結(jié)直腸癌c-erbB-CD44v6及nm23表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相ppt課件

1、 結(jié)直腸癌結(jié)直腸癌c-erbB-2、CD44v6 及及nm23表達(dá)表達(dá) 與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研討與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性研討 碩士研討生碩士研討生 張張 建建 兵兵 導(dǎo)導(dǎo) 師師 陳莉教授陳莉教授 腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是當(dāng)今腫瘤治療最棘手的問題之一。據(jù)統(tǒng)計，有90%以上的癌癥病人死于腫瘤的復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。研討腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的分子根底及其與癌基因及抑癌基因的關(guān)系，已成為目前腫瘤防治研討的熱點問題。真核細(xì)胞增殖調(diào)控是一個多要素、多環(huán)節(jié)、涉及到細(xì)胞內(nèi)眾多分子事件的復(fù)雜過程。在細(xì)胞增殖調(diào)控中，大多數(shù)癌基因是促進與發(fā)揚正調(diào)作用，而抑癌基因那么是抑制與負(fù)調(diào)作用。它們在正常細(xì)胞中能夠有調(diào)理細(xì)胞正常生長、抑制

2、腫瘤構(gòu)成的作用，它們的失活或缺失會導(dǎo)致細(xì)胞增殖失控或癌變。癌基因c-erbB-2又稱為neu或HER-2。c-erbB-2編碼分子量為185ku的穿膜蛋白，與表皮生長因子受體EGFR同源，該蛋白可以抑制酪氨酸激酶活性，c-erbB-2過度表達(dá)和擴增可見于多種腫瘤。已有很多研討闡明，乳腺癌c-erbB-2的高程度表達(dá)經(jīng)常與較大的原發(fā)瘤體積、較多的腋下淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及較差的內(nèi)分泌治療反響性有關(guān)，預(yù)示著更早、更多的術(shù)后復(fù)發(fā)及較短的生存期1，2。粘附分子CD44是淋巴細(xì)胞的一種歸巢受體，為高度異質(zhì)性的單鏈跨膜糖蛋白，參與細(xì)胞與細(xì)胞間、細(xì)胞與基質(zhì)間的粘連，有規(guī)范型CD44s和變異型CD44V兩型。據(jù)報道，其

3、變異體CD44v6過表達(dá)與結(jié)直腸癌的侵襲才干有關(guān)3，4。核苷二磷酸激酶核苷二磷酸激酶NDPK/ nm23屬屬NME基因家族，被以為參與了同惡性腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因家族，被以為參與了同惡性腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的多種調(diào)理活動。多種調(diào)理活動。nm23異常改動一方面可引起微管異常改動一方面可引起微管聚合而成的紡錘體異常，導(dǎo)致非整倍體構(gòu)成；另聚合而成的紡錘體異常，導(dǎo)致非整倍體構(gòu)成；另一方面可經(jīng)過細(xì)胞骨架及細(xì)胞素等信號反響性的一方面可經(jīng)過細(xì)胞骨架及細(xì)胞素等信號反響性的改動引起細(xì)胞運動，從而參與侵襲和轉(zhuǎn)移過程。改動引起細(xì)胞運動，從而參與侵襲和轉(zhuǎn)移過程。研討發(fā)現(xiàn)嚙齒動物實驗性腫瘤的轉(zhuǎn)移才干與研討發(fā)現(xiàn)嚙齒動物實驗性腫瘤的

4、轉(zhuǎn)移才干與nm23基因的表達(dá)呈親密負(fù)相關(guān)基因的表達(dá)呈親密負(fù)相關(guān)5，Bertheau 等等6在甲狀腺惡性腫瘤中研討證明在甲狀腺惡性腫瘤中研討證明nm23及基因產(chǎn)物及基因產(chǎn)物的表達(dá)與腫瘤的轉(zhuǎn)移和預(yù)后相關(guān)密集，的表達(dá)與腫瘤的轉(zhuǎn)移和預(yù)后相關(guān)密集，nm23的的mRNA 下調(diào)與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和低生存率有關(guān)下調(diào)與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和低生存率有關(guān)。 結(jié)直腸癌結(jié)直腸癌colorectal carcinoma是是人類常見惡性腫瘤之一，對人類的安康構(gòu)成了極人類常見惡性腫瘤之一，對人類的安康構(gòu)成了極大要挾。近年來對結(jié)直腸癌相關(guān)基因產(chǎn)物的檢測大要挾。近年來對結(jié)直腸癌相關(guān)基因產(chǎn)物的檢測已逐漸和早期診斷、發(fā)病機制、病理特征

