潔凈室環(huán)境監(jiān)測操作規(guī)程

1、青島文件文件名稱潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測操作規(guī)程文件編號SOP-ZL66-1制 定 人審 核 人審 核 人制定日期審核日期審核日期批 準 人批準日期生效日期頒發(fā)部門品管部印 數(shù)份分發(fā)部門品管部目的 建立潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測規(guī)程，標準潔凈區(qū)沉降菌、浮游菌、懸浮粒子的測試，保證藥品在規(guī)定的潔凈級別內進行生產。范圍 本標準適用于潔凈區(qū)沉降菌、浮游菌、懸浮粒子的監(jiān)測。責任 環(huán)境監(jiān)測員內容1、檢驗依據(jù)：1.1 GB/T16294-2021?醫(yī)藥潔凈室區(qū)沉降菌的測試方法?1.2 GB/T16293-2021?醫(yī)藥潔凈室區(qū)浮游菌的測試方法?1.3 GB/T16292-2021?醫(yī)藥潔凈室區(qū)懸浮粒子的測試方法?2、懸浮粒子的

2、監(jiān)測2.1概述：本測試方法采用計數(shù)濃度法，即通過測定潔凈區(qū)環(huán)境內單位體積空氣中含大于或等于某粒徑懸浮粒子數(shù)，來評定潔凈室區(qū)的懸浮粒子潔凈度等級。2.2儀器和設備：塵埃粒子計數(shù)器，嚴格按照?塵埃粒子計數(shù)器操作、維護保養(yǎng)規(guī)程?SOP-ZL95-1操作。2.3測試步驟測試條件：在測試之前，要對潔凈室區(qū)相關參數(shù)進行預先測試，包括溫度控制在18-26、相對濕度控制在45-65%、壓差等，同時應滿足儀器的使用范圍。測試狀態(tài)：靜態(tài)測試，人員不得多于2人。測試報告中應明確測試時所采用的狀態(tài)及測試人員數(shù)。測試時間：在空態(tài)或靜態(tài)a測試時，對單向流潔凈室區(qū)而言，測試宜在凈化空氣調節(jié)系統(tǒng)正常運行時間不少于10min后

3、開始。對非單向流潔凈室區(qū)，測試宜在凈化空氣調節(jié)系統(tǒng)正常運行時間不少于30min開始。在靜態(tài)b測試時，對單向流潔凈室區(qū)，測試宜在生產操作人員撤離現(xiàn)場并經過10min后開始；對非單向流潔凈室區(qū)，測試宜在生產操作人員撤離現(xiàn)場并經過20min自凈后開始。2.4采樣點數(shù)目及其布置在空態(tài)或靜態(tài)測試時，懸浮粒子采樣點數(shù)目及其布置應力求均勻，并不得少于最少采樣點數(shù)目。在動態(tài)測試時，懸浮粒子采樣點數(shù)目及其布置應根據(jù)產品的生產及工藝關鍵操作區(qū)設置。最少采樣點數(shù)目如下 最少采樣點數(shù)目面積潔凈級別A級C級D級102-32210204222040822401001642采樣點的布置：· · 

4、3; ·   采樣點位置：一般在離地0.8m高度的水平面上均勻布置，并避開回風口。測試人員應在采樣口的下風側。采樣次數(shù)的限定：對于任何小潔凈室或局部空氣凈化區(qū)域，采樣點的數(shù)目不得少于2個，總采樣次數(shù)不得少于5次。 最小采樣量潔凈度級別采樣量L/次0.5m5mA級5.668.5C級2.838.5D級2.838.52.5判斷標準：潔凈度級別懸浮粒子最大允許數(shù)個/m3靜態(tài)0.5m5mA級352020C級3520002900D級3520000290002.6監(jiān)測頻率：每季度對微生物潔凈實驗室進行監(jiān)測，并及時填寫監(jiān)測記錄附件2。 D級取樣間每季度監(jiān)測所有房間，并及

