗(yàn)室的單克隆抗體所識(shí)別的同一種分化抗原歸為分化群。12.CAM:

3、 黏附分子：是介導(dǎo)細(xì)胞間或細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)間相互結(jié)合的分子13.MHC: 主要組織相容性復(fù)合體:是一組決定移植組織是否相容，與免疫應(yīng)答密切 相關(guān)，緊密連鎖的基因群。14.APC:即抗原提呈細(xì)胞,是能夠加工抗原并以抗原肽-MHC分子復(fù)合物的形式將抗原肽提呈給T細(xì)胞的一類(lèi)細(xì)胞.15.免疫耐受:生理?xiàng)l件下,機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)外來(lái)的抗原刺激產(chǎn)生的一系列應(yīng)答以清除抗原物質(zhì),但對(duì)體內(nèi)組織細(xì)胞表達(dá)的自身抗原卻表現(xiàn)為免疫無(wú)應(yīng)答,從而避免自身免疫病,機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)特定抗原的這種免疫無(wú)應(yīng)答的狀態(tài)稱為免疫耐受.16.超敏反應(yīng):是機(jī)體受到某些抗原刺激后,出現(xiàn)生理功能紊亂或組織細(xì)胞損傷等異常的適應(yīng)性免疫應(yīng)答.17.自身免疫

4、:.在某些情況下,自身耐受遭到破壞,機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)自身成分發(fā)生免疫應(yīng)答的這種現(xiàn)象稱為自身免疫.18.自身免疫?。河勺陨砻庖咭鹱陨斫M織器官損傷和臨床癥狀的疾病稱為自身免疫性疾病。19.免疫缺陷病（IDD）:是指由遺傳因素或其他原因造成的免疫系統(tǒng)發(fā)育或免疫應(yīng)答障礙而導(dǎo)致的一種或多種免疫功能缺陷或不全所致的臨床綜合征。20.腫瘤抗原：是指細(xì)胞癌變過(guò)程中新出現(xiàn)的或異常表達(dá)的抗原物質(zhì)，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展及誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗腫瘤免疫應(yīng)答中具有重要作用。簡(jiǎn)單題：1.免疫系統(tǒng)有哪些功能？ 功能 正常表現(xiàn)（有利） 異常表現(xiàn)（有害）l 免疫防御 抗病原微生物的侵襲 超敏反應(yīng)、易受感染或免疫缺陷病l 免疫自穩(wěn) 對(duì)自身組

5、織成分的耐受 自身免疫疾病l 免疫監(jiān)視防止細(xì)胞癌變或持續(xù)性感染 腫瘤或持續(xù)性病毒感染2.固有免疫和適應(yīng)性免疫的比較？ 區(qū)別點(diǎn)固有免疫適應(yīng)性免疫獲得形式固有性 無(wú)需抗原激發(fā)獲得性免疫 需抗原激發(fā)發(fā)揮作用時(shí)相早期，快速4-5天后發(fā)揮效應(yīng)免疫原識(shí)別受體模式識(shí)別受體特異性抗原識(shí)別受體， 免疫記憶無(wú)有 產(chǎn)生記憶細(xì)胞舉例抑菌 殺菌物質(zhì) 補(bǔ)體等T細(xì)胞 B細(xì)胞 3骨髓和胸腺的功能？ A骨髓:各類(lèi)血細(xì)胞的發(fā)源地，也是B細(xì)胞的發(fā)育成熟的場(chǎng)所。 1 各類(lèi)血細(xì)胞和免疫細(xì)胞的場(chǎng)所。2 B細(xì)胞和NK細(xì)胞分化成熟的場(chǎng)所。 、3 體液免疫應(yīng)答的場(chǎng)所。 b.胸腺：T細(xì)胞分化.發(fā)育.成熟的場(chǎng)所。由皮質(zhì)和髓質(zhì)組成)1) T細(xì)胞分化

