第9章常見植物的脫毒與快速繁殖技術(shù)

1、第第9 9章章 常見植物的脫毒與常見植物的脫毒與快速繁殖技術(shù)快速繁殖技術(shù) 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng) 大大 家家 好好 ！本章主要內(nèi)容本章主要內(nèi)容(4學時學時)l蔬菜的脫毒與快繁l果樹的脫毒與快繁l花卉植物的脫毒與快繁l農(nóng)作物的脫毒與快繁l藥用植物的試管快繁l樹木的脫毒與快繁第第9 9章章 常見植物的脫毒常見植物的脫毒 與快速繁殖技術(shù)與快速繁殖技術(shù) (1)(1)掌握馬鈴薯的生物學習性，掌握馬鈴薯脫毒培養(yǎng)的過程以掌握馬鈴薯的生物學習性，掌握馬鈴薯脫毒培養(yǎng)的過程以及馬鈴薯脫毒苗的鑒定方法；掌握番茄的生物學特性及快及馬鈴薯脫毒苗的鑒定方法；掌握番茄的生物學特性及快速繁殖方法；速繁殖方法；(2)(2)掌

2、握蘋果的脫掌握蘋果的脫 毒方法與快繁技術(shù)；掌握葡萄的脫毒與快技毒方法與快繁技術(shù)；掌握葡萄的脫毒與快技術(shù)；掌握草莓的脫術(shù)；掌握草莓的脫 毒與快繁技術(shù)；毒與快繁技術(shù)；(3)(3)掌握蘭花、香石竹、菊花、非洲菊、矮牽牛、百合等花卉掌握蘭花、香石竹、菊花、非洲菊、矮牽牛、百合等花卉的生物學特性，組培快速繁殖方法及自然繁殖法；的生物學特性，組培快速繁殖方法及自然繁殖法；(4)(4)掌握甘薯的生物學特性，脫毒與快繁的方法及技術(shù)；掌握甘薯的生物學特性，脫毒與快繁的方法及技術(shù)；(5)(5)掌握蘆薈、桔梗等藥用植物的快繁技術(shù)；掌握蘆薈、桔梗等藥用植物的快繁技術(shù)； (6)(6)掌握毛白楊、河北楊等綠化苗木的快繁技

3、術(shù)。掌握毛白楊、河北楊等綠化苗木的快繁技術(shù)。第第9 9章章 常見植物的脫毒常見植物的脫毒 與快速繁殖技術(shù)與快速繁殖技術(shù) 本章教學目的與要求第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜的脫毒與快繁蔬菜的脫毒與快繁 第第9 9章常見植物的脫毒章常見植物的脫毒 與快速繁殖技術(shù)與快速繁殖技術(shù) 馬鈴薯馬鈴薯 蕃茄蕃茄一、馬鈴薯的組織培養(yǎng)一、馬鈴薯的組織培養(yǎng)第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁蔬菜脫毒與快繁微型薯第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁蔬菜脫毒與快繁 馬鈴薯是一種全球性的重要經(jīng)濟作物。馬鈴薯是一種全球性的重要經(jīng)濟作物。適應性廣，營養(yǎng)價值高，耐貯藏適運輸，適應性廣，營養(yǎng)價值高，耐貯藏適運輸，既是一種重要的糧食作物也是一種調(diào)節(jié)市既是一種重

4、要的糧食作物也是一種調(diào)節(jié)市場供應的重要蔬菜。馬鈴薯原產(chǎn)于拉丁美場供應的重要蔬菜。馬鈴薯原產(chǎn)于拉丁美洲，當被發(fā)現(xiàn)可以食用后，很快傳到世界洲，當被發(fā)現(xiàn)可以食用后，很快傳到世界各地，成為栽培很廣的一種作物。各地，成為栽培很廣的一種作物。第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁蔬菜脫毒與快繁 危害有危害有1717種之多，如種之多，如X X病毒、病毒、S S病毒、病毒、Y Y病毒、病毒、MM病毒、病毒、A A病毒、花葉病毒、紡錘病毒、花葉病毒、紡錘形塊莖病毒等。形塊莖病毒等。 馬鈴薯病毒可使塊莖產(chǎn)量減少馬鈴薯病毒可使塊莖產(chǎn)量減少50%80%50%80%。 馬鈴薯病毒的種類馬鈴薯病毒的種類第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁

5、蔬菜脫毒與快繁1 1、形態(tài)特性、形態(tài)特性 根根 根系由出生根和匍匐根組成。根系由出生根和匍匐根組成。 莖莖 分地上部分和地下部分。分地上部分和地下部分。 葉葉 全緣，心臟形。全緣，心臟形。 花花 為聚傘花序。為聚傘花序。(1)(1)果實果實 漿果。漿果。（一）、馬鈴薯特性和生物學習性（一）、馬鈴薯特性和生物學習性第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁蔬菜脫毒與快繁馬鈴薯性喜冷氣候，不耐高溫和霜凍。馬鈴薯性喜冷氣候，不耐高溫和霜凍。發(fā)芽適溫為發(fā)芽適溫為12181218。地上莖葉生長溫度為地上莖葉生長溫度為17211721。塊莖形成要求晝溫塊莖形成要求晝溫14241424，夜溫，夜溫12141214。結(jié)薯期

6、要求結(jié)薯期要求12h12h左右的短日照和疏松、濕潤、肥左右的短日照和疏松、濕潤、肥沃以及通氣良好的土壤條件。土壤板結(jié)，薯塊表沃以及通氣良好的土壤條件。土壤板結(jié)，薯塊表面粗糙和薯形不整。面粗糙和薯形不整。2 2、 生物學習性生物學習性第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁蔬菜脫毒與快繁通過微莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)能從馬鈴薯體通過微莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)能從馬鈴薯體內(nèi)脫除內(nèi)脫除PLRVPLRV、PVYPVY、PVAPVA、PAFPAF、PVGPVG、PVMPVM、PSWPSW等病毒。等病毒。（二）、馬鈴薯脫毒技術(shù)（二）、馬鈴薯脫毒技術(shù)第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁蔬菜脫毒與快繁全國現(xiàn)有馬鈴薯播種面積全國現(xiàn)有馬鈴薯播種面積

7、300300多萬公頃，多萬公頃，每年需合格種薯每年需合格種薯4545億公斤，脫毒原種億公斤，脫毒原種4 4億億公斤，脫毒小薯或微型薯公斤，脫毒小薯或微型薯4545億粒。億粒。我國的馬鈴薯平均單產(chǎn)僅為我國的馬鈴薯平均單產(chǎn)僅為13.6013.60噸噸/ /公頃，公頃，是世界單產(chǎn)最高國這瑞士（是世界單產(chǎn)最高國這瑞士（48.8048.80噸噸/ /公頃）公頃）的的1/41/4。最主要的因素就是種薯質(zhì)量差，品。最主要的因素就是種薯質(zhì)量差，品種布局不合理。種布局不合理。我國馬鈴薯栽培現(xiàn)狀我國馬鈴薯栽培現(xiàn)狀第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁蔬菜脫毒與快繁 微莖尖組織培養(yǎng)微莖尖組織培養(yǎng)-誘導出苗誘導出苗-聯(lián)免聯(lián)免疫

