中國(guó)藥科大學(xué)生物制藥工藝學(xué)期末B卷

1、中國(guó)藥科大學(xué)生物制藥工藝學(xué)期末試卷（B卷）一、填空題（每空 0.5分，共30分）1多糖構(gòu)效關(guān)系研究還不夠完善，但目前的研究已表明，多糖的活性與其高級(jí)結(jié)構(gòu)、分支度及其側(cè)鏈、分子量 以及多糖中的取代基 有關(guān)。2、利用產(chǎn)氨短桿菌發(fā)酵法生產(chǎn)肌甘酸，第一步是用誘變育種的方法篩選缺乏SAMP合成酶的腺喋吟缺陷型菌株,在發(fā)酵培養(yǎng)基中提供亞適量的 腺喋吟；另外，改變細(xì)胞膜對(duì) 5 -IMP的透性，選育 Mn2+不敏感的變異株。3、溶質(zhì)通過色譜柱時(shí)造成的峰加寬效應(yīng)包括分子擴(kuò)散 、渦流擴(kuò)散、流動(dòng)相中 傳質(zhì)阻力、固定相中傳質(zhì)阻力。4、在采用多緩沖陰離子交換劑作固定相的離子交換聚焦色譜過程中，當(dāng)柱中某位點(diǎn)之pH值下降到

2、蛋白質(zhì)組分 PI（等電點(diǎn)）值以下時(shí)，它因帶 正電荷而下移，如果柱中有兩種蛋白組 分，pI值較大（高）者會(huì)超過另一組分,移動(dòng)至柱下部pH較色的位點(diǎn)進(jìn)行聚焦（交換）。5、親和層析洗脫方法有 非專一性洗脫，特殊洗脫，專一性洗脫廠6、晶體的質(zhì)量主要是指晶體的大小、形狀和純度，其中影響晶體大小的主要因素有過飽和度，溫度，攪拌速度，晶種 。7、常用的吸附劑有 活性炭、 硅膠和白陶土等。8、在萃取過程中被提取的溶液稱為 婁遮，其中欲提取的物質(zhì)稱 辿，而用以進(jìn)行萃取的溶 劑稱為萃取劑。達(dá)到萃取平衡后，大部分溶質(zhì)轉(zhuǎn)移到萃取劑中，這種含有溶質(zhì)的萃取劑溶液稱為萃取液，而被萃取出溶質(zhì)以后的料液稱為 萃余液。9、從細(xì)胞

3、培養(yǎng)液中提取有效組分時(shí) ，往往需要除去細(xì)胞及蛋白質(zhì) ，常用的除去細(xì)胞及蛋白質(zhì)的 方法有 加入凝聚劑，加入絮凝劑，變性沉淀，等電點(diǎn)沉淀 等。10、影響絮凝效果的主要因素有 絮凝劑的分子量，絮凝劑的用量，溶液 pH值，攪拌速度和 時(shí)間。11、色譜介質(zhì)按分離機(jī)理分為 反相色譜、正相色譜 、離子交換色譜 、凝膠過濾色譜，親和 色譜。12、基因治療中常用的非病毒載體有 裸露DNA、基因縫合線法、 脂質(zhì)體載體 和 哺乳動(dòng)物 人工染色體。13、四環(huán)類抗生素是一類以 四并苯（蔡并生）為母核的一族抗生素;鏈霉素是 氨基糖昔類抗 生素；紅霉素是分子內(nèi)含有 14元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素；寫出青霉素的化學(xué)結(jié)構(gòu)通式 14、

4、請(qǐng)列舉應(yīng)用基因藥物來治療腫瘤的幾種方案：導(dǎo)入抑癌基因或細(xì)胞因子、自殺基因、抑制血管生成、反義藥物 、導(dǎo)入 MHCI類抗原基因、 導(dǎo)入 MDRI基因等方法。二、名詞解釋（每小題 3分，共30分）1、酶促半合成人胰島素：以豬胰島素為原料，利用胰蛋白酶的轉(zhuǎn)酰胺作用（1分）將豬胰島素 B鏈之30位丙氨酸轉(zhuǎn)化（1分）為蘇氨酸即得人胰島素（1分）。2、親和膜：結(jié)合親和技術(shù)和膜分離技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)，利用親和配基修飾的微濾膜（2分）為親和吸 附介質(zhì),純化目標(biāo)蛋白質(zhì)（1分）。3、全排阻：當(dāng)具有一定分子量分布的高聚物溶液從柱中通過時(shí)，較大的分子完全不能進(jìn)入顆粒內(nèi)部，只能從顆粒間隙流過， 稱“全排阻” （2分）。其流經(jīng)體

5、積最小，等于外水 體積V0 （1 分）。4、類分離：將分子量極為懸殊的兩類物質(zhì)分開（2分），如蛋白質(zhì)與鹽類（1分），稱作類分 離或的分子量小組分離.選擇凝膠時(shí)，應(yīng)使樣品中大分子組的分子量大于其排阻限，而小分子組于滲入限。大分子的分配系數(shù)K =0,小分子的K =1。5、基因藥物：基因藥物 genetic medicine, 核酸類藥物，以遺傳物質(zhì) DNA、RNA 為治療物質(zhì)基礎(chǔ) 的藥物（2分），如核酸疫苗、反義藥物（1分）。6、容量因子：在色譜過程中，溶質(zhì)在固定相中的總摩爾數(shù)與流動(dòng)相中總摩爾數(shù)之比（2分），容量因子越大該組分的保留能力越強(qiáng)，越難洗脫。（1分）7、等密度離心法：在離心力作用下，不同

