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文檔簡介
1、重點(diǎn)高中生物選修一知識點(diǎn)總 結(jié)背誦作者:日期:選修1根底知識點(diǎn)背誦?果酒和果醋和制作?一、果酒制作1. 原理:菌種,屬于核生物,新陳代謝類型 ,有氧時(shí),呼吸的反響式為: ; 無氧 時(shí),呼吸的反響式為: 。2. 條件:繁殖最適溫度 ,酒精發(fā)酵一般控制在 。(傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所使用的酵母菌的來源)卄比十、片自然發(fā)酵:附著于葡萄皮上的野生 型酵母菌。3菌種來源:人工培養(yǎng):別離獲得得純潔的酵母 菌菌種?,F(xiàn)在工廠化生產(chǎn)果酒, 為提高果酒的品質(zhì),更好地抑制其它微生物的生長,采取的措施是。4實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)流程圖I垃I勺5 .根據(jù)教材P4操作提示設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟及裝置。充氣口作用 排氣口作用;出料口作用。排氣口要通過一個(gè)長
2、而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的使用該裝置制酒時(shí),應(yīng)該關(guān)閉 ;制醋時(shí),應(yīng)將充氣口 6 .實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評價(jià):可通過嗅覺和品嘗初步鑒定,并用檢驗(yàn)酒精存在??捎^察到的現(xiàn)象為 二、果醋的制作:1原理:菌種: ,屬于核生物,新陳代謝類為 醋酸生成反響式是。2條件:最適合溫度為 ,需要充足的 。3菌種來源:到 或購置。4設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)流程及操作步驟:果酒制成以后,在發(fā)酵液中參加 或醋曲,然后將裝置轉(zhuǎn)移至°C條件下發(fā)酵,適時(shí)向發(fā)酵液中 。如果沒有充氣裝置,可以將瓶蓋翻開,在瓶蓋上紗布,以減少空氣中塵土污染。三、操作過程應(yīng)注意的問題(1) 為防止發(fā)酵液被污染,發(fā)酵瓶要用 消毒。(2) 葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí),
3、要留出大約 的空間。(3) 制作葡萄酒時(shí)將溫度嚴(yán)格控制在 ,時(shí)間控制在d 左右,可通過對發(fā)酵的情況進(jìn)行及時(shí)的監(jiān)測。(4) 制葡萄醋的過程中,將溫度嚴(yán)格控制在 ,時(shí)間控制在 d ,并注意適時(shí)在充氣?!疽呻y點(diǎn)撥】1、認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗?為什么?應(yīng)該先沖洗,然后再除去枝梗,以防止除去枝梗時(shí)引起葡萄破損,增加被雜菌污染的 時(shí)機(jī)。2、認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?需要從發(fā)酵制作的過程進(jìn)行全面的考慮,因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌。例如: 榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈;每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋、不要完全揭開瓶蓋等。3. 制葡萄酒時(shí),為什么要將溫度控制在1825 C?制葡萄醋時(shí),為什么要將溫
4、度控制在30 35 C?答:溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。20 C左右最適合酵母菌繁殖。因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長溫度為3035 C,因此要將溫度控制在 3035 C。4. 制葡萄醋時(shí),為什么要適時(shí)通過充氣口充氣?答:醋酸菌是好氧菌,在將酒精變?yōu)榇姿釙r(shí)需要氧的參與,因此要適時(shí)向發(fā)酵液中充氣。?腐乳的制作?一、腐乳制作的原理1. 腐乳的發(fā)酵有多種微生物的協(xié)同作用,如 、等,其中起主要作用的是 。它是一種絲狀,常見于、 上。新陳代謝類型是 。2. 等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的分解成小分子的 和;脂肪酶可以將 水 解成和。3現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的 條
5、件下,將優(yōu)良 菌種直接接種在豆腐上,這樣可以防止 ,保證。、腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程:讓豆腐長出毛霉ttt密封腌制。三、實(shí)驗(yàn)材料含水量70%的豆腐,粽葉,盤子,鹽,黃酒,米酒,糖,香辛料等,廣口玻璃瓶,高壓鍋。四、實(shí)驗(yàn)步驟1 .將豆腐切實(shí) 3cm x 3cm x 1cm假設(shè)干塊2 .豆腐塊放在鋪有干粽葉的盤內(nèi),每塊豆腐等距離排放,豆腐上再鋪干凈粽葉,再用保 鮮膜包裹。3. 將平盤放在溫度為 的地方,毛霉逐漸生長,大約5d后,豆腐外表叢生直立菌絲。4. 當(dāng)毛霉生長旺盛,呈淡黃色時(shí),去除保鮮膜及粽葉, 散熱及水分,同時(shí)散去霉味約36h。5. 豆腐涼透后,將豆腐間的菌絲拉斷,整齊排在容器內(nèi),準(zhǔn)備腌制。6長