5、時填寫監(jiān)測記錄附件12.6.3每季度對D級潔凈區(qū)所有房間進行監(jiān)測，并及時填寫監(jiān)測記錄附件1。3、沉降菌的監(jiān)測3.1概述：本測試方法利用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經假設干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內的活微生物數(shù)，并以此來評定潔凈室區(qū)的潔凈度。本法采用動態(tài)監(jiān)測，培養(yǎng)皿暴露時間為不大于4小時。3.2儀器和設備：高壓消毒鍋、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿已滅菌，90mm×15mm、大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基TSA或沙氏瓊脂培養(yǎng)基SDA。3.3測試步驟：測試前培養(yǎng)皿外表必須嚴格消毒。將已于3035恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)

6、48小時且無菌落生長的培養(yǎng)皿按照采樣點布置圖逐個放置，然后從里到外逐個翻開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基外表暴露在空氣中。全部采樣結束，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。采用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基TSA配制的培養(yǎng)皿經采樣后在3035下培養(yǎng)，時間不少于2天。采用沙氏瓊脂培養(yǎng)基SDA配制的培養(yǎng)皿經采樣后在2025下培養(yǎng)，時間不少于5天。每批培養(yǎng)基應有對照試驗，檢查培養(yǎng)根本身是否污染，可每批選定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。菌落計數(shù)：用肉眼直接計數(shù)，然后用510倍放大鏡檢查有否遺漏。假設培養(yǎng)皿上有2個或2個以上菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上的菌落計數(shù)。采樣點數(shù)目及其布置：參照懸浮粒子的采樣點數(shù)目。最少培養(yǎng)皿數(shù)：在滿足

7、最少采樣點數(shù)目的同時，還應滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)最少培養(yǎng)皿數(shù)潔凈度級別最少培養(yǎng)皿數(shù)90mmA級2C級2D級2采樣次數(shù)：每個采樣點采樣一次。評定標準：潔凈度級別浮游菌cfu/m3沉降菌90mmcfu/4小時接觸蝶cfu/蝶手套cfu/手套A級小于1小于1小于1小于1C級1005025D級20010050監(jiān)測頻率：.1 微生物潔凈實驗室凈化臺樣品每次實驗時監(jiān)測，其他房間每周一次并及時填寫監(jiān)測記錄附件4。.2 D級取樣間每季度監(jiān)測所有房間，并及時填寫監(jiān)測記錄附件3。.3 D級潔凈區(qū)每季度監(jiān)測所有房間，并及時填寫監(jiān)測記錄附件3。.4 陽性對照間生物平安柜每次實驗時監(jiān)測，其他房間每季度測一次并及時填寫監(jiān)測記錄

8、附件4.5 微生物潔凈實驗室外表微生物手套及操作服每周測一次，并及時填寫監(jiān)測記錄附件4。4、浮游菌的監(jiān)測4.1概述 本方法采用計數(shù)濃度法，即通過收集懸游在空氣中的生物性粒子于專門的培養(yǎng)基，經假設干時間，在適宜的生長條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)，從而判定潔凈環(huán)境內單位體積空氣中的活微生物數(shù)，以此來評定潔凈室(區(qū))的潔凈度。本法采用動態(tài)監(jiān)測。 4.2儀器、設備和培養(yǎng)基：FKC-1型浮游菌采樣器，嚴格按照?浮游菌采樣器操作及維護保養(yǎng)規(guī)程?SOP-ZL96-1操作。培養(yǎng)皿已滅菌，90mm×15mm、大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基TSA或沙氏瓊脂培養(yǎng)基SDA、恒溫培養(yǎng)箱。4.3測試步驟測試前儀器、

9、培養(yǎng)皿外表必須嚴格消毒。采樣器進入被測房間前先的消毒劑滅菌，用于100級潔凈室的采樣器宜一直放在被測房間內。先用消毒劑消毒采樣器的頂蓋、轉盤以及罩子的內外面，采樣結束，再用消毒劑輕輕噴射罩子的內壁和轉盤。采樣口及采樣管，使用前必須高溫滅菌。如用消毒劑對采樣管的外壁及內壁進行消毒時，應將管中的殘留液倒掉并晾干。采樣者應穿戴與被測潔凈區(qū)域相應的工作服，在轉盤上放入或調換培養(yǎng)皿前，雙手用消毒劑消毒。儀器經消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開動真空泵抽氣，使儀器中的剩余消毒劑蒸發(fā)，時間不少于5min，并調好流量、轉盤轉速。關閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子后調節(jié)采樣器縫隙高度。置采樣口于采樣點后，依次開啟 采樣器、