5、、估計已逐漸和早期診斷、發(fā)病機制、病理特征、估計預(yù)后等親密聯(lián)絡(luò)起來，但研討結(jié)果不盡一致預(yù)后等親密聯(lián)絡(luò)起來，但研討結(jié)果不盡一致7-10。目前分子病理學(xué)研討以為，結(jié)直腸癌的發(fā)生是個目前分子病理學(xué)研討以為，結(jié)直腸癌的發(fā)生是個多階段、多要素作用的過程，主要是由于癌基因多階段、多要素作用的過程，主要是由于癌基因激活、抑癌基因及激活、抑癌基因及DNA修復(fù)基因突變或功能缺失修復(fù)基因突變或功能缺失所致。我們運用免疫組織化學(xué)方法同時檢測結(jié)直所致。我們運用免疫組織化學(xué)方法同時檢測結(jié)直腸癌中癌基因蛋白腸癌中癌基因蛋白c-erbB-2、CD44v6及及nm23的表的表達(dá)，并討論其與病理特征和臨床預(yù)后的相關(guān)性。達(dá)，并討

6、論其與病理特征和臨床預(yù)后的相關(guān)性。 1.1資料資料1.1.1臨床資料：臨床資料： 92例結(jié)直腸癌：例結(jié)直腸癌： 28例：有十年以上隨訪結(jié)果例：有十年以上隨訪結(jié)果 64例：無隨訪結(jié)果例：無隨訪結(jié)果以上病例均為結(jié)直腸原發(fā)性腺癌，不含腺以上病例均為結(jié)直腸原發(fā)性腺癌，不含腺瘤癌變的病例，都只作了結(jié)直腸癌根治手術(shù)，瘤癌變的病例，都只作了結(jié)直腸癌根治手術(shù)，未作化療、放療等輔助治療。男性未作化療、放療等輔助治療。男性49例，女例，女性性43例，年齡例，年齡2475歲中位歲中位55歲。結(jié)腸歲。結(jié)腸癌癌27例，直腸癌例，直腸癌65例。根據(jù)國際抗癌聯(lián)盟例。根據(jù)國際抗癌聯(lián)盟UICC的的TNM分期規(guī)范分期規(guī)范11見表

7、見表1作作臨床分期：臨床分期：期期19例，例，期期28例，例，期期37例，例，期期8例。例。表表1 UICC結(jié)直腸癌結(jié)直腸癌TNM分期規(guī)范分期規(guī)范 A. TNM定義定義 分期分期 描畫描畫 原發(fā)腫瘤原發(fā)腫瘤T Tx 原發(fā)腫瘤資料不詳原發(fā)腫瘤資料不詳 T0 原發(fā)灶不能確定原發(fā)灶不能確定 Tis 原位癌原位癌 T1 腫瘤侵入粘膜下層腫瘤侵入粘膜下層 T2 腫瘤侵入肌層腫瘤侵入肌層 . T3 腫瘤穿過肌層到漿膜腫瘤穿過肌層到漿膜下或至無腹膜的結(jié)腸周圍或直腸周圍組織下或至無腹膜的結(jié)腸周圍或直腸周圍組織 T4 腫瘤穿過臟層腹膜或直接腫瘤穿過臟層腹膜或直接侵入其它器官組織侵入其它器官組織表表1 UICC結(jié)