6、滿毛霉的豆腐塊以下稱毛坯分層擺放,分層加鹽,并隨層高而增加,在瓶口外表鋪鹽 ,以防止,約腌制 8d。7將黃酒、米酒和糖、香辛料等混合制成鹵湯。鹵湯酒精含量控制在為宜。&廣口玻璃瓶刷洗干凈,用高壓鍋在 100°C蒸汽滅菌30min,將腐乳成坯擺入瓶中,參加 鹵湯和輔料后,將瓶口用酒精燈加熱滅菌,用膠條密封,常溫下,六個(gè)月即可以成熟?!疽呻y點(diǎn)撥】1.王致和為什么要撒許多鹽,將長毛的豆腐腌起來?鹽在該過程中起什么作用? 鹽能防止雜菌污染,防止豆腐腐敗。鹽能抑制多種微生物的生長。2配制鹵湯時(shí),一般將酒精含量控制在12%左右,過高過低都不行,為什么?酒精含量的上下與腐乳后期發(fā)酵時(shí)間的長
7、短有很大關(guān)系。酒精含量越高,對蛋白酶的 抑制作用也越大,使腐乳成熟期延長;酒精含量過低,蛋白酶的活性高,加快蛋白質(zhì)的水 解,雜菌繁殖快,豆腐易腐敗,難以成塊。3. 豆腐坯用食鹽腌制,其作用是什么? 滲透鹽分,析出水分給腐乳以必要的咸味防止毛霉繼續(xù)生長和污染的雜菌繁殖浸提毛霉菌絲上的蛋白酶4. 腐乳在釀造后期發(fā)酵中添加多量酒液的目的是什么? 防止雜菌污染以防腐 與有機(jī)酸結(jié)合形成酯,由于酒中特別是黃酒中含有酵母茼,經(jīng)發(fā)酵可產(chǎn)生醇,并與有 機(jī)酸結(jié)合形成酯,賦予腐乳風(fēng)味 利于后期發(fā)酵5. 鹵湯中香辛料的作用是什么?調(diào)味促進(jìn)發(fā)酵殺菌防腐解釋:香辛料如花椒、大蒜、茴香中含有花椒酰胺、蒜辣素、茴香醚及茴香醛
8、等,有極 強(qiáng)的殺菌力;又有良好的調(diào)味功能;香辛料成分參與發(fā)酵過程,合成復(fù)雜的酯類,使腐乳 形成特有色、香、味。6你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識,解釋豆腐長白毛是怎么一回事?答:豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說是直立菌絲, 在豆腐中還有匍匐菌絲。7. 我們平常吃的豆腐,哪種適合用來做腐乳?答:含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過高的豆腐制腐乳,不易成形。8. 吃腐乳時(shí),你會發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮。這層“皮是怎樣形成的呢?它對 人體有害嗎?它的作用是什么?答:“皮是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐外表上生長的菌絲匍匐菌絲,它能形成腐乳的“體,使腐乳成形?!捌θ梭w無害。?探討加酶洗衣粉的洗滌效
9、果?一、根底知識】.加酶洗衣粉是指含有_ 的洗衣粉,目前常用的醉制劑有四類:、 、和 °其中,應(yīng)用fifg.效果最用昱的是 和_ _ .堿性蛋白晦能將 醫(yī)漬、奶橫等含有的大分子蚩白質(zhì)水解成可落性的 或小分子的,使污跡從衣物上2使用加酶猊衣粉時(shí),滋響酶曙性的因素有、.等,為此科學(xué)家通過L生產(chǎn)出了特殊的解并制成酶制劑岸決了這個(gè)冋題。I3 在本課題中,我們主要探究有關(guān)加酶洗衣粉的三個(gè)問題:一是普通洗衣粉和加酶洗 衣粉對衣物污漬的 效果有什么不同;二是在什么溫度下使用加酶洗衣粉 最好,三是的洗衣粉,其洗劑效果有哪些區(qū)別。二、實(shí)驗(yàn)操作1探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬的洗滌效果1 實(shí)驗(yàn)遵循
10、的原那么:實(shí)驗(yàn)變量為洗滌劑,設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)遵循 原那么、原那么,有效地控制其他變量,如水的用量、污染物的量、所用實(shí)驗(yàn)用布的質(zhì)地大小、兩種 洗衣粉的用量,攪拌及洗滌時(shí)間。2實(shí)驗(yàn)過程 取兩只大燒杯并 ,用量筒分別量500mL蒸餾水放入其中,放入 4O0C的水浴鍋保溫。 將制好的污染布和洗衣粉一組為 和,另一組為和分別放入兩只燒杯中。 用玻璃棒同時(shí)充分?jǐn)嚢?時(shí)間,一段時(shí)間后攪拌可重復(fù)進(jìn)行。 過相同的時(shí)間后觀察洗滌效果,探究加酶洗衣粉使用時(shí)的最適溫度。2 不同種類的酶洗衣粉對同一污漬的洗滌效果1 實(shí)驗(yàn)原理:不同種類的加酶洗衣粉所加的酶不同,而酶具有 ,所以對不 同污漬的洗滌效果不同。2實(shí)驗(yàn)過程:根據(jù)表格設(shè)計(jì)
11、實(shí)驗(yàn)步驟編號污漬類型洗滌效果蛋白酶脂肪酶淀粉酶復(fù)合酶普通洗衣酶1雞血2牛奶3菜油4番茄汁5墨水6染料【疑難點(diǎn)撥】1普通洗衣粉中包含哪些化學(xué)成分?提示:普通洗衣粉中通常包含有:外表活性劑、水軟化劑、堿劑、漂白劑等成分,有的洗 衣粉中還含有增白劑、香精和色素,以及填充劑等。2 在本課題中你打算使用什么方法和標(biāo)準(zhǔn)判斷洗滌效果?提示:可在洗滌后比擬污物的殘留狀況,如:已消失、顏色變淺、面積縮小等,3含有蛋白酶的洗衣粉的洗劑效果好,可以用絲綢作為實(shí)驗(yàn)材料嗎?不能。因?yàn)榻z綢的主要成分是蛋白質(zhì),它會被加酶洗衣粉中的蛋白酶分解,損壞衣物?!镜淅馕觥恳韵虏粚儆诿钢苿┑氖茿 蛋白酶 B 脂肪酶C 淀粉酶D 麥芽