10、真空泵，轉動定時器，根據(jù)采樣量設定采樣時間。培養(yǎng) 全部采樣結束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在3035培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于48h。每批培養(yǎng)基應有對照試驗，檢驗培養(yǎng)根本身是否污染?？擅颗x定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。菌落計數(shù) 用肉眼直接計數(shù)、標記或在菌落計數(shù)器上點計，然后用510倍放大鏡檢查，有否遺漏。假設平板上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上的菌落計數(shù)。4.4采樣點數(shù)量及其布置浮游菌測試的最少采樣點數(shù)目及其布置參照懸浮粒子的采樣點數(shù)目。4.5監(jiān)測頻率： 微生物潔凈實驗室每季度監(jiān)測一次，并及時填寫監(jiān)測記錄附件6。 D級取樣間每季度監(jiān)測所有房間，并及時填寫監(jiān)測記錄附件5

11、。4.5.3 D級潔凈區(qū)每季度監(jiān)測所有房間，并及時填寫監(jiān)測記錄附件5。5、考前須知5.1使用前仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質量，培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿有變質、破損或污染的不能使用。5.2采取一切措施防止采樣管的污染和其他人為對樣本的污染。5.3對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細的記錄。5.4由于細菌種類繁多，差異甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿反面或正面仔細觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細菌菌落或培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時用顯微鏡鑒別。6、年度回憶審核與數(shù)據(jù)趨勢分析6.1 品管部每年對通過質量回憶對監(jiān)測數(shù)據(jù)收集并經評價，用統(tǒng)計分析圖將趨勢直觀地反映出來，在圖中標出警戒限度及糾偏限度。6.2 根據(jù)

12、趨勢分析結果可對環(huán)境控制區(qū)的微生物學質量做出評估，并對警戒和糾偏限度做出相應調整，并通知相關部門。7、警戒限度與糾偏限度確實定原那么7.1 警戒限度：用以指示環(huán)境中的微生物水平是否有偏離正常水平的可能性如超過，至少應予以調查。7.2 糾偏限度：一旦超出，表示環(huán)境中微生物污染水平已嚴重偏離正常水平，對產品質量造成高度的污染風險必須立即采取糾偏措施。7.3 制定依據(jù):警戒限、糾偏限以正常監(jiān)測數(shù)據(jù)為根底，并賦與一定的平安系數(shù)。即： 警戒限度平均值+ 2， 糾偏限度平均值+ 38、附件1?潔凈區(qū)懸浮粒子監(jiān)測記錄?R-SOP-ZL66-1-01附件2?微生物潔凈實驗室懸浮粒子監(jiān)測記錄?R-SOP-ZL6

13、6-1-02附件3?潔凈區(qū)沉降菌監(jiān)測記錄?R-SOP-ZL66-1-03附件4?微生物潔凈實驗室沉降菌監(jiān)測記錄?R-SOP-ZL66-1-04附件5?潔凈區(qū)浮游菌監(jiān)測記錄?R-SOP-ZL66-1-05附件6?微生物潔凈實驗室浮游菌監(jiān)測記錄?R-SOP-ZL66-1-06附件7?監(jiān)測點分布圖?9、修訂歷史文件修訂、變更歷史原文件編號現(xiàn)文件編號生效日期修訂變更原因潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測操作規(guī)程SOP-ZL66-1 第 14 頁 共 14 頁附件1潔凈區(qū)懸浮粒子監(jiān)測記錄編號： R-SOP-ZL66-1-01監(jiān)測狀態(tài)靜態(tài)監(jiān)測日期 年 月 日監(jiān)測標準D級：0.5m 3520000/m3；5m 29000 /m