6、，成熟的場(chǎng)所。2) 免疫調(diào)節(jié)作用3) 自身耐受的建立和維持4.抗原有哪些分類(lèi)？ 根據(jù)誘生抗體是否需要TH細(xì)胞參與分類(lèi);TD-Ag和TI-Ag根據(jù)抗原與機(jī)體的親緣關(guān)系:異嗜性抗原.異種抗原.同種異型抗原.自身抗原.獨(dú)特型抗原根據(jù)抗原的來(lái)源：內(nèi)源性抗原和外源性抗原其他分類(lèi)5.免疫球蛋白的功能有哪些？(v去主要功能是特異性結(jié)合抗原，從而阻斷病原入侵，發(fā)揮中和作用，C區(qū)則在V區(qū)與特異性抗原結(jié)合后，通過(guò)激活補(bǔ)體及靶細(xì)胞表面FC受體結(jié)合后，發(fā)揮調(diào)理作用，產(chǎn)生ADCC效應(yīng)，介導(dǎo)超敏反應(yīng)和穿越胎盤(pán)等。）1 識(shí)別抗原：執(zhí)行該功能的為抗體的V區(qū)， 在體內(nèi)結(jié)合病原微生物及其產(chǎn)物，具有中和毒素，阻斷病原微生物入侵等免

7、疫防御功能。2 激活補(bǔ)體3 結(jié)合Fc受體 調(diào)理作用；抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（ADCC 效應(yīng)）；介導(dǎo)I型超敏反應(yīng) 4 穿過(guò)胎盤(pán)和黏膜（lgG是唯一能透過(guò)胎盤(pán)的免疫球蛋白)天然的被動(dòng)免疫機(jī)制，對(duì)于新生兒抗感染有重要作用）6.五種免疫球蛋白的基本特征有哪些？1 IgG:血清中的主要抗體成分（75-80%）；半壽期長(zhǎng)（20-23天）；出生后3個(gè)月開(kāi)始合成，3-5歲接近成人水平；多數(shù)抗菌、抗病毒、抗毒素抗體均屬I(mǎi)gG類(lèi);是唯一能通過(guò)胎盤(pán)的Ig，發(fā)揮自然被動(dòng)免疫功能；具有活化補(bǔ)體經(jīng)典途徑的能力（IgG3>IgG1>IgG2）；具有調(diào)理作用、ADCC作用和結(jié)合SPA等；參與型、型超敏反應(yīng)

8、，某些自身免疫病的抗體也屬I(mǎi)gG;2 IgM:為五聚體，分子量最大，稱為巨球蛋白（macroglobulin）；個(gè)體發(fā)育中最先出現(xiàn)的Ig，胚胎晚期即能產(chǎn)生，臍帶血IgM增高提示胎內(nèi)感染（如風(fēng)疹病毒、巨細(xì)胞病毒感染等）；抗原初次刺激機(jī)體時(shí)，是體內(nèi)最先產(chǎn)生的Ig；血清IgM升高說(shuō)明有近期感染；有強(qiáng)大激活補(bǔ)體能力和調(diào)理作用，在機(jī)體早期免疫防御中具有重要作用；天然血型抗體是IgM；未成熟B細(xì)胞僅表達(dá)mIgM，記憶B細(xì)胞mIgM1 IgA:分為單體的血清型和二聚體的分泌型IgA；分泌型IgA 主要由黏膜相關(guān)淋巴組織產(chǎn)生，存在于唾液、淚液、乳汁及呼吸道、消化道、泌尿道的分泌液中和黏膜表面，是機(jī)體黏膜局部抗

9、感染免疫的重要因素;初乳中的sIgA可對(duì)嬰幼兒發(fā)揮自然被動(dòng)免疫作用;調(diào)理吞噬、中和毒素.2 IgD：血清中含量低（1%），其生物學(xué)作用尚不清楚.mIgD可作為B細(xì)胞分化成熟標(biāo)記，成熟B細(xì)胞同時(shí)表達(dá)mIgM和mIgD3 IgE:是血清中含量最低的Ig；主要由呼吸道、胃腸道粘膜固有層的漿細(xì)胞產(chǎn)生.7.細(xì)胞因子的共同特點(diǎn)及分類(lèi)？分類(lèi) （1）白細(xì)胞介素IL （2）集落刺激因子CSF：是指能夠刺激多功能造血干細(xì)胞和不同發(fā)育分化階 段的造血祖細(xì)胞分化.增殖的細(xì)胞因子。 （3）干擾素INF：能夠干擾病毒復(fù)制的細(xì)胞因子.I型和II型 （4)生長(zhǎng)因子GF：指一類(lèi)可促進(jìn)相應(yīng)細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的細(xì)胞因子。 (5)腫瘤壞