8、直腸癌分期結(jié)直腸癌分期 A. TNM定義定義 分期分期 描畫描畫 區(qū)域淋巴結(jié)區(qū)域淋巴結(jié)N Nx 區(qū)域淋巴結(jié)資料不詳區(qū)域淋巴結(jié)資料不詳 No 無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 N1 腫瘤轉(zhuǎn)移至腫瘤轉(zhuǎn)移至13個結(jié)腸直腸個結(jié)腸直腸周圍淋巴結(jié)周圍淋巴結(jié) N2 腫瘤轉(zhuǎn)移至腫瘤轉(zhuǎn)移至4個結(jié)腸直腸個結(jié)腸直腸周圍淋巴結(jié)周圍淋巴結(jié) N3 腫瘤轉(zhuǎn)移至主要血管沿途的任腫瘤轉(zhuǎn)移至主要血管沿途的任何淋巴結(jié)何淋巴結(jié)表表1 UICC結(jié)直腸癌分期結(jié)直腸癌分期 A. TNM定義定義 分期分期 描畫描畫 遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移M Mx 不能確定有無轉(zhuǎn)移不能確定有無轉(zhuǎn)移 M0 無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移 M1 有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移 表表1 UICC結(jié)

9、直腸癌分期結(jié)直腸癌分期 B. 分期規(guī)范分期規(guī)范 期別期別 T N M 0 Tis N0 M0 T1 ,T2 N0 M0 T3,T4 0 0 ny 1,2,3 0 ny ny 1 1.1.2病理資料：92例結(jié)直腸癌中，高分化腺癌16例，中分化腺癌45例，低分化腺癌21例，粘液腺癌10例。對全部病例察看了鏡下腫瘤生長方式推進式為主34例，圖1；浸潤性為主58例，圖2以及瘤周淋巴樣細(xì)胞聚集情況21例見有大量淋巴樣細(xì)胞浸潤，圖3；71例無大量淋巴樣細(xì)胞浸潤，圖2。1.1.3主要試劑及實驗資料：c-erbB-2單克隆抗體克隆系TAB250，任務(wù)濃度1：100；CD44v6單克隆抗體克隆系2F10,任務(wù)濃

10、度1：100；nm23單克隆抗體克隆系M-0421，任務(wù)濃度1：80。抗原修復(fù)液為0.01M、PH6.0枸櫞酸鹽緩沖液，DAB顯色。以上試劑、二抗及SP試劑盒均為DAKO公司產(chǎn)品。免疫標(biāo)志陽性對照組織來自乳腺癌、胃癌。 1.2 方法方法 1. 2.1 標(biāo)本及玻片的處置：標(biāo)本及玻片的處置：一切標(biāo)本經(jīng)一切標(biāo)本經(jīng)10%中性甲醛固定，石蠟中性甲醛固定，石蠟包埋，包埋，34m延續(xù)切片。每例選取四張延續(xù)切片。每例選取四張切片貼于經(jīng)多聚賴氨酸處置的玻片上，切片貼于經(jīng)多聚賴氨酸處置的玻片上，70 oC烘烤烘烤2小時，小時，1張進展張進展HE染色，其染色，其他他3張進展免疫組織化學(xué)染色。張進展免疫組織化學(xué)染色。

11、 1.2.2HE染色： 主要步驟：主要步驟： 石蠟切片石蠟切片 脫蠟脫蠟 梯度乙醇梯度乙醇水化水化 蘇木素染色蘇木素染色 鹽酸乙醇鹽酸乙醇分化分化 返藍(lán)返藍(lán) 伊紅染色伊紅染色 梯度乙梯度乙醇脫水醇脫水 透明透明 封固封固 1.2.3c-erbB-2、CD44v6及nm23免疫組織化學(xué)染色： 主要步驟：主要步驟： 石臘切片脫蠟至水石臘切片脫蠟至水 去內(nèi)源性酶去內(nèi)源性酶 抗原修復(fù)高壓鍋煮沸放氣抗原修復(fù)高壓鍋煮沸放氣3分分鐘鐘,nm23不需不需 一抗一抗 二抗二抗 SP復(fù)合物復(fù)合物 DAB顯色顯色 水洗，水洗，蘇木素復(fù)染，封片。蘇木素復(fù)染，封片。 1.1.2.4 免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果分析免疫組織化學(xué)