8、吸附試驗法或指示植物方法鑒定疫吸附試驗法或指示植物方法鑒定-脫毒脫毒試管基礎(chǔ)苗。試管基礎(chǔ)苗。 固體、液體培養(yǎng)基相結(jié)合固體、液體培養(yǎng)基相結(jié)合-擴繁基礎(chǔ)擴繁基礎(chǔ)苗苗-在防蟲網(wǎng)室栽植或封閉溫室扦插在防蟲網(wǎng)室栽植或封閉溫室扦插-原原種（或稱脫毒小薯）。原原種原原種（或稱脫毒小薯）。原原種-原種原種1 1代代-原種原種2 2代代-良種良種1 1代代-良種良種2 2代。代。1 1脫毒種薯生產(chǎn)程序脫毒種薯生產(chǎn)程序第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁蔬菜脫毒與快繁（1）莖尖消毒一般在室內(nèi)發(fā)芽，芽經(jīng)熱處理（一般在室內(nèi)發(fā)芽，芽經(jīng)熱處理（3838）2 2周。然后取周。然后取1 1厘米的莖尖，水洗干凈，無菌厘米的莖尖，水洗干

9、凈，無菌條件下先用條件下先用7070的酒精浸組織的酒精浸組織15-2015-20秒，再秒，再用用2 2次氯酸鈉溶液浸泡次氯酸鈉溶液浸泡4-5min4-5min，然后用，然后用無菌水沖洗無菌水沖洗3 3次。次。 2 2莖尖培養(yǎng)脫毒莖尖培養(yǎng)脫毒第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁蔬菜脫毒與快繁 把消毒芽在解剖鏡下逐層剝?nèi)ビ兹~，露把消毒芽在解剖鏡下逐層剝?nèi)ビ兹~，露出圓滑的生長點，留出圓滑的生長點，留1-21-2個葉原基，個葉原基，0.20.20.30.3毫米，隨即接種于毫米，隨即接種于MSMS液體培養(yǎng)基上，液體培養(yǎng)基上，每升加每升加0.1mgNAA 0.1mgNAA 、 0.2mgGA30.2mgGA3、0

10、.5BA0.5BA，2%2%蔗糖，蔗糖，p Hp H值值5.85.8。取材和接種取材和接種第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁蔬菜脫毒與快繁溫度溫度：21252125光照度光照度：2000-3000 lx2000-3000 lx光照時間光照時間：12h/d12h/d 2-3 2-3周長愈傷，周長愈傷，4-54-5周長綠點，周長綠點，3-63-6月月長成長成2-32-3厘米小芽，越慢越好，出芽厘米小芽，越慢越好，出芽很快的扔掉。很快的扔掉。培養(yǎng)條件：培養(yǎng)條件：第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁蔬菜脫毒與快繁 培養(yǎng)成功的馬鈴薯脫毒苗，經(jīng)培養(yǎng)成功的馬鈴薯脫毒苗，經(jīng)ELISAELISA（試劑盒）（試劑盒）鑒定后（試

11、管苗應每鑒定后（試管苗應每3 3月檢測一次，每年月檢測一次，每年4 4次）次）采用固體、液體培養(yǎng)基相結(jié)合方法擴繁。采用固體、液體培養(yǎng)基相結(jié)合方法擴繁。 取試管苗單節(jié)切段扦插在（或平放）固體培取試管苗單節(jié)切段扦插在（或平放）固體培養(yǎng)基上，每瓶可插養(yǎng)基上，每瓶可插2020個左右莖段，經(jīng)個左右莖段，經(jīng)20d20d左右發(fā)左右發(fā)育成育成510cm510cm高小植株，繼續(xù)進行切段繁殖，此高小植株，繼續(xù)進行切段繁殖，此法速度快，每月可繁殖法速度快，每月可繁殖5858倍，試管苗多節(jié)接種倍，試管苗多節(jié)接種在液體培養(yǎng)基上，進行淺層靜止液體培養(yǎng)。在液體培養(yǎng)基上，進行淺層靜止液體培養(yǎng)。（2 2） 繼代和生根繼代和生根

12、第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁蔬菜脫毒與快繁MS+NAA0.2-0.5+D-MS+NAA0.2-0.5+D-泛酸鈣泛酸鈣1010，3%3%蔗糖；蔗糖；20-2520-25，3000-4000LX3000-4000LX，14-16hr14-16hr光照；光照；每每3 3周繼代一次，單芽莖段約周繼代一次，單芽莖段約1 1厘米；厘米；原則試管苗用原則試管苗用2 2年年33年。年。 馬鈴薯繼代培養(yǎng)基：馬鈴薯繼代培養(yǎng)基：第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁蔬菜脫毒與快繁馬鈴薯試管苗馬鈴薯試管苗第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁蔬菜脫毒與快繁煉苗室溫度：煉苗室溫度：白天白天23272327，夜間不低于，夜間不低于1414

13、。煉苗具體方法煉苗具體方法：移植前：移植前7d7d左右，將長有左右，將長有3535片葉、片葉、高高23cm23cm的試管苗，在不開瓶口的狀態(tài)下，從培的試管苗，在不開瓶口的狀態(tài)下，從培養(yǎng)室移至溫室排好。為防止強光、高溫灼傷試管養(yǎng)室移至溫室排好。為防止強光、高溫灼傷試管苗，在溫室頂上加蓋一層黑色遮陽網(wǎng)。苗，在溫室頂上加蓋一層黑色遮陽網(wǎng)。 (3) (3) 馴化馴化第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁蔬菜脫毒與快繁 1 1、指示植物鑒定、指示植物鑒定在馬鈴薯的病毒鑒定中，汁液鑒定是最常在馬鈴薯的病毒鑒定中，汁液鑒定是最常用的方法，病毒、病毒和紡錘塊狀病用的方法，病毒、病毒和紡錘塊狀病毒很容易通過汁液來接種。毒

14、很容易通過汁液來接種。 2 2、鑒定寄主的準備、鑒定寄主的準備馬鈴薯常用的鑒定寄主植物有莧科的千日馬鈴薯常用的鑒定寄主植物有莧科的千日紅，茄科的洋酸漿、毛曼佗羅等。寄主植紅，茄科的洋酸漿、毛曼佗羅等。寄主植物應在無蟲網(wǎng)室中培養(yǎng)。物應在無蟲網(wǎng)室中培養(yǎng)。（三）、馬鈴薯無病毒苗的鑒定材料（三）、馬鈴薯無病毒苗的鑒定材料第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁蔬菜脫毒與快繁 葉片洗凈后。在消毒的研缽中研成糊狀，用紗葉片洗凈后。在消毒的研缽中研成糊狀，用紗布濾出汁液，再用蒸餾水稀釋倍作為接種物布濾出汁液，再用蒸餾水稀釋倍作為接種物( (混入目的金剛砂混入目的金剛砂) )。 用左手心緊靠在鑒定寄主植物的背面，以右用左

15、手心緊靠在鑒定寄主植物的背面，以右手指蘸取接種液，均勻的在葉背面擦過，以不造手指蘸取接種液，均勻的在葉背面擦過，以不造成葉片產(chǎn)生傷痕為度，最后把葉面上多余的接種成葉片產(chǎn)生傷痕為度，最后把葉面上多余的接種物用清水洗凈，放置在的防蟲室中，物用清水洗凈，放置在的防蟲室中，一般天可發(fā)病。一般天可發(fā)病。 . .接種液制備及接種接種液制備及接種第一節(jié)第一節(jié) 蔬菜脫毒與快繁蔬菜脫毒與快繁（）（） 直接塊莖繁殖直接塊莖繁殖（）（） 扦插繁殖扦插繁殖（）（） 組織培養(yǎng)切段繁殖組織培養(yǎng)切段繁殖 A A：繼代培養(yǎng)：繼代培養(yǎng) B B：低溫保存：低溫保存（四）、馬鈴薯無病毒株的繁殖（四）、馬鈴薯無病毒株的繁殖第一節(jié)蔬菜

