細胞工程動物組織與胚胎工程學習教案

1、會計學1細胞工程動物組織細胞工程動物組織(zzh)與胚胎工程與胚胎工程第一頁，共88頁。第2頁/共88頁第二頁，共88頁。第3頁/共88頁第三頁，共88頁。第4頁/共88頁第四頁，共88頁。第5頁/共88頁第五頁，共88頁。Growth factor stimulation第6頁/共88頁第六頁，共88頁。第7頁/共88頁第七頁，共88頁。第8頁/共88頁第八頁，共88頁。B B、組織生長支架需、組織生長支架需第9頁/共88頁第九頁，共88頁。第10頁/共88頁第十頁，共88頁。C C、生長因子、生長因子表皮生長因子：是對表皮生長因子：是對誘導或刺激新骨的生誘導或刺激新骨的生成。成。第11頁/

2、共88頁第十一頁，共88頁。3、技術路、技術路線線（1）體外）體外得到工程得到工程提供新組提供新組織形成的織形成的空間空間第12頁/共88頁第十二頁，共88頁。皮膚(p f)修復第13頁/共88頁第十三頁，共88頁。骨修復(xif)第14頁/共88頁第十四頁，共88頁。4 4、已取得成就、已取得成就第一個組織工程產(chǎn)品第一個組織工程產(chǎn)品人工皮膚已于人工皮膚已于19971997年年3 3月經(jīng)美國月經(jīng)美國FDAFDA批準上市。批準上市。這種產(chǎn)品是器官基因這種產(chǎn)品是器官基因作用，就連病人自身作用，就連病人自身(zshn)(zshn)的血管和色的血管和色素也會逐漸轉(zhuǎn)移到素也會逐漸轉(zhuǎn)移到 適適移植移植 活

3、性皮膚中去，活性皮膚中去，愈后不留瘢痕。愈后不留瘢痕。第15頁/共88頁第十五頁，共88頁。200020003 31010第16頁/共88頁第十六頁，共88頁。第二節(jié)、胚第二節(jié)、胚胎工程胎工程胚胎工程（胚胎工程（embryo 細胞核移植、轉(zhuǎn)基因細胞核移植、轉(zhuǎn)基因操作等操作等第17頁/共88頁第十七頁，共88頁。第18頁/共88頁第十八頁，共88頁。第19頁/共88頁第十九頁，共88頁。胚胎胚胎(piti)移植成功的羊移植成功的羊第20頁/共88頁第二十頁，共88頁。第21頁/共88頁第二十一頁，共88頁。第22頁/共88頁第二十二頁，共88頁。transfer: MOET)牛羊的牛羊的生長性狀

4、年遺傳進展可比生長性狀年遺傳進展可比正常繁殖提高正常繁殖提高80%和和70%；產(chǎn)奶性狀提高產(chǎn)奶性狀提高33%。第23頁/共88頁第二十三頁，共88頁。羊也是采用胚胎移植進行擴羊也是采用胚胎移植進行擴繁的。繁的。第24頁/共88頁第二十四頁，共88頁。開始研究在該種動物的亞種開始研究在該種動物的亞種或親緣種中試驗，并取得一或親緣種中試驗，并取得一些成功。如斑馬胚胎移植給些成功。如斑馬胚胎移植給馬，蒙古馬胚胎移植給驢，馬，蒙古馬胚胎移植給驢，白肢野牛移植給荷斯坦牛。白肢野牛移植給荷斯坦牛。第25頁/共88頁第二十五頁，共88頁。第26頁/共88頁第二十六頁，共88頁。第27頁/共88頁第二十七頁，

5、共88頁。n胚胎的遺傳性不受受體的影胚胎的遺傳性不受受體的影響響第28頁/共88頁第二十八頁，共88頁。期黃體期內(nèi)期黃體期內(nèi)n胚胎的質(zhì)量：胚胎必須是正常胚胎的質(zhì)量：胚胎必須是正常的，并在處理過程中不受不良的，并在處理過程中不受不良因素的影響因素的影響第29頁/共88頁第二十九頁，共88頁。第30頁/共88頁第三十頁，共88頁。第31頁/共88頁第三十一頁，共88頁。第32頁/共88頁第三十二頁，共88頁。第33頁/共88頁第三十三頁，共88頁。放栓發(fā)情鑒定配種01234567891010111112121313141516171819207:00 7:00 FSH 4mlFSH 4ml18:0

6、0 18:00 FSH 4 mlFSH 4 ml7:00 7:00 FSH 2.5mlFSH 2.5ml18:00 18:00 FSH 2.5mlFSH 2.5ml7:00 FSH 7:00 FSH 2ml2ml14:00 PG6ml14:00 PG6ml18:00 FSH 18:00 FSH 2ml2ml7:00 FSH 7:00 FSH 1.5ml1.5ml14:00 14:00 取栓取栓18:00 FSH 18:00 FSH 1.5ml1.5ml配種配種檢查黃體沖胚移胚第34頁/共88頁第三十四頁，共88頁。第35頁/共88頁第三十五頁，共88頁?？砂l(fā)情。n羊：每日肌注孕酮1020mg，

7、或經(jīng)陰道海綿栓給予孕酮5060mg，綿羊處理1214天，山羊處理1218天，在處理的最后一天或撤除 海 綿 栓 的 前 一 天 ， 給 予PMSG200250IU，一般(ybn)可在停止注射或撤除海綿栓后23天內(nèi)發(fā)情。第36頁/共88頁第三十六頁，共88頁。第37頁/共88頁第三十七頁，共88頁。第38頁/共88頁第三十八頁，共88頁。第39頁/共88頁第三十九頁，共88頁。第40頁/共88頁第四十頁，共88頁。nn三路法三路法第41頁/共88頁第四十一頁，共88頁。第42頁/共88頁第四十二頁，共88頁。第43頁/共88頁第四十三頁，共88頁。第44頁/共88頁第四十四頁，共88頁。第45頁