12、糖酶解析:目前常用的酶制劑有四大類:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶。其中,應(yīng)用最 廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有的大 分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污跡從衣物上脫落。脂肪酶、淀粉酶 和纖維素酶也能分別將大分子的脂肪、淀粉和纖維素水解為小分子物質(zhì),使洗衣粉具有更 強(qiáng)的去污能力。?酵母細(xì)胞的固定化?一、根底知識酶:優(yōu)點(diǎn):催化效率高,低耗能、低污染,大規(guī)模地應(yīng)用于食品、化工等各個(gè)領(lǐng)域。實(shí)際問題:對環(huán)境條件敏感,易失活;溶液中的酶很難回收,不能再次利用,提高了生產(chǎn)本錢;反響后的酶會混合在產(chǎn)物中,如不除去,會影響產(chǎn)品質(zhì)量。1F設(shè)想:固定化酶:
13、優(yōu)點(diǎn)實(shí)際問題:一種酶只能催化一種化學(xué)反響,而在生產(chǎn)實(shí)踐中,很多產(chǎn)物的形成都是通過一系列的酶促反響才能得到的設(shè)想:固定化細(xì)胞:優(yōu)點(diǎn)二、固定化酶的應(yīng)用實(shí)例高果糖漿是指能將葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖的酶是 。使用固定化酶技術(shù),將這種酶固定在一種上,再將這些酶顆粒裝到一個(gè)反響柱內(nèi),柱子底端裝上分布著許多小孔的。酶顆粒無法通過篩板的小孔,而反響溶液卻可以自由出入。生產(chǎn)過程中,將葡萄 糖溶液從反響柱的上端注入,使葡萄糖溶液流過反響柱,與 接觸,轉(zhuǎn)化成果糖,從反響柱的下端流出。 反響柱能連續(xù)使用半年, 大大降低了生產(chǎn)本錢,提高了果糖的產(chǎn)量和質(zhì)量。三、固定化細(xì)胞技術(shù)固定化酶和固定化細(xì)胞是利用或方法將酶或細(xì)胞固定在一定空
14、間內(nèi)的技術(shù),包括 、和法。一般來說,酶更適合采用 和法固定,而細(xì)胞多采用 法固定化。這是因?yàn)榧?xì)胞個(gè)大,而酶分子很?。粋€(gè)大的細(xì)胞難以被 或,而個(gè)小的酶容易從中漏出。包埋法法固定化細(xì)胞即將微生物細(xì)胞 包埋在不溶于水的 中。常用的載體有 、和等。四、實(shí)驗(yàn)操作一制備固定化酵母細(xì)胞制備固定化酵母細(xì)胞需要的材料是 、和 1酵母菌的活化活化就是處于 狀態(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)。2配制物質(zhì)的量嘗試為 0.05mol/L的CaCl2溶液3配制海藻酸鈉溶液加熱溶化海藻酸鈉時(shí)要注意: 4海藻酸鈉溶液與酵母菌細(xì)胞混合5固定化酵母細(xì)胞以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的 溶液中,并浸泡 時(shí)間。二用固
15、定化酵母細(xì)胞發(fā)酵1將固定好的酵母細(xì)胞用 沖洗2-3次。2發(fā)酵時(shí)的溫度就為 ,時(shí)間。五、結(jié)果分析與評價(jià)一觀察凝膠珠的顏色和形狀如果制作的凝膠珠顏色過淺、 呈白色,說明如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形,那么說明 ,制作失敗,需要再作嘗試。二觀察發(fā)酵的葡萄糖溶液利用固定的酵母細(xì)胞發(fā)酵產(chǎn)生酒精,可以看到產(chǎn)生了很多 ,同時(shí)會聞到補(bǔ)充:直接使用酶、固定化酶和固定化細(xì)胞催化的優(yōu)缺點(diǎn):類型優(yōu)點(diǎn)缺乏直接使用酶催化效率高,低耗能、低污染等。對環(huán)境條件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很難 回收,不能被再次利用,提高了生產(chǎn)本錢;反響后 酶會混在產(chǎn)物中,可能影響產(chǎn)品質(zhì)量。固定化酶酶既能與反響物接觸,又能與產(chǎn)物分 離,同時(shí)
16、,固定在載體上的酶還可以 被反復(fù)利用。一種酶只能催化一種化學(xué)反響,而在生產(chǎn)實(shí)踐中, 很多產(chǎn)物的形成都通過一系列的酶促反響才能得到 的。固定化細(xì)胞本錢低,操作更容易。固定后的酶或細(xì)胞與反響物不容易接近,可能導(dǎo)致疑1E難點(diǎn)撥】!£1捲蹩用朋嗣定化細(xì)胞黑的種賢-果列制土*碰腰、劇膠瓊脂ML和蠡醱4! ft否子,小小廿于物煩晌產(chǎn)品疝話不:利干催化-與譽(yù)擢ift,于鞫歯反 蟲敗甲F降« ft ft ¥ i 禺、疑隹毎“既虢與股Xtt'J產(chǎn)腳1細(xì)胞的活化。:在缺水的狀態(tài)下,微生物會處于休眠狀 態(tài)?;罨褪亲屘幱谛菝郀顟B(tài)的微生物重 新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)。酵母細(xì)胞所需要