12、檢測結(jié)果分析方法：方法： c-erbB-2、CD44v6 陽性定位在細(xì)陽性定位在細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒，胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒，nm23陽性定陽性定位在細(xì)胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒。著色位在細(xì)胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒。著色細(xì)胞細(xì)胞10%為陰性，為陰性，10%為陽性。為陽性。1.2.5統(tǒng)計學(xué)處置方法： 運用Stata7.0統(tǒng)計軟件美國計算機資源中心研制進展統(tǒng)計學(xué)處置。不同組間表達(dá)率的比較采用Fisher準(zhǔn)確檢驗；對有隨訪結(jié)果的病例用Cox比例風(fēng)險模型進展單要素和多要素生存分析，并對有預(yù)后意義的目的作出Kaplan-Meier生存曲線。2.1 結(jié)直腸癌癌基因蛋白表達(dá)與臨床病結(jié)直腸癌癌基因蛋白表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系理

13、參數(shù)的關(guān)系 92例結(jié)直腸癌中，例結(jié)直腸癌中，44例例c-erbB-2陽性陽性圖圖4、5，陽性率，陽性率47.8%；51例例CD44v6陽性圖陽性圖6、7，陽性率，陽性率55.4%；39例例nm23陽性圖陽性圖8、9，陽性率，陽性率42.4%。c-erbB-2、CD44v6及及nm23表達(dá)表達(dá)與組織分型、與組織分型、UICC分期、腫瘤生長方式分期、腫瘤生長方式及瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤的關(guān)系見表及瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤的關(guān)系見表2。 表表2 C-erbB-22 C-erbB-2、CD44v6CD44v6、nm23nm23表達(dá)表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N C-erbB-2

14、 陰性陰性 陽性陽性 陽性率陽性率% 組織類型組織類型 高分化腺癌高分化腺癌 16 10 6 37.5 中分化腺癌中分化腺癌 45 23 22 48.9 低分化腺癌低分化腺癌 21 9 12 57.1 粘液腺癌粘液腺癌 10 6 4 40.0 p=0.658 表表2 C-erbB-22 C-erbB-2、CD44v6CD44v6、nm23nm23表達(dá)表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N CD44V6 陰性陰性 陽性陽性 陽性率陽性率% 組織類型組織類型 高分化腺癌高分化腺癌 16 8 8 50.0 中分化腺癌中分化腺癌 45 21 24 53.3 低分化腺癌低分化腺

15、癌 21 7 14 66.7 粘液腺癌粘液腺癌 10 5 5 50.0 p=0.696 表表2 C-erbB-22 C-erbB-2、CD44v6CD44v6、nm23nm23表達(dá)表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N nm23 陰性陰性 陽性陽性 陽性率陽性率% 組織類型組織類型 高分化腺癌高分化腺癌 16 9 7 43.8 中分化腺癌中分化腺癌 45 27 18 40.0 低分化腺癌低分化腺癌 21 13 8 38.1 粘液腺癌粘液腺癌 10 4 6 60.0 p=0.690 表表2 C-erbB-22 C-erbB-2、CD44v6CD44v6、nm23nm23

16、表達(dá)表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N C-erbB-2 陰性陰性 陽性陽性 陽性率陽性率% UICC分期分期 、期期 47 31 16 34.0 期期 37 15 22 59.5 期期 8 2 6 75.0 p=0.018* 表表2 C-erbB-22 C-erbB-2、CD44v6CD44v6、nm23nm23表達(dá)表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N CD44V6 陰性陰性 陽性陽性 陽性率陽性率% UICC分期分期 、期期 47 28 19 40.4 期期 37 10 27 73.0 期期 8 3 5 62.5 p=0.009*

17、表表2 C-erbB-22 C-erbB-2、CD44v6CD44v6、nm23nm23表達(dá)表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N nm23 陰性陰性 陽性陽性 陽性率陽性率% UICC分期分期 、期期 47 29 18 38.3 期期 37 18 19 51.4 期期 8 6 2 25.0 p=0.300 表表2 C-erbB-22 C-erbB-2、CD44v6CD44v6、nm23nm23表達(dá)表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N C-erbB-2 陰性陰性 陽性陽性 陽性率陽性率% 腫瘤生長方式腫瘤生長方式 推進式為主推進式為主 34

18、 21 13 38.2 浸潤性為主浸潤性為主 58 27 31 53.4 p=0.197 表表2 C-erbB-22 C-erbB-2、CD44v6CD44v6、nm23nm23表達(dá)表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N CD44V6 陰性陰性 陽性陽性 陽性率陽性率% 腫瘤生長方式腫瘤生長方式 推進式為主推進式為主 34 17 17 50.0 浸潤性為主浸潤性為主 58 24 34 58.6 p=0.516 表表2 C-erbB-22 C-erbB-2、CD44v6CD44v6、nm23nm23表達(dá)表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N n

