突變和多態(tài)的分析學習教案

1、會計學1突變突變(tbin)和多態(tài)的分析和多態(tài)的分析第一頁，共16頁?；虍惓?方 法 探針、引物或限制酶基因缺失 Southern雜交 缺失基因的探針 PCR分析(fnx) 引物包括缺失或在缺失部位內(nèi)點突變 RFLP分析(fnx) 突變導致其切點消失的限制酶 ASO雜交 正常和異常的ASO探針 PCR分析(fnx) 引物包括突變部位 （RFLP,SSCP) 基因已知但異常不明 基因內(nèi)或旁側序列 基因內(nèi)或旁側序列探針或引物 多態(tài)性（RFLP,AMP-FLP) 連鎖分析(fnx)基因未知 與疾病連鎖的多態(tài)性， 與疾病連鎖的多態(tài)位點探 如AMP-FLP連鎖分析(fnx) 針或引物 RFLP位點單體

2、型連鎖分析(fnx)第2頁/共16頁第二頁，共16頁。第3頁/共16頁第三頁，共16頁。Allele Specific Oligonucleotide(ASO) Hybridization第4頁/共16頁第四頁，共16頁。10kb4kbBamHBamH5353()53(-)/ /- /- -/- -/-14kb10kb地貧基因缺失的診斷 左圖示16染色體上攜帶(xidi)有數(shù)目不同的基因，箭頭示BamHI的切點；由圖為用基因探針雜交的結果。缺失缺失(qu sh)的檢測的檢測第5頁/共16頁第五頁，共16頁。外顯子 bp N P Pm 535 3 410 43 357 50 271 13 238

3、 6 202 47 181 60 139 52 113DMD基因缺失(qu sh)的多重PCR診斷。共采用9對引物，可見患者(P)有電泳帶的缺失(qu sh)。Pm為啟動子第6頁/共16頁第六頁，共16頁。熒光熒光(ynggung)原位雜原位雜交（交（FISH）基因組探針(tn zhn)的分離利用原位雜交的方法進行基因(jyn)定位第7頁/共16頁第七頁，共16頁。IVS-IVS- Mst部位(bwi) 1.15kb1.15kb1.35kb正常(zhngchng)1.15kb鐮變1.35kb 正常(zhngchng) 鐮狀性狀 鐮狀貧血1.15kb1.35kb鐮狀貧血的基因診斷第8頁/共16頁

4、第八頁，共16頁。Linkage Analysis第9頁/共16頁第九頁，共16頁。1212345kb5.73.42.3成人型多囊腎病的連鎖(lin su)分析第10頁/共16頁第十頁，共16頁。第11頁/共16頁第十一頁，共16頁。第12頁/共16頁第十二頁，共16頁。Single Strand Conformational Polymorphism (SSCP)DNA is denatured into single strandsSingle strands fold; shape is altered by mutationsMobility of mutant and normal strands differ in gel第13頁/共16頁第十三頁，共16頁。Protein Truncation Assay（蛋白質(zhì)截短檢測(jin c)）DNA transcribed to mRNARNA translated to proteinProtein run on gelTruncated protein has different mobility in gel第14頁