8、/共88頁第四十五頁，共88頁。第46頁/共88頁第四十六頁，共88頁。第47頁/共88頁第四十七頁，共88頁。第48頁/共88頁第四十八頁，共88頁。第49頁/共88頁第四十九頁，共88頁。第50頁/共88頁第五十頁，共88頁。第51頁/共88頁第五十一頁，共88頁。第52頁/共88頁第五十二頁，共88頁。第53頁/共88頁第五十三頁，共88頁。n直接移植法是不經(jīng)瓊脂處理，直接移入預先結(jié)扎過的受體輸卵管中。經(jīng)過短期培養(yǎng)后，將胚胎從輸卵管內(nèi)沖出 ，觀察發(fā)育情況。對發(fā)育良好者，移植入同期發(fā)情的同種動物受體內(nèi)，使其產(chǎn)仔。第54頁/共88頁第五十四頁，共88頁。移向受體，胎兒的發(fā)育率要下降50，保存

9、時間越長發(fā)育率越下降。n就卵母細胞而言，排卵或由卵泡取出后，受精能力有一定限度，所以保存時間長，即或能受精，也可能出現(xiàn)胚胎發(fā)育異常。第55頁/共88頁第五十五頁，共88頁。第56頁/共88頁第五十六頁，共88頁。第57頁/共88頁第五十七頁，共88頁。第58頁/共88頁第五十八頁，共88頁。植冰（seeding）。一般，在37之間誘發(fā)結(jié)晶。n現(xiàn)在，人們已經(jīng)使用玻璃化法冷凍胚胎獲得成功，在冷凍保存液中加入高濃度的冷凍保護劑，使溶液粘性增強，當處于(chy)超低溫時，形成玻璃樣液體。第59頁/共88頁第五十九頁，共88頁。第60頁/共88頁第六十頁，共88頁。第61頁/共88頁第六十一頁，共88頁

10、。第62頁/共88頁第六十二頁，共88頁。第63頁/共88頁第六十三頁，共88頁。第64頁/共88頁第六十四頁，共88頁。第65頁/共88頁第六十五頁，共88頁。第66頁/共88頁第六十六頁，共88頁。胚胎移植胚胎移植(yzh)產(chǎn)出的產(chǎn)出的犢牛犢牛第67頁/共88頁第六十七頁，共88頁。第68頁/共88頁第六十八頁，共88頁。第69頁/共88頁第六十九頁，共88頁。第70頁/共88頁第七十頁，共88頁。胚胎嵌合方法胚胎嵌合方法聚合法聚合法第一種可以利用胚胎第一種可以利用胚胎與胚胎聚合，即使用與胚胎聚合，即使用(shyng)發(fā)生致密化發(fā)生致密化效果更佳，聚合完畢效果更佳，聚合完畢后，洗除后，洗除

11、PHA，繼續(xù)，繼續(xù)培養(yǎng)，或進行胚胎移培養(yǎng)，或進行胚胎移植。植。第71頁/共88頁第七十一頁，共88頁。第二種是利用卵裂球或細第二種是利用卵裂球或細胞與胚胎聚合，將胚胎卵胞與胚胎聚合，將胚胎卵裂球解離或用其他游離的裂球解離或用其他游離的細胞，與胚胎聚合。當用細胞，與胚胎聚合。當用一個已經(jīng)除去透明帶的胚一個已經(jīng)除去透明帶的胚帶內(nèi)，用帶內(nèi)，用PHA使之聚合使之聚合在一起，并用瓊脂包埋。在一起，并用瓊脂包埋。通過中間受體培養(yǎng)通過中間受體培養(yǎng)(piyng)一段時間后，一段時間后，觀察其發(fā)育的情況。觀察其發(fā)育的情況。第72頁/共88頁第七十二頁，共88頁。第73頁/共88頁第七十三頁，共88頁。有有色色(

12、yu s)鼠鼠與與白白色色鼠鼠胚胚胎胎融融合合第74頁/共88頁第七十四頁，共88頁。胚胎嵌合的鑒定胚胎嵌合的鑒定兩種：色素分析法和遺兩種：色素分析法和遺傳分析法傳分析法素情況，確定是否是嵌素情況，確定是否是嵌合體。合體。第75頁/共88頁第七十五頁，共88頁。第76頁/共88頁第七十六頁，共88頁。第77頁/共88頁第七十七頁，共88頁。胚胎嵌合的意義胚胎嵌合的意義胚胎嵌合技術可以作胚胎嵌合技術可以作為研究分析哺乳動物為研究分析哺乳動物發(fā)生機制的重要手段，發(fā)生機制的重要手段，例如研究卵裂球分化例如研究卵裂球分化種組合的嵌合體，培種組合的嵌合體，培育新的毛皮動物；利育新的毛皮動物；利用種間移植，分析胎用種間移植，分析胎兒和母體的相互關系。兒和母體的相互關系。第78頁/共88頁第七十八頁，共88頁。第79頁/共88頁第七十九頁，共88頁。第80頁/共88頁第八十頁，共88頁。同卵雙生(shungshng)第81頁/共88頁第八十一頁，共88頁。第82頁/共88頁第八十二頁，共88頁。吸出的半胚或卵裂球，納入空透明帶中?？胀该鲙菍U棄的卵母細胞或不合適的胚胎，去除其內(nèi)容物即可。然后將分割