19、m23 陰性陰性 陽性陽性 陽性率陽性率% 腫瘤生長方式腫瘤生長方式 推進式為主推進式為主 34 23 11 32.4 浸潤性為主浸潤性為主 58 30 28 48.3 p=0.190 表表2 C-erbB-22 C-erbB-2、CD44v6CD44v6、nm23nm23表達(dá)表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N C-erbB-2 陰性陰性 陽性陽性 陽性率陽性率% 瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤 有大量淋巴樣細(xì)胞浸潤有大量淋巴樣細(xì)胞浸潤 21 16 5 23.8 無大量淋巴樣細(xì)胞浸潤無大量淋巴樣細(xì)胞浸潤 71 32 39 54.9 p=0.014* 表表2

20、C-erbB-22 C-erbB-2、CD44v6CD44v6、nm23nm23表達(dá)表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N CD44V6 陰性陰性 陽性陽性 陽性率陽性率% 瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤 有大量淋巴樣細(xì)胞浸潤有大量淋巴樣細(xì)胞浸潤 21 13 8 38.1 無大量淋巴樣細(xì)胞浸潤無大量淋巴樣細(xì)胞浸潤 71 28 43 60.6 p=0.084 表表2 C-erbB-22 C-erbB-2、CD44v6CD44v6、nm23nm23表達(dá)表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 N nm23 陰性陰性 陽性陽性 陽性率陽性率% 瘤周

21、淋巴樣細(xì)胞浸潤瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤 有大量淋巴樣細(xì)胞浸潤有大量淋巴樣細(xì)胞浸潤 21 11 10 47.6 無大量淋巴樣細(xì)胞浸潤無大量淋巴樣細(xì)胞浸潤 71 42 29 40.8 p=0.622注：注：p為為Fisher準(zhǔn)確檢驗值準(zhǔn)確檢驗值 * 示示P0.05 *示示P0.01 由表2可見，c-erbB-2表達(dá)與UICC分期及瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤有關(guān)P0.05，而與組織分型及腫瘤生長方式無明顯關(guān)系。CD44v6表達(dá)與UICC分期有關(guān)P0.01，而與其他參數(shù)無關(guān)。nm23表達(dá)與上述各項參數(shù)間均無明顯關(guān)系。2.2 結(jié)直腸癌的單要素和多要素生結(jié)直腸癌的單要素和多要素生存關(guān)系分析存關(guān)系分析隨訪十年以上的隨訪十

22、年以上的28例結(jié)直腸癌臨床例結(jié)直腸癌臨床病理特征、癌基因蛋白表達(dá)與隨訪病理特征、癌基因蛋白表達(dá)與隨訪結(jié)果見表結(jié)果見表3。表表3 28例結(jié)直腸癌臨床病理特征、癌基因蛋白例結(jié)直腸癌臨床病理特征、癌基因蛋白表達(dá)與生存資料表達(dá)與生存資料 生存時間例5年%510年%10年%組織類型高、中分化腺癌203(15.0)10(50.0)7(35.0)低分化、粘液腺癌86(75.0)2(25.0)0UICC分期、期172(11.8)8(47.0)7(41.2)、期117(63.6)4(36.4)0腫瘤生長方式推進式102(20.0)3(30.0)5(50.0)浸潤性187(38.9)9(50.0)2(11.1)表

23、表3 28例結(jié)直腸癌臨床病理特征、癌基因蛋白例結(jié)直腸癌臨床病理特征、癌基因蛋白表達(dá)與生存資料表達(dá)與生存資料生存時間例5年%510年%10年%瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤有大量淋巴樣細(xì)胞602(33.3)4(66.7)無大量淋巴樣細(xì)胞229(40.9)10(45.5)3(13.6)c-erbB-2(16)2(12.5)7(43.75)7(43.75)(12)7(58.3)5(41.7)0CD44v6(14)4(28.6)3(21.4)7(50.0)(14)5(35.7)9(64.3)0nm23(15)7(46.7)7(46.7)1(6.6)(13)2(15.4)5(38.5)6(46.1)對表3進展單要素