16、脫毒與快繁第一節(jié)蔬菜脫毒與快繁二、番茄的組織培養(yǎng)二、番茄的組織培養(yǎng)（一）、形態(tài)特征和生物學習性（一）、形態(tài)特征和生物學習性 番茄的葉片為長羽狀，番茄的葉片為長羽狀，在葉軸上生有裂片，頂生在葉軸上生有裂片，頂生裂片，小裂片，間裂片，裂片，小裂片，間裂片，這些裂片是葉的深裂，缺這些裂片是葉的深裂，缺刻的變化。兩性花，聚傘刻的變化。兩性花，聚傘花序，漿果?；ㄐ颍瑵{果。蕃茄耐低溫，喜光照，對蕃茄耐低溫，喜光照，對水分需求量極大，喜肥，水分需求量極大，喜肥，適于微酸性或中性土壤。適于微酸性或中性土壤。 第一節(jié)蔬菜脫毒與快繁第一節(jié)蔬菜脫毒與快繁（二）、番茄的組織培養(yǎng)（二）、番茄的組織培養(yǎng)1 1、外植體、外

17、植體：幼嫩葉片：幼嫩葉片 。2 2、消毒、消毒：用：用0.1%0.1%升汞浸泡升汞浸泡4min4min，再用無菌水沖洗，再用無菌水沖洗3-43-4次次 。3 3、愈傷組織培養(yǎng)條件、愈傷組織培養(yǎng)條件：MS + BA2mg/L + IAA1mg/L MS + BA2mg/L + IAA1mg/L ，溫，溫度度2525，每天光照，每天光照10h10h，光照度，光照度2000lx 2000lx 。4 4、分化培養(yǎng)、分化培養(yǎng)：分化培養(yǎng)基：分化培養(yǎng)基MS+BA4MS+BA4中。中。5 5、生根培養(yǎng)、生根培養(yǎng)：MS+IAA2 mg/LMS+IAA2 mg/L。6 6、煉苗栽植、煉苗栽植：將培養(yǎng)有根試管苗的瓶

18、口打開。煅煉：將培養(yǎng)有根試管苗的瓶口打開。煅煉3d3d后后取出，洗去根上帶有的培養(yǎng)基，移栽到營養(yǎng)土中，澆透水，取出，洗去根上帶有的培養(yǎng)基，移栽到營養(yǎng)土中，澆透水，并罩上塑料薄膜，以保溫保濕，并罩上塑料薄膜，以保溫保濕，4-5d4-5d后去掉薄膜，新葉長后去掉薄膜，新葉長出時即定植田間。出時即定植田間。 第一節(jié)蔬菜脫毒與快繁第一節(jié)蔬菜脫毒與快繁（三）、番茄的胚培養(yǎng)（三）、番茄的胚培養(yǎng)1 1、外植體制備、外植體制備：授粉后：授粉后30-40d30-40d收獲果皮完整的果實，果收獲果皮完整的果實，果實放入實放入95%95%乙醇中表面消毒，浸在乙醇中表面消毒，浸在5%NaCI5%NaCI中中5min5

19、min，用，用無菌蒸餾水充分淋洗。果實放在無菌吸水紙上，除去種子無菌蒸餾水充分淋洗。果實放在無菌吸水紙上，除去種子上的膠狀復被。上的膠狀復被。 2 2、培養(yǎng)基、培養(yǎng)基：啟動：啟動：MS+MS+硫胺素硫胺素0.3mg/L+2,4-D2mg/L+0.3mg/L+2,4-D2mg/L+椰椰乳乳100ml/L100ml/L，pH6.0pH6.0；繼代：；繼代： MS+ 2,4-D2mg/LMS+ 2,4-D2mg/L；分化：；分化：MS+BA1.5mg/LMS+BA1.5mg/L；生根：；生根：MS+NAA2mg/LMS+NAA2mg/L。 3 3、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)條件：愈傷組織啟動和繼代，用暗培養(yǎng)，：

20、愈傷組織啟動和繼代，用暗培養(yǎng)，2727。芽再生和生根在室溫芽再生和生根在室溫20-30.16h/d 20-30.16h/d 的光照，的光照，2000lx2000lx。 第一節(jié)蔬菜脫毒與快繁第一節(jié)蔬菜脫毒與快繁第二節(jié)第二節(jié) 果樹的脫毒與快繁果樹的脫毒與快繁 葡萄葡萄蘋果蘋果第第9 9章常見植物的脫毒章常見植物的脫毒 與快速繁殖技術(shù)與快速繁殖技術(shù) 草莓草莓一、蘋果的脫毒與快繁一、蘋果的脫毒與快繁（一）、蘋果的形態(tài)特性和生物學特性（一）、蘋果的形態(tài)特性和生物學特性 蘋果（蘋果（Malus pumilaMalus pumila）屬落葉喬木，樹木高大。果實為）屬落葉喬木，樹木高大。果實為假果。假果。 蘋

21、果喜涼；喜光；適合在微酸性到中性土壤中栽種。蘋果喜涼；喜光；適合在微酸性到中性土壤中栽種。 第二節(jié)果樹脫毒與快繁第二節(jié)果樹脫毒與快繁（二）、脫毒技術(shù)（二）、脫毒技術(shù)1 1、病毒種類、病毒種類：蘋果褪綠葉斑病毒、蘋果莖痘病毒：蘋果褪綠葉斑病毒、蘋果莖痘病毒和蘋果莖溝病毒等和蘋果莖溝病毒等 。2 2、微尖嫁接脫毒、微尖嫁接脫毒：砧木：去頂?shù)碾x體培養(yǎng)幼苗，：砧木：去頂?shù)碾x體培養(yǎng)幼苗，接穗：試管培養(yǎng)的無毒新稍；嫁接后培養(yǎng)生葉，接穗：試管培養(yǎng)的無毒新稍；嫁接后培養(yǎng)生葉，移栽即可。移栽即可。3 3、熱處理脫毒、熱處理脫毒：把植株置于：把植株置于38 38 下下25-5025-50天。天。4 4、莖尖培養(yǎng)脫

22、毒、莖尖培養(yǎng)脫毒：把：把0.1-0.3mm0.1-0.3mm的莖尖離體培養(yǎng)。的莖尖離體培養(yǎng)。5 5、脫毒苗的鑒定、脫毒苗的鑒定：抗血清法，電子：抗血清法，電子 顯微鏡法，顯微鏡法，ELISAELISA法、指示植物法。法、指示植物法。 第二節(jié)果樹脫毒與快繁第二節(jié)果樹脫毒與快繁（三）、蘋果莖尖脫毒快繁技術(shù)（三）、蘋果莖尖脫毒快繁技術(shù) 1 1、材料與消毒、材料與消毒：帶芽或莖尖的莖段；常規(guī)消毒，：帶芽或莖尖的莖段；常規(guī)消毒，用無菌水洗用無菌水洗3 35 5次次 ；切莖尖約；切莖尖約0.10.10.5mm0.5mm。 2 2、芽的誘導、芽的誘導：MSMS或或LS+BA2+300LS+BA2+30050