14、3報告日期年 月 日監(jiān)測依據(jù)GB/T16292-2021?醫(yī)藥潔凈室區(qū)懸浮粒子的測試方法?監(jiān)測數(shù)據(jù)房間名稱平均值房間名稱平均值0.5m5m0.5m5m男二更中控室女二更粉篩室緩沖間產氣劑前室2洗衣整衣間配漿室稱量室制粒烘干室備料室男二更潔具間女二更物料氣閘室緩沖間內包材室潔凈走廊潔凈走廊中控室暫存室模具室顆粒填充室暫存室產氣劑前室1物料緩沖間模具室器具存放室預留間器具清洗室配料室潔具間器具存放室噴干室器具清洗室內包裝室機械間取樣緩沖間取樣間備注：帶“為一樓潔凈區(qū)監(jiān)測人： 復核人：附件2微生物潔凈實驗室懸浮粒子監(jiān)測記錄編號： R-SOP-ZL66-1-02監(jiān)測標準A級：0.5m 3520/m3；

15、 5m 20/ m3監(jiān)測狀態(tài)靜態(tài)C級：0.5m 352000/m3 ； 5m 2900/ m3監(jiān)測依據(jù)GB/T16292-2021?醫(yī)藥潔凈室區(qū)懸浮粒子的測試方法?監(jiān)測數(shù)據(jù)年區(qū)域名稱平均值年區(qū)域名稱平均值月日0.5m5m月日0.5m5m監(jiān)測人： 復核人：附件3潔凈區(qū)沉降菌監(jiān)測記錄編號： R-SOP-ZL66-1-03監(jiān)測狀態(tài)動態(tài)監(jiān)測日期年 月 日監(jiān)測標準D級：100cfu/4小時，90mm平皿報告日期年 月 日監(jiān)測依據(jù)GB/T16294-2021?醫(yī)藥潔凈室區(qū)沉降菌的測試方法?監(jiān)測數(shù)據(jù)區(qū)域名稱菌落數(shù)平均菌落數(shù)區(qū)域名稱菌落數(shù)平均菌落數(shù)1#采樣點累計2#采樣點累計1#采樣點累計2#采樣點累計男二更

16、中控室女二更粉篩室緩沖間產氣劑前室2洗衣整衣間配漿室稱量室制粒烘干室備料室男二更潔具間女二更物料氣閘室緩沖間內包材室潔凈走廊潔凈走廊中控室暫存室模具室顆粒填充室暫存室產氣劑前室1物料緩沖間模具室器具存放室預留間器具清洗室配料室潔具間器具存放室噴干室器具清洗室內包裝室機械間取樣緩沖間取樣間備注：帶“為一樓潔凈區(qū)監(jiān)測人： 復核人：附件4沉降菌、溫濕度、壓差監(jiān)測記錄微生物實驗室口 陽性菌對照室口 編號： R-SOP-ZL66-1-04 年二更cfu/皿操作間cfu/皿操作臺cfu/皿相對濕度%溫度壓差Pa備注月日121212監(jiān)測人： 復核人： 附件5潔凈區(qū)浮游菌監(jiān)測記錄編號： R-SOP-ZL66-

17、1-05監(jiān)測標準D級：200cfu/m3監(jiān)測日期 年 月 日監(jiān)測狀態(tài)動態(tài)報告日期年 月 日采樣點2個面積100m2采樣量200L/次監(jiān)測依據(jù)GB/T16293-2021?醫(yī)藥潔凈室區(qū)浮游菌的測試方法?監(jiān)測數(shù)據(jù)區(qū)域名稱菌落數(shù)cfu菌落數(shù)cfu/m3區(qū)域名稱菌落數(shù)cfu菌落數(shù)cfu/m31#采樣點2#采樣點1#采樣點2#采樣點1#采樣點2#采樣點1#采樣點2#采樣點男二更中控室女二更粉篩室緩沖間產氣劑前室2洗衣整衣間配漿室稱量室制粒烘干室備料室男二更潔具間女二更物料氣閘室緩沖間內包材室潔凈走廊潔凈走廊中控室暫存室模具室顆粒填充室暫存室產氣劑前室1物料緩沖間模具室器具存放室預留間器具清洗室配料室潔具間器具存放室.噴干室器具清洗