17、的活化時(shí)間較短,一般需要0.51小時(shí)。2 .如何檢驗(yàn)?zāi)z珠的質(zhì)量是否合格。提示:檢驗(yàn)?zāi)z珠的質(zhì)量是否合格,可以 采用以下方法。一是用鑷子夾起一個(gè)凝膠 珠放在實(shí)驗(yàn)桌上用手?jǐn)D壓,如果凝膠珠不 破裂,沒有液體流出,就說明凝膠珠的制 作成功。二是在實(shí)驗(yàn)桌上用力摔打凝膠 珠,如果凝膠珠很容易彈起,也說明制備 的凝膠珠是成功的。3 酶和細(xì)胞分別適應(yīng)哪種固定方法?提示:一般來說,酶更適合采用化學(xué)結(jié)合 和物理吸附法固定,而細(xì)胞多采用包埋法 固定化。這是因?yàn)榧?xì)胞個(gè)大,而酶分子很 ??;個(gè)大的難以被吸附或結(jié)合, 而個(gè)小的 酶容易從包埋材料中漏出?!镜淅馕觥棵负图?xì)胞分別適應(yīng)哪種固定方法? 提示:一般來說,酶更適合采
18、用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定,而細(xì)胞多采用包埋法 固定化。這是因?yàn)榧?xì)胞個(gè)大,而酶分子很?。粋€(gè)大的難以被吸附或結(jié)合,而個(gè)小的酶容易 從包埋材料中漏出。?DNA的粗提取與鑒定?一、提取DNA勺方法提取生物大分子的根本思路是 。對于DNA的粗提取而言,就是要利用 、等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,提取 DNA,去除其他成分。1DNA的溶解性 DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的 中溶解度不同,利用這一特點(diǎn),選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使 充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以到達(dá)別離目的。此外,DNA不溶于溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)那么溶于酒精。利用這一原理,可以將 DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的別離。2DNA對酶、高
19、溫和洗滌劑的耐受性蛋白酶能水解 ,但是對沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60 80oC的高溫,而DNA在以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解 ,但對DNA沒有影響。3 DNA的鑒定在條件下,DNA遇會被染成色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1 實(shí)驗(yàn)材料的選取但凡含有的生物材料都可以考慮,但是使用的生物組織,成功的可能性更大。在下面的生物材料中選取適合的實(shí)驗(yàn)材料:魚卵、豬肝、菜花花椰菜、香蕉、雞血、哺乳動物的紅細(xì)胞、獼猴桃、洋蔥、豌 豆、菠菜、在液體培養(yǎng)基的大腸桿菌2 破碎細(xì)胞,獲取含 DNA的濾液 動物細(xì)胞的破碎比擬容易 ,以雞血細(xì)胞為例,在 雞血細(xì)胞液中參加一定量的 ,同時(shí)用 攪拌,
20、過濾后收集濾液即可。如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞,需要先用 溶解細(xì)胞膜。例如,提取洋蔥的DNA時(shí),在切碎的洋蔥中參加一定的 和,進(jìn)行充分的攪拌和研磨,過濾后收集研磨液。3去除濾液中的雜質(zhì)4DNA的析出與鑒定將處理后的溶液過濾,參加與濾液體積 、冷卻的,靜置,溶液中會出現(xiàn),這就是粗提取的 DNA。用玻璃棒攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水分。取兩支20ml的試管,各參加物質(zhì)的量濃度為 的NaCI溶液5ml,將絲狀物放入其中一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解。然后,向兩支試管中各參加4ml的.?;旌暇鶆蚝?,將試管置于中加熱5min,待試管冷卻后,比擬兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有DNA的溶液
21、是否變 。三、操作提示以血液為實(shí)驗(yàn)材料時(shí),每 100ml血液中需要參加 3g,防止。參加洗滌劑后,動作要 、,否那么容易產(chǎn)生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟地操作。參加酒精和用玻璃棒攪拌時(shí),動作要 ,以免,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。二苯胺試劑要,否那么會影響鑒定的效果。四、結(jié)果分析與評價(jià)【疑難點(diǎn)撥】1. 為什么參加蒸餾水能使雞血細(xì)胞破裂?答:蒸餾水對于雞血細(xì)胞來說是一種低滲液體,水分可以大量進(jìn)入血細(xì)胞內(nèi),使血細(xì)胞脹 裂,再加上攪拌的機(jī)械作用,就加速了雞血細(xì)胞的破裂細(xì)胞膜和核膜的破裂,從而釋放出DNA2 參加洗滌劑和食鹽的作用分別是什么?答:洗滌劑是一些離子去污劑, 能溶解細(xì)胞膜,有利于DNA的