23、0CH500CH或或LH+3%LH+3%蔗糖的培養(yǎng)基上，誘導芽的分化。蔗糖的培養(yǎng)基上，誘導芽的分化。3 3、繼代增殖培養(yǎng)、繼代增殖培養(yǎng)：MS+BA0.5MS+BA0.51+CH300 1+CH300 培養(yǎng)培養(yǎng)基上增殖。基上增殖。4 4、生根培養(yǎng)、生根培養(yǎng)：1/2MS1/2MS或或 WhiteWhite，NitshNitsh附加附加IAA1IAA1、IBA0.2IBA0.2和和GA33 GA33 等。等。第二節(jié)果樹脫毒與快繁第二節(jié)果樹脫毒與快繁（四）蘋果花粉培養(yǎng)（四）蘋果花粉培養(yǎng)1 1、選材與預處理、選材與預處理：選取中心花蕾吐紅，周圍花：選取中心花蕾吐紅，周圍花蕾明顯增大，但花序尚未分離的花蕾

24、，置于冰蕾明顯增大，但花序尚未分離的花蕾，置于冰箱中箱中1-31-3預處理。預處理。2 2、消毒、消毒：70%70%的酒精浸約的酒精浸約0.5min0.5min，再在，再在10%10%漂漂白粉上清夜中浸白粉上清夜中浸151520min20min。3 3、胚狀體誘導、胚狀體誘導：接種到：接種到MS+2,4-D0.4 + KT0.2 MS+2,4-D0.4 + KT0.2 + IAA4 + 3+ IAA4 + 38%8%蔗糖培養(yǎng)基上，蔗糖培養(yǎng)基上，25253030下下培養(yǎng)。培養(yǎng)。 4 4、生根、生根：同莖尖脫毒中所用方法。：同莖尖脫毒中所用方法。第二節(jié)果樹脫毒與快繁第二節(jié)果樹脫毒與快繁（五）胚培養(yǎng)

25、（五）胚培養(yǎng)1 1、取材消毒、取材消毒：取授粉取授粉303050d50d內(nèi)的幼果，用內(nèi)的幼果，用70%70%酒精擦拭。取出種子，剝出幼胚或成熟酒精擦拭。取出種子，剝出幼胚或成熟胚。胚。 2 2、啟動培養(yǎng)、啟動培養(yǎng)：接種在接種在BA0.25+IAA0.5BA0.25+IAA0.5的的1/2MS1/2MS培養(yǎng)基上。培養(yǎng)條件為培養(yǎng)基上。培養(yǎng)條件為25253030和和150015002000lx2000lx光照光照14h14h。 3 3、分化增殖、分化增殖：移植到加有移植到加有BA0.5BA0.51.01.0和和CH300CH300的的1/2MS1/2MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)基上 ，在光下培養(yǎng)條件同上。，在光

26、下培養(yǎng)條件同上。4 4、生根培養(yǎng)、生根培養(yǎng)：同莖尖培養(yǎng)。同莖尖培養(yǎng)。第二節(jié)果樹脫毒與快繁第二節(jié)果樹脫毒與快繁二、葡萄的脫毒與快繁二、葡萄的脫毒與快繁 （一）、形態(tài)特征和生物學習性（一）、形態(tài)特征和生物學習性 葡萄屬落葉木質(zhì)藤本植物，葡萄葡萄屬落葉木質(zhì)藤本植物，葡萄地上部分的莖細。節(jié)上具有卷須，地上部分的莖細。節(jié)上具有卷須，可向上攀援。葉近圓型或卵型，可向上攀援。葉近圓型或卵型，3 35 5裂。裂。 葡萄原產(chǎn)于溫帶地區(qū)，不太抗寒。葡萄原產(chǎn)于溫帶地區(qū)，不太抗寒。葡萄的根系抗寒力很弱，在葡萄的根系抗寒力很弱，在5 577時即受凍。時即受凍。 第二節(jié)果樹脫毒與快繁第二節(jié)果樹脫毒與快繁（二）、葡萄的組織

27、培養(yǎng)（二）、葡萄的組織培養(yǎng) 1 1、選材接種、選材接種：從生長旺盛的葡萄新梢頂端取：從生長旺盛的葡萄新梢頂端取1 12 2的莖的莖尖。消毒。分離出約尖。消毒。分離出約2 2長的莖尖，接種到培養(yǎng)基上。長的莖尖，接種到培養(yǎng)基上。2 2、培養(yǎng)基、培養(yǎng)基：MSMS培養(yǎng)基（無機鹽減半為好），再添加培養(yǎng)基（無機鹽減半為好），再添加BA1BA12 2，NAA0.01NAA0.01，LH100LH100，蔗糖，蔗糖2%2%，瓊脂，瓊脂0.6%0.6%，而而B5B5培養(yǎng)基愈傷組織化嚴重，莖尖生長不好。培養(yǎng)基愈傷組織化嚴重，莖尖生長不好。3 3、苗分化、苗分化：BA0.5BA0.5，同時添加，同時添加GA30.2

28、GA30.2，黑暗處理可促，黑暗處理可促進幼莖的伸成，提高成苗率。進幼莖的伸成，提高成苗率。 4 4、根分化、根分化：將苗轉(zhuǎn)入：將苗轉(zhuǎn)入MS+IAA0.4+NAA0.05MS+IAA0.4+NAA0.05培養(yǎng)基中進培養(yǎng)基中進行生根。行生根。第二節(jié)果樹脫毒與快繁第二節(jié)果樹脫毒與快繁（三）、葡萄無病毒苗的培養(yǎng)（三）、葡萄無病毒苗的培養(yǎng) 葡萄受到葡萄受到2626種病毒的危害。由于病種病毒的危害。由于病毒的危害，葡萄的長勢減弱，產(chǎn)量降毒的危害，葡萄的長勢減弱，產(chǎn)量降低，果實的糖分含量減少，風味變劣。低，果實的糖分含量減少，風味變劣。葡萄卷葉病是危害最大的病毒病葡萄卷葉病是危害最大的病毒病。第二節(jié)果樹脫

29、毒與快繁第二節(jié)果樹脫毒與快繁（三）、葡萄無病毒苗的培養(yǎng)（三）、葡萄無病毒苗的培養(yǎng) 1 1、熱處理脫毒：、熱處理脫毒：（1 1）葡萄無性系處理：材料置于）葡萄無性系處理：材料置于3838，COCO2 21200120010-610-6的的人工空氣侯箱內(nèi)。經(jīng)人工空氣侯箱內(nèi)。經(jīng)30min30min處理，較易從枝條尖端或休眠處理，較易從枝條尖端或休眠芽中除去扇葉病毒。芽中除去扇葉病毒。（2 2）將感染材料的修面芽插入健康指示植物的蔓中，然）將感染材料的修面芽插入健康指示植物的蔓中，然后在后在3838的環(huán)境中保持的環(huán)境中保持2 2個月，以后取出枝條和接種芽繼個月，以后取出枝條和接種芽繼續(xù)生長。續(xù)生長。（

30、3 3） 直接將葡萄蔓浸泡在直接將葡萄蔓浸泡在5050的的 溫水中溫水中101020min20min，可，可以治療皮爾斯病，但不能治療黃點病及卷葉病。以治療皮爾斯病，但不能治療黃點病及卷葉病。 第二節(jié)果樹脫毒與快繁第二節(jié)果樹脫毒與快繁2 2、組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)、組織培養(yǎng)脫毒技術(shù) （1 1）、莖尖接種后變綠、增大期的培養(yǎng)）、莖尖接種后變綠、增大期的培養(yǎng)：在：在2525，相對，相對濕度濕度80%80%，16h16h的長日照條件下水培生成的嫩莖取的長日照條件下水培生成的嫩莖取0.20.20.3mm 0.3mm 莖尖接種于莖尖接種于 1/2MS1/2MS，添加，添加NAA0.1NAA0.1，BA1.0B