24、Cox模型分析，結(jié)果見表4。表表4. 結(jié)直腸癌單要素生存分析結(jié)直腸癌單要素生存分析(Cox比例風(fēng)險模型比例風(fēng)險模型)結(jié)果結(jié)果 風(fēng)險比規(guī)范誤 z統(tǒng)計量 P值95可信區(qū)間組織分型4.3164852.070272 3.050.0021.686075 11.05054UICC分期6.158393.069948 3.650.0002.318166 16.36025腫瘤生長方式3.2363921.6779922.270.0231.171477 8.941054瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤5.9772814.4844262.380.0171.373706 26.00839c-erbB-25.5192182.75654

25、7 3.420.0012.073714 14.68947CD44v62.5768881.232054 1.980.0481.009535 6.577633nm23 .2552479.1230412 -2.830.005.0992302 .6565691由表4可見，結(jié)直腸癌組織分型、UICC分期、腫瘤生長方式、瘤周大量淋巴樣細(xì)胞浸潤及c-erbB-2、CD44v6、nm23表達(dá)均與預(yù)后有關(guān)P0.05。對表3進展多要素Cox模型分析結(jié)果見表5表表5. 結(jié)直腸癌多要素生存分析結(jié)直腸癌多要素生存分析(Cox比例風(fēng)險模型比例風(fēng)險模型)結(jié)果結(jié)果 風(fēng)險比風(fēng)險比 規(guī)范誤規(guī)范誤 z統(tǒng)計量統(tǒng)計量 P值值 95可信

26、區(qū)間可信區(qū)間UICC分期分期 10.88877 6.41264 4.05 0.000 3.43310934.53587c-erbB-2 5.724749 3.2123253.11 0.002 1.90599717.19454nm23 .3072231 .1580824 -2.29 0.022 .1120639 .8422513 由表5可見，只需UICC分期、c-erbB-2和nm23表達(dá)具有獨立的預(yù)后意義P0.05，即UICC、期，c-erbB-2過表達(dá)及nm23表達(dá)減少與結(jié)直腸癌的不良預(yù)后有關(guān)圖1a-3a。 生存率圖1 a UICC分 期的K a p l an_Meier生 存 曲 線生存時

27、間( 年)0510150.000.250.500.751.00III、I V期I、I I期 生存率圖2 a c-erbB-2表 達(dá)的K a p l an_Meier生 存 曲 線生存時間( 年)0510150.000.250.500.751.00( + )( - ) 生存率圖3 a nm23表 達(dá)的K a p l an_Meier生 存 曲 線生存時間( 年)0510150.000.250.500.751.00( + )( - )31 c-erbB-2的表達(dá)及其意義的表達(dá)及其意義 C-erbB-2 癌基因癌基因 位于位于17號染色號染色體體q21區(qū)帶上，與表皮生長因子受體區(qū)帶上，與表皮生長因子

28、受體EGFR基因具有同源性，編碼具基因具有同源性，編碼具有抑制酪氨酸激酶活性的穿膜蛋白有抑制酪氨酸激酶活性的穿膜蛋白分子量分子量185ku。經(jīng)過分析腫瘤細(xì)。經(jīng)過分析腫瘤細(xì)胞中胞中c-erbB-2基因在基因在DNA、mRNA或或其產(chǎn)物的不同程度上質(zhì)和量的變化與其產(chǎn)物的不同程度上質(zhì)和量的變化與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移表型之間的相關(guān)性，或腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移表型之間的相關(guān)性，或經(jīng)過基因轉(zhuǎn)染使轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞獲得轉(zhuǎn)經(jīng)過基因轉(zhuǎn)染使轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞獲得轉(zhuǎn)移才干的實驗，已證明該基因與一些移才干的實驗，已證明該基因與一些腫瘤的進展和轉(zhuǎn)移有關(guān)。腫瘤的進展和轉(zhuǎn)移有關(guān)。 目前已有較多證聽闡明c-erbB-2基因過表達(dá)與乳腺癌的較差預(yù)后有關(guān)1，