22、釋放;食鹽的主要成分是 NaCI, 有利于DNA的溶解。3如果研磨不充分,會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生怎樣的影響?答:研磨不充分會使細(xì)胞核內(nèi)的DNA釋放不完全,提取的 DNA量變少,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍(lán)色等。4此步驟獲得的濾液中可能含有哪些細(xì)胞成分? 答:可能含有核蛋白、多糖和RNA等雜質(zhì)。5. 為什么反復(fù)地溶解與析出DNA能夠去除雜質(zhì)?答:用高鹽濃度的溶液溶解 DNA能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,通過反復(fù)溶解與析出 DNA就能夠除去與 DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。6. 方案二與方案三的原理有什么不同?答:方案
23、二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白,從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開;方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同,從而使蛋白質(zhì)變性,與DNA別離。7. DNA的溶解度與NaCI溶液濃度的關(guān)系:當(dāng)NaCI溶液濃度低于O.14mol/L時(shí),隨濃度的升高,DNA的溶解度降低;當(dāng) NaCI溶液濃度高于O.14mol/L時(shí),隨濃度升高,DNA的溶解度升高。8. 制備雞血細(xì)胞液時(shí),要在新鮮的雞血中參加檸檬酸鈉的原因制備雞血細(xì)胞液時(shí),要在新鮮的雞血中參加抗凝劑一一檸檬酸鈉,防止血液凝固。其原理 是檸檬酸鈉能與血漿中 Ca2+生反響,生成檸檬酸鈣絡(luò)合物,血漿中游離的Ca+大大減少,血液便不會凝固,因?yàn)殡u血紅細(xì)胞,白
24、細(xì)胞都有細(xì)胞核,DNA主要存在于細(xì)胞核中,所以在離心或靜置沉淀后,要棄出上層清液一一血漿。9. 提取DNA的第一步是材料的選取,其目的是一定要選取DNA含量較高的生物材料,否那么會由于實(shí)驗(yàn)過程中或多或少的損失而造成檢測的困難;第二步是DNA的釋放和溶解,這一步是實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵,要盡可能使細(xì)胞內(nèi)的DNA全部溶解;第三步是 DNA的純化,即根據(jù)DNA的溶解特性、對酶及高溫的耐受性的不同等特性,最大限度地將DNA與雜質(zhì)分開;最后一步是對 DNA進(jìn)行鑒定,這是對整個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果的檢測。10. 在DNA的析出的步驟中用到玻璃棒攪拌時(shí),注意動作要輕緩,以免加劇DNA分子的斷 裂,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮
25、狀沉淀。11. 盛放雞血細(xì)胞液的容器,最好是塑料容器。雞血細(xì)胞破碎以后釋放出的DNA容易被玻璃容器吸附,由于細(xì)胞內(nèi)DNA的含量本來就比擬少,再被玻璃容器吸附去一局部,提取到的DNA就會更少。因此,實(shí)驗(yàn)過程中最好使用塑料的燒杯和試管,這樣可以減少提取過程的DNA的損失。典例解析 本實(shí)驗(yàn)中有三次過濾:過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細(xì)胞液過濾含粘稠物的 0.14mol/LNaCI溶液過濾溶解有 DNA的2moI/LNaCI溶液以上三次過濾分別為了獲得A含核物質(zhì)的濾液、紗布上的粘稠物、含DNA的濾液B含核物質(zhì)的濾液、濾液中 DNA粘稠物、含DNA的濾液C含核物質(zhì)的濾液、濾液中 DNA粘稠物、紗布上的 DNA
26、D含較純的DNA濾液、紗布上的粘稠物、含DNA的濾液答案:A解析:用蒸餾水稀釋雞血細(xì)胞液,使血細(xì)胞的細(xì)胞膜、核膜破裂,釋放出核物質(zhì),此時(shí)過濾 只能得到含DNA和其他物質(zhì)如蛋白質(zhì)的濾液,這種濾液必須經(jīng)過實(shí)驗(yàn)中其他步驟得相繼 處理,方能得到較純的 DNA。DNA在0.13mol/LNaCI溶液中溶解度最低,成絲狀粘稠物, 可經(jīng)過濾留在紗布上。?血紅蛋白的提取和別離?根底知識1 凝膠色譜法凝膠色譜法也稱做 ,是根據(jù) 別離蛋白質(zhì)的有效方法。凝膠實(shí)際上是一些由 構(gòu)成的多孔球體,在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道,相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子通過凝膠時(shí)速度不同,相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì) 進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程