10、死因子TNF：能造成腫瘤組織壞死的細(xì)胞因子 （6)趨化因子：由多種細(xì)胞分泌的對(duì)不同細(xì)胞具有趨化作用的細(xì)胞因子特點(diǎn)：² 小分子蛋白質(zhì)² 可溶性² 高效性，在較低濃度下即有生物學(xué)活性² 通過(guò)結(jié)合細(xì)胞表面相應(yīng)受體發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)² 可誘導(dǎo)產(chǎn)生² 半衰期短² 效應(yīng)范圍小，絕大多數(shù)為近距離發(fā)揮作用² 單體形式存在，多細(xì)胞來(lái)源8.HLAI類(lèi)分子的組織分布和功能？ I類(lèi)分子由重鏈和B2m組成，分布于所有有核細(xì)胞表面。 II類(lèi)分子由鏈和鏈組成，分布于淋巴組織中一些特定的細(xì)胞表面。功能：參與抗原加工和提呈參與T細(xì)胞限制性識(shí)別參與T細(xì)胞

11、在胸腺的發(fā)育誘導(dǎo)同種移植排斥反應(yīng)參與對(duì)免疫應(yīng)答的遺傳控制9.B細(xì)胞和T細(xì)胞的功能？ B淋巴細(xì)胞的功能：產(chǎn)生抗體介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答提呈抗原免疫調(diào)節(jié)功能B1細(xì)胞參與非特異性免疫：抗感染，自身免疫性疾病有關(guān) T細(xì)胞的功能：輔助T細(xì)胞（Th0） 不同細(xì)胞因子和共刺激分子對(duì)Th0的分化方向發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。Th1 主要分泌Th1型細(xì)胞因子，包括IFN- TNF IL-2等，能促進(jìn)Th1的進(jìn)一步增殖，進(jìn)而發(fā)揮免疫細(xì)胞免疫效應(yīng)，同時(shí)能抑制Th2增殖。主要效應(yīng)是分泌細(xì)胞因子增強(qiáng)細(xì)胞介導(dǎo)的抗感染免疫，特別是抗胞內(nèi)病原體感染。Th2細(xì)胞主要分泌Th2型細(xì)胞因子，包括IL-4 IL-5 IL-10 IL-13等，能促進(jìn)T

12、h2細(xì)胞增殖，進(jìn)而輔助B細(xì)胞的活化，發(fā)揮體液免疫的作用，同時(shí)抑制Th1增殖。細(xì)胞毒性T細(xì)胞（CTL）通常所稱的CD8+細(xì)胞：主要功能是特異性識(shí)別內(nèi)源性抗原肽-MHC類(lèi)分子復(fù)合物，進(jìn)而殺傷靶細(xì)胞(病原體感染細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞）殺傷機(jī)制：分泌穿孔素，顆粒酶，顆粒溶素及淋巴毒素的物質(zhì)直接殺傷靶細(xì)胞 通過(guò)Fas/FasL途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（了解)10.B細(xì)胞和T細(xì)胞激活的第一第二信號(hào)？ B細(xì)胞活化:第一信號(hào)：抗原刺激信號(hào)，由BCR-CD79a/b和CD19/CD21/CD81共同傳遞。第二信號(hào)：共刺激信號(hào)，由th細(xì)胞與B細(xì)胞表面多對(duì)共刺激分子相互作用產(chǎn)生，其中最重要的是CD40/CD40L.

13、T細(xì)胞活化;第一信號(hào)：抗原刺激信號(hào)，BCR識(shí)別你、并結(jié)合抗原，形成抗原抗體復(fù)合物，抗原被加工形成抗原肽后與MHCII類(lèi)分子形成復(fù)合物，提呈給T細(xì)胞活化的第一信號(hào)。第二信號(hào)：抗原后表達(dá)B7分子，與T細(xì)胞表面CD28結(jié)合形成T細(xì)胞活化的第二信號(hào)?；罨腡細(xì)胞表達(dá)CD40L,與B細(xì)胞表面組成性表達(dá)CD40結(jié)合，產(chǎn)生B細(xì)胞活化的第二信號(hào)。11.初次免疫應(yīng)答和再次免疫應(yīng)答的區(qū)別有哪些？區(qū)別點(diǎn)初次應(yīng)答再次應(yīng)答潛伏期長(zhǎng)（約5-10天）短（1-3天）產(chǎn)生抗體的量少多在體內(nèi)維持的時(shí)間短長(zhǎng)抗體與抗原的親和力低高主要的抗體以LgM為主以LgG為主12.巨噬細(xì)胞表面有哪些受體？ 補(bǔ)體受體，F(xiàn)C受體，清道夫受體，模式識(shí)