31、A1.0，Kt0.5Kt0.5，腺嘌呤腺嘌呤4.04.0，蔗糖，蔗糖30g/L30g/L，瓊脂，瓊脂6.06.0，pH5.8pH5.8培養(yǎng)基上培養(yǎng)基上。（2 2） 從畸形葉和莖葉伸長期從畸形葉和莖葉伸長期：采用：采用1/2MS1/2MS，添加，添加IAA0.2IAA0.2，BA0.1BA0.1，KT0.5KT0.5，腺嘌呤，腺嘌呤4.04.0，蔗糖，蔗糖30g/L30g/L的培養(yǎng)基。的培養(yǎng)基。（3 3）地上部和地下部的伸長期）地上部和地下部的伸長期：GalzyGalzy（19641964）培養(yǎng)基，）培養(yǎng)基，添加添加NAA0.1NAA0.1。（三）、葡萄無病毒苗的培養(yǎng)（三）、葡萄無病毒苗的培養(yǎng)

32、第二節(jié)果樹脫毒與快繁第二節(jié)果樹脫毒與快繁三、草莓的脫毒與快繁三、草莓的脫毒與快繁 （一）、形態(tài)特征和生物習性（一）、形態(tài)特征和生物習性草莓（草莓（FragariaFragaria）屬多年生草本）屬多年生草本植物，植株矮小，呈半平臥叢植物，植株矮小，呈半平臥叢狀生長，基生三出復葉。果實狀生長，基生三出復葉。果實為聚合瘦果生于花托上。為聚合瘦果生于花托上。 草莓喜光但又較耐陰，要求肥沃、草莓喜光但又較耐陰，要求肥沃、疏松、透水、通氣的中性微酸疏松、透水、通氣的中性微酸性或微堿性土壤。性或微堿性土壤。 第二節(jié)果樹脫毒與快繁第二節(jié)果樹脫毒與快繁（二）、草莓脫毒苗的培養(yǎng)（二）、草莓脫毒苗的培養(yǎng) 1 1、

33、熱處理脫毒、熱處理脫毒 將草莓植株在將草莓植株在40404141溫度下處理溫度下處理4 46 6周。周。 2 2、微莖尖脫毒、微莖尖脫毒（1 1）、初代培養(yǎng)）、初代培養(yǎng) ：取草莓頂芽，用自來水流水：取草莓頂芽，用自來水流水沖洗沖洗2 24h4h，然后剝?nèi)ネ鈱尤~片，消毒，然后剝?nèi)ネ鈱尤~片，消毒， 切取切取0.2mm0.2mm的莖尖。接入的莖尖。接入MS + BA0.25 + NAA0.25MS + BA0.25 + NAA0.25培養(yǎng)基中。培養(yǎng)條件為培養(yǎng)基中。培養(yǎng)條件為22222525，日照，日照161618h18h光強光強3000lx3000lx。第二節(jié)果樹脫毒與快繁第二節(jié)果樹脫毒與快繁 （二

34、）、草莓脫毒苗的培養(yǎng)（二）、草莓脫毒苗的培養(yǎng)(2) (2) 繼代培養(yǎng)繼代培養(yǎng)：把芽叢割成芽叢小塊，轉(zhuǎn)入：把芽叢割成芽叢小塊，轉(zhuǎn)入MSMS培養(yǎng)基中，令其長大培養(yǎng)基中，令其長大 。并進行分株，擴大繁殖。并進行分株，擴大繁殖。(3) (3) 生根培養(yǎng)生根培養(yǎng)：在培養(yǎng)基中加入：在培養(yǎng)基中加入NAA1NAA1或或IBA1IBA1。 第二節(jié)果樹脫毒與快繁第二節(jié)果樹脫毒與快繁第三節(jié)第三節(jié) 花卉植物的脫毒與快繁花卉植物的脫毒與快繁 第第9 9章常見植物的脫毒章常見植物的脫毒 與快速繁殖技術(shù)與快速繁殖技術(shù) 一、一、蘭花的脫毒與快繁蘭花的脫毒與快繁 蘭花系蘭科蘭花系蘭科(Orchidaceae)(Orchidac

35、eae)植物，在植物，在自然條件下主要靠分株繁殖，繁殖率一自然條件下主要靠分株繁殖，繁殖率一年只有幾倍，所以無法大量繁殖生產(chǎn)，年只有幾倍，所以無法大量繁殖生產(chǎn)，而且由于長期進行無性繁殖，帶病毒株而且由于長期進行無性繁殖，帶病毒株增多，逐漸使種性降低，影響生長。增多，逐漸使種性降低，影響生長。 第三節(jié)第三節(jié) 花卉植物的花卉植物的 脫毒與快繁脫毒與快繁 （一）蝴蝶蘭屬的培養(yǎng)（一）蝴蝶蘭屬的培養(yǎng) 1 1、莖尖的培養(yǎng)、莖尖的培養(yǎng) (1) (1) 取材消毒取材消毒：將芽除去葉后，用水沖洗，再用：將芽除去葉后，用水沖洗，再用1010的的漂白粉表面滅菌漂白粉表面滅菌15min15min。除去葉原基后，用。除

36、去葉原基后，用5 5的漂白的漂白粉中滅菌粉中滅菌l0minl0min，以后用無菌水沖洗，以后用無菌水沖洗3 35 5次。切取莖尖次。切取莖尖和腋芽，約和腋芽，約2 23mm3mm，接種到培養(yǎng)基中。，接種到培養(yǎng)基中。 (2)(2) 培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：采用采用VacinVacin和和WentWent培養(yǎng)基，添加培養(yǎng)基，添加1515CMCM進進行液體培養(yǎng)，或加行液體培養(yǎng)，或加9g9gL L的瓊脂進行固體培養(yǎng)。的瓊脂進行固體培養(yǎng)。 (3)(3)培養(yǎng)條件：培養(yǎng)條件：為溫度為溫度2525，光照強度，光照強度2000Lx2000Lx，照明，照明161624h24h。液體培養(yǎng)基用。液體培養(yǎng)基用60r60rmin

37、min的速度進行振蕩培養(yǎng)。的速度進行振蕩培養(yǎng)。培養(yǎng)培養(yǎng)1 1個月即可形成原球莖球狀體，即可進行繼代增殖。個月即可形成原球莖球狀體，即可進行繼代增殖。第三節(jié)第三節(jié) 花卉植物的花卉植物的 脫毒與快繁脫毒與快繁 （一）蝴蝶蘭屬的培養(yǎng)（一）蝴蝶蘭屬的培養(yǎng)2.2.花梗腋芽的培養(yǎng)花梗腋芽的培養(yǎng) (1)(1)采芽采芽：將帶腋芽的花梗進行沖洗，用：將帶腋芽的花梗進行沖洗，用1010的漂白粉溶液的漂白粉溶液表面滅菌表面滅菌20min20min，除去腋芽的苞葉，再在，除去腋芽的苞葉，再在5 5的漂白粉溶的漂白粉溶液中表面滅菌液中表面滅菌3min3min，無菌水沖洗凈。僅取腋芽，接種到，無菌水沖洗凈。僅取腋芽，接種