27、 ,移動速度 ;而相對分子質(zhì)量 的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在移動,路程 ,移動速度。相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以別離。2 緩沖溶液緩沖溶液的作用是。緩沖溶液通常由 溶解于水中配制而成的。生物體內(nèi)進(jìn)行的各種生物化學(xué)反響都是在一定的 pH下進(jìn)行的,例如:血漿的 pH是,要在實(shí)驗(yàn)條件下準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的過程,必須保持體外的pH與體內(nèi)的根本一致。3.電泳電泳是指。許多重要的生物大分子,如多肽、核酸等都具有可解離的基團(tuán),在一定的pH下,這些基團(tuán)會帶上 。在電場的作用下,這些帶電分子會向著與其所帶電荷 的電極移動。電泳利用了待別離樣品中各分子 以及分子本身的 、的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同
28、的 ,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的別離。兩種常用的電泳方法是 和,在測定蛋白質(zhì)分子量時(shí)通常使用 。蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于以及等因素。4蛋白質(zhì)的提取和別離蛋白質(zhì)的提取和別離一般分為四步: 、和。5 樣品處理血液由 和組成,其中紅細(xì)胞最多。紅細(xì)胞具有 的特點(diǎn)。紅細(xì)胞中有一種非常重要的蛋白質(zhì) ,其作用是 ,血紅蛋白有個(gè)肽鏈組成,包括,其中每條肽鏈環(huán)繞一個(gè),磁基團(tuán)可攜帶 。血紅蛋白因含有 呈現(xiàn)紅色。紅細(xì)胞的洗滌洗滌紅細(xì)胞的目的是 ,采集的血樣要及時(shí)采用 別離紅細(xì)胞,然后用膠頭吸管吸出上層透明的,將下層暗紅色的 倒入燒杯,再參加 ,緩慢攪拌,低速短時(shí)間離心,如此重復(fù)洗滌三次,直至 ,說明紅細(xì)
29、胞已洗滌干凈。血紅蛋白的釋放在和作用下,紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。別離血紅蛋白溶液將攪拌好的混合溶液離心后,試管中的溶液分為4層。第一層為無色透明的 ,第2層為白色薄層固體,是 ,第3層是紅色透明液體,這是 ,第4層是其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物。將試管中的液體用濾紙過濾,除去之溶性沉淀層,于分液漏斗中靜置片刻后,分出下層的紅色透明液體。透析 取1mL的血紅蛋白溶液裝入 中,將透析袋放入盛有 300mL的物質(zhì)的量的濃度為 20mmol/L的中,透析12h。透析可以去除樣品中 的雜質(zhì),或用于更換樣品的 。6.凝膠色譜操作第一步要制作,第二步要,因?yàn)樗匝b柱前需要根據(jù)色譜柱的內(nèi)體積計(jì)算所需要的凝膠量。在
30、裝填凝膠柱時(shí),不得有存在。因?yàn)闅馀輹?,降低別離效果。第三步是 _疑難點(diǎn)撥1 凝膠色譜法別離蛋白質(zhì)的原理凝膠色譜法也稱為分配色譜法,它是根據(jù)分子量的大小別離蛋白質(zhì)的方法之一。所用的凝 膠實(shí)際上是一些微小的多孔球體,這些小球體大多數(shù)是由多糖類化合物構(gòu)成,小球體內(nèi)部 有許多貫穿的通道,當(dāng)一個(gè)含有各種分子的樣品溶液緩慢流經(jīng)時(shí),各分子在色譜柱內(nèi)進(jìn)行 兩種不同的運(yùn)動,即垂直向下的運(yùn)動和無規(guī)那么的擴(kuò)散運(yùn)動,相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分 子不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部,只能分布在顆粒之間,通過的路程較短,移動速度較快;相對 分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子比擬容易進(jìn)入凝膠內(nèi)的通道,通過的路程較長,移動速度較慢。因此,樣品中相
31、對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先流出,相對分子質(zhì)量中等的分子后流出,相對 分子質(zhì)量最小的分子最后流出,這種現(xiàn)象又叫分子篩現(xiàn)象。此外,凝膠本身具有三維網(wǎng)狀 結(jié)構(gòu),相對分子質(zhì)量大的分子通過這種網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)上的空襲時(shí)阻力大,而相對分子質(zhì)量小的 分子通過時(shí)阻力小,因此不同分子量的蛋白質(zhì)分子可以獲得別離。2. 與其他真核細(xì)胞相比,紅細(xì)胞的特點(diǎn)及這一特點(diǎn)對進(jìn)行蛋白質(zhì)的別離的意義 哺乳動物及人的成熟的紅細(xì)胞是雙面凹圓餅狀,沒有細(xì)胞核和細(xì)胞器。其含有的血紅蛋白 是有色蛋白,因此在凝膠色譜別離時(shí)可以通過觀察顏色來判斷什么時(shí)候應(yīng)該收集脫液。這 使血紅蛋白的別離過程非常直觀,大大簡化了實(shí)驗(yàn)操作。3 電泳的作用及其原理/電泳是指