14、別受體等13.NK細(xì)胞的殺傷作用機(jī)制？ NK細(xì)胞不表達(dá)特異性抗原識(shí)別受體，而是通過(guò)表面活化受體和抑制性受體對(duì)自身與非己進(jìn)行識(shí)別，并直接殺傷某些腫瘤和病毒感染的靶細(xì)胞。 作用機(jī)制;1.孔素/顆粒酶作用途徑2.Fas與FasL作用途徑3.TNF-與TNFR-作用途徑:TNF-與TNFR-I結(jié)合14.四型超敏反應(yīng)的臨床疾病有哪些？ I型;藥物過(guò)敏性休克，血清過(guò)敏性休克，呼吸道過(guò)敏反應(yīng)，消化道過(guò)敏反應(yīng)，皮膚過(guò)敏反應(yīng)。 II型：輸血反應(yīng)，新生兒溶血，自身免疫性溶血性貧血，藥物過(guò)敏性血細(xì)胞減少癥，肺出血腎炎綜合征，甲亢。 III型：Arthus反應(yīng)和類(lèi)Arthus反應(yīng)，血清病，鏈球菌感染后的腎小球腎炎，類(lèi)

15、風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，系統(tǒng)性紅斑狼瘡 四型：感染性遲發(fā)型超敏反應(yīng)，接觸性皮炎，移植排斥反應(yīng)。15.自身免疫病有哪些特征?1) 多數(shù)病因不明，可以有誘因，也可以無(wú)誘因。2) 患者以女性居多，發(fā)病率隨年齡的增長(zhǎng)而增加。3) 有遺傳傾向。4) 體內(nèi)有自身抗體和針對(duì)自身組織細(xì)胞的致敏T細(xì)胞。自身抗體在不同的自身免疫性疾病中有交叉和重疊現(xiàn)象，部分疾病有相關(guān)的特征性自身抗體。5) 疾病有重疊現(xiàn)象，即一個(gè)患者同時(shí)患兩種或兩種以上自身免疫性疾病。6) 病程一般較長(zhǎng)，多遷延不愈。7) 損傷局部可發(fā)現(xiàn)有淋巴細(xì)胞，漿細(xì)胞，中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。8) 免疫抑制劑治療多可取得較好的療效。9) 在某些實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中免疫相關(guān)抗原或輸注自身抗體

16、或輸注自身反應(yīng)性T細(xì)胞可復(fù)制出相似的疾病模型。16.AIDS的主要免疫學(xué)特征有哪些？目前傳播途徑有什么變化？主要特征：a) CD4+T細(xì)胞數(shù)量顯著減少，功能?chē)?yán)重障礙，CD4+/CD8+比例倒置，低于0.5.b) TH1細(xì)胞與th2細(xì)胞平衡失調(diào)，在感染的無(wú)癥狀階段以th1細(xì)胞占優(yōu)，分泌IL-2刺激CD4+細(xì)胞增殖，至AIDS期則以th2細(xì)胞占優(yōu)，分泌IL-4和IL-10抑制th1細(xì)胞分泌IL-2，從而消弱CTL的細(xì)胞毒效應(yīng)。c) 抗原提呈細(xì)胞功能降低。d) B細(xì)胞功能異常。 主要傳播途徑：性傳播，血液傳播，垂直傳播。 變化：性傳播途徑已成為主要傳播途徑，男男同性性傳播比例上升明顯；部地特定人群疫

17、情嚴(yán)重；感染者陸續(xù)進(jìn)入發(fā)病期，死亡人數(shù)增加。17.免疫缺陷病有哪些臨床特點(diǎn)？a) 反復(fù)感染 患者對(duì)各種病原體的易感性增加b) 腫瘤 IDD患者尤其是T細(xì)胞免疫缺陷者，惡性腫瘤的發(fā)生率比正常人高100-300倍。以白血病和淋巴系統(tǒng)腫瘤居多。c) 自身免疫病 IDD患者有高度伴發(fā)自身免疫病的傾向，其自身免疫病的發(fā)生率比正常人高約1000倍，以類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和惡性貧血多見(jiàn)。d) 遺傳傾向e) 臨床表現(xiàn)和病理?yè)p傷復(fù)雜多樣18.人工主動(dòng)免疫和人工被動(dòng)免疫的區(qū)別和聯(lián)系？ 比較項(xiàng)目人工主動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫免疫物質(zhì)抗原抗體或細(xì)胞因子等免疫產(chǎn)生的時(shí)間較慢，2-4周快，立即免疫維持時(shí)間長(zhǎng)，數(shù)月至數(shù)年短，2-3周主要