29、2，但有關(guān)該基因與結(jié)直腸癌關(guān)系的研討較少。Yamaguchi等12和Yang等13報道發(fā)生肝轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌c-erbB-2蛋白的陽性率顯著高于無肝轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌。Nakae等14報道c-erbB-2蛋白的陽性率在DukesD期顯著高于DukesA、B、C期。本組92例結(jié)直腸癌免疫酶標(biāo)結(jié)果顯示，c-erbB-2陽性率與UICC分期呈正相關(guān)P0.05,與瘤周大量淋巴樣細(xì)胞浸潤呈負(fù)相關(guān)P0.05,但與組織類型及腫瘤生長方式無明顯相關(guān)性(P0.05)13,15。對有10年以上隨訪資料的28例結(jié)直腸癌研討闡明,c-erbB-2陰性者5年生存率(87.5%)明顯高于c-erbB-2陽性者(41.7%,P0

30、.05)，并且經(jīng)作多要素Cox回歸模型分析提示，c-erbB-2過表達(dá)與結(jié)直腸癌的不良預(yù)后有關(guān)。32 CD44v6的表達(dá)及其意義的表達(dá)及其意義 CD44是分布極為廣泛的細(xì)胞外表跨膜糖蛋白分是分布極為廣泛的細(xì)胞外表跨膜糖蛋白分子子,主要參與細(xì)胞主要參與細(xì)胞-細(xì)胞、細(xì)胞細(xì)胞、細(xì)胞-基質(zhì)之間的特異性粘基質(zhì)之間的特異性粘附過程。人類附過程。人類CD44基因定位于基因定位于11號染色體短臂，號染色體短臂，全長約全長約50kb，共由，共由20個高度保守的外顯子組成。個高度保守的外顯子組成。外顯子按照轉(zhuǎn)錄方式不同可分為組成型外顯子外顯子按照轉(zhuǎn)錄方式不同可分為組成型外顯子c和變異性拼接外顯子和變異性拼接外顯子

31、(v)兩大類兩大類,變異性拼接外顯子變異性拼接外顯子共有共有10個個,其中較為重要的第其中較為重要的第6位變異性拼接外顯子位變異性拼接外顯子(CD44v6)的過度轉(zhuǎn)錄已被發(fā)現(xiàn)與一些上皮性腫瘤的過度轉(zhuǎn)錄已被發(fā)現(xiàn)與一些上皮性腫瘤的進展和轉(zhuǎn)移有關(guān)。的進展和轉(zhuǎn)移有關(guān)。 有作者報道CD44v6過表達(dá)的結(jié)直腸癌易于轉(zhuǎn)移3，4,還有作者報道CD44V6表達(dá)減少與結(jié)直腸癌的更強侵襲性和不良預(yù)后有關(guān)9，16，17，但Morrin等10和Jungling等18的最近報道以為CD44v6的表達(dá)與結(jié)直腸癌進展沒有明顯關(guān)系。本組92例結(jié)直腸癌進展CD44v6標(biāo)志的陽性率與UICC分期之間具有相關(guān)性P.01，即、期CD4

32、4v6陽性率明顯高于、期，但期陽性率73.0%卻高于期62.5%。此外，CD44v6表達(dá)與組織類型、腫瘤生長方式及瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤間無明顯相關(guān)性。在有10年以上隨訪資料的28例結(jié)直腸癌中，CD44v6的表達(dá)與10年生存率間無明顯相關(guān)性。Weg-Remers等17及Chun等19的研討闡明，CD44v6在正常結(jié)腸粘膜內(nèi)很少表達(dá)，而在結(jié)直腸癌組織中的陽性率顯著增高。因此，CD44基因能夠只是在結(jié)直腸癌的腫瘤構(gòu)成過程中發(fā)揚一定作用9,19。33nm23的表達(dá)及其意義人類nm23基因定位于17號染色體長臂17q21，該基因全長8.5Kb，由5個外顯子及4個內(nèi)含子組成，編碼蛋白質(zhì)分子量約1700017