32、帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程。許多重要的生物大分子,如氨基酸、 多肽、蛋白質(zhì)、核苷酸、核酸等都具有可解離基團(tuán),它們在某個(gè)特定的pH下會帶上正電或負(fù)電;在電場的作用下,這些帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極方向移動。電泳 技術(shù)就是在電場的作用下,利用待別離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大小、形狀 等性質(zhì)的差異,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而到達(dá)對樣品進(jìn)行別離、鑒定或提純 的目的。4你能從凝膠色譜的別離原理分析為什么凝膠的裝填要緊密、均勻嗎?答:凝膠實(shí)際上是一些微小的多孔球體,小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道。相對分子質(zhì)量較 大的蛋白質(zhì)分子不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部,只能分布在顆粒之間,通過
33、的路程較短,移動速 度較快;相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子比擬容易進(jìn)入凝膠內(nèi)的通道,通過的路程較長, 移動速度較慢。因此,樣品中相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先流出,相對分子質(zhì)量中等的分 子后流出,相對分子質(zhì)量最小的分子最后流出,從而使各種相對分子質(zhì)量不同的分子得以 別離。如果凝膠裝填得不夠緊密、均勻,就會在色譜柱內(nèi)形成無效的空隙,使本該進(jìn)入凝 膠內(nèi)部的樣品分子從這些空隙中通過,攪亂洗脫液的流動次序,影響別離的效果。典例解析用凝膠色譜法別離蛋白質(zhì)時(shí),分子量大的蛋白質(zhì)D A路程較長,移動速度較慢B路程較長,移動速度較快C路程較短,移動速度較慢D路程較短,移動速度較快解析:在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道,當(dāng)
34、相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時(shí),相對 分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長,移動速度較慢;而相對分子 質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動,路程較短,移動速度 較快。經(jīng)典例題剖析例題1、關(guān)于果酒制作過程中的表達(dá)正確的選項(xiàng)是B A先去爛子粒和枝梗,再用清水沖洗污物B發(fā)酵的溫度維持在 20C最好C發(fā)酵過程中需要適時(shí)翻開瓶蓋放氣,以防發(fā)酵瓶破裂D需要不斷的充入氧氣解析:為防雜菌污染,爛子粒應(yīng)該沖洗之前去除,而去枝梗應(yīng)在沖洗之后;酵母菌酒精發(fā) 酵需在無氧條件下進(jìn)行,通氣時(shí)只能擰松瓶蓋不可翻開瓶蓋;最適宜溫度為20 C。例題2、關(guān)于果醋制作過程中的表達(dá)正確的選項(xiàng)
35、是C A翻開發(fā)酵瓶是因?yàn)槿^程需要通入氧氣,排出二氧化碳B醋酸菌在糖源和氧氣充足時(shí),能將葡萄糖分解成醋酸和二氧化碳C當(dāng)糖源缺乏時(shí),醋酸菌可將酒精分解成醋酸D要使果酒變成果醋只需通入氧氣,參加醋酸菌就可以了解析:醋酸菌和酵母菌發(fā)酵的區(qū)別在于前者需氧,不產(chǎn)生二氧化碳,而且發(fā)酵的最適溫度 也不同。例題3、腐乳制作過程中影響其風(fēng)味和品質(zhì)的因素有哪些?A 鹽的用量 酒的種類和用量 發(fā)酵溫度 發(fā)酵時(shí)間辛香料的用量AB C D解析:鹽、酒、辛香料不僅用來調(diào)味,還可抑菌,防腐乳變質(zhì)。適宜的鹽的用量和酒的濃 度還影響發(fā)酵中蛋白酶的作用發(fā)揮;發(fā)酵時(shí)間和溫度都會影響腐乳的風(fēng)味。例題4、將10毫升酵母菌液放在適宜的溫
36、度下培養(yǎng),并且于不同時(shí)間內(nèi)等量均勻取樣4次,分別測定樣品中酵母菌的數(shù)量和PH,結(jié)果如下表。請分析答復(fù):樣品酵母菌的數(shù)量個(gè) /mm3PH112104.8:28205.4312103.7410005.0 表中樣品取樣先后次序是 對酵母菌而言,10毫升該培養(yǎng)液的環(huán)境負(fù)荷量為個(gè)。 假設(shè)第五次均勻取樣時(shí),樣品中的酵母菌數(shù)量為760 個(gè)/mm3,產(chǎn)生這一結(jié)果的原因解析:1由于酵母菌進(jìn)行有氧呼吸和無氧呼吸都產(chǎn)生二氧化碳,使發(fā)酵液的酸性增強(qiáng)。 根據(jù)樣品PH大小,越早取樣 PH越大,由此取樣順序?yàn)?2、4、1、3。2經(jīng)過培養(yǎng)10mL培養(yǎng)液中有菌數(shù)1210個(gè)/mm3,環(huán)境負(fù)荷量應(yīng)為1.21 x 107。3培養(yǎng)液中