38、到培養(yǎng)基上。培養(yǎng)基上。 (2)(2)培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件：用德蘭屬：用德蘭屬1 1號培養(yǎng)基培養(yǎng)原球狀體，號培養(yǎng)基培養(yǎng)原球狀體，育苗用卡德蘭屬育苗用卡德蘭屬1 1號加號加1010香蕉汁；培養(yǎng)條件是光照強度香蕉汁；培養(yǎng)條件是光照強度2000Lx2000Lx，光照時間每天，光照時間每天13h13h，保持恒溫，保持恒溫2525。(3)(3)繼代培養(yǎng)繼代培養(yǎng)：用原球莖球狀體繁殖。：用原球莖球狀體繁殖。 (4)(4)育苗育苗：不切塊繼續(xù)培養(yǎng)即可分化產(chǎn)生葉片，移到育苗：不切塊繼續(xù)培養(yǎng)即可分化產(chǎn)生葉片，移到育苗的培養(yǎng)基，的培養(yǎng)基，3 36 6個月可得到能栽植的苗。個月可得到能栽植的苗。 第三節(jié)第三

39、節(jié) 花卉植物的花卉植物的 脫毒與快繁脫毒與快繁 （一）蝴蝶蘭屬的培養(yǎng)（一）蝴蝶蘭屬的培養(yǎng)3.3.葉片的培養(yǎng)：葉片的培養(yǎng)：(1)(1)取材取材：葉片是從試管內(nèi)培養(yǎng)的材料上切取。取展開葉最上部：葉片是從試管內(nèi)培養(yǎng)的材料上切取。取展開葉最上部先端、中央或基部約先端、中央或基部約6 68mm8mm2 2 。(2)(2)培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件：用：用 KyotoKyoto改良培養(yǎng)基，加復合肥料改良培養(yǎng)基，加復合肥料3.5g3.5gL L、肌醇、肌醇10001000、煙酸、煙酸1 1、維生素、維生素B11B11、NAAlNAAl、腺嘌呤、腺嘌呤1010、BAl0BAl0、蔗糖蔗糖2 2、瓊脂、瓊

40、脂1.01.0。 2525恒溫，光照恒溫，光照500Lx,500Lx,日照日照16h16h。 (3)(3)繼代培養(yǎng)繼代培養(yǎng)：用改良的：用改良的KyotoKyoto培養(yǎng)基進行繼代培養(yǎng)，或在培養(yǎng)基進行繼代培養(yǎng)，或在VacinVacin和和WentWent培養(yǎng)基中去掉蔗糖和瓊脂，加培養(yǎng)基中去掉蔗糖和瓊脂，加2020的的CMCM的液體的液體培養(yǎng)基進行振蕩培養(yǎng)。培養(yǎng)基進行振蕩培養(yǎng)。 (4)(4)育苗育苗：原球莖球狀體：原球莖球狀體2 23 3個月即可萌芽，形成細苗，以后個月即可萌芽，形成細苗，以后轉(zhuǎn)移到轉(zhuǎn)移到KyotoKyoto培養(yǎng)基，加培養(yǎng)基，加1010的香蕉汁，經(jīng)數(shù)月后可得到能移的香蕉汁，經(jīng)數(shù)月后可

41、得到能移f f栽的大苗。栽的大苗。 第三節(jié)第三節(jié) 花卉植物的花卉植物的 脫毒與快繁脫毒與快繁 （二）、卡特蘭的培養(yǎng)（二）、卡特蘭的培養(yǎng) 1. 1.取材和消毒取材和消毒：選擇：選擇5 510cm10cm長的嫩莖，從基部采芽。長的嫩莖，從基部采芽。先用流水沖洗，切去葉片酒精，漂白粉等消毒。先用流水沖洗，切去葉片酒精，漂白粉等消毒。2.2.培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件：MSMS基本培養(yǎng)基，附加維生素，氨基本培養(yǎng)基，附加維生素，氨基酸，基酸，NAA0.186mgNAA0.186mgL L，Kt0.02mgKt0.02mgL L，GAGA3 30.173mg0.173mgL L，蔗糖，蔗糖30g30

42、gL L，瓊脂，瓊脂6g6gL L，不加，不加CMCM。啟動培養(yǎng)溫。啟動培養(yǎng)溫度度15152020，成活以后，則保持在，成活以后，則保持在2525。光照強度。光照強度500-500-2000Lx2000Lx，照明，照明161622h22h。3.3.防止培養(yǎng)材料變褐方法防止培養(yǎng)材料變褐方法：(1)(1)采芽后，用無菌水沖洗再采芽后，用無菌水沖洗再接種接種 (2) (2) 在培養(yǎng)基中加在培養(yǎng)基中加(50(50100)100)1010-6-6蕓香甙。蕓香甙。 (2) (2) 開開始培養(yǎng)到成活，保持溫度始培養(yǎng)到成活，保持溫度15152020。 (4) (4) 調(diào)調(diào)pHpH值至值至5.55.5，減輕褐化

43、，提高成活率。減輕褐化，提高成活率。 (5)(5)避免避免6 68 8月采芽（由于多月采芽（由于多酚類物質(zhì)的積累，褐化較嚴重）。酚類物質(zhì)的積累，褐化較嚴重）。第三節(jié)第三節(jié) 花卉植物的花卉植物的 脫毒與快繁脫毒與快繁 二、香石竹的組織培養(yǎng)二、香石竹的組織培養(yǎng) 香石竹為石竹科石竹屬草本植物，原產(chǎn)南歐地中香石竹為石竹科石竹屬草本植物，原產(chǎn)南歐地中海北岸。須根系，莖直立，多分枝，株高海北岸。須根系，莖直立，多分枝，株高7070100cm100cm，莖部半木質(zhì)化。葉線狀披針形，全緣，葉質(zhì)較厚，上莖部半木質(zhì)化。葉線狀披針形，全緣，葉質(zhì)較厚，上半部向外彎曲，對生，基部抱莖?；ㄍǔ紊虬氩肯蛲鈴澢?，對生，基

44、部抱莖?；ㄍǔ紊? 23 3朵聚傘狀排列。朵聚傘狀排列。 石竹是一種中日性花卉。喜干燥、通風，喜冷石竹是一種中日性花卉。喜干燥、通風，喜冷涼，最適宜的生長溫度為涼，最適宜的生長溫度為19192121，忌高溫多濕。喜，忌高溫多濕。喜保肥、通氣、排水良好的腐殖質(zhì)或砂質(zhì)壤土，最適宜保肥、通氣、排水良好的腐殖質(zhì)或砂質(zhì)壤土，最適宜的土壤的土壤pHpH值為值為6 66.56.5。（一）形態(tài)特性和生物學習性第三節(jié)第三節(jié) 花卉植物的花卉植物的 脫毒與快繁脫毒與快繁 （二）、組織培養(yǎng)育苗（二）、組織培養(yǎng)育苗 1 1、取材滅菌、取材滅菌： 取長勢健壯植株上較為粗壯的嫩芽，剝?nèi)￠L勢健壯植株上較為粗壯的嫩芽，剝?nèi)?/p>

45、成熟葉片，在清水中清洗后，常規(guī)消毒，切取去成熟葉片，在清水中清洗后，常規(guī)消毒，切取0.3-0.3-0.4mm0.4mm的莖尖。的莖尖。2 2、培養(yǎng)基、培養(yǎng)基：選用：選用MSMS或或WhiteWhite培養(yǎng)基。附加培養(yǎng)基。附加BABA或或KT KT 0 05 52mg2mgL(L(單位下同單位下同) )；NAANAA、IAAIAA濃度為濃度為0 02 22 2，2,4-D2,4-D為為0.10.11 1。3 3、分化增殖、分化增殖： 于于MSMS附加附加BA2BA2，IAA0.5IAA0.5進行分化；于進行分化；于MSMS附加附加BA0.5BA0.52 2、IAA0. 5IAA0. 5進行叢生芽