33、KDa。nm23基因產(chǎn)物NDPK與微管聚集、G蛋白信號傳送、細(xì)胞與周圍組織粘附力、完好的基底膜構(gòu)成及轉(zhuǎn)錄調(diào)理等有關(guān)20，21?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)nm23基因主要有H1、H2兩種類型，多數(shù)研討以為H1亞型與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系最親密。在人類腫瘤中，該基因的改動有基因喪失、突變、表達(dá)異常22.起初，人們經(jīng)過動物實驗發(fā)現(xiàn)nm23基因具有抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的作用，以后不少研討報道結(jié)直腸癌中nm23表達(dá)減少與腫瘤晚期及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)23-25，并且Tannapfel等26研討以為nm23表達(dá)減少可作為評價結(jié)直腸癌具有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移潛能的一項獨立目的。Cheah等27報道nm23表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床分期呈反比分期越晚，表達(dá)越少，但與性

34、別、年齡、腫瘤分化程度及5年生存率等無明顯關(guān)系。最近，Katakura等28報道nm23表達(dá)可作為預(yù)測非小細(xì)胞肺癌良好預(yù)后的一項獨立目的，但Forte等29以為nm23尚不能作為結(jié)直腸癌的一項獨立預(yù)后目的。本組92例結(jié)直腸癌的nm23表達(dá)與組織類型、UICC分期、腫瘤生長方式及瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤均無明顯相關(guān)性，但經(jīng)對有隨訪結(jié)果的結(jié)直腸癌中nm23表達(dá)作多要素Cox回歸模型分析提示，nm23陰性病例預(yù)示更差的預(yù)后。因此我們贊同nm23基因具有抗腫瘤轉(zhuǎn)移的潛能28，以為nm23表達(dá)減少預(yù)示結(jié)直腸癌更強的侵襲性和易于轉(zhuǎn)移分散。34 其它臨床病理要素其它臨床病理要素341 UICC分期：分期：本研討發(fā)

35、現(xiàn)該分期與本研討發(fā)現(xiàn)該分期與C-erbB-2、CD44v6的表達(dá)具的表達(dá)具有明顯相關(guān)性，提示有明顯相關(guān)性，提示c-erbB-2、CD44v6癌基因過癌基因過表達(dá)的結(jié)直腸癌能夠具有更強的侵襲性。經(jīng)過對表達(dá)的結(jié)直腸癌能夠具有更強的侵襲性。經(jīng)過對有隨訪資料的結(jié)直腸癌有隨訪資料的結(jié)直腸癌UICC分期作多要素分期作多要素Cox回回歸模型分析證明，該分期具有顯著獨立的預(yù)后意歸模型分析證明，該分期具有顯著獨立的預(yù)后意義義 18，29 。342 組織類型：組織類型：本研討發(fā)現(xiàn)組織類型與本研討發(fā)現(xiàn)組織類型與C-erbB-2、CD44v6及及nm23基因蛋白表達(dá)無明顯相關(guān)性基因蛋白表達(dá)無明顯相關(guān)性 13，18，2

36、7。雖然單。雖然單要素要素Cox模型分析顯示低分化腺癌、粘液腺癌的預(yù)模型分析顯示低分化腺癌、粘液腺癌的預(yù)后明顯差于高、中分化腺癌后明顯差于高、中分化腺癌 30，但經(jīng)作多要素，但經(jīng)作多要素Cox模型分析發(fā)現(xiàn)組織類型不能作為獨立的預(yù)后目模型分析發(fā)現(xiàn)組織類型不能作為獨立的預(yù)后目的的 31 。 343 腫瘤生長方式：近年研討以為結(jié)直腸癌腫瘤的推擠式膨脹性生長比浸潤性生長的預(yù)后好31,32。并且Jass等 33 提出的結(jié)直腸癌分期方法中將腫瘤生長方式作為預(yù)后的重要目的之一。本組研討顯示，結(jié)直腸癌腫瘤生長方式與C-erbB-2、CD44v6及nm23的表達(dá)無明顯關(guān)系。單要素Cox模型生存分析顯示浸潤性生長比膨脹性推擠式生長的結(jié)直腸癌預(yù)后要差，但經(jīng)多要素Cox模型分析顯示腫瘤生長方式不能作為獨立的預(yù)后目的。344 瘤周淋巴樣細(xì)胞浸潤：有人以為結(jié)直腸癌腫瘤組織周圍見大量淋巴樣細(xì)胞浸潤淋巴細(xì)胞、