6、密度的多組分顆粒在梯度介質(zhì)中“向上”或“向下”移動(dòng)，（1分）當(dāng)移動(dòng)至其密度與介質(zhì)密度相等的位置便不再移動(dòng)，形成靜止區(qū)帶，即“達(dá)到”離心平衡，各組分根據(jù)密度不同而分離。（2分）8、超濾技術(shù)：超過濾（簡(jiǎn)稱超濾）是一項(xiàng)分子級(jí)膜分離手段，（1分）以具有一定孔徑的膜為分離介質(zhì)，（1分）以壓力差為推動(dòng)力將不同分子量的物質(zhì)進(jìn)行選擇性分離的方法。（1分）9、超臨界流體萃取：超臨界流體（supercritical fluid , 簡(jiǎn)稱 SCF） 萃取技術(shù)，又稱壓力流體萃取、超臨界氣體萃取、臨界溶劑萃取等，是利用處于臨界壓力和臨界溫度以上（2分）的一些溶劑流體所具有特異增加物質(zhì)溶解能力來進(jìn)行分離純化的技術(shù)。（1分

7、）10、生物制品：生物制品（biological product ） 是應(yīng)用普通的或以基因工程、細(xì)胞工程、蛋白質(zhì)工程、發(fā)酵工程等生物技術(shù)獲得的微生物、細(xì)胞及各種動(dòng)物和人源的組織和液體等生物材料制備（2分），用于人類疾病預(yù)防、治療和診斷的藥品（1分）。三、單項(xiàng)選擇題（每小題1分，共20分）（從A、B、C、D四個(gè)選項(xiàng)中選擇一個(gè)正確答案填入空格中）1、下面表達(dá)系統(tǒng)為原核表達(dá)系統(tǒng)的是（ A ）A. E.coliB.畢赤酵母C.昆蟲細(xì)胞 D.動(dòng)物細(xì)胞、2、下列藥物哪些是基因藥物（ B ）A.基因工程藥物B.遺傳物質(zhì) DNA為物質(zhì)基礎(chǔ)制造的藥物 C.天然生物藥物D.半合成生物藥物3、肽合成中，由于順序合成

8、的需要，必須對(duì)暫不參加反應(yīng)的基團(tuán)加以保護(hù)。在多肽的固相合成中，常用的氨保護(hù)基是（ A ） A.Fmoc B.Bz C.Tos D.甲醇4、蛋白質(zhì)類物質(zhì)分離純化往往是多步驟的，其前期處理手段多采用下列哪類的方法。（B ）A.分辨率高B.負(fù)載量大C.操作簡(jiǎn)便D.價(jià)廉5、當(dāng)向蛋白質(zhì)純?nèi)芤褐屑尤胫行喳}時(shí)，蛋白質(zhì)溶解度（C ）A.增大 B.減小 C.先增大，后減小 D.先減小，后增大6、鹽析常數(shù) Ks是生物大分子的特征常數(shù)，它與下列哪種因素關(guān)系密切。（B ）A.鹽濃度 B.鹽種類 C.溶質(zhì)濃度D介質(zhì)pH7、網(wǎng)格高聚物吸附劑吸附的弱酸性物質(zhì)，一般用下列哪種溶液洗脫。（D ）A.水B.高鹽C.低pH D.高

9、pH 8、用鈉型陽(yáng)離子交換樹脂處理氨基酸時(shí)，吸附量很低，這是因?yàn)锳.選錯(cuò)樹脂 B.離子競(jìng)爭(zhēng)C.偶極排斥D.解離低9、凝膠層析中，有時(shí)小分子溶質(zhì)的Kd工匚FH P 10 4洗篷 洗脫樹脂吸附物f f E氣 填寫SOD生產(chǎn)工藝中非空格（豈1-） 分）溶：j:沉淀1洗7附納施 洗血液c上消水國(guó)門陽(yáng)心溶解上消液L_超述與聞 祖酷液 *濃縮他濃能-一沉淀物S7-T杜層析一位:，脫拄濃縮吸附科_闔丁 erflpRs.2七脫液一廠一詼干嵇粉途干答案：A:去血紅蛋白（1分）B: 乙醇（1分）C: 氯仿（1分）D :丙酮（1分E:熱變性（1分）F: 60-70 C （1分）G洗脫（1分）3、青霉素為弱酸性抗生素，在水溶液中穩(wěn)定性較差，且其穩(wěn)定性隨溫度上升而下降，請(qǐng)寫出將該抗生素從發(fā)酵液中分離制備的方法，寫出選擇依據(jù)、主要工藝及操作要點(diǎn)：（7分）答：青霉素游離酸易溶于醇類、醍類和酯類，但在水中溶解度很?。磺嗝顾剽淃}則易溶于水和甲醇，難溶于有機(jī)溶媒。從濾液中提取青霉素就是利用青霉素這個(gè)性質(zhì)，在不同pH條件下，用不同的溶劑反復(fù)進(jìn)行萃取，從而達(dá)到提純和濃縮的目的（1分）。溶劑萃取法提取青霉素鉀成品的一般工藝路線如下（5分）：I板框過婚或靛女越窟I|BA美小發(fā)除液拉洗液丁理落取液冷卻莖1 口寸F過犍周1魄氏yL,加1,3 BA.in PPE1,pH5.00.1（恥 陛H溶