18、用途預(yù)防，治療治療或緊急預(yù)防常用制劑疫苗，類(lèi)毒素抗毒素，丙種球蛋白，細(xì)胞因子19.抗原抗體反應(yīng)原理和特點(diǎn)？ 反應(yīng)的原理：抗原與抗體的特異性結(jié)合是基于抗原表位與抗體超變區(qū)的結(jié)構(gòu)互補(bǔ)性和親和性（由抗原抗體分子的空間構(gòu)型決定）（1） 抗原抗體結(jié)合力：靜電引力，范德華力，氫鍵，疏水作用力（2） 抗原抗體的親和性與親和力（3） 親水膠體轉(zhuǎn)化疏水膠體 特點(diǎn)：特異性，可逆性，比例性，和階段性。20.雜交瘤技術(shù)的基本原理？ 答：利用聚乙二醇為細(xì)胞融合劑，使免疫后能產(chǎn)生抗體的小鼠脾細(xì)胞與能在體外長(zhǎng)期繁殖的小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞，通過(guò)次黃嘌呤，氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷選擇性培養(yǎng)基（HAT）融合成功的雜交瘤

19、細(xì)胞生長(zhǎng)，經(jīng)反復(fù)的免疫學(xué)檢測(cè)篩選和單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)（克隆化），最終獲得既產(chǎn)生所需單克隆抗體又能長(zhǎng)期體外繁殖的雜交瘤細(xì)胞系。21.對(duì)流免疫電泳的原理？ 答：是將雙向免疫擴(kuò)散與電泳相結(jié)合在直流電場(chǎng)中的定向加速的免疫擴(kuò)撒技術(shù)，在PH8.6的緩沖液中，大部分蛋白質(zhì)抗原等電點(diǎn)低，帶較強(qiáng)的負(fù)電荷，分子量小，受到電滲作用下，在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)，而抗體絕大多數(shù)lgG，等電點(diǎn)偏高，在ph8.6時(shí)帶負(fù)電荷少，且分子量大，移動(dòng)速度慢，它向正極移動(dòng)緩慢甚至不移動(dòng)，而在電滲作用下，隨水流向負(fù)極移動(dòng)，電滲引向負(fù)極移動(dòng)的速度超過(guò)了lgG向正極的移動(dòng)速度，因此抗體移向負(fù)極，在抗原抗體濃度最適比處形成沉淀線，根據(jù)沉淀線相對(duì)兩孔的位

20、置可大致判斷抗原抗體的比例關(guān)系。22.電化學(xué)發(fā)光的基本原理？ 答：在電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)中，磁性微粒為固相載體包被抗體（抗原）,用三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記抗體（抗原），在反應(yīng)體系內(nèi)待測(cè)標(biāo)本與相應(yīng)的抗原（抗體）發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成磁性微粒包被抗體-待測(cè)抗原三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記抗體復(fù)合物，這時(shí)上述復(fù)合物吸入流動(dòng)室，同時(shí)加入TPA緩沖液。當(dāng)磁性微粒流經(jīng)電極表面時(shí)，被安裝在電極下面的電磁鐵吸引住，而未結(jié)合的標(biāo)記抗體和標(biāo)本被緩沖液沖走，與此同時(shí)電極加壓，啟動(dòng)電化學(xué)發(fā)光，使三聯(lián)吡啶釕和TPA在電極表面進(jìn)行電子轉(zhuǎn)移，產(chǎn)生電化學(xué)發(fā)光，光的強(qiáng)度與待測(cè)抗原的濃度呈正比。23.Ficoll分離液分離外周血單個(gè)核細(xì)胞的原理和示意圖