37、的營養(yǎng)物質(zhì)不斷被消耗,pH值減小,局部酵母菌因營養(yǎng)缺乏不適應(yīng)而死亡并解體。答案:2、4、1、3; 1.21X 107;培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質(zhì)不斷被消耗,pH值減小,局部酵母菌因營養(yǎng)缺乏不適應(yīng)而死亡并解體。例題5、水果罐頭蓋上印有“如發(fā)現(xiàn)蓋子鼓起,請勿選購的字樣,引起蓋子鼓起的最可 能原因是B A、好氧型細(xì)菌呼吸,產(chǎn)生 CO2和H2O B、酵母菌呼吸,產(chǎn)生 CO2和C2H5OHC、乳酸菌呼吸,產(chǎn)生 CO2和C3H6O3 D、酵母菌呼吸,產(chǎn)生 CO2和H2O 解析罐頭是密封、殺菌的,但不排除有微生物的孢子等存活下來,只有進(jìn)行無氧呼吸的 微生物可以生存;罐頭鼓脹是過期后微生物生活產(chǎn)氣的結(jié)果,乳酸菌無氧呼
38、吸產(chǎn)生乳酸, 無氣體產(chǎn)生;酵母菌既可以在有氧條件下生活,也可以在無氧條件下發(fā)酵產(chǎn)生酒精和二氧 化碳。攝氏度條件下,競爭能力最強(qiáng)的生物和對溫度適應(yīng)例題6、有人測定了 A、B、C、D四種植物體內(nèi)多種酶的活性與溫度的關(guān)系,結(jié)果如以下圖所示。根據(jù)圖中的信息,你認(rèn)為在25范圍最廣的生物分別是C B和AD A和C(A B和D解析酶活性具有一定的溫度范圍和適宜溫度,溫度過高酶會失活,低溫對酶活性抑制; 在一定溫度下,最適宜該溫度的酶活性最強(qiáng),該生物生活的也最好,競爭力就強(qiáng);酶有活 性的范圍最大,生物的生存溫度范圍就越廣。例題7、( 05年杭州高三第一次檢測)以下圖是人體內(nèi)某個(gè)化學(xué)反響的示意圖,圖中代表酶 的
39、英文字母是(A )解析酶是起催化作用的,它在反響前后的性質(zhì)保持不變,據(jù)圖可以解釋A所代表的物質(zhì)是酶。所以在特定條件和一定的時(shí)間內(nèi),酶的催化作用可以一直保持。例題8 ( 04年北京東城區(qū)綜合檢測)實(shí)驗(yàn)研究pH對酶活性的影響,準(zhǔn)備 5支含有等量胃蛋白酶溶液但 pH各不相同的試管,每支試管加1塊1 cm3的正方體凝固蛋白塊,試管均置于25 C室溫條件下,將各試管蛋白塊消失的時(shí)間記錄于下表:酶溶液的pH蛋白塊消失的時(shí)間(min)113293114455>60(1 )酶活性最強(qiáng)時(shí)的 pH是。(2) 蛋白塊消失的時(shí)間與酶活性強(qiáng)弱的關(guān)系是 。(3) 請以2種方法改良實(shí)驗(yàn),使實(shí)驗(yàn)在更短的時(shí)間內(nèi)完成。(4
40、 )在人體消化道中,能分泌本實(shí)驗(yàn)中酶的部位是 。(5 )為確認(rèn)蛋白塊的消失是由于酶的作用,還應(yīng)對實(shí)驗(yàn)進(jìn)行什么設(shè)計(jì)答案(1) 2(2) 酶活性越大,蛋白質(zhì)分解越快,蛋白塊消失的時(shí)間越短(3) 方法I:將題給溫度由25C提高至大約37C。方法H:將原題中正方體蛋白塊處理得更小(如切成 0.5 X 0.5X 0.5=0.125 cm3),這相當(dāng)于消化道內(nèi)進(jìn)行的物理性消化(4 )胃(答小腸不給分,因pH與題意不符)(5 )另增加一個(gè)試管,放入等量的蛋白塊并將pH調(diào)得適當(dāng),但不加酶溶液例題9、現(xiàn)有相同容積的玻璃缸幾只,利用自然的清水、同齡且發(fā)育狀態(tài)相同的小蝌蚪60只、飼喂蝌蚪的飼料、未經(jīng)處理的具有生物活
41、性的甲狀腺激素,并把具有生物活性的甲狀腺激素放在50C的溫水中處理 10 min。根據(jù)這些現(xiàn)有的條件,請你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證 甲狀腺激素經(jīng)過處理以后,是否還有生物活性。(1) 實(shí)驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)第一步,取玻璃缸 3只,分別標(biāo)記為甲、乙、丙;第二步,;第三步,如果甲缸每天飼喂飼料,丙缸每天飼喂用具有生物活性的甲狀腺激素相拌的 飼料,那么乙缸怎樣飼喂 ?;最后經(jīng)過一定時(shí)間的飼喂,觀察現(xiàn)象,得出結(jié)果和結(jié)論。(2) 結(jié)果分析 假設(shè)乙、丙缸的蝌蚪發(fā)育同步,迅速變態(tài)為小青蛙,而甲缸還是蝌蚪狀態(tài),說明 假設(shè)甲、乙缸的蝌蚪發(fā)育同步,而丙缸發(fā)育變態(tài)迅速,說明了 假設(shè)乙缸的蝌蚪發(fā)育比甲缸快,比丙缸慢,那么說明了 該實(shí)驗(yàn)設(shè)置甲、丙兩組實(shí)驗(yàn)的目的是 每天飼喂用經(jīng)過處理過的甲狀腺激素對其生物活性沒有影響甲狀腺激素甲狀腺激素經(jīng)過 50 C的溫水處理后,答案(1 )分別參加等量的清水和20只蝌蚪相拌的飼料(2)甲狀腺激素經(jīng)過 50 C的溫水處理后, 經(jīng)過50 C的溫水處理后,完全喪失了生物活性 使生物活性有所降低(3) 起對照作用例10、在DNA分子的粗提取實(shí)驗(yàn)中,兩次向燒杯中參加蒸餾水的作用是()A.稀釋血液、沖洗樣品B.使血細(xì)胞破裂,
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