46、誘導。進行叢生芽誘導。4 4、生根、生根：于：于1/2MS1/2MS上，溫度上，溫度20202525，光照強度，光照強度20001x20001x光照光照101012h/d12h/d。第三節(jié)第三節(jié) 花卉植物的花卉植物的 脫毒與快繁脫毒與快繁 三、菊花的組織培養(yǎng)三、菊花的組織培養(yǎng) 菊花系多年生植物，株高菊花系多年生植物，株高60-180cm60-180cm，莖直立粗，莖直立粗壯，多分枝。葉形大，互生，葉片有深缺刻。花序單壯，多分枝。葉形大，互生，葉片有深缺刻?；ㄐ騿紊蚓凵?，邊緣為舌狀花，中部為筒狀花，也有全為生或聚生，邊緣為舌狀花，中部為筒狀花，也有全為舌狀或筒狀花的，形狀各異，種子為細小的瘦果

47、，中舌狀或筒狀花的，形狀各異，種子為細小的瘦果，中間膨大，兩端突出。間膨大，兩端突出。 適宜的生育溫度為適宜的生育溫度為15-2515-25，喜陽光充足，通風，喜陽光充足，通風良好，在光照條件下生長健壯。比較耐旱，不耐潮濕，良好，在光照條件下生長健壯。比較耐旱，不耐潮濕，忌低洼積水。秋菊、冬菊為典型的短日照植物，只有忌低洼積水。秋菊、冬菊為典型的短日照植物，只有光照長度在光照長度在12h12h以下時才能開花以下時才能開花 （一）形態(tài)特性和生物學習性第三節(jié)第三節(jié) 花卉植物的花卉植物的 脫毒與快繁脫毒與快繁 （二）、菊花的組織培養(yǎng)快速繁殖（二）、菊花的組織培養(yǎng)快速繁殖 1 1、取材、取材：外植體很

48、多，如莖段、側(cè)芽、葉、：外植體很多，如莖段、側(cè)芽、葉、花序梗、花序軸等，但最好采用莖尖或側(cè)芽，花序梗、花序軸等，但最好采用莖尖或側(cè)芽，其次是花序軸。經(jīng)一般其次是花序軸。經(jīng)一般 滅菌過程后即可接種。滅菌過程后即可接種。 2 2、培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件、培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件：MSMS、B5B5、N6N6、White White 均可，多用均可，多用MSMS。附加。附加BA2BA23mg3mgL L，NAA0NAA002020 02mg2mgL L。 于于22222828（24242626最佳）。光照最佳）。光照121216h/d16h/d，光強，光強100010004000Lx4000Lx。第三節(jié)第三節(jié) 花

49、卉植物的花卉植物的 脫毒與快繁脫毒與快繁 （二）、菊花的組織培養(yǎng)快速繁殖（二）、菊花的組織培養(yǎng)快速繁殖 3 3、繼代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng) ：可通過莖尖直接分化出新芽，：可通過莖尖直接分化出新芽，或經(jīng)愈傷組織分化出新芽；也可用莖切段作或經(jīng)愈傷組織分化出新芽；也可用莖切段作微型扦插繁殖（微型扦插繁殖（MSMS或或MS+NAA0.1MS+NAA0.1） 。 4 4、生根和移栽、生根和移栽 ：將無根幼苗轉(zhuǎn)入：將無根幼苗轉(zhuǎn)入1 12 2 MS+NAA(MS+NAA(或或IBA)0.1IBA)0.1的培養(yǎng)基中，經(jīng)兩周即的培養(yǎng)基中，經(jīng)兩周即可生根（培養(yǎng)條件同上）可生根（培養(yǎng)條件同上） 。第三節(jié)第三節(jié) 花卉植物的花

50、卉植物的 脫毒與快繁脫毒與快繁 （三）、菊花花瓣的培養(yǎng)（三）、菊花花瓣的培養(yǎng) 1 1、取材、取材：在菊花開花前：在菊花開花前2 23d3d將整個花蕾剪下，將整個花蕾剪下，沖洗十幾分鐘，用沖洗十幾分鐘，用7575的酒精浸泡的酒精浸泡101015min15min進行表面滅菌，后用無菌水沖洗兩次，再用進行表面滅菌，后用無菌水沖洗兩次，再用1010的漂白粉澄清液浸泡的漂白粉澄清液浸泡20min20min后。切取舌狀花后。切取舌狀花約約5mm5mm見方大小見方大小 。 2 2、培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件、培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件：MSMS培養(yǎng)基，添加培養(yǎng)基，添加BAlBAl3mg/L3mg/L，NAA0.5NAA0.52

51、mg2mgL L。置于溫度。置于溫度2525左右，光照強度左右，光照強度2000Lx2000Lx，每天照光，每天照光12h12h的的條件下培養(yǎng)，或獲得愈傷組織。條件下培養(yǎng)，或獲得愈傷組織。第三節(jié)第三節(jié) 花卉植物的花卉植物的 脫毒與快繁脫毒與快繁 （四）、菊花的脫毒（四）、菊花的脫毒 危害菊花的病毒有：危害菊花的病毒有：菊花斑紋病毒；菊花斑紋病毒；菊花菊花矮縮類病毒；矮縮類病毒；菊花輕斑駁病毒；菊花輕斑駁病毒；番茄不孕病番茄不孕病毒。此外還有畸花病毒、綠花病毒、褪綠斑駁病毒。此外還有畸花病毒、綠花病毒、褪綠斑駁病毒、花葉病毒等。毒、花葉病毒等。 第三節(jié)第三節(jié) 花卉植物的花卉植物的 脫毒與快繁脫毒

52、與快繁 1 1、莖尖培養(yǎng)脫毒：取頂芽或腋芽經(jīng)表面消毒后，、莖尖培養(yǎng)脫毒：取頂芽或腋芽經(jīng)表面消毒后，切取切取0.5mm0.5mm以下莖尖進行培養(yǎng)脫毒。以下莖尖進行培養(yǎng)脫毒。 2 2、熱處理脫毒：在、熱處理脫毒：在35353636的條件下栽培的條件下栽培2 2個月，個月，可以達到脫毒的效果（但是熱處理只能除去菊花矮可以達到脫毒的效果（但是熱處理只能除去菊花矮縮類病毒和番茄不孕病毒）?？s類病毒和番茄不孕病毒）。 四、非洲菊的組織培養(yǎng)四、非洲菊的組織培養(yǎng) 非洲菊非洲菊(Gerbera hybrida)(Gerbera hybrida)屬菊科大丁草屬，多年生宿屬菊科大丁草屬，多年生宿根草本花卉。全株具細