21、？ 原理：是利用聚蔗糖-泛影葡胺分層液進(jìn)行單個(gè)核細(xì)胞的分離技術(shù)，主要成分為聚蔗糖，分子量40KD，具有高密度，低滲透壓，無(wú)毒性的特點(diǎn)。高濃度的Ficoll溶液粘性高，易使細(xì)胞聚集，故常用6%的溶液，其密度為1,020，比重為1.200的泛影葡胺可增加溶液密度，因此在Ficoll溶液中加入不同量的濃度為34%的泛影葡胺即可制成不同密度的分層液。分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞以密度為1.077+/-0.0001的分層液為最佳。將分層液加入試管底層，肝素抗凝靜脈血用Hanks液或PBS液作適當(dāng)稀釋后，輕輕疊加在分層液上面，使兩者形成一個(gè)清晰的界面，水平離心后，離心管中會(huì)出現(xiàn)幾個(gè)不同層次的液體和細(xì)胞帶，從而實(shí)

22、現(xiàn)PBMC的分離。分層(從上到下)：血小板 血漿，單個(gè)核細(xì)胞，粒細(xì)胞，紅細(xì)胞問(wèn)答題：24.補(bǔ)體的生物學(xué)意義有哪些?p46 (一）補(bǔ)體的生物功能: (二）補(bǔ)體的病理生理意義：1 溶菌、溶細(xì)胞作用 a.機(jī)體抗感染的主要機(jī)制2 免疫調(diào)理作用 b.參與適應(yīng)性免疫應(yīng)答3 清除免疫復(fù)合物 c.補(bǔ)體系統(tǒng)與血液中其他級(jí)聯(lián)反應(yīng)系4 介導(dǎo)炎癥反應(yīng) 統(tǒng)的相互作用。5 參與免疫調(diào)節(jié)25.ELISA的基本原理？雙抗體夾心法原理操作和結(jié)果觀察，臨床常用于哪些標(biāo)本的檢測(cè)？ ELISA的基本原理：是把抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性，也就是形成固相抗原或抗體，將抗原或抗體與酶連接成酶標(biāo)記的抗原或抗體，它既保

23、留了免疫活性，又保留了酶的活性，測(cè)定時(shí)將受檢樣品(含有待測(cè)抗原或抗體)和酶標(biāo)記抗原或抗體按一定程序與結(jié)合在固相載體上的抗原或抗體反應(yīng)形成固相化抗原抗體-酶復(fù)合物；用洗滌的方法將固相載體上形成的抗原抗體-酶復(fù)合物與其他成分分離，結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的的量成一定比例， 加入底物后，底物被固相載體上的酶催化生成有色產(chǎn)物，通過(guò)定性或定量檢測(cè)有色產(chǎn)物的量即可確定樣品中待測(cè)物質(zhì)的含量。 雙抗體夾心法操作： 固相抗體 加入待測(cè)樣品 溫育一段時(shí)間 洗板，去除其他游離成分 加入酶標(biāo)抗體并溫育一段時(shí)間 洗板 形成固相抗體-待測(cè)抗原-酶標(biāo)記抗體復(fù)合物 加底物 固相載體結(jié)合的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。

24、根據(jù)產(chǎn)物的顯色程度進(jìn)行抗原的定性和定量的檢測(cè)。（考試可畫(huà)圖表示） 結(jié)果觀察：產(chǎn)生有色產(chǎn)物，其顏色的深淺以待測(cè)抗原的量成正相關(guān)。臨床常用于乙肝表面抗原的檢測(cè)，取血漿或血清。26.免疫層析試驗(yàn)競(jìng)爭(zhēng)法的原理和雙抗體夾心法檢測(cè)HBsAg原理和結(jié)果觀察？AGTCB競(jìng)爭(zhēng)法原理：G處為金標(biāo)特異性抗體（兔型），T處包被了標(biāo)準(zhǔn)抗原，C處包被了羊抗兔免疫球蛋白抗體。測(cè)試時(shí)待測(cè)標(biāo)本加于A端，若標(biāo)本中含有待測(cè)抗原，流經(jīng)G處時(shí)結(jié)合金標(biāo)特異性抗體，當(dāng)混合物移至T處時(shí)，因無(wú)足夠游離的金標(biāo)特異性抗體與膜上標(biāo)準(zhǔn)抗原結(jié)合，T處無(wú)棕色紅色線條出現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性，游離金標(biāo)特異性抗體或金標(biāo)特異性抗體復(fù)合物流經(jīng)C處，與該處的羊抗兔免疫球蛋白抗體結(jié)合出現(xiàn)棕紅色的保證帶；或標(biāo)本中不含待測(cè)抗原，金標(biāo)特異性抗體則與T處膜上的標(biāo)準(zhǔn)抗原結(jié)合，在T處出現(xiàn)棕紅色的線條，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性，而保證帶仍然出現(xiàn)棕