53、毛，葉片基生，橢圓至長橢圓根草本花卉。全株具細毛，葉片基生，橢圓至長橢圓形?；ㄐ蝽斏酄罨ㄝ^大，排列成一輪或數(shù)輪。形?；ㄐ蝽斏酄罨ㄝ^大，排列成一輪或數(shù)輪。 非洲菊性喜冬季溫和，夏季涼爽的氣候條件。最適非洲菊性喜冬季溫和，夏季涼爽的氣候條件。最適生長溫度為生長溫度為20202525。4 45 5月和月和8 81010月為盛花期。月為盛花期。喜陽光充足的環(huán)境。土壤要求有機質(zhì)豐富、排水良好、喜陽光充足的環(huán)境。土壤要求有機質(zhì)豐富、排水良好、pHpH值為值為6 66.56.5的微酸性壤土。的微酸性壤土。（一）、形態(tài)特性和生物學習性（一）、形態(tài)特性和生物學習性 第三節(jié)第三節(jié) 花卉植物的花卉植物的 脫

54、毒與快繁脫毒與快繁 （二）、非洲菊組織培養(yǎng)育苗（二）、非洲菊組織培養(yǎng)育苗 1 1、取材消毒、取材消毒：常用花托作為外植體，用：常用花托作為外植體，用0.10.1的吐的吐溫浸泡溫浸泡101015min15min，取出洗凈后再放入，取出洗凈后再放入0.10.1氯化汞氯化汞中消毒中消毒20min20min。將花托切成。將花托切成2-3mm2-3mm見方的小塊。見方的小塊。 2 2、培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件、培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件：初代培養(yǎng)基為：初代培養(yǎng)基為MS+BA2mgMS+BA2mgL(L(單位下同單位下同) )十十NAA0.2 + IAA0.2NAA0.2 + IAA0.2。培養(yǎng)條件為。培養(yǎng)條件為2424土

55、土22，光照強度為，光照強度為2000200030001x30001x，每天光照，每天光照121216h16h。3 3、分化生根、分化生根：轉(zhuǎn)入：轉(zhuǎn)入MS+Kt5+IAA0.2MS+Kt5+IAA0.2培養(yǎng)基進行分培養(yǎng)基進行分化培養(yǎng)。待苗高化培養(yǎng)。待苗高2cm2cm時，轉(zhuǎn)移到時，轉(zhuǎn)移到I I2 MS 2 MS 十十 NAA0.1NAA0.1生根培養(yǎng)基中生根。生根培養(yǎng)基中生根。第三節(jié)第三節(jié) 花卉植物的花卉植物的 脫毒與快繁脫毒與快繁 五、矮牽牛的組織培養(yǎng)五、矮牽牛的組織培養(yǎng) 矮牽牛矮牽牛( (Petunia bybridaPetunia bybrida) )，又名碧冬茄，茄科，矮牽，又名碧冬茄，

56、茄科，矮牽牛屬。多年生草本植物，株高牛屬。多年生草本植物，株高404060cm60cm，莖直立或，莖直立或臥倒，全身被短毛。上部葉片對生，中下部葉片互臥倒，全身被短毛。上部葉片對生，中下部葉片互生，卵圓形?；▎紊谥敾蛉~腋間，花冠喇叭狀，生，卵圓形。花單生于枝頂或葉腋間，花冠喇叭狀，花色豐富，朔果卵形?；ㄉS富，朔果卵形。矮牽牛原產(chǎn)南美洲。喜溫暖，向陽和通風良好的環(huán)矮牽牛原產(chǎn)南美洲。喜溫暖，向陽和通風良好的環(huán)境條件，不耐寒，耐暑熱，在炎熱的夏季仍能正常境條件，不耐寒，耐暑熱，在炎熱的夏季仍能正常開花，要求排水良好疏松的酸性沙質(zhì)土地。開花，要求排水良好疏松的酸性沙質(zhì)土地。 （一）、形態(tài)特性和生

57、物學習性（一）、形態(tài)特性和生物學習性 第三節(jié)第三節(jié) 花卉植物的花卉植物的 脫毒與快繁脫毒與快繁 （二）、矮牽牛組織培養(yǎng)育苗（二）、矮牽牛組織培養(yǎng)育苗 1 1、葉片培養(yǎng)、葉片培養(yǎng) ：選擇嫩葉作為外植體，進行常規(guī)消：選擇嫩葉作為外植體，進行常規(guī)消毒后將其切成毒后將其切成5mm5mm見方，接種到見方，接種到MS + BA0.5MS + BA0.5的培的培養(yǎng)基上誘導愈傷組織及叢生芽。所得芽叢接種于養(yǎng)基上誘導愈傷組織及叢生芽。所得芽叢接種于MS+BA0.05MS+BA0.05的繼代培養(yǎng)基上。的繼代培養(yǎng)基上。 第三節(jié)第三節(jié) 花卉植物的花卉植物的 脫毒與快繁脫毒與快繁 2 2、莖尖莖段接種、莖尖莖段接種：選

58、擇莖尖、帶芽的莖段作為：選擇莖尖、帶芽的莖段作為外植體。消毒后，切取莖尖外植體。消毒后，切取莖尖0.5cm0.5cm或帶腋芽莖段或帶腋芽莖段lcmlcm接種到接種到MS+BA1+IBA0.02MS+BA1+IBA0.02的誘導培養(yǎng)基上。的誘導培養(yǎng)基上。1 1周后，芽開始萌動，逐漸長大成新梢。繼代可用周后，芽開始萌動，逐漸長大成新梢。繼代可用切割莖段法進行。切割莖段法進行。 六、百合的組織培養(yǎng)六、百合的組織培養(yǎng) 百合是百合科百合是百合科(Liliaceae)(Liliaceae)百合屬植物的統(tǒng)稱，為多百合屬植物的統(tǒng)稱，為多年生的草本植物。鱗莖無皮，廣卵形，白色或黃年生的草本植物。鱗莖無皮，廣卵形

59、，白色或黃白色，莖高白色，莖高303090cm90cm，直立，上葉多而散生，披，直立，上葉多而散生，披針形。花單生或數(shù)花橫向著生莖頂，花朵呈喇叭針形?；▎紊驍?shù)花橫向著生莖頂，花朵呈喇叭狀、筒狀，有清香。狀、筒狀，有清香。百合屬于球根花卉，要求肥沃、疏松和排水良好百合屬于球根花卉，要求肥沃、疏松和排水良好的沙壤土，以利于鱗莖發(fā)育。百合喜微酸性土壤，的沙壤土，以利于鱗莖發(fā)育。百合喜微酸性土壤，土壤土壤pHpH值在值在5.55.56.56.5最為適宜。最為適宜。（一）、形態(tài)特性和生物學習性（一）、形態(tài)特性和生物學習性 第三節(jié)第三節(jié) 花卉植物的花卉植物的 脫毒與快繁脫毒與快繁 （二）、繁殖方法（二）

60、、繁殖方法 1 1、分球、分球：使用百合老鱗莖：使用百合老鱗莖( (母球母球) )生長過程中于莖生長過程中于莖軸上逐漸形成小鱗莖軸上逐漸形成小鱗莖 進行繁殖。進行繁殖。2 2、鱗片扦插、鱗片扦插：使用成熟鱗葉進行扦插。：使用成熟鱗葉進行扦插。3 3、葉插及分珠芽、葉插及分珠芽：使用地上莖進行扦插，或使：使用地上莖進行扦插，或使用腋生珠芽進行繁殖。用腋生珠芽進行繁殖。 4 4、播種、播種。第三節(jié)第三節(jié) 花卉植物的花卉植物的 脫毒與快繁脫毒與快繁 1 1、花器的組織培養(yǎng)、花器的組織培養(yǎng)(1)(1) 、取材和滅菌、取材和滅菌：采取開花前數(shù)日的花蕾。花蕾：采取開花前數(shù)日的花蕾?；ɡ俚谋砻嬗镁凭